Rh血型鉴定完整版

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凝聚胺法步骤
• Polybrene技术首先利用低离子介质（LIM），介质的离子强度是影响 抗体结合红细胞原能力的重要理化条件之一，正负离子相互作用力-即静电力显著影响抗体与红细胞的反应。减低介质的离子强度，减少 了红细胞周围的阳离子云，从而促进带正电荷的lgG与带负电荷的红 细胞发生反应，以促进红细胞和血清（血浆）中的抗体结合。 其后，加入凝聚胺（Polybrene）试剂。凝聚胺是一种高价阳离子 季胺盐多聚物，溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞膜表面的 唾液酸带有的负电荷，使红细胞的zeta电位降低，红细胞之间距离减 少，使红细胞发生凝聚。 最后，加入复悬液（Resuspending）。复悬液有中和Polybrene的 作用。使正常红细胞可逆性的非特异性凝聚散开。如果是抗体致敏的 红细胞被凝聚胺凝集，则凝集不可逆，为阳性结果。
② D抗原是非ABO红细胞抗原中免疫性最强的抗原，可以引 起抗D的产生，抗D与D红细胞产生严重的溶血反应。
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㈢. Rh血型鉴定
常规情况下，红细胞只做Rh（D）定型，
对供血者需鉴定D变异型，只有特殊情况下才检 查其它抗原。例如：家系调查、父权鉴定、产 前检查、确定纯合子或杂合子以及配血试验中 发现有不规则抗体存在等情况下才需做Rh血型 全部表现型的定型
Rh血型的遗传学说及命名
Rh--Hr命名法（Wiener学说） CDE命名法（Fisher--Race学说） 数字命名法
二.Rh血型系统
㈠.Rh抗原
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① Rh抗原有40多种，
② Rh抗原的发育 Rh抗原是胎儿早期就充分发育并维持整个一生，脐带血或 新生儿的红细胞Rh血型与成人一样强。 ③ 与临床关系最密切：D、E、C、c、e 5种，D的抗原性最强。 抗原强弱次序为 D>E > C> c>e
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(2).抗人球蛋白法：又称Coombs试验 直接法：可检查受检者的RBC是否已被不完全抗体致敏；
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间接法：可用于鉴定Rh血型及血清中是否存在不完全抗体。
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(3).酶介质法：
原理：
①木瓜酶或菠萝酶可以破坏RBC表面的唾液酸， 使RBC膜失去电荷，缩小RBC间的距离； ②酶可以部分地改变RBC结构，使某些隐蔽的 抗原得以暴露，增强凝集性 (4).聚凝胺法： 本法用于临床配血是切实可行的。
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1.Rh血型鉴定及方法学评价：
Rh抗体属IgG不能在盐水介质中与RBC发生凝集。 (1).低离子强度盐水试验 原理： 降低介质的离子强度→可减少RBC外围的离子云 ①促进IgG分子在两个RBC之间搭桥→使之结合，
②能缩短抗原与抗体的反应时间，并提高其灵敏度。
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凝聚胺法
【原理】 • 红细胞膜表面的唾液酸带有的大量的负电荷，可避免其发 生自发凝聚，使红细胞保持最大的表面面积，增加氧的转 移能力和气体扩散。红细胞悬浮在电解质内，阳离子被红 细胞的负电荷吸引，红细胞被扩散的双层离子云围绕，形 成zeta电位，它决定红细胞之间的排斥作用。
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漏加或错加定型试剂 观察结果时摇动用力过度，摇散弱凝集。 试剂血清保存不当引起变质
㈣.RH血型的临床意义： 1.与输血关系： Rh－第一次接受Rh＋血液→不溶血，产生抗体
Rh－第二次接受Rh＋血液→产生大量的抗体，溶血
2.与新生儿溶血病的关系：孕妇血浆中如有Rh抗体， 妊娠Rh血型不配合胎儿时，其中IgG类的Rh抗体可以通 过胎盘进入胎儿体内。
凝集
次
病人 血清
病人 2%RBC
病人 ＋ 献血员 血清 2%RBC
病人 ＋ 献血员 2%RBC 血清
献血员 献血员 2%RBC 血清
室温5min后 1000-2000 rpm ×1-2min 观察。
无凝集 无凝集
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【报告方式】
1.如两管均无凝集，则报告： 病人XX（X型）血清＋献血者XX（X型）红细胞 有或无凝集溶血 病人XX（X型）红细胞＋献血者XX（X型）血清 有或无凝集溶血
D变异型抗原的特点
与一些抗D血清发生凝集反应，而与另一些 抗D血清不发生凝集反应，要证实这种弱表现的 D抗原，需用间接抗球蛋白试验。
㈡.Rh系统抗体
① 多是通过外来RBC免疫刺激后产生，即通过输血或妊娠 免疫而产生。这些抗体均为IgG。一般在初次免疫后2~6个月 内出现，经再次免疫后，3周内抗体浓度可达到高峰。大约 1/3的Rh阴性的人，经Rh阳性抗原免疫后，不产生抗D.非免疫 的Rh抗体极为罕见.
（XX配血法）
2. 任何一管或两管有凝集或溶血: 立即复查血型或查明其他原因如实报告，并与病室 联系，决不能随便输血。
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盐水法评价
• 安全输血包括检测ABO相合与否，也包括免疫性抗体的检 测。最初的交叉配血以盐水介质为主，而盐水介质实验只 能发现ABO不配合，不能检出IgG抗体，所以血库《标准》 不要求盐水介质实验的配血 ，而要求在血清学配合实验 中使用能展示ABO不配合和在37℃有活性的、有临床意义 重要抗体的方法。从安全输血的角度和今后发展趋势分析， 盐水介质法将会和其他技术联合运用。
Levine和Stetsen在一患死胎的孕妇血清中检测到 一种抗体，此为人类发现的第一例Rh抗体
1941--1945年 确定了人体红细胞上含有Rh系统的六种抗原，即D、 d；E、e；C、c。D和d；E和e；C和c表现为对偶关系， 但d抗原只是推测。
Rh血型的定义
根据红细胞上D抗原的有无可将人类 红细胞分为Rh阳性和Rh阴性，即红细胞 上缺乏D抗原的人是Rh阴性；红细胞有D 抗原的人是Rh阳性
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2 .Rh血型鉴定可能出现假阳性的原因
• • • • • •
受检细胞直抗阳性
高蛋白试剂引起缗钱状凝集 纤维蛋白造成的凝块 定型试剂中存在的其它抗体 多凝集细胞造成的假阳性 鉴定器材和试剂血清被污染
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3.Rh血型鉴定可能出现假阴性的原因
• • • •
受检细胞悬液浓度太高，与试剂血清比例失调。
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三、其它红细胞血型系统
MNSsU血型系统 有40个抗原，基因表达产 物为MN唾液酸糖蛋白、Ss唾液酸糖蛋白 P血型系统 Kell血型系统 Kidd血型系统
Lewis血型系统
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（五）.交叉配血
【原理 （principle） 】(盐水法)
天然IgM类 血型抗体
＋
对应的红 细胞抗原
主
室温
盐水介质
教案编制
授课内容：Rh血型系统
授课学时：1学时
重点内容：Rh血型抗原与抗体及临床意义； 交叉配血 熟习内容：Rh血型鉴定方法。 了解内容：其它红细胞血型系统 医学全在线网站 www.med126.com
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二.Rh血型系统
Rh 血型系统的发现
1937年--1939年
Landsteiner和Wiener用恒河（rhesus）红细胞免 疫家兔和豚鼠得到的抗血清将人红细胞分为Rh阴性和 Rh阳性 1939年
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Discussion：
1.是不是交叉配血结果阴性，就一 定不会出现输血反应？
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④ 我国Rh－频率约占人群中的0.34%
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Rh血型的 D变异型
D变异型的定义： 有些含D抗原的红细胞与某些抗D血清反应， 而与另一些抗D血清不反应，这些红细胞所含的D 抗原可能缺少完整D抗原的某些成份或者呈现很 弱的抗原活性，这些D抗原统称为D变异型。
D变异型包括弱D型（Du）和不完全D型 （partial D）