焦磷酸测序技术在4种食源性致病菌快速检测中的应用

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L i s t e r i a mo n o c y t o g e n e s, S t a p h y l o c o c c u s a u r e u s a n d S h i g e l l a c e r e u s wa s d e s i g n e d, t h e n t h e
酸测 序快速 检 测方 法。此 方 法以传 统 国标 法 的前增 菌为前提 , 而省 去 了后 期 生化 验证 的繁 琐过 程, 大 大缩短 了检测 时 间 , 并且 其 准确性 与传 统生 化验证 完全一 致 , 灵敏度 可达 1 0 C F U / mL 结
果表 明 , 作 者建 立的 焦磷 酸测 序检 测 方 法具 有 高效 、 快速 、 精 准及 操 作 简便 等特 点 , 为食 源性 致 病 菌的 快速鉴 定开辟 了广 阔的前景 关键 词 : 食 源性致 病 菌 ; 焦磷 酸测序 技 术 : 检 测
T he r e s u l t s p r o v i d e a n i n f o r ma t i v e s u pp l e me nt t o f a s t i d e n t i ie f d f o o d -b o r ne pa t h o g e ni c b a c t e r i a . Ke ywor ds:f o o d —b o r n e pa t h o g e ni c ba c t e r i a, p y r o s e q ue nc i n g t e c h n o l o g y, d e t e c t i o n
bo r n e p a t ho g e n i c ba c t e r i Байду номын сангаас b y us i n g p y r o s e q ue n c i n g t e c h n o l o g y .F o r t hi s ,o ne pa i r o f po l y me r a s e
中图分类 号 : Q 7 8 1 文 献标志 码 : A 文 章编 号 : 1 6 7 3 —1 6 8 9 ( 2 0 1 3 ) 0 2 —0 1 8 2 一O 7
S t ud y a n d Ap pl i c a t i o n o n De t e c t i o n o f Fo ur Ki nd s o f Fo o d-Bo r ne Pa t ho g e ni c Ba c t e r i a by Py r 0 s e q ue nc i n g Te c hno l og y
c h a i n r e a c t i o n ( P C R) p r i me r s a n d o n e p y r o s e q u e n c i n g s e q u e n c i n g p r i m e r o f S a l m o n e l l l a s p p ,
焦磷酸测序技术在 4 种食源性致病菌 快速检灏I J 中的应用
赵 新, 王 永 , 兰青阔 , 陈 锐, 朱 珠, 余景会 , 李 欧静 , 郭 永 泽
( 天津 巾农 业科 学 院 f , C 盼空 , 天津 3 0 0 3 8 1 )
摘要 : 为建 立一 种利 用 焦磷 酸测 序技 术检 测和鉴 定 沙 门氏菌( S a l mo n e l l l a ) 、 单核 细胞增 生李斯 特 菌( L i s t e r i a mo n o c y t o g e n e s ) 、 金 黄 色葡 萄球 菌 ( S t a p h y l O C O C C  ̄ ¥a u r e u s ) 和志贺氏茵( S Z ) 的方 法, 通过 对 4种 菌毒 力靶基 因特 异 性序 列 的 同源性 分 析 , 设计 出适合 焦磷 酸 测序 特 异性 扩增 和 测序 的 引物 , 摸 索 出最佳 的 焦磷 酸 测序 反 应体 系和反 应程 序 , 并 建 立 了 4种 食 源性 致病 菌焦磷
A bs t r a c t: Th e a i m O ±t hi s s t u d y wa s t o e s t a b l i s h a d e t e c t i o n me t h o d f o r i de n t i ic f a t i o n o f f o o d—
( C e n t r a l L a b, T i a n j i n A c a d e my o f A g r i c u l t u r a l S c i e n c e s , T i a n j i n 3 0 0 3 8 1 , C h i n a )
a r r i v e d a t 1 0 CFU/ n l L a n d h a s be e n p r o v e n t o b e h i g h l y e ic f i e n c y, r a p i d, e x a c t a nd e a s y ha n dl i n g .
p y r o s e qu e nc i n g r e a c t i o n s y s t e m a n d c o nd i t i o n s wa s o p t i mi z e d.t h e s e n s i t i v i t y o f t h i s me t ho d wa s
Z H A0 X i n , WA N G Y o n g * , , J AⅣ Q i n g - k u o , C H E N R u i , Z HU Z h u ,
Y U J i n g - h u i , L I O u - j i n g , G U O Y o n g - z e