雷公藤化学成分研究
严振1，田洋2 ，马跃平3，傅晓春1，张振学2，王金辉3
（1．广东食品药品职业学院，广东，广州510520；
2．沈阳化工学院化学工程学院，辽宁，沈阳 110142 ；
3．沈阳药科大学中药学院，辽宁，沈阳110016 ）
[摘要]目的：研究雷公藤（Tripterygium wilfordii Hook. f .）根的化学成分。方法：利用各种色谱方法进行分离纯化，根据理化性质和谱学数据对分离得到的化合物进行结构研究。结果：从雷公藤根乙醇提取物中分离得到6个化合物，分别鉴定为5α-豆甾烷-3,6-二酮(5α-stigmast-3,6-dione,1)，6β-羟基-豆甾-4-烯-3-
酮(6β-hydroxystigmast-4-en-3-one,2)，邻苯二甲酸二丁酯(phthalic acid dibutyl ester,3)，秦皮素(fraxetin,4)，β-谷甾醇（β-sitosterol,5），胡萝卜苷（daucosterol,6）。结论：化合物1、3、4为首次从卫矛科植物中分离得到；化合物2为首次从本属植物中分离得到。
[关键词] 雷公藤；化学成分；结构鉴定
雷公藤（Tripterygium wilfordii Hook. f.）系卫矛科雷公藤属植物。广泛分布于浙江、江西、安徽、湖南、广东、福建、台湾等地。其性苦、寒，有大毒，具有杀虫、消炎、活血通络、解毒的功效。现代临床广泛用于多种免疫系统异常而致的疾病，获得了良好的疗效。大量药理及临床已证明其提取物和某些成分具有免疫调节、抗炎、抗肿瘤和男性抗生育作用[1]。通过对雷公藤根的化学成分的研究，得到6个化合物并分别鉴定，为其药用资源的开发利用提供有益参考。
1 材料与仪器
Bruker ARX-300和Bruker AV-600型核磁共振波谱仪（TMS内标，瑞士Bruker公司）；N2000型日立高效液相色谱仪；制备型色谱柱为YWC C18反相柱（5μm,10 mm×250mm）；MP-S3型显微熔点测定仪（温度计未校正，日本Yanaco公司）；Sephadex LH-20（美国Pharmacia 公司），柱色谱和薄层色谱硅胶（青岛海洋化工厂有限公司）；所用试剂为色谱纯和分析纯。
雷公藤（市售）经沈阳药科大学孙启时教授鉴定为Tripterygium wilfordii Hook. f .的根。
2 提取与分离方法
取雷公藤根20 kg，用体积分数为90%乙醇煮沸提取，合并滤液，减压浓缩后得浸膏900 g，将浸膏加适量水稀释，依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取。石油醚层和氯仿层提取物（71.5 g）进行硅胶柱色谱分离，以石油醚-丙酮系统（100：1～1：1）梯度洗脱。得到的流份（Fr.37～63）经重结晶处理后得化合物5；流份（Fr.88～96）经重结晶处理后得到化合物1；流份（Fr.143～169）经重结晶处理
后得到化合物2；流份（Fr.213～256）经硅胶吸附柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱后，所得到的流份用高效液相色谱分离，最后得到化合物3；流份（Fr.506～554）经石油醚-丙酮反复洗脱，Sephadex LH-20柱色谱得到化合物6；乙酸乙酯萃取物（27.7g）经硅胶吸附柱柱色谱，以三氯甲烷-甲醇系统（200：1～1：1）梯度洗脱，得到的流份（Fr.27～35）经重结晶处理后得到化合物4。
3结果与讨论
3．1 化合物1
无色针状结晶（甲醇），与10%硫酸乙醇试剂显紫色；与Libermann-Burchard反应阳性，示为甾体或三萜类化合物。1H-NMR（300MHz，CDCl3）谱中，高场区给出6个典型的甲基质子信号：δ：0.69 (3H，s，H-18)，0.96 (3H，s，H-19)，0.93 (3H，d，J= 6.2 Hz, H-21)，0.84 (3H，d，J = 6.6 Hz，H-26)，0.81 (3H，d，J= 6.8 Hz，H-27)，0.85 (3H, t，J= 7.0 Hz，H-29)；13C-NMR（75MHz, CDCl3）谱中，给出29个碳信号（数据如表1），提示该化合物有可能是29C甾类化合物；13C-NMR谱中δ209.2、211.7二个碳信号提示该化合物中有2个酮羰基信号。其数据与文献[2]中谱学数据基本一致，故鉴定其为5α-豆甾烷-3,6-二酮（5α-stigmast-3,6-dione），为卫矛科植物中首次分离得到。
3．2 化合物2
无色针状结晶（石油醚-乙酸乙酯），mp208～210℃；与10%硫酸乙醇试剂显紫色；与Libermann-Burchard反应阳性，示为甾体或三萜类化合物。1H-NMR（300MHz，CDCl3）谱中，高场区给出6个典型的甲基质子信号：δ 0.74(3H，s，H-18)，1.37(3H，s，H-19)，0.92(3H，d，J =6.4H Z，H-21)，0.84 (3H，d，J=6.6H Z，H-26)，0.82 (3H，d，J =6.6H Z，H-27)，0.85 (3H，t，J=7.0 H Z，H-29)；另外给出一个烯烃质子信号δ5.82（1H，s）及一个与连氧碳相连碳的质子信号δ4.35(1H，d，J =3 Hz)。13C-NMR （75MHz，CDCl3）谱中，给出29个碳信号（数据如表1），因此进一步推断该化合物为豆甾类化合物，δ200.4、168.44、126.35示结构中具有不饱和碳信号；δ73.30为6位连氧碳信号；此外低场区无其他碳信号，其数据与文献[3]中谱学数据基本一致，故鉴定其为6β-羟基-豆甾-4-烯-3-酮（6β-hydroxystigmast-4-en-3-one），为本属植物中首次分离得到。
Table 1 13C-NMR Chemical Shifts of Compounds1 、2
No. Compound 1(CDCl3) Compound 2(CDCl3) No. Compound 1(CDCl3 ) Compound 2(CDCl3)
1 38.037.016 28.029.0
2 39.334.217 56.556.0
3 209.2200.518 12.512.0
4 36.9126.319 11.919.8
5 57.5168.420 36.036.1
