微生物的分类鉴定技术.

4.观察完毕镜头擦拭干净放回原处
实训材料与仪器： 普通光学显微镜、细菌标本片、香柏油、二甲苯、擦镜纸、吸水纸等
实践操作 普通光学显微镜的使用
显微镜的安置 光源调节
确定观察部位 浸油观察
显微镜使用后处理

• 一手握镜臂，一手托 镜座，保持镜体直立。 放置水平桌面上。
• 坐姿端正，两眼同时 睁开操作，必要时左 眼观察，右眼绘图或 记录。
1674年，荷兰布商列文·虎克(Antonie van Leeuwenhoek,1632～1723)（上图）为了检查布 的质量，亲自磨制透镜，装配了高倍显微镜（300 倍左右）（下图），并观察到了血细胞、池塘水 滴中的原生动物、人类和哺乳类动物的精子，这 是人类第一次观察到完整的活细胞。列文·虎克把 他的观察结果写信报告给了英国皇家学会，得到
• 由于空气与玻片的密度不同，使光 线受到曲折，发生散射，降低了视 野的照明度。若中间的介质是一层 油（其折射率与玻片的相近），则 几乎不发生折射，增加了视野的进 光量，从而使物象更加清晰。
物镜与油镜系统镜光线通路
显微镜使用中的注意事项
字形叉开置于载物台上（或将载物台下降到最低点），最 后将显微镜送回箱内。
问题探究
1、普通光学显微镜的构造及原理
目镜 镜筒
物镜转换器 接物镜
弹簧夹 载物台 聚光器 虹彩光圈
光源
标本移动螺旋
镜座 电源开关
镜臂 微调螺旋 粗调螺旋
光源滑动变阻器
普通光学显微镜的成像原理
光学显微镜是利用光学原理，把人眼所不能分辨的微小物体放大成像，以 供人们提取微细结构信息的光学仪器。
观察部位的确定
将标本片放在载 物台上，使标本位于 物镜下方。先用低倍 镜观察，转动粗调节 螺旋，缓慢提升镜筒 （或下降载物台）使 物镜与标本距离拉大， 当出现物像时，改用 细调节螺旋，上下微 微移动，直至物像清 晰后，用推进器找到 理想的观察部位。
浸油观察的方法
找到观察部位后，将镜筒升起， 在观察部位加一滴香柏油，转 换油镜，从侧面注视，用粗调 节螺旋缓慢提升载物台，使油 镜头浸入香柏油中，直到几乎 与标本片接触为止，然后从目 镜观察视野，当视野见有模糊 的物像时，改用细调节螺旋上 下微微移动，直到物像清晰为 止，再用推进器进一步观察标 本。如果镜头离开香柏油时， 应重新浸油，重复上述操作过 程。
显微镜使用后处理
• 油镜使用完毕，先用擦镜纸擦去镜头上的香柏油，再取一 张擦镜纸滴上少量二甲苯把镜头上油擦净，最后再用一张 干擦镜纸将镜头上残留的二甲苯擦净。
• 下降聚光器，取下载玻片。 • 用擦镜布（绸布）将显微镜各部位擦净，除去灰尘、油污、
水汽，以免生霉长锈。 • 使显微镜各部位恢复回原位，转动转换器，使物镜呈“八”
微生物的发现史
世界上第一台显微镜是荷兰眼镜商詹森 （Hans Janssen）（左图）在1604年发明的。 （右图）
1665年，英国的物理学家罗伯特·胡克 （Robert Hooke, 1635～1703）（左图）用自 己设计并制造的显微镜（右下图）观察栎树软 木塞切片时发现其中有许多小室，状如蜂窝， 称为“cella”，这是人类第一次发现细胞，不 过，胡克发现的只是死的细胞壁。胡克的发现 对细胞学的建立和发展具有开创性的意义，其 后，生物学家就用“cell”一词来描述生物体的 基本结构。
情境一 微生物的分类鉴定技术
目录
项目一：普通光学显微镜的操作技术 项目二：染色与细菌的细胞形态观察 项目三：酵母和霉菌等细胞形态观察 项目四：常见微生物群体形态观察 项目五：微生物鉴定用常规生化反应试验
项目一 普通光学显微镜的操作技术
显微镜是我们研究微生物重要的也是最基本的 工具。我们只有借助于显微镜才能看得清这些微小 的生物，观察它们的形态结构才能对它们的种类做 个基本的判断。
法国微生物学家、化学家巴斯德 （Louis Pasteur，1822-1895） 是近代微生物学的奠基人。
柯赫——细菌学的奠基人
• 提出了柯赫法则 • 建立固体培养基分离纯化
微生物技术 • 染色观察和显微摄影技术
• 从列文虎克第一次看到细菌以来，300多年 来微生物学从孕育、诞生到发展，以至于 今天成为生命科学中的一个不可忽略的重 要分支。在这漫长的时间中，一批杰出的 科学家在微生物学的各方面作出的贡献， 他们是人类认识、利用和驾御微生物伟大 成就中的明星。
英国皇家学会的充分肯定，并很快成为世界知名 人士。列文·虎克的一生致力于在微观世界中探索， 发表论文402篇，其中《列文·虎克发现的自然界 的秘密》是人类关于微生物研究的最早专著。
• 否定了自然发生说 • 证实发酵由微生物引起（酒精发酵） • 巴氏灭菌法 • 免疫学---提出了预防接种措施（制
备了狂犬疫苗）
微生物学发展
形态学发展阶段 生理学发展阶段 近代微生物学阶段
项目一 普通光学显微镜操作技术
项目实训任务单 实践操作 问题探究 知识拓展
项目 名称 显微镜操作技术
实训对象 学时
高职（五年）/高专 (三年)
2学时
实
知识目标：1.了解显微镜构造、性能及原理；
训
能力目标：1.掌握显微镜的基本使用基础和保养方法
目
2.掌握显微镜油镜的观察
标
情感目标：1.通过自主操作，提高学生发现问题,解决
问题的能力
2.养成良好的实验习惯进而形成良好的职业素养
学习内容：
1.显微镜的构造及原理 2.观察前准备 3.显微观察 4.油镜观察 5.显微镜使用后处理 重点与难点:显微观察步骤
具体要求：
1. 取出显微镜时应一手握住镜臂一 手拖住底座，使显微镜保持直立、 平稳。放置在水平桌面. 2.初学者遵循从低倍镜到高倍镜再 到油镜的观察过程. 3.选择合适观察部位在油镜下得到 较清晰图像
表面为曲面的玻璃或其他透明材料制成的光学透镜可以使物体放大成 像，光学显微镜就是利用这一原理把微小物体放大到人眼足以观察的尺寸。 而近代光学显微镜就是采用物镜和目镜两组透镜放大而完成的。显微镜的总 放大倍率就是物镜放大倍率和目镜放大倍率的乘积。B’ A’
两次放大后成倒立的虚像
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A’
• 而油镜使用的原理，是 为了减少光线通过玻片 与镜头之间的空气时的 损失。