主要目的:
——为了测定样品清除ABTS自由基的能力。
主要原理:
——用K2S2O8与ABTS 直接生成稳定的阳离子自由基ABTS+,抗氧化物质与ABTS+发生反应而使反应体系褪色。
实验室签章
一、试剂
——K2S2O8水溶液
——ABTA溶液
——乙醇(分析纯)
——PBS 溶液
二、仪器设备
——96孔酶标板
——UV-Vis可见多功能酶标仪——移液枪
——200 μL量程枪头
三、实验方法
◆前期准备
ABTS储备液(7.4 mmol/L)取ABTS 96 mg,加蒸馏水25 mL。
K2S2O8储备液(2.6 mmol/L)取K2S2O8 378.4 mg,加蒸馏水10 mL。
将5 ml 7.4 mmol/L ABTS储备液与88 μL 2.6 mmoL/L K2S2O8混匀,静置12-16小时,配制成ABTS工作液。
◆ABTS自由基清除法
0.4 mL ABTS工作液,用PBS 溶液稀释,要求在常温下734nm 处吸光值为0.7±0.02。0.2 mL ABTS+·工作液与10uL 不同浓度受试物混合,常温避光静置6min,在734 nm 波长处测吸光度,平行3次。
ABTS自由基清除能力由下式计算:
清除率(%)=[A0-A i/A0]×100%
式中:A0为不加样品,加入ABTS 的吸光度;A i为加入样品和ABTS 的吸光度