常用培养基的制备PPT课件

灭菌时包牛皮纸
5．灭菌：用高压灭菌器灭菌
包扎好，直立放入内筒中， 在121.3℃灭菌20-30min。
灭菌完毕后，将平板培养基 拿出平放于桌面，凝固前勿 动；将试管培养基摆成斜面 ，凝固前勿动。
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6．无菌检验：
随机抽取几个平板或试管培养基于温箱中培养24 小时，若无菌 生长则为合格。
7．备用：
• 计算 • 称量 • 溶化 • 调PH • 分装 • 灭菌 • 无菌检验 • 备用
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（一）肉汤培养基 （二）琼脂培养基 （三）半固体培养基 （四）血液琼脂培养基
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（一）肉汤培养基
1．成分 牛肉膏3～5g，蛋白胨10g，氯化钠5g，蒸馏水 1000ml。
2．制法 将牛肉膏、蛋白胨、氯化钠加蒸馏水后，加热 溶解。矫正pH至7.4～7.6，过滤分装。置高压蒸气灭 菌器内，121.3℃灭菌20min即成。
3．用途 可供一般细菌生长，同时也是制作一般培养基 的基础原料。供营养要求较高的细菌分离培养，亦可 供溶血性的观察和保存菌种。
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（二）固体琼脂培养基 1．计算：
1000 ml蒸馏水中应加营养琼脂粉31.3g，再根据培养基 的需要量确定营养琼脂粉的用量。
营养琼脂粉的量=31.3×15×n/1000 （g） 其中：
15代表一个平板需要营养琼脂约15 ml； n代表要做的培养基平板的数量
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2．称量：
用普通天平准确称量出营养琼脂粉的量，用量筒量出相 应的 蒸馏水的量，要尽量准确。
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3．溶化：
将营养琼脂粉和蒸馏水倒入搪瓷缸中，于电炉上加热溶 化，边加热边搅拌，沸腾时立即从电炉上拿下，等泡沫 消失后再放在电炉上加热，注意不能让琼脂溢出，煮沸 2—3次。
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课后作业
1.写出实习报告； 2.掌握普通营养琼脂培养基的制备过程
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4．分装：倒平板或倒试管
• 若做平板培养基应倒于培养皿中，每板约15ml左右， 以刚好覆盖平皿底为易。
• 若做斜面培养基应倒入试管中，量为试管的1/3
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包扎：
◇加塞后，试管通常每7支一起，包上一层牛皮纸或两层报纸， 用线绳扎紧。三角瓶加塞后也用牛皮纸包扎。 ◇以活结形式扎紧，以便使用时容易解开。 ◇用记号笔注明培养基名称、配制日期、配制人或实验组。
技能训练 常用培养基的制备
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实训目标
• 熟悉培养基制备的基本程序 • 会制备常用的培养基
仪器材料
高压蒸气灭菌器、电热干燥箱、电炉、天平、量 筒、漏斗、试管、培养皿、烧杯、三角烧瓶、等
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方法步骤
（一）肉汤培养基 （二）琼脂培养基 （三）半固体培养基 （四）血液琼脂培养基
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制备培养基 方法步骤
将合格的培养基放入冰箱， 在0-4℃中保存备用。
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（三）半固体培养基
肉汤培养基中加入0.3%～0.5%琼脂粉制成， 用于菌种的保存或观察细菌的运动性。
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（四）血液琼脂培养基
将灭菌的营养琼脂冷至45～50℃，以无菌操 作 ， 加 入 5% ～ 10% 的 无 菌 血 液 （ 或 脱 纤 维 血），然后倾注平皿或分装试管制成斜面。