首次成功克隆成年人细胞人类完全克隆
更进一步
4月26日消息，据媒体报道，生物科技的发展，克隆技术发展日趋完善，科学家们利用动物进行克隆实验，实验很成功，现在科学家正在实验克隆人体的细胞，2013年成功用于婴
儿细胞。
近期，科学家Robert Lanza 和他的同事们展示如何真实地从35 岁中年男性提取皮肤细胞，同时还从75 岁男性体内提取细胞，使用该细胞DNA 创建精确匹配的成人
身体组织。
俄勒冈健康科学
大学发育生物学家Shoukhrat Mitalipov 说：我非常高兴地听到我们的实验经验证是真实有效的。这项研究证实该过程的关键是采用高质量人类卵细胞，研究人员使用捐赠DNA 替代未受精卵细胞中的原始DNA ，之后在实验室器
皿中进行培育。
这些干细胞与捐赠者DNA 精确匹配，之后可形成不同类型的组织。虽然实现完全人类克隆技术仍有一定差距，这项研究报告可能倍受关注，令科学家们感到兴奋。
加州大学戴维斯分校医学院教授Paul
Knoepfler 说：令人担忧的是，很有可能这种技术会被一些流氓科
学家滥用。
《汉字英雄》第二季热播十强选手酣战终极淘汰赛“淘宝时代”激活网络视频市场如果沈玎和李洪绸碰面的话，或许真的会为微电影未来的发展路
径发生争吵。因为这两个好不容易从网络视频草根中打拼出的文化人所走的路径如此不同，前者创立的南辕映画靠着网络广告和宣传片需求的爆发，实现了跨越式的发展，这个6人团队在去年创造了超200万的营业收入；而后者开设的优优
影视凭着一系列小有名气的网络剧赚足眼球，在实现收入倍增的同时，李洪绸更登堂入室，签约新公司，将真正指导投资超千万的大电影。
抑或，两人会成为好朋友。因为无论是沈玎还是李洪绸，这一众网络视频草根创业者的
成功，都毫无疑问拜托了这个淘宝时代的点化。真正成为这群草根文化班子输血者的不再是衣冠楚楚的500强大公司，而是一群出手阔绰的淘宝大户；真正成为这些网络视频重度消费者的也不再是以往的沙发土豆，而是热衷网络
生活的都市白领。
换言之，草根的产品需求催生了一群草根的内容提供商，而这个庞大市场的吸金效应才刚刚开始展现。
南方日报记者钟啸实习生钟宜珊
淘宝时代颠覆市场网店生意激活视频草根
写书的时候我就想做电影，这是一种梦想。开口必谈理想仿佛是所有草根故事的开端，这次的主角是李洪绸。2008年，这位还在读大二的同学烧光了几部书的版税喂养着自己的短片创作。在当年10月，他自编自导的《大学生同居的事
儿》(以下简称《同居》)登陆网络，才让更多人都把他看成是一个网
络导演。
回头看看，那时候的片相当粗糙。回忆起青涩岁月，李洪绸印象颇深，什么都得省着来，没什么投入。我们租了个房子，大家就过来帮忙拍，除了一套2
万多元的拍摄器材是自己买的，其他都是凑合着，最搞笑是话筒，就是用竹竿儿挑着的。然而，正是这一次的经历让他看到了这个市场的悸动，这在后来证明比什么都重要。我们当时把联系电话放在了片头和片尾部分，算是招商吧，没想
到第二集和第三集的时候就有人来投广告了。作为团队制片的李洪绸也见证了这次初步的商业化之路，然而一大拨淘宝档主的涌来还是令人喜出望外，卖手机的，卖衣服都来投了，手法也很简单粗暴，就是在片头片尾加广告，但就
这样拼出了一集几千
块的广告额。正是这一波零零碎碎的小广
告帮助了整个团队熬
过了最困难的2008年。凭借着单集点击百万，全季总点击过千万的表现，《同居》在2009年赢得了重庆电视台
接近百万的投资，这部片子也蜕变成了一步
长达70集的电视栏目剧。
就在李洪绸迎来转机的2009年，沈玎的梦想也开始起步，南辕映画工作室成立在2009年，大家都想改变中国本土影视以北派文化为主导的现状，南辕即要强调南方的立场，拍摄一系列视
角新锐、直面现实的影视作品。他和三个核心成员就这样背着如此滂沱的梦想拉起了工作室。
后来一个很偶然的机会，朋友介绍了几个做小企业的朋友过来请我们帮忙拍微电影，随后陆陆续续就有新的项目进来。大家一
想，既然这样，就不如做成生意，既能赚钱，也可以更好地补贴我们的电影。而沈玎和记者提到的金主中也出现了不少淘宝店的名字，在网上卖东西的付钱拍片子给网上买东西的人看，这在供职媒体的沈玎看来，毫无疑问就是一个完整的
生态闭环。
这不是个别现象，网店的顾客来自于网民，他们自然是在网络上投放广告的效果更好，而网络不同于传统媒体的属性也要求有人能为他们做更个性化的产品，这是一个趋势。沈玎认为，相比于更趋工业化的传统
媒体广告市场，个性化十足的网络视频市场更需要创意十足而价廉物美的产品，你是开网店的，你当然会优先选择在网络上寻找制作公司，而不是去找大型广告公司，因为他们更了解你。
沈玎就举了一个例子，他在为一家名为
爱定客的鞋类订做网店做广告时，就一次性为他们拍摄了3集轻松搞笑风的片子，但只收了1万多块钱。在沈玎看来，虽然这些生意看起来太过微小，但却预示着未来需求的旺盛，这足以撑起一个市场。在零打碎敲了两三年后，沈玎终于和朋友
有关克隆人的看法 人们之所以反对克隆人，主要是来自两方面的原因，一方面是道德伦理方面的，另一方面是技术方面的。 关于技术方面，成功率低，会存在病理性的个体。 关于道德伦理方面，千百年来，人类一直遵循有性生殖方式，而克隆人却是实验室里的产物，克隆人也被克隆人之间的关系也有悖于传统的由血缘确定亲缘的伦理方式。So克隆人无法在传统伦理道德里找到合适的安身之地。 关于技术方面的问题，我不想多说，随着时间的推移它会变得更加完善。 重点想谈论下关于道德伦理方面的问题。 有人有着这样的设想，将一个人的母亲的细胞核移植到姐姐的去核卵细胞里，然后再放入姐姐的子宫里孕育。生出的小孩，问怎么来确定她们之间的关系。 我想说这个问题好傻！因为我不知道干这种事情到底有什么意义，那位母亲本来就有自己的孩子了为什么还要再用自己的基因来克隆出另一个孩子呢？如果是姐姐想要一个孩子，干嘛要用母亲的基因呢？我这样说不知道你有没有听懂，其实我想说的是像这种伦理问题其实是可以避免的。如果实在是无法生育，就用自己的基因，然后生出来的就是自己的孩子，其实关系也并没有想象的那么复杂。这是生殖性克隆问题。 下面我想来谈谈克隆人的好处，以及克隆人的必要性。 一、好处 1、克隆人可以解决不生育问题。人又生殖自由或生殖权力，因此应该当事人来选 择是否用生殖性克隆的方法来解决生殖问题。 2、克隆人可以保留优秀基因，优化物种，避免自然进化的缓慢和随机，使我们可 以有计划地培育优秀的人才，避免成长环境的不良影响。 3、克隆人可以治愈包括白血病在内的很多绝症和慢性疾病。在当代，医生几乎可 以所有人类器官和组织上施行移植手术。But移植器官和组织最为头疼的是由于组织不配型而发生排斥反应，还有就是组织器官的稀有性，然而克隆则完全可以解决这些问题，因为取用需要换器官者的基因，二者基因完全一样，组织也就完全匹配，不会出现任何排斥反应。治疗性克隆并不一定要培育出完整的人再去剥夺器官，随着细胞工程技术的完善，可以直接取用克隆细胞处于囊胚期的细胞，定向培育出组织或器官，而不是个体，只需几个月就可以完成。
论克隆人的尊严问题(一) 作者按：本文的研究和写作得到“985工程”建设项目“行动计划”的资助，凭证号04178。 自从第一只克隆羊诞生以来，据说相继又有克隆牛、克隆兔、克隆猫降生。当2002年底有人宣布第一个克隆人已经降临人世时，尽管消息是真是假还没定论，人们已经不可能对克隆人涉及的伦理问题等闲视之了。 在此之前，西方很多国家已立法禁止或严格限制克隆人及以克隆人为目的的研究。美国总统布什在2001年11月28日成立了由包括哈佛大学著名政治伦理哲学家桑代尔在内的十多名专家学者组成的生命伦理顾问委员会，专门就克隆人涉及的伦理问题进行集体论证，写出了长达二百多页的论证报告，作为制定克隆人技术应对政策的理论依据。联合国也积极介入克隆技术实践的规范建设，并于2005年通过了禁止克隆人的宣言。 与以往的几乎所有技术不同，成熟的遗传技术（还有此处不拟讨论的虚拟实在技术）不是首先用来制造工具、提高经济效益而改造自然客体的，而是用来重塑人的本性甚至制造新人的。过去的技术通过“格物”的过程使人的知识物化，技术活动的物化结果也是在对象世界中制造出作为人造物的工具客体或消费品，因而我们可以把这种传统的技术叫做“客体技术”。而以遗传工程和虚拟实在为代表的新兴技术，一旦趋于成熟，实施起来得到的结果就首先不是工具客体或消费品的制造和使用，而是人本身——作为人类一切活动的目的的人本身的根性的改造或重塑。所以，我们可以把这种技术称为“主体技术”。我们这里将要深入讨论的克隆人技术属于遗传技术，而遗传技术一旦超出农业畜牧业品种改良定向培育的水平，就很自然地指向人本身的遗传密码,成为不折不扣的主体技术了。 主体技术的开发利用是具有颠覆性的，之所以这样说，是因为一旦这种技术活动成为人类活动的主要内容，整个人类文明就会发生有史以来最深刻的转型，这种转型的彻底性是以往由任何其他技术引起的工业革命、由政治运动带来的社会变革、由思想革命导致的文化更新等等都不可比拟的。在转型后的新文明中，我们主要的活动不是改造客观世界为我所用，而是按照自己的意志对自然界原本给予我们人类的天性进行重新设计、重新塑造了。在这里，伦理问题占据着绝对优先的地位。所以，我们就不难理解，克隆人的现实可能性，把哲学伦理学家推到了决定人类何去何从的最前沿。 那么，克隆人涉及到的核心伦理问题到底是什么呢？如果克隆人从原则上就违背了人类最核心的伦理原则，我们是否就可以一概禁止克隆人呢？如果我们禁止克隆人，一旦有人暗地里把人克隆出来了，我们应该如何对待克隆出来的人和克隆策划实施者呢？看来，要回答这样的关系到整个人类何去何从的重大问题，没有进行严肃的、以前人的重大思想成果为重要参考的系统思考，就给出草率的回答，是极端不负责任的。鉴于中国也已有克隆动物成功的纪录，克隆人也成了非常现实的可能，对与克隆人技术直接相关的伦理价值问题的回答已迫在眉睫。 在西方，哲学界的伦理学家及其他相关的价值问题专家对上述问题进行了独立于公众舆论的比较深入的讨论，并深刻影响了各国政府相关政策和法律的制定。在中国，类似的讨论却很少见，除甘绍平、邱仁宗、吴国盛等极少数人对问题的本质有某种不同程度的把握外，其它的讨论只是停留在技术的层面。技术、社会规范、流行观念等等，这些都是随时都有可能发生变化的东西，并且我们正在促成它们的变化。但是，我们讨论的有关克隆人的伦理问题，涉及到人类文明的最基本的原则，必定要超越这种历史偶然性。不然的话，我们制定的法律和政策，就会在很大程度上陷入盲目性，而这种盲目性，对人类文明的前途是很有可能带来危险的。我们这里对这些问题进行深入系统的探讨的主要目的，就是要试图克服这种盲目性。 一、“克隆”及其伦理问题讨论的背景 克隆是英文clone的音译，简单地讲就是一种人工诱导的无性生殖方式，应用于人体被称为人类克隆（humancloning），有人依其目的不同将其分为两类，即医疗研究性克隆
软琼脂克隆形成实验步 骤完整版 集团标准化办公室：[VV986T-J682P28-JP266L8-68PNN]
注意：软琼脂克隆形成试验方法简单，适用于贴壁生长的细胞。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。试验成功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分散得好，不能有细胞团，接种密度不能过大。软琼脂培养法常用检测肿瘤细胞和转化细胞系。接种细胞的密度每平方厘米不超过35个，正常细胞在悬浮状态下不能增殖，不适用于软琼脂克隆形成试验。 1、配制100ml的1.2%Argrose和0.7%Argrose，Argrose用DNA电泳用BIOWESTREGULARArgroseG10 （4℃），溶剂用双蒸水（DDW），高压灭菌后，维持在42℃中不会凝固；配制500ml的2×1640和 0.005%的结晶紫。 2、实验前，将水浴锅放入超净台内，紫外照射，设定温度42℃。提前融化血清和双抗。 3、如已制好上下胶，则在微波炉中溶解1.2%Argrose下胶和0.7%Argrose上胶，降温后放入42℃水浴锅 中保持。 4、根据实验需要的量配制20%FBS+2×1640+2×PS（5种细胞配40ml），每种细胞设3个复孔。 5、铺下胶：按1:1比例使1.2%Argrose下胶和20%FBS+2×1640+2×PS混合，6孔盘每孔迅速加入1.5ml 混合液，轻轻混匀，室温静置待下胶凝固（加混合液时不能产生气泡）。对于一个6孔盘，配5ml上述培养液+5ml1.2%Argrose下胶于50ml离心管中（离心管要一直置于水浴锅中）。 6、细胞计数：取对数生长期细胞，用0.25%胰蛋白酶消化并轻轻吹打，使之成为单细胞，作活细胞计数， 用正常培养液调整细胞密度至40×104／ml以上，这样加的体积小于100ul，不会影响其他成分的稀释程度。每孔铺1万个细胞，准备4个孔的细胞数，即4×104。 7、铺上胶：按1:1比例混合0.7%Argrose上胶和20%FBS+2×1640+2×PS，每种细胞需先配2ml（20%FBS+2 ×1640+2×PS）+2ml0.7%Argrose上胶于离心管中混匀，放入42℃水浴锅中保持。再将细胞悬液加入上述混合液中，混匀后迅速加入6孔盘中，每孔1ml。待上层琼脂凝固后，置于5%CO ，37℃，培养2－3 2周。 8、间隔2天补加200ul10%FBS+1640+1×PS，以防过于干燥。 9、计数克隆：把平皿放置在倒置显微镜下（100×），在镜下随机选择10个视野，计数视野中大于50个 克隆数(﹥0.05mm的克隆)和所有克隆数，克隆形成率=大于50个克隆数\所有克隆数×100%。每孔加入1ml的0.005%结晶紫染色1h以上，镜下拍照。 10、数据处理：每个视野的面积是1mm2,6孔盘每孔的面积是9.6cm2,则一个孔中总的克隆数=平均克隆数× 960，如果要比较﹥0.05mm的克隆的绝对值，则可以利用“每孔﹥0.05mm的克隆数/每孔总细胞克隆数”，将分母取一组作为标准，做出此组与其他组的比值系数，再分别用此系数乘以各组﹥0.05mm的克隆的绝对值，就得到总细胞克隆数相同条件下的﹥0.05mm的克隆的绝对值，可进行比较。
注意：软琼脂克隆形成试验方法简单，适用于贴壁生长的细胞。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。试验成功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分散得好，不能有细胞团，接种密度不能过大。软琼脂培养法常用检测肿瘤细胞和转化细胞系。接种细胞的密度每平方厘米不超过35个，正常细胞在悬浮状态下不能增殖，不适用于软琼脂克隆形成试验。 1、配制100ml的1.2% Argrose和0.7%Argrose，Argrose用DNA电泳用BIOWEST REGULAR Argrose G10（4℃），溶剂用双蒸水（DDW），高压灭菌后，维持在42℃中不会凝固；配制500ml的2×1640和0.005%的结晶紫。 2、实验前，将水浴锅放入超净台内，紫外照射，设定温度42℃。提前融化血清和双抗。 3、如已制好上下胶，则在微波炉中溶解1.2%Argrose下胶和0.7% Argrose上胶，降温后 放入42℃水浴锅中保持。 4、根据实验需要的量配制20%FBS+2×1640+2×PS（5种细胞配40ml），每种细胞设3 个复孔。 5、铺下胶：按1:1比例使1.2%Argrose下胶和20%FBS+2×1640+2×PS混合，6孔盘每 孔迅速加入1.5ml混合液，轻轻混匀，室温静置待下胶凝固（加混合液时不能产生气泡）。对于一个6孔盘，配5ml上述培养液+5ml 1.2%Argrose下胶于50ml离心管中（离心管要一直置于水浴锅中）。 6、细胞计数：取对数生长期细胞，用0.25%胰蛋白酶消化并轻轻吹打，使之成为单细胞， 作活细胞计数，用正常培养液调整细胞密度至40×104／ml以上，这样加的体积小于100ul，不会影响其他成分的稀释程度。每孔铺1万个细胞，准备4个孔的细胞数，即4×104。 7、铺上胶：按1:1比例混合0.7% Argrose上胶和20%FBS+2×1640+2×PS，每种细胞需 先配2ml（20%FBS+2×1640+2×PS）+2ml0.7% Argrose上胶于离心管中混匀，放入42℃水浴锅中保持。再将细胞悬液加入上述混合液中，混匀后迅速加入6孔盘中，每孔1ml。待上层琼脂凝固后，置于5%CO2，37℃，培养2－3 周。 8、间隔2天补加200ul 10%FBS+1640+1×PS，以防过于干燥。 9、计数克隆：把平皿放置在倒置显微镜下（100×），在镜下随机选择10个视野，计数 视野中大于50个克隆数(﹥0.05mm的克隆)和所有克隆数，克隆形成率=大于50个克隆数\所有克隆数×100%。每孔加入1ml的0.005%结晶紫染色1h以上，镜下拍照。
2011年《现代分子生物学与基因工程》课程论文 克隆技术——对人类社会的影响 学校： 所在院、所、中心： 年级： 专业： 姓名： 学号： 指导老师： 日期：
目录 摘要 2 引言 2 1.克隆技术 2 2.“多利”羊特别之处 2 3.“多利”羊成功诞生的科学意义和应用价值 3 4.克隆技术是否应用于复制人类 3 5.人类不同的态度和看法 4 5.1赞成者的理由 4 5.2不赞成者的理由 5 6.应该如何正确看待和应用克隆技术克隆绵羊“多利”的问世 5 参考文献 6
克隆技术——对人类社会的影响 摘要： 本文分析克隆技术的科学意义和应用价值，研究科技进步对伦理学提出了哪些挑战，讨论如何正确看待和应用克隆技术。 关键词：克隆技术，克隆人，克隆的科学意义和应用价值，伦理挑战，正确看待和应用克隆技术 引言： 1997 年2 月23 日世界上第一头克隆羊“多利”(Dolly)诞生在英国苏格兰爱丁堡罗斯林研究所以来，有关克隆技术及克隆人的讨论一直沸沸扬扬，始终是人们关注的焦点。随着时间的推移，克隆技术不断成熟完善，继克隆羊之后克隆兔、克隆猪、克隆猴等不断获得成功。照这样的速度下去，过不了多久人类将很有可能“遭遇”克隆人。但是，是否应将克隆技术引向人类自身却引发了全球范围内的大讨论。 1. 克隆”技术 何为“克隆”技术，何为克隆克隆是英文“clone”一词的音译，简单讲就是一种人工诱导的无性繁殖方式，即人工操作动物的繁殖过程。这门生物技术叫克隆技术。清华大学生物科学与技术系教授郑昌学说，克隆通俗地讲就是“复制”、“拷贝”生物，而不是靠父母繁育。随着生物科学技术的发展，克隆的内涵也在不断地扩大，只要是从一个细胞得到两个以上的细胞、细胞群或生物体，就可以称为克隆。由此分化所得到的细胞、生物体就是克隆细胞、克隆体。 2.“多利”羊特别之处 “多利”羊特别之处何在多利早在本世纪六十年代末，英国科学家戈德就运用克隆技术成功培育出了青蛙，自１９８６年以来，科学家又成功培育出了兔子、猪、牛、羊、猴，都从未引起过轰动，而克隆羊“多利”却引起了巨大反响，这是为什么呢？无性繁殖的手段有多种。其中的细胞核移植，就是用机械的办法，把一个称之为“供体细胞”的细胞核移入另一个被称之为“受体”的、去除了细胞核的细胞质，生命科学导论论文中。核移植采用的供体细胞有两种，一种是胚胎细胞，一种是体细胞，但二者有本质的区别。胚胎细胞克隆属于异体复制，复制的是提供受精卵胚胎的动物的下一代，而体细胞克隆属于自体复制，“拷贝”的是提供体细胞的动物本身。严格的说，只有基因组全都来自于单亲的体细胞克隆，才是真正的无性繁殖。另外，从技术操作的难度考虑，前者难度小，后者难度大。因为胚胎细胞是有全能性的，而体细胞却失去了全能性，只有用特殊方法处理后才能恢复其全能性。“多利”是世界上第一只由成年动物的体细胞——
细胞xx形成实验 当单个细胞在体外增殖6代以上，其后代所组成的细胞群体，成为集落或克隆。 每个克隆含有50以上的细胞，大小在之间。集落形成率表示细胞的独立生存能力。各种理化因素可能导致细胞的克隆形成能力发生改变。通过一定的实验方法可以对细胞的克隆形成能力进行检测。 细胞接种存活率只表示接种细胞后贴壁的细胞数，但贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆。而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。由于细胞生物学性状不同，细胞克隆形成率差别也很大： 一般初代培养细胞克隆形成率弱，传代细胞系强；二倍体细胞克隆形成率弱，转化细胞系强；正常细胞克隆形成率弱，肿瘤细胞强。 实验方法： 平板集落形成实验、软xx集落形成实验 (a)平板集落形成实验：本法适用于贴壁生长的细胞和正常培养的细胞(b)软琼脂集落形成实验：本法适用于非锚着依赖性生长的细胞，如骨髓造血干细胞、肿瘤细胞株、转化细胞系。 平板xx形成实验基本步骤： 1、取对数生长期的各组细胞，分别用%胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞，并把细胞悬浮在10%胎牛血清的DMEM培养液中备用。 2、将细胞悬液作梯度倍数稀释，每组细胞分别以每皿50、100、200个细胞的梯度密度分别接种含10mL37℃预温培养液的皿中，并轻轻转动，使细胞分散均匀。 置37℃ 5% CO2及饱和湿度的细胞培养箱中培养2～3周。
3、经常观察，当培养皿中出现肉眼可见的克隆时，终止培养。弃去上清液，用PBS小心浸洗2次。加4%多聚甲醛固定细胞5mL固定15分钟。然后去固定液，加适量GIMSA应用染色液染10～30分钟，然后用流水缓慢洗去染色液，空气干燥。 4、将平皿倒置并叠加一张带网格的透明胶片，用肉眼直接计数克隆，或在显微镜（低倍镜）计数大于10个细胞的克隆数。最后计算克隆形成率。 克隆形成率=（克隆数/接种细胞数）×100% 平板克隆形成试验方法简单，适用于贴壁生长的细胞。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。试验成功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分散得好，不能有细胞团，接种密度不能过大。 平板克隆形成试验方法简单，适用于贴壁生长的细胞。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。试验成功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分散得好，不能有细胞团，接种密度不能过大。 软xx培养xx形成试验基本步骤： (1)取对数生长期细胞，用%胰蛋白酶消化并轻轻吹打，使之成为单细胞，作活细胞计数，用含20%胎牛血清的DMEM培养液调整细胞密度至1×106细胞/L。然后根据实验要求作梯度倍数稀释。 (2)用蒸馏水分别制备出%和%两个浓度的低溶点琼脂糖液，高压灭菌后，维持在40℃中不会凝固。 (3)按1:1比例使%的琼脂糖和2×DMEM培养基(含有2×抗生素和20%的小牛血清)混合后，取3mL混合液注入直径6cm平皿中(10cm平皿加7～10mL)，冷却凝固，可作底层琼脂置CO2温箱中备用。 (4)按1:1比例让%的琼脂糖和2×DMEM培养基在无菌试管中相混以后，再向管中加入的细胞悬液，充分混匀，注入铺有%琼脂糖底层平皿中，逐形成双琼脂层。 待上层琼脂凝固后，置入37℃ 5%CO2温箱中培养10～14天。
关于克隆人的一些看法 弊端（先看完，不懂得给我打电话。） 科学家在克隆技术研究时如果只着眼于技术上的可能性，而忽视或不考虑其价值正当性的话，那么克隆技术带给人类的将是弊大于利，甚至是一场灾难。 从道德价值的角度看待克隆人有以下几个方面：一是从社会伦理角度，克隆人是对人类发展的一种过强的干预，可能影响人种的自然构成和自然发展。二是从家庭伦理角度，会加剧家庭多元化倾向，瓦解正常的人伦秩序，改变人的亲系关系，丧失基本的归属感。三是从性伦理学角度，完全改变了人类自然的、基于性爱的生育方式，使人口的产生与性爱分离，破坏人类的感情。四是从生命伦理学角度，破坏了人拥有独特基因的权利，有可能导致人种的退化，还会使正常的生与死的观念发生动摇。 有的学者还从更广阔的视野批判性地反省了克隆技术有可能带来的负面后果，除了上述的道德层面以外，这种还表现在：一是生态层面，克隆技术导致的基因复制，会威胁基因多样性的保持，生物的演化将出现一个逆向的颠倒过程，即由复杂走向简单，这对生物的生存是极为不利的。二是文化层面，克隆人是对自然生殖的替代和否定，打破了生物演进的自律性，带有典型的反自然性质。与当今正在兴起的祟尚天人合一、回归自然的基本文化趋向相悖。三是哲学层面，通过克隆技术实现人的自我复制和自我再现之后，可能导致人的身心关系的紊乱。人的不可重复性和不可替代性的个性规定因大量复制而丧失了唯一性，丧失了自我及其个性特征的自然基础和生物学前提。 克隆人一直遭到全世界绝大多数人的反对原因首先，克隆人的身份难以认定，他们与被克隆者之间的关系无法纳入现有的伦理体系。其次，人类繁殖后代的过程不再需要两性共同参与，这将对现有的社会关系、家庭结构造成难以承受的巨大冲击。第三，克隆人技术可能会被滥用，成为恐怖分子的工具。第四，从生物多样性上来说，大量基因结构完全相同的克隆人，可能诱发新型疾病的广泛传播，这对人类的生存是不利的。第五，克隆人可能因自己的特殊身份而产生心理缺陷，形成新的社会问题。 在今年8月联合国大会上，美国总统布什呼吁全面禁止克隆活动。他说：“人的生命，不应为另一个人的利益，被创造或毁灭。” 按照生命伦理学的观点，科学技术要从长远利益出发，造福整个人类。它必须遵循“行善、不伤害、自主和公正”这四项国际公认的伦理原则。“多利”羊的克隆成功经过了200多次的失败，出现过畸形或夭折的羊。而克隆人更为复杂，无疑会遇到更多的失败，如果制造出不健康、畸形或短寿的人，将是对人权的一种侵犯。
我可怕的“克隆人” 妈妈催我上床睡觉了，我便上床进入了梦乡。 突然，我看见一个散发着银光的门，这时，一位穿着和巴拉拉小魔仙里面的魔仙一样的衣服的姐姐拉着我进了门。 我有点怕这位姐姐，颤抖着说：你……你是谁？为……什……么……带我来这里。 那位阿姨温柔地说：你好，欢迎来到克隆世界，我是克隆世界里的一名指引人类进来的。 什么！人类，莫非？这里不是地球？我害怕极了，说：你为什么要带我来这里，我要回家，呜呜呜，放我回家，我要回家，回家。 这位令我惧怕的姐姐说：你不用怕，我不会伤害你的！是女王陛下叫我领你来的！这下，我倒有点儿想看一看这位所谓的女王陛下了，好奇心勾引着我跟着魔仙姐姐去看女王陛下。 魔仙姐姐拉着我走进一间宽阔的房子，哎？那里有一个尊贵的座椅，在最中央，上面坐着一位貌美如花，衣之华丽的阿姨正在瞅我呢！女王说：你好呀，可爱的人类！我说：你们到底带我来这做什么，有话快说，有屁快放。 因为我现在正烦着要回家，她们把我带到这来，有点生气，所以素质问题就没那么好了。 女王说：小孩，不必生气，现在我带你去一个地方！说着不顾我同不同意，硬是拉我来到了一台机器前，说：小孩，你将会克隆一个
和你长得一模一样的人，然后你将不用上学，做错事不用遭到你父母的责骂了，克隆人将会替你承担一切，你可愿意克隆。 我想：不用上学，做错事不用挨骂，多好了！以后就可以睡懒觉喽！啦啦啦！我毫不犹豫地回答：我愿意。 女王说：恩，请你进入这台机器的内部！我走了进去，机器门关了，开始启动，起初我感觉有点冷，就抱紧全身，女王说：你若这般模样，克隆出来的人也会和你这般模样。 我一听连忙立正，后来真是越来越热，我真是受不了了！这是要把我给烤了是吧？我敲击着机器，拳脚踢打都弄不开这个机器，我气馁地坐着！这时，机器开了，我看了看我，啊？怎么会有一面镜子？不是镜子，是我的克隆人，真的一模一样啊！要不是女王在后面画了一个永远擦不掉的叉作为记号，保证可以以假乱真！克隆后，女王要我输入它的本性，我输入了，善良，勇敢，纯真，机智！可是女王却乘机把它改写了，狡猾，调皮，捣蛋，爱捉弄人。 我也是后来才得知的！我带着克隆人回到家，急忙把我自己藏起来了，便拿着冰箱里的零食躲在被窝里！吧唧吧唧地吃着。 克隆人回到家，趁我家里的人都不在，把碗摔碎了，电视遥控机扔了，妈妈的化妆盒被克隆人丢了。 爷爷好不容易种的花被它糟蹋了，它还把夹心饼干里的料换成牙膏，害爸爸吃了反胃。 我生气极了，想去教训它，可是它藏起来了，害我背了黑锅。
[对克隆技术的看法高中英语作文]对克隆技术的看法 克隆技术，从出现的时候就已经备受争议了。克隆技术的出现到底是好还是不好呢?下面是小编为你整理的对克隆技术的看法高中英语作文，希望你喜欢! 对克隆技术的看法高中英语作文篇1 Nowadays, the controversial issue of cloning has been in the limelight and has aroused wide concern in the public. It’s quite understandable that the views of this issue vary from person to person. Some people are in favour of cloning, who firmly believe that scientists can bring the extinct animals back to life by cloning. It’s indisputable that cloning is a great process to produce quantities of commercial plants as well as new species of plants.
However, the cloning of the sheep Dolly attracted public’s attention but arouse a storm of objections. For instance, if heaps and heaps of evil leaders like Hillary attempt to clone themselves, a disaster will break out in the world. In addition, the objectors insist that cloning has a huge impact on genetic diversity. As for me, I suggest that cloning plays an important role on improving our quality of life. Needless to say, that cloning is an effective access to cure serious illnesses that at present have no cure. What’s more, not only can cloning assist us to acquire unknown knowledge about the creature, but it also is a wonderful breakthrough. Thought now there are lots of questions about cloning, by no means should we give in to the unsolved problems. 如今，关于颇受争议的克隆问题已经明确地引起了大众广泛关注。而人们对于这个问题的看法也各不相同，这完全可以理解。 有些人很支持克隆，他们坚定地相信科学家们可以通过克隆技术将灭绝的动物重现天日。而且无需置疑的是克隆技术能帮助大量生产经济作物和新品种。
克隆技术弊大于利 1．生态层面,克隆技术导致的基因复制,会威胁基因多样性的保持,生物的演化将出现一个逆向的颠倒过程,即由复杂走向简单,这对生物的生存是极为不利的. 2．文化层面,克隆人是对自然生殖的替代和否定,打破了生物演进的自律性,带有典型的反自然性质.与当今正在兴起的崇尚天人合一、回归自然的基本文化趋向相悖. 3．哲学层面,通过克隆技术实现人的自我复制和自我再现之后,可能导致人的身心关系的紊乱.人的不可重复性和不可替代性的个性规定因大量复制而丧失了唯一性,丧失了自我及其个性特征的自然基础和生物学前提. 4．血缘生育构成了社会结构和社会关系.为什么不同的国家、不同的种族几乎都反对克隆人,原因就是这是另一种生育模式,现在单亲家庭子女教育问题备受关注,就是关注一个情感培育问题,人的成长是在两性繁殖、双亲抚育的状态下完成的,几千年来一直如此,克隆人的出现,社会该如何应对,克隆人与被克隆人的关系到底该是什么呢? 5．身份和社会权利难以分辨.假如有一天,突然有20个儿子来分你的财产,他们的指纹、基因都一样,该咋办?是不是要像汽车挂牌照一样在他们额头上刻上克隆人川A0001、克隆人川A0002之类的标记才能识别. 6．可能支持克隆人的人有一个观点：解决无法生育的问题.但一个没有生育能力的人克隆的下一代还会没有生育能力.
7.你自认为优秀,可克隆出的人除血型、相貌、指纹、基因和你一样外,其性格、行为可能完全不同,你能保证克隆人会和你一样优秀而不误入歧途吗? 8.在克隆人研究中,如果出现异常,有缺陷的克隆人（正常的生育也会有缺陷）不能像克隆的动物随意处理掉,这也是一个麻烦.因此在目前的环境下,不仅是观念、制度,包括整个社会结构都不知道怎么来接纳克隆人. 9. 根据信息克隆生物有早衰性,"多利"也是,因而已逝世. 10. 生命不再宝贵! 11. 克隆的坏处：对伦理学界来说,克隆人行为关涉到一个很严重的伦理问题,因为它侵犯了伦理学的基本原则,比如不伤害原则,自主原则,平等原则等等. 12在理论上，克隆技术还很不成熟；在实践中，克隆动物的成功率还很低，生出的部分个体表现出生理或免疫缺陷，而且动物的残废率相当高并伴有早衰现象等。此外，克隆技术（尤其是人胚胎方面的应用）对伦理道德的冲击和公众对词的强烈反应也限制了克隆技术的应用。但几年来克隆技术的发展表明，世界各科技大国都不甘落后，谁也没有放弃克隆技术研究。 13克隆将减少遗传变异，通过克隆产生的个体具有同样的遗传基因，同样的疾病敏感性，一种疾病就可以毁灭整个由克隆产生的群体。可以设想，如果一个国家的牛群都是同一个克隆产物，一种并不严重的病毒就可能毁灭全国的畜牧业。
细胞集落形成实验方法介绍 非整倍体无限细胞系和癌细胞株中，仍然存在不同细胞亚群，它们的功能和生长特点有些差异，其中有些亚群细胞对培养环境有较大的适应性和具有较强的独立生存能力，细胞集落率高。纯化细胞群来自一个共同的祖细胞，细胞遗传性状、生物学特性相似，利于实验研究。原代培养细胞和二倍体有限细胞系，细胞集落率很低。细胞集落化培养之前，应先测定细胞集落形成率，以了解细胞在极低密度条件下的生长能力。 集落抑制率=（1-（实验组集落形成率/对照组集落形成率））×100% （一）原理 细胞集落形成率单个细胞在体外增殖6代以上，其后代所组成的细胞群体，称为集落或克隆。每个克隆含有50个以上的细胞，大小在0.3-1.0mm 之间。集落形成率表示细胞独立生存能力。常用方法有平板集落形成试验、软琼脂集落形成试验。 （二）实验用品 1.材料：Hela细胞。 2.器材：（直径60mm ）培养皿、细胞记数板、烧杯、吸管、离心机、离心管、废液瓶、倒置显微镜、二氧化碳培养箱、超净工作台、水浴锅。 3.试剂：Giemsa染液、0.25%胰蛋白酶消化液、血清细胞培养液、安尔碘、琼脂。 （三）方法 1.平板克隆形成试验 本法适用于贴壁生长的细胞，包括培养的正常细胞和肿瘤细胞。 (1)对指数生长期细胞，采用常规消化传代方法，制成细胞悬液。 (2)细胞悬液反复吹打，使细胞充分分散，单个细胞百分率应在95%以上。细胞记数，并用培养基调节细胞浓度，待用。 (3)根据细胞增殖能力，将细胞悬液倍比稀释。一般按照每皿含50、100、200个细胞的浓度分别接种5ml细胞悬液到培养皿（直径60mm ）中，以十字方向轻轻晃动培养皿，使细胞分散均匀。 (4)培养皿置37℃、5%CO2中培养2~3周，中间根据培养液pH变化适时更换新鲜培养液。 (5)当培养皿中出现肉眼可见克隆时，终止培养，弃去培养液，PBS液小心浸洗2次，空气干燥。甲醇固定15分钟，弃甲醇后空气干燥。用Giemsa染液染色10分钟，流水缓慢洗去染液，空气干燥。 2.软琼脂集落形成试验
细胞克隆形成实验 This manuscript was revised by the office on December 22, 2012
细胞克隆形成实验 当单个细胞在体外增殖6代以上，其后代所组成的细胞群体，成为集落或克隆。每个克隆含有50以上的细胞，大小在0.3-1.0mm之间。集落形成率表示细胞的独立生存能力。各种理化因素可能导致细胞的克隆形成能力发生改变。通过一定的实验方法可以对细胞的克隆形成能力进行检测。 细胞接种存活率只表示接种细胞后贴壁的细胞数，但贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆。而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。由于细胞生物学性状不同，细胞克隆形成率差别也很大：一般初代培养细胞克隆形成率弱，传代细胞系强；二倍体细胞克隆形成率弱，转化细胞系强；正常细胞克隆形成率弱，肿瘤细胞强。 实验方法： 平板集落形成实验、软琼脂集落形成实验 (a)平板集落形成实验：本法适用于贴壁生长的细胞和正常培养的细胞 (b)软琼脂集落形成实验：本法适用于非锚着依赖性生长的细胞，如骨髓造血干细胞、肿瘤细胞株、转化细胞系。 平板克隆形成实验基本步骤：
1、取对数生长期的各组细胞，分别用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞，并把细胞悬浮在10%胎牛血清的DMEM培养液中备用。 2、将细胞悬液作梯度倍数稀释，每组细胞分别以每皿50、100、200个细胞的梯度密度分别接种含10mL 37℃预温培养液的皿中，并轻轻转动，使细胞分散均匀。置37℃ 5% CO2及饱和湿度的细胞培养箱中培养2～3周。 3、经常观察，当培养皿中出现肉眼可见的克隆时，终止培养。弃去上清液，用PBS小心浸洗2次。加4%多聚甲醛固定细胞5mL固定15分钟。然后去固定液，加适量GIMSA应用染色液染10～30分钟，然后用流水缓慢洗去染色液，空气干燥。 4、将平皿倒置并叠加一张带网格的透明胶片，用肉眼直接计数克隆，或在显微镜（低倍镜）计数大于10个细胞的克隆数。最后计算克隆形成率。 克隆形成率 =（克隆数/接种细胞数）×100% 平板克隆形成试验方法简单，适用于贴壁生长的细胞。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。试验成功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分散得好，不能有细胞团，接种密度不能过大。 平板克隆形成试验方法简单，适用于贴壁生长的细胞。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。试验成功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分散得好，不能有细胞团，接种密度不能过大。 软琼脂培养克隆形成试验基本步骤：
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《奇妙的克隆》教学设计 【教学目标】 1、培养学生严谨求实的科学态度和勇于创新的科学精神。 2、进一步了解说明顺序和说明方法。 3、引导学生养成搜集信息，筛选信息的学习习惯。 【教学重点】 培养学生严谨求实的科学态度和勇于创新的科学精神，进一步了解说明顺序和说明方法。 【教学难点】 培养学生严谨求实的科学态度和勇于创新的科学精神，引导学生养成搜集信息，筛选信息的学习习惯。 【教学方法】 阅读讨论探究。 【教学内容及过程】 第一课时 〖课前学习〗 1、阅读课文，借助工具书解决字词障碍。 2、查找克隆的相关资料，如文字资料、图片资料、实物资料。 3、思考：以克隆为例，谈谈对“科学是一把双刃剑”的理解。 〖课文学习〗 一、课文导入 1、导入： 古希腊有位哲学家曾经说过“世上不可能有两片完全相同的叶子”，但是，现在情况却有了变化，有一种新兴生物技术“克隆”，或许可以做到这一点。那么克隆是什么呢?它奇妙在哪里呢?今天，就让我们一起走近──“奇妙的克隆”。
2、展示查找的资料。 自然界中哪些动、植物先天就具有克隆的本领? (出示实物、图片：秋海棠落叶生根、富贵竹插枝即活、土豆、地瓜发芽生长、各种水果、蔬菜、稻麦的嫁接、水螅除夏初和秋末外通常进行无性生殖即身体长出芽体等) 二、整体感知 1、检查预习： 请学生快速自读课文，概括各部分主要内容，并出示问题，供小组讨论。 问题： ⑴ 课文使用了四个小标题，有什么作用? ⑵ “克隆”的突出特点是什么? ⑶ 第二小节写了许多实验，为什么要这样安排材料? ⑷ “多利”的诞生有什么重大的意义和影响? ⑸ 克隆技术能够给人类带来哪些益处与弊处? 明确： ⑴ 课文使用四个小标题，使全文内容层次分明，条理清晰。先写克隆的含义，接着写克 隆实验，再写克隆的发展，最后写克隆对人类的造福和对克隆的思考。 ⑵ 理解“克隆”的关键是：来自一个祖先，无性繁殖。 ⑶ 作者没有用时间顺序来介绍“克隆”实验，而是用两条线索来组织材料：一条是以中 外科学实验为线索，这样写突出了中国科学家在克隆实验方面的研究成果和贡献;一条是 以实验对象即由鱼类、两栖类到哺乳类为线索来安排材料，这样写便于认清克隆技术发展的脉络。 ⑷ 多利”的诞生标志着克隆研究取得新的进展和重大突破，而且这个结果证明：动物体 中执行特殊功能，具有特定形态的所谓高度分化的细胞与受精卵一样具有发育成完整个体的潜在能力。也就是说，动物细胞与植物细胞一样，也具有全能性。 ⑸ 课文从三方面来写克隆技术造福于人类：第一，克隆可以有效地繁殖具有“高附加值 的牲畜”;第二，克隆可以用来挽救珍稀动物;第三，克隆对于人类疾病姆乐巍。 三、内容研读
细胞克隆形成实验 当单个细胞在体外增殖6 代以上，其后代所组成的细胞群体，成为集落或克隆。每个克隆含有50 以上的细胞，大小在0.3-1.0mm 之间。集落形成率表示细胞的独立生存能力。各种理化因素可能导致细胞的克隆形成能力发生改变。通过一定的实验方法可以对细胞的克隆形成能力进行检测。 细胞接种存活率只表示接种细胞后贴壁的细胞数，但贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆。而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。由于细胞生物学性状不同，细胞克隆形成率差别也很大： 一般初代培养细胞克隆形成率弱，传代细胞系强；二倍体细胞克隆形成率弱，转化细胞系强；正常细胞克隆形成率弱，肿瘤细胞强。 实验方法： 平板集落形成实验、软琼脂集落形成实验 (a) 平板集落形成实验：本法适用于贴壁生长的细胞和正常培养的细胞 (b) 软琼脂集落形成实验：本法适用于非锚着依赖性生长的细胞，如骨髓造血干细胞、肿瘤细胞株、转化细胞系。 平板克隆形成实验基本步骤： 1、取对数生长期的各组细胞，分别用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞，并把细胞悬浮在10%胎牛血清的DME培养液中备用。 2、将细胞悬液作梯度倍数稀释，每组细胞分别以每皿50、100、200个细胞的梯度密度分别接种含10mL37°C预温培养液的皿中，并轻轻转动，使细胞分散均匀。置37C 5% CO2及饱和湿度的细胞培养箱中培养2?3周。 3、经常观察，当培养皿中出现肉眼可见的克隆时，终止培养。弃去上清液，用 PBS小心浸洗2次。加4%多聚甲醛固定细胞5mL固定15分钟。然后去固定液，加适量GIMSA应用染色液染10?30分钟，然后用流水缓慢洗去染色液，空气干燥。 4、将平皿倒置并叠加一张带网格的透明胶片，用肉眼直接计数克隆，或在显微镜(低倍镜)计数大于10个细胞的克隆数。最后计算克隆形成率。 克隆形成率=(克隆数/接种细胞数)X100% 平板克隆形成试验方法简单，适用于贴壁生长的细胞。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。试验成功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分散得好，不能有细胞团，接种密度不能过大。
自然科学概论期末论文 题目：关于克隆技术利弊的思考 学院马克思主义学院 专业思想政治教育 年级2009级 学号222009********* 姓名蓝安 二○一二年十二月
关于克隆技术利弊的思考 蓝安 西南大学马克思主义学院，重庆，400715 摘要：克隆这一重要生物技术, 正越来越受到人们的关注。以它为中心所产生的截然相反的议论, 纷纷不止。对它的认识, 无论就技术革命而言, 还是就人类伦理、道德等领域来说, 都有着极为重要的意义。不同的人对于克隆技术都有着不同的看法，克隆技术的利与弊都明显的存在，克隆技术的好与坏，不在于技术的本身，而在于今后能否正确的应用这一技术。关键词：克隆；利弊；伦理；应用；思考 一、关于克隆技术 克隆技术，是由同一个祖先细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系，该细胞系中每个细胞的基因彼此相同。克隆通常是一种人工诱导的无性生殖方式或者自然的无性生殖方式（如植物）。一个克隆就是一个多细胞生物在遗传上与另外一个生物完全一样。克隆可以是自然克隆，例如由无性生殖或是由于偶然的原因产生两个遗传上完全一样的个体（就像同卵双生一样）。但是我们通常所说的克隆是指通过有意识的设计来产生的完全一样的复制。 1996年7月5日，对英国爱丁堡罗斯林研究所由伊恩·维尔穆特领导的科学研究小组全体成员来讲，是一个令人激动的日子。对全世界来说，也是值得庆贺的一天。因为在这一天，一只妊娠了148天的震惊世界的小羊来到了这个世界。这只羊的身世与众不同，它既无父亲，又无母亲，它是科学家们用“克隆技术”复制出来的一只小绵羊。经过几个月的精心呵护，这只身世不凡的小绵羊茁壮成长，并获得了一个动听的名字——多莉。多莉的出现，在生物技术史上具有重大的意义。因为多莉是用成年羊体细胞克隆出的一只活产羊，它的出生给克隆技术研究带来了重大突破，它突破了以往只能用胚胎细胞进行动物克隆的技术难关，首次实现了用体细胞进行动物克隆的目标，实现了更高意义上的动物复制。二、克隆技术的利弊 （一）克隆技术给人类带来的利 克隆技术有很多有嗲，且应用广泛。克隆技术与遗传育种：在农工业方面人