包涵体纯化试剂配方
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✧ Buffer A 裂解液 500ml
1M Tris (pH 6.8)母液 25 ml
5M Nacl 母液( M:58.5) 15ml
H 20 435ml
5%甘油 25ml
✧ 1M Tris 母液 ( M:121.14 PH:6.8 )的配置100ml
称量12.114gTris 加50ml 水,PH 由浓Hcl 调节至6.8,定容至100ml
✧
1M Tris-HCl (M:121.14 PH 7.9)母液配置100ml
称量12.114gTris 加50ml 水,PH 由浓Hcl 调节至7.9,定容至100ml
✧ 5M Nacl 母液( M:58.5) 配置100ml
称量29.25g Nacl 加水定容至100ml
✧ 2M 尿素(M:60.06)裂解缓冲液250ml
1M Tris (pH 6.8)母液12.5 ml + 5M Nacl 母液 7.5ml + 甘油 12.5ml+30.030g Urea
定容至250ml
✧ 1% T ri t on X-100裂解缓冲液250ml
1MTris (pH6.8)母液12.5ml +5M Nacl 母液7.5ml +甘油12.5ml+Triton X-100(M:646.86 ) 2.5ml
✧ 1M 咪唑(M:68.0773)母液配置
称量6.80773g 咪唑定容至100ml
✧ 透析袋处理液(PH8.0)500ml
2%NaHCO3 称量NaHCO3 10g
1mM EDTA (M:292.248 称量0.14624g )
(若为EDTA 二钠M :372.2 称量0.1861g )
✧
Binding Buffer
Elution Buffer 各100ml ,定容至100ml 注:Elution Buffer 咪唑梯度浓度:20mM 加母液2ml ;40mM 加母液4ml ;80mM 加母液8ml ;150加母液15ml ;250mM 加母液25ml ;300加母液30ml ;500加母液50ml
成 分
Tris-HCl (PH 7.9) 咪唑 NaCl 尿素 Binding Buffer 1MTris-HCl
(M:121.14 PH
7.9)母液 2ml
1M 咪唑(M:68.0773)母液 0.5ml 5M Nacl 母液 10ml 8M(即称48.048gUrea) Elution Buffer
1MTris-HCl
(M:121.14 PH
7.9)母液 2ml 1M 咪唑(M:68.0773)母液 50ml 5M Nacl 母液 10ml 8M(即称48.048gUrea)