干细胞标记物ppt课件
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小鼠造血干细胞表达底水平Thy-1。
表型为Thy-1Low的细胞群能完全重建受致死量照射宿 主的淋巴造血系统。
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25
干细胞抗原（stem cell antigen-1,Sca-1）
Sca-1是18kDa磷脂酰肌醇锚定蛋白，属Ly-6(一种胞浆膜蛋
白）抗原家族成员。 Sca-1被广泛认为和Ly-6 半抗原一起，是小鼠HSC标志分子， 它在多能HSCs上表达。 一种抗Sca-1抗体经常和一些细胞表面标志分子表达的阴性 选择一起用来鉴定和分离小鼠HSCs。 Sca-1+ HSCs可在成年骨髓、胎儿肝脏、成年动物流动的外 周血和脾脏中被找到。Sca-1在几种非造血组织中也被发现。 可用来富集HSCs之外的祖细胞。 有人自骨髓中Thy-1Io、Lin-、Sca-1+细胞群中，可分离纯人 造血干细胞。
受体与配体间的作用具有三个主要特征： ①特异性； ②饱和性； ③高度的亲和力。
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10
白细胞分化抗原： 是白细胞（还包括血小板、血管内皮细胞
等）在分化成熟为不同谱系（lin-eage）和分 化不同阶段以及活化过程中，出现或消失的细 胞表面标记
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11
粘附分子: 是一类能介导细胞间及细胞与细胞外
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26
Kit：原癌基因c-kit表达产物（又叫干细胞因子受
体SCF-R,CD117）,表达于几乎所有小鼠造血干细
胞。
C-kit可编码一种穿膜酪氨酸激酶受体分子。
存在于造血干细胞膜上，它的配体分子是造血干细
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23
系表面抗原(lineage surface antigen,Lin)
当造血干细胞分化为各系的祖细胞和成熟细胞时， 会出现各系细胞的专一标志，即系表面抗原 如： 淋巴 系：CD19、CD7 粒 系：CD11、CD13、CD15、CD16 红 系：CD36、CD47、CD51、CD59、CD71； 单核 系：CD14 巨核 系：CD31、CD41、CD42、CD61、CD107 B淋巴系：CD19、CD20、CD21、CD22 T/NK 系：CD2、CD7、CD11、CD25、CD26
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8
细胞表面分子分类：
细胞膜受体
白细胞分化抗原
粘附分子
细胞因子受体
结合促分裂素的分子
主要组织相容性复合体抗原
B细胞识别抗原的膜免疫球蛋白
免疫球蛋白Fc段受体
其它受体和分ห้องสมุดไป่ตู้。
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9
受体：（receptor）是一种能够识别和选择
性结合某种配体（信号分子）的大 分子物质
SSEA 核型 不被Hoechst33342和Rhodamine123染色 分化能力
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21
人胚胎干细胞特性
胚胎干细胞
SSEA-1 SSEA-3 SSEA-4 TRA-1-60 TRA-1-81 AKP Oct-4 端粒酶活性 滋养细胞
培养条件
－ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ 滋养细胞 ＋无血清培养 +bFGF
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16
胚胎干细胞的常用标志： Oct-4 SSEAs TRA-1-60和TRA-1-81
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17
Oct-4 ：Oct-4（也叫Oct-3或Oct3/4） 属POU转录因子一员
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18
SSEAs （特异性胚胎抗原）： 人EC、ES：SSEA-3（+）、SSEA-4（+），SSEA-1（-） 鼠ES： SSEA-1（+） ， SSEA-3（-）、SSEA-4（-） TRA（肿瘤排斥抗原）： 人ES（+） 鼠ES（-）
生殖干细胞
＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ？ ＋ ＋
LIF+bFGF +Forskolin
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22
造血干细胞的标志物
Lin： lineage surface antigen 胸腺抗原-1（Thy-1、CD90） 干细胞抗原（stem cellantigen-1,Sca-1） Kit CD34 CD133 ABCG2 CD45 KDR/VEGFR-2 其它： CD38 ，WGA（丝裂原）
干细胞的标志物
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1
干细胞：是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。
包括： 胚胎干细胞 生殖干细胞 成体干细胞
按分化潜能分为： 全能干细胞 多能干细胞 专能（单能）干细胞
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2
干细胞的标志物分类：
细胞表面的特殊标志 细胞内特异基因的表达 细胞内特殊物质的表达 其他特性
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3
细胞表面分子
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14
“通用的”干细胞标记：ABCG2/Bcrp1
（St. Jude Children's Research Hospital ）
多能干细胞标记 ：干细胞因子 Oct-4 波形蛋白 硷性磷酸酶
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15
鉴定干细胞的常用方法： 细胞形态和结构 细胞功能 细胞表面的特殊标
志 细胞内特异基因的表达
基质粘附的分子，多为糖蛋白。
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12
粘附分子分类: 粘合素超家族粘附分子（纤维粘连蛋白、层粘连 蛋白、纤维蛋白原、胶原蛋白、等） 免疫求蛋白超家族粘附分子（ICAM、VCAM、和CD31等） 钙粘连素超家族粘附分子 选择素家族粘附分子 其它粘附分子。
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13
干细胞表面分子功能： 参与干细胞的分化调控 维持干细胞的自我更新和多能性 参与机体重要的生理和病理过程
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20
胚胎干细胞的检测： 形态特性：ES具有与早期胚胎细胞相似的形态特点。 生长特性 干细胞特殊标记：SSEAs, TRA-1-60, TRA-1-80
（AKP+, SSEA+, Oct-4+显示ES的未分化状态，并且Oct-4和SSEA-4是人类ES的特性）
端粒酶活性高
AKP
检测造血祖细胞时，可选择其中3-5个代表各系 的抗原。
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胸腺抗原-1（Thy-1、CD90）
为GPI （糖磷脂酰肌醇glycophosphatidylinositol,GPI） 连结的膜分子，主要分布在胸腺T细胞、NK细胞和 神经元。Thy-1是用来鉴别造血干细胞的种系特异性 标志物.Thy-1在CD34阳性细胞中表达最高，是比 CD34更早期的造血干/祖细胞表面标志,并且当造血 干细胞开始表达其分化细胞类型(如CD45RA，CD38， 和CD71)时，他的表达开始下降 .
表型为Thy-1Low的细胞群能完全重建受致死量照射宿 主的淋巴造血系统。
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干细胞抗原（stem cell antigen-1,Sca-1）
Sca-1是18kDa磷脂酰肌醇锚定蛋白，属Ly-6(一种胞浆膜蛋
白）抗原家族成员。 Sca-1被广泛认为和Ly-6 半抗原一起，是小鼠HSC标志分子， 它在多能HSCs上表达。 一种抗Sca-1抗体经常和一些细胞表面标志分子表达的阴性 选择一起用来鉴定和分离小鼠HSCs。 Sca-1+ HSCs可在成年骨髓、胎儿肝脏、成年动物流动的外 周血和脾脏中被找到。Sca-1在几种非造血组织中也被发现。 可用来富集HSCs之外的祖细胞。 有人自骨髓中Thy-1Io、Lin-、Sca-1+细胞群中，可分离纯人 造血干细胞。
受体与配体间的作用具有三个主要特征： ①特异性； ②饱和性； ③高度的亲和力。
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白细胞分化抗原： 是白细胞（还包括血小板、血管内皮细胞
等）在分化成熟为不同谱系（lin-eage）和分 化不同阶段以及活化过程中，出现或消失的细 胞表面标记
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粘附分子: 是一类能介导细胞间及细胞与细胞外
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Kit：原癌基因c-kit表达产物（又叫干细胞因子受
体SCF-R,CD117）,表达于几乎所有小鼠造血干细
胞。
C-kit可编码一种穿膜酪氨酸激酶受体分子。
存在于造血干细胞膜上，它的配体分子是造血干细
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系表面抗原(lineage surface antigen,Lin)
当造血干细胞分化为各系的祖细胞和成熟细胞时， 会出现各系细胞的专一标志，即系表面抗原 如： 淋巴 系：CD19、CD7 粒 系：CD11、CD13、CD15、CD16 红 系：CD36、CD47、CD51、CD59、CD71； 单核 系：CD14 巨核 系：CD31、CD41、CD42、CD61、CD107 B淋巴系：CD19、CD20、CD21、CD22 T/NK 系：CD2、CD7、CD11、CD25、CD26
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细胞表面分子分类：
细胞膜受体
白细胞分化抗原
粘附分子
细胞因子受体
结合促分裂素的分子
主要组织相容性复合体抗原
B细胞识别抗原的膜免疫球蛋白
免疫球蛋白Fc段受体
其它受体和分ห้องสมุดไป่ตู้。
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受体：（receptor）是一种能够识别和选择
性结合某种配体（信号分子）的大 分子物质
SSEA 核型 不被Hoechst33342和Rhodamine123染色 分化能力
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人胚胎干细胞特性
胚胎干细胞
SSEA-1 SSEA-3 SSEA-4 TRA-1-60 TRA-1-81 AKP Oct-4 端粒酶活性 滋养细胞
培养条件
－ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ 滋养细胞 ＋无血清培养 +bFGF
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胚胎干细胞的常用标志： Oct-4 SSEAs TRA-1-60和TRA-1-81
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Oct-4 ：Oct-4（也叫Oct-3或Oct3/4） 属POU转录因子一员
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SSEAs （特异性胚胎抗原）： 人EC、ES：SSEA-3（+）、SSEA-4（+），SSEA-1（-） 鼠ES： SSEA-1（+） ， SSEA-3（-）、SSEA-4（-） TRA（肿瘤排斥抗原）： 人ES（+） 鼠ES（-）
生殖干细胞
＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ？ ＋ ＋
LIF+bFGF +Forskolin
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造血干细胞的标志物
Lin： lineage surface antigen 胸腺抗原-1（Thy-1、CD90） 干细胞抗原（stem cellantigen-1,Sca-1） Kit CD34 CD133 ABCG2 CD45 KDR/VEGFR-2 其它： CD38 ，WGA（丝裂原）
干细胞的标志物
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干细胞：是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。
包括： 胚胎干细胞 生殖干细胞 成体干细胞
按分化潜能分为： 全能干细胞 多能干细胞 专能（单能）干细胞
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干细胞的标志物分类：
细胞表面的特殊标志 细胞内特异基因的表达 细胞内特殊物质的表达 其他特性
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细胞表面分子
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“通用的”干细胞标记：ABCG2/Bcrp1
（St. Jude Children's Research Hospital ）
多能干细胞标记 ：干细胞因子 Oct-4 波形蛋白 硷性磷酸酶
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鉴定干细胞的常用方法： 细胞形态和结构 细胞功能 细胞表面的特殊标
志 细胞内特异基因的表达
基质粘附的分子，多为糖蛋白。
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粘附分子分类: 粘合素超家族粘附分子（纤维粘连蛋白、层粘连 蛋白、纤维蛋白原、胶原蛋白、等） 免疫求蛋白超家族粘附分子（ICAM、VCAM、和CD31等） 钙粘连素超家族粘附分子 选择素家族粘附分子 其它粘附分子。
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干细胞表面分子功能： 参与干细胞的分化调控 维持干细胞的自我更新和多能性 参与机体重要的生理和病理过程
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胚胎干细胞的检测： 形态特性：ES具有与早期胚胎细胞相似的形态特点。 生长特性 干细胞特殊标记：SSEAs, TRA-1-60, TRA-1-80
（AKP+, SSEA+, Oct-4+显示ES的未分化状态，并且Oct-4和SSEA-4是人类ES的特性）
端粒酶活性高
AKP
检测造血祖细胞时，可选择其中3-5个代表各系 的抗原。
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胸腺抗原-1（Thy-1、CD90）
为GPI （糖磷脂酰肌醇glycophosphatidylinositol,GPI） 连结的膜分子，主要分布在胸腺T细胞、NK细胞和 神经元。Thy-1是用来鉴别造血干细胞的种系特异性 标志物.Thy-1在CD34阳性细胞中表达最高，是比 CD34更早期的造血干/祖细胞表面标志,并且当造血 干细胞开始表达其分化细胞类型(如CD45RA，CD38， 和CD71)时，他的表达开始下降 .