抗酸染色操作程序
【检验原理】
抗酸染色可将细菌分为两大类，即抗酸性细菌和非抗酸性细菌，因日常大多数病原菌为非抗酸性细菌，所以抗酸染色不作为临床上常规的细菌检测项目，只针对结核病等具有抗酸性细菌标本的染色。
【主要组成成分】
1.石碳酸复红溶液
2.脱色剂（3%盐酸酒精溶液）
3.复染液（吕氏美兰溶液）
【样本要求】
1.直接用于痰标本时，可以适当增加标本涂片的厚度，以提高检出率；
2.直接用细菌染色，要注意防护，以防生物感染。
【检验方法】
1.涂片经火焰固定，加1液徐徐加热至有蒸汽出现，切不可沸腾。染5分钟（若
染色奴卡氏菌需要更长时间），水洗。
2.加第2液不时摇动玻片至无红色脱落为止，水洗；
3.加3液，染0.5-1分钟，水洗。
4.干后油镜镜检。
【结果判断】
分支杆菌在暗背景中呈红色，背景为蓝色。
镜检结果分级报告
抗酸杆菌阴性（-）：连续观察300个不同视野，未发现抗酸杆菌
抗酸杆菌阳性（报告抗酸杆菌菌数）：1~8条/300视野
抗酸杆菌阳性（1+）：3~9条/100视野，连续观察300个视野
抗酸杆菌阳性（2+）：1~9条/10视野，连续观察100个视野
抗酸杆菌阳性（3+）：1~9条/每视野
抗酸杆菌阳性（4+）：≥10条/每视野
【注意事项】
1、严格掌握脱色时间，要脱色充分，脱色时间过短易使红色的石炭酸复红染料
残留显红色而造成假阳性。
2、在染片过程中，加1液后一定要酒精灯徐徐加热至有蒸汽出现，切不可沸腾，
这样才能使细菌充分着色。
3、石碳酸对皮肤、粘膜有强烈的刺激性和腐蚀性，使用时要注意安全，如果不
慎沾到皮肤上，立即用水或酒精冲洗。
4、涂片染色阳性只能说明抗酸杆菌的存在，不能区分是结核菌还是非结核分支
杆菌。
