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微生物学试验沈萍等高教出版社
微生物学试验沈萍等高教出版社
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(3)染色:滴加石炭酸复红,覆盖整个涂片标本区,放置20~30 秒,使细胞着色。
(4)水洗:染色时间到,用细小的水流慢慢冲洗去载片上多 余的染色液;注意:避免水流直接冲在标本区。
(5)干燥:将洗过的涂片标本晾干,或用吸水纸吸去多余水分, 然后晾干或微热烘干。
(6)镜检:将干燥后的标本置于显微镜下观察。细菌、放线菌用 油镜镜检。注意:务必完全干燥后再进行油镜镜检。
4、其它类型的显微镜:
①暗视野显微镜 ②相差显微镜 ③荧光显微镜 ④电子显微镜;
(二)单染色法
1、定义:仅使用一种染色剂使微生物着色的染色方法,只能识别 微生物细胞的形状和大小。
2、操作步骤: (1)涂片:取少量无菌水滴在干净载片上,用接种环无菌操作取 少量菌种(四联球菌)轻轻混入水中,将其铺成薄层。 (2)固定:自然干燥后,进行热固定:把涂有细菌的一面向上, 小心通过酒精等火焰烘烤3~4次。 固定的目的: ①杀死细胞,固定细胞结构; ②使菌体牢固附着在玻片上,防止标本被水冲洗掉; ③改变染色剂对细胞的通透性,增强染色效果。
实验一、显微镜的使用与单染色法
一、实验目的
1、熟练掌握显微镜的结构及使用方法 2、熟练掌握细菌涂片的制作及单染色法
二、实验材料
1、电光源双目显微镜 2、培养24小时的四联球菌斜面
D
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2N A 2nsin( / 2)
三、试验内容
(一)显微镜的使用
1、普通光学显微镜的构造 (1)机械装置:
实验内容
实验一、显微镜的使用与单染色法 实验二、革兰氏染色与荚膜染色 实验三、放线菌形态观察与芽孢染色 实验四、霉菌形态观察与各大类微生物菌落特征 实验五、酵母菌形态观察、显微计数与显微测量技术 实验六、培养基的制备 实验七、菌种分离纯化技术与平板菌落计数 实验八、水质微生物学检测 实验九、消毒与灭菌技术
镜座、镜臂、镜台、镜筒、物镜转换器、调焦装置等 (2)光学系统:
目镜、物镜、光源等 2、显微镜的工作原理
① N ·A = nsin(α /2)
② D 2N A 2nsin
2
3、油镜的使用及维护
(1)反向调节 (2)镜头维护:
① 4~6层镜头纸,单向擦拭; ② 4~6层镜头纸,沾取二甲苯,单向擦拭; ③ 4~6层洁净镜头纸,单向擦拭;
微生物学实验课的目的在于加强课堂讲授的基本理论与基本知 识的理解,掌握研究微生物最基本的操作技能和实验手段,培 养分析问题和从事实践应用的能力。为上好实验课,必须做到: 1. 安全第一!注意水、电、门、窗安全;如有意外,及时报告 2. 严守纪律!严禁迟到、喧哗,吸烟、接打电话,做与实验无 关的事情,不要随意走动。 3. 认真完成实验。实验前预习,明确实验目的、原理、方法; 实验操作要细心谨慎,认真进行观察和记录,培养严谨求实的 科学态度;认证完成实验报告。课上认真听讲,课后积极讨论 4. 爱惜仪器,保持秩序。每次实验之后必须清理好实验台,待 实验老师检查之后才能离开。
四、实验报告
1、油镜的工作原理? 2、细菌涂片染色前固定的目的? 3、绘图表示所观察到的菌体形态。
要求:绘制圆形视野图,每张试验报告 纸上不多于2份视野图;标注菌体名称, 放大倍数,染色剂等信息。
实验考核办法:
1、平时成绩占70%,期末卷面成绩占30%。 2、每次实验课预习报告占30分,实验操作占50分,结果
与讨论(实验报告)占20分;∑实验得分/X,为平时成 绩。 3、出现安全责任事故,实验课成绩记为不及格;无故缺课 一次,本次实验为零分;迟到或早退一次,扣20分;逃 避值日或实验后未整理实验台,扣20分;喧哗、接听手 机、随意走动,扣10分。
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