结核病防治试验室痰检工作

痰涂片镜检服务必需在健全的细菌学 实验室网络中才能实现
国家结核病规划（NTP）与 结核病细菌学实验室网络
3 结核病高负担国家NTP主要通过实施 现代结核病控制策略（DOTS）来实现
4 痰涂片镜检是结核病细菌学实验室服 务中最重要的内容之一。痰涂片镜检发 现传染源是DOTS策略的重要组成部分
检查对象
染色特性
结核菌的形态和结构
4 一旦着色，不易被盐酸酒精脱色，而其他细菌均被 脱色，把不被盐酸酒精脱色的细菌称为抗酸菌，这种方 法称为抗酸染色法
结核菌的形态和结构
萋尼氏染色镜下形态
痰涂片操作程序
常见标本的收集及处理
【胸腹水】 【脑脊液】 【尿标本】 【脓液、病灶组织】 【痰标本，肺部深咳的痰】
痰涂片操作程序
第一讲 痰涂片镜检
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➢痰检工作的目的和意义 ➢国家结核病规划（NTP）
与结核病细菌学实验室网络 ➢检查对象 ➢结➢电核子菌显的微镜形下态的和结核结分构枝杆菌
➢染色特性 ➢萋尼氏染色镜下形态
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➢ 痰涂片操作程序
➢常见标本的收集及处理 ➢痰标本的采集－容器 ➢痰标本的采集 ➢留取标本 ➢痰标本的运送 ➢标本的性状 ➢直接涂片的步骤 ➢染色的步骤
螺旋盖痰瓶 可密封的塑料盒 可密封的蜡纸盒
痰涂片操作程序
痰标本的采集－容器
痰盒图例
痰涂片操作程序
痰盒图例
痰涂片操作程序
痰标本的采集
痰涂片操作程序
痰标本的采集
➢通用螺旋盖
痰瓶，或可
密封塑料盒 蜡纸盒收集 痰标本
➢痰容器应标明病人姓 名、编号（检查项目 和容器序号1、2、3
（1＝当日即时痰，2
＝夜间痰，3＝次日
染色特性
结核菌的形态和结构
1 结核杆菌用革兰氏染色，着色较差但呈兰色， 列为G＋菌
2 结核杆菌用普通的染色方法不易着色，在染液 中加入石炭酸后才可着色
染色特性
结核菌的形态和结构
3 抗酸染色时，因结核杆菌菌体含有大量脂质，其脂质 的含量占分枝杆菌之首，占菌体干重的40%，因脂质的 含量大，所以不易着色，但经过加热或者提高石炭酸的 浓度、延长染色时间等处理以后才能着色
痰涂片操作程序
痰标本的运送
➢ 难以获得合格标本时，也应进行细菌学检查，但 应注明标本性状，以供分析结果时参考
➢ 需送上一级实验室检查的痰标本应置4℃冰箱保存， 外送前认真核对检验单与痰瓶上标注，放专用的冰 盒内运送，或用纸袋、塑料袋封装扎牢后顺序放入 包装盒，盒外注明请勿倒置标志
标本的性状
痰涂片操作程序
检查对象
疗效评价
治疗中或复诊随访病人按期每次送检两份 痰(当 日即时痰、当日或次日晨痰）
初治涂阳患者在疗程满2、5、6月时
复治涂阳患者在疗程满2、5、8月时
结核菌的形态和结构
结核分枝杆菌
光学显微镜下为细长 稍弯曲，两端钝圆的 杆菌 ，菌体长度多为 1.5~3.5um
宽度为0.3～0.6um，生 长发育期间形成分枝
晨痰）
➢如：张三，涂片 58—1，58—2 58--3
痰涂片操作程序
留取标本
➢ 留痰时应嘱咐病人尽量深咳，留取痰量3~5毫升 ➢ 干酪痰、血痰、黏液痰为合格的标本唾液属不合
格痰标本
留取标本
痰瓶上标明病人姓名，初诊门 诊序号（或随访病人登记号）
痰标本留取后，痰盒切勿倒置、 严防痰液外溢，应立即送检
进行细菌学检查时，应在登记 本和检验报告单上注明标本性 状
常见标本的收集及处理
【胸腹水的采取】 ➢ 于试管中加20%的枸橼酸钠3—5滴，或10%的草酸钾
5—6滴，可防止15—20ml 胸腹水凝固。无菌采取胸腹 水以后应立即送检。可采取离心集菌或漂浮集菌法检查
痰涂片操作程序
常见标本的收集及处理
【纤维支气管镜刷检物】 ➢ 可将毛刷直接进行抗酸染色,也可将刷检标本洗脱于装有
的尿液，放冰箱或阴凉处，静置，去上清，留沉淀部分 50—60ml送检，取此沉淀液，经3000转，离心30分钟， 取沉淀部分2ml直接涂片，染色检查
痰涂片操作程序
常见标本的收集及处理
➢ 脓液直接涂片染色镜检 ➢ 病灶组织或干酪样组织需充分研碎后再涂片检查
痰涂片操作程序
痰标本的采集－容器
当前,贵州省疾病预防控制机构结核病实验室进行痰检 工作的耗材由项目统一提供：
痰检工作的目的和意义
1 在结核病控制工作中痰结核菌涂片镜 检对于发现传染源、确定诊断和化疗方 案、考核疗效、评价防治效果具有重要 2意义
是国家结核病控制规划(NTP) 的重 要组成部分，在现代结核病控制工作中 起着不可缺少的重要作用
国家结核病规划（NTP）与 结核病细菌学实验室网络
1 结核病细菌学实验室通过日常、有效 的细菌学（病原学）诊断，发现传染源、 决定化疗方案和评价治疗效果为实现NTP 的2 重要目标服务
无菌生理盐水的试管中,再涂片检查
痰涂片操作程序
常见标本的收集及处理
【脑脊液的采取】 ➢ 无菌手术取得脑脊液以后，3000转离心30分钟，取沉
淀物涂片染色检查 ➢ 结核性的脑脊液放在冰箱中4℃过夜以后，会在液面形
成一个倒漏斗状的薄膜，取此薄膜涂片染色镜检
痰涂片操作程序
常见标本的收集及处理
【尿标本的采取】 ➢ 通常留取清晨第一次全尿或中后段夜尿,也可留取24小时
确定诊断
凡因结核病症状求诊及转诊的可疑肺结核患 者，均应进行痰直接涂片检查
持续咳嗽 咳痰超过
3发热或胸 痛超过2周
胸部X线异常
检查对象
➢确定诊断的涂片检查应采集3个合格的痰 标本
➢就诊当时在门诊留一份“即时痰”标本， 同时给患者2个痰盒，嘱患者留取“夜间 痰”和“晨痰”，于次日交验
经萋尔-尼尔逊染色后 在显微镜内蓝色背景 下呈红色杆状
结核菌的形态和结构
电子显微镜下的结核分枝杆菌
细胞壁
细胞膜
细胞质
结核分枝 杆菌
核物质
结核菌的形态和结构
电子显微镜下的结核分枝杆菌
Gram-positive S. aureus
Gram-negative E. coli
Acid fast M. tuberculosis
外层是 口 腔黏液
核心是肺 部坏死组
织
中间层是支 气管分泌物
➢ 合格的痰标本应是患者深呼吸后，由肺部 深处咳出的分泌物
痰涂片操作程序
标本的性状
【干酪痰】 标本外观以黄色(或奶酪色)、脓样、团块状的肺部
分泌物为主，粘度较粘液痰低，制片时较易涂抹 涂片染色后镜检，可发现大量脓性炎症细胞、肺上