文档之家
首页
教学研究
幼儿教育
高等教育
外语考试
建筑/土木
经管营销
自然科学
当前位置:
文档之家
›
胶乳增强免疫比浊法测定肌钙蛋白Ⅰ
胶乳增强免疫比浊法测定肌钙蛋白Ⅰ
格式:pdf
大小:195.61 KB
文档页数:2
下载文档原格式
下载原文件
/ 2
下载本文档
合集下载
下载提示
文本预览
1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
随着医学科学研究的进展, 原心肌损伤后以酶活性测定 的心肌酶谱因敏感性和特异性都相对较差, 在心肌诊断中已 不在应用和逐步停用[1] 。应用以蛋白质量浓度的 cTnI 定量检 测, 是替代心肌酶谱的良好推荐指标。
川 至 生 物 工 程 有 限 公 司 引 进 加 拿 大 spectral 公 司 技 术 (FDA 批准)生产的 cTnI 试剂盒。使用特异性抗体结合于胶乳 颗 粒 表 面 , 标 本 与 胶 乳 颗 粒 在 缓 冲 液 中 混 合 , 标 本 中 的 cTnI 胶乳颗粒表面结合, 使相邻的胶乳颗粒彼此相联。在波长 600 nm 附近测量溶液浊度增加, 其 增 加 的 程 度 与 标 本 中 的 cTnI 含量相关。 1 材料和方法 1.1 仪 器 OLYMPUS AU640 全 自 动 生 化 分 析 仪 ; COBAS MIRA PLUS 自动生化分析仪。 1.2 cTnI 试 剂 盒 评 价 试 剂 由 川 至 生 物 工 程 有 限 公 司 提 供 。 cTnI 试剂主要成分: (1)胶乳试剂含结合特异性抗体的胶乳颗 粒 。 (2)反 应 缓 冲 液 含 增 敏 剂 和 表 面 活 性 剂 。 1.3 测 定 样 本 (1)定 值 质 控 血 清(高 值 、低 值)由 川 至 生 物 工 程 有 限 公 司 提 供 。 (2)校 准 品 (不 同 浓 度 )由 川 至 生 物 工 程 有 限 公司提供。(3)149 例非相关人员血清标本和 127 例已确诊心 肌梗死患者血清标本。 1.4 方法 1.4.1 操作方法 严格按照试剂盒设定参数设置和操作。 1.4.2 评 价 方 法 按 照 NCCLS 评 价 方 案 , 对 试 剂 盒 的 精 密 度、线性、灵敏度 、回 收 试 验 、稳 定 性 、抗 干 扰 等 进 行 了 方 法 学 评价及临床评价。
2 结果 2.1 精 密 度 试 验 取 高 低 值 质 控 血 清 , 平 均 测 定 20 次 , 批 内 变 异 百 分 率 , 质 控 1:X=5.3 CV=4.0% , 质 控 2:X=16.7,CV=1. 4%。对其连续测定 20 d, 计算批间变异百分率。质控 1: CV=4. 7%, 质控 2 :CV=2.0%。 2.2 线 性 高 浓 度 cTnI 系 列 稀 释 5 个 浓 度 , 50 ng/ml、25 ng/ml、12.5 ng/ml、6.25 ng/ml、3.12 ng/ml, 5 次重复测定, 采用 速 率 法 多 点 较 准 , 多 参 数 曲 线 方 程( logit/log)拟 合 , 线 性 范 围 达 25 ng/ml, (图 1)表明在测定范围内有良好线性。
表 1 不同分布下的诊断界值
·2837·
2.8.3 不 同 诊 断 界 值 的 临 床 诊 断 效 率 50 例 确 诊 AMI 病 人 和 149 例对照标本(见表 2)
表 2 不同诊断界值的临床诊断效率
2.8.4 ROC 曲线(图 2)。 3 讨论
近 10 a 来临床实践证实, cTnI 是目前临床特异性和敏 感性最好的心肌损伤标志物, 已成为心肌组织损伤最重要的 诊断依据[1] 。由于 cTnI 的测定方法有金标法, 但不能定量分 析, 放 射 免 疫 方 法 操 作 复 杂 , ELISA 方 法 速 度 慢 , 化 学 发 光 和 酶联荧光分析法价格昂贵, 需有专门仪器[3] 。胶乳增强免疫比 浊法操作简单, 适用于绝大多数医院的自动生化分析仪使用,
图 1 cTnI 线性试验 2.3 回收试验 不含 cTnI 的血清中加入已知浓度的 cTnI 混 匀 , 5 次 重 复 测 定 , 理 论 值 为 4 ng/ml、9 ng/ml、20 ng/ml, 实 测 为 4.0 ng/ml、9.3 ng/ml、20.8 ng/ml, 回 收 率 分 别 为 100% 、 103%、104%。 2.4 灵敏度 用 0.00 ng/ml 的标准品重复测定 20 次, 计算结 果为 X=0.0067,SD=0.019, X+2.58SD=0.1 ng/ml。 2.5 稳定性 37℃放置 5 d 后, 与 4℃保存比较, 4℃吸光度为 0.4643, 37℃为 0.4943, 相 对 误 差 6.46%, 测 定 值 变 化 <10%, 试剂有良好稳定性。 2.6 抗干扰试验 在已知浓度的血清中, 加入下列物质: 人血 清 白 蛋 白 3 000 mg/dl, 甘 油 三 酯 25 mg/dl, γ球 蛋 白 5 000 mg/dl, 干扰 <10%, 严重溶血和黄疸有负干扰。 2.7 抗凝剂及 VC 影响 在 15 ng/ml 的血清中分别加入肝素 12.5 U/ml、 枸 橼 酸 钠 3.2 mg/ml、EDTA-K23.2 mg/ml 和 VC50
图 2 cTnI ROC 曲线 特别是对急诊能实现快速定量检测, 为 AMI 的早期诊断提供 了重要的依据。本实验观察了川至公司开发的 cTnI 试剂盒, 结果显示其化学性能优良, 稳定性好, 临床评价效果满意。
临 床 应 用 cTnI 检 测 时 , 确 定 cTnI 参 考 界 值 (第 99 百 分 位值)十分重要[2], 各实验室应根据条件确定各自的 cTnI 测定 方法的参考界值。国内外有关学术团体对疑为急性心肌损伤 时, 检测 cTnI 的标本采集时间的建议几近一致, <60 min 治疗 死亡率为 1%, >6 h 治疗死亡率为 10%~12%[1], 建议心肌 标 志物的检测从标 本 采 集 到 报 告 到 临 床 的 时 间 不 要 >1 h, 本 方 法采血可用肝素或枸橼酸钠抗凝负压管, 以增快血液的分离 速度。 参考文献: [1] 王兰兰. 心肌标志物分类和临床应用[J].国外医学生物化学与检
实用医技杂志 2007 年 7 月第 14 卷第 21 期( 旬刊) JPMT , July . 2007 , Vol.14 , No . 21(Issued Every Days)
mg/dl、100 mg/dl 测 定 值 分 别 为 14.3 ng/ml、15.1 ng/ml、13.2 ng/ml、15.0 ng/ml 和 15.2 ng/ml, 除 EDTA-K2 负 干 扰 外 , 其 余 均无影响。 2.8 临床评价 2.8.1 预期值 149 例非相关人血清, 经本室测定 95%单侧分 布为 1.1 ng/ml, 99%单侧分布为 1.7 ng/ml。 2.8.2 不同分布下的诊断界值(见表 1)。
验 学 分 册,2004,25:385-386. [2] 潘柏申 . 心脏标志物的临床应用 [ J ]. 中 华 检 验 杂 志, 2005 , 28 : 124-126. [3] 王忠诚,沈钧乐,王 强,等.心肌肌钙蛋白 I 的检测方法及临床应
用 进 展[J].国 外 医 学 生 物 化 学 与 检 验 学 分 册,2004,25:303-305. (收 稿 日 期:2007-05-26)
[ 关键词] 胶乳增强免疫比浊法;肌钙蛋白 I; 使用 [中图分类号] R446.62 [文献标识码] B [文章编号] 1671-5098(2007)21-2836-02
在心肌细胞损伤早期, 游离于胞浆内的肌钙蛋白 I(cTnI) 快速释放 , 血 清 / 血 浆 中 水 平 4 h~6 h 升 高 , 8 h~14 h 达 高 峰, 7 d~14 d 后降到正常 。 由 于 cTnI 升 高 具 有 诊 断 特 异 性 , 且窗口期宽, 是回顾性检测的最佳指标。心肌梗死(AMI)的早 期、快速诊断可为患者的治疗赢得宝贵的时间以挽救生命。 cTnI 被 美 国 心 脏 病 协 会(ACC)和 欧 洲 心 脏 病 协 会(ESC)一 致 评价是诊断 AMI 的高特异性和高敏感性的确诊性标志物。
·2836·
实用医技杂志 2007 年 7 月第 14 卷第 21 期( 旬刊) JPMT , July . 2007 , Vol.14 , No . 21(Issued Every Days)
胶乳增强免疫比浊法测定肌钙蛋白Ⅰ
宋丽芳,张理华
(太钢总医院,山西 太原 030000)
[摘 要] 目的:通过对肌钙蛋白 I(cTnI)试剂盒的化学性能测定, 评价了 cTnI 测定方法的可靠性。方法: 用胶乳增 强免疫比浊的方法, 在 OLYMPUS 和 COBAS MIRA 全自动生化分析仪上对 cTnI 的精密度、线性、稳定性、回收试验、 灵敏度、抗干扰性等指标进行评价, 并进行了临床评价。结果: 本方法性能评价表明, cTnI 批内变异系数分别为 4.0% 和 1.4%, 批间变异系数分别为 4.7%和 2.0%。线性良好, γ2 1.0000, 回收 100%~104%, 灵敏度 0.1 ng/ml, 37℃稳定性放 置 5 d 后与 4℃比较, 相对误差 <10%, 人血清白蛋白、甘油三酯、γ球蛋白均干扰 <10%, 严重溶血和黄疸造成负干扰, 抗凝剂 EDTA-K2 有负干扰, 其余抗凝剂及 VC 无干扰。临床评价预期值 149 例非相关人样本测定, 99%单侧 1.7 ng/ml, 敏 感 性 86%, 特 异 性 99%, 临 床 符 合 率 96%。 临 床 评 价 预 期 值 100 例 非 相 关 人 血 清 测 定 , 95%单 侧 57 ng/ml, 敏 感 性 96.1%, 特异性 93.0%, 临床符合率 94.7%。结论: 本方法所测结果准确可靠, 且操作简便、快速, 直接在自动生化分析仪 上使用, 值得推广。
Hs-CRP 检测在脑梗死诊断中的应用
武惠萍 (长治市人民医院,山西 长治 04 反应蛋白( hs-CRP) 检测对脑梗死的诊断价值。方法: 对 60 例脑梗死患者和 25 例健 康对照者进行血清 hs-CRP 的测定、分析, 比较两组中 hs-CRP 的差别, 分析 hs-CRP 在诊断脑梗死疾病中应用价值。结 果:脑梗死患者血清 hs-CRP 浓度显著高于对照组( P<0.01) 。结论:应用 hs-CRP 检测有助于脑梗死的早期诊断。
( hs-CRP) 作为慢性 炎 症 的 一 种 重 要 的 , 较 新 的 标 志 物 引 起 人 们的关注, 并已得到实验室的证实, 本研究通过实验分析 hs-CRP 与 CI 的 内 在 联 系 , 对 CI 患 者 与 健 康 对 照 者 的 血 清 hs-CRP 指标进行分析,以探讨 hs-CRP 的临床应用价值。 1 材料和方法
[关键词] 超敏 -C 反应蛋白( hs-CRP) ; 脑梗死( CI) ; 诊断 [中图分类号] R364.1+7 [文献标识码] B [文章编号] 1671-5098(2007)21-2837-02
脑梗死( CI) 是发病率较高, 危害中老年人健康的疾病之 一 , 已 越 来 越 受 到 人 们 的 关 注[1]。 其 病 理 基 础 为 动 脉 粥 样 硬 化, 而慢性炎症是动脉粥样硬化发生和发展的一个重要组成 部分。近年来不少新的炎症指标不断应用于临床, 但用来预测 和诊断 CI 都不能收到满意的效果[2]。最近, 超敏 -C 反应蛋白
相关主题
胶乳免疫比浊
胶乳增强免疫比浊法
胶乳免疫比浊法
胶乳增强免疫比浊
文档推荐
甘胆酸测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)产品技术要求baiding
页数:4
铁蛋白(FER)测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)产品技术要求sainuopu
页数:3
类风湿因子测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)产品技术要求jiuqiang
页数:3
α1-微球蛋白测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)产品技术要求baiding
页数:4
免疫比浊胶乳颗粒使用资料
页数:6
胶乳增强免疫比浊反应原理
页数:2
体外诊断试剂胶乳比浊法学习.
页数:3
胶乳透射免疫比浊法-国家食品药品监督管理总局
页数:21
髓过氧化物酶测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)产品技术要求baiding
页数:4
降钙素原测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)产品技术要求baiding
页数:4
最新文档
南漳一中课件高一物理加速度
高考 短文改错 冠词& 连词
健康档案操作手册(1.0.0.0)
早期妊娠的诊断有哪些
8-1_结构类型
知识产权论文
山东省青岛市2019届高三5月二模理科综合生物试题 含答案
三、3 铁及其重要化合物
发动机原理复习-2012
2015届高考物理第一轮复习课件22