乳酸菌降胆固醇体外筛选的培养基研究_王晓君
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乳酸菌体外和体内降解胆固醇的机理及其应用页数:8
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传统乳制品中降胆固醇作用乳酸菌的分离研究页数:2
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乳酸菌降胆固醇作用研究进展页数:3
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乳酸菌发酵食品降低人体血清胆固醇含量分析
现代食品XIANDAISHIPIN/乳酸菌发酵食品降低人体血清胆固醇含量分析Lactic acid bacteria fermented foods to reduce human serum cholesterol content analysis◎汪文忠（浙江省食品工业协会，浙江杭州310004）Ｗang Wenzhong（Zhejiang food industry association，hangzhou 310004，China ）摘要：有人对乳酸菌在食品基质中的降胆固醇作用做了研究，发现在既没有额外加入游离胆固醇也没有添加胆盐等物质的奶油中，大部分菌种也能达到40%以上的胆固醇吸收率。
因此，人们对于乳酸菌降低胆固醇的机理进行了广泛的研究。
关键词：乳酸菌；发酵食品；胆固醇含量；微生物降解；益生乳酸菌食品Abstract：Someone cholesterol-lowering effect of lactic acid bacteria in food matrix in the study,found that in no additional free cholesterol no add the bile salts and other substances in cream,most of the strains can reach more than 40%of the cholesterol absorption.As a result,people for extensively studied the mechanism of lactic acid bacteria to lower cholesterol.Key words：Lactic acid bacteria;Fermented foods;Cholesterol levels;Microbial degradation ；Live lactic acid bacteria in food中图分类号：TS26目前，在利用微生物降胆固醇领域科学工作者已做了很多有价值的研究，许多研究表明乳酸菌发酵的食品可以降低人体的血清胆固醇的含量。
高效降解胆固醇乳酸菌的选育及其应用效果研究
，
H Z Q F 16 0 全 温
-
降解胆 固 醇 乳酸菌 的筛 选
乳 酸 菌 应 用 到 高胆 固 醇 食 品 ( 鸡 蛋 ) 中
观 察 降解 效 果
。
天 津 天 宇 实验 仪 器 有 限 公
，
将 分 离 纯 化 出 的 乳 酸 茵 菌 株 分 别接 种 于 已 灭 菌 的 改 良培 养 基 中 干
力蒸 汽 灭 菌
；
0
，
20
～
3 0 m in 湿 热 灭 菌 )
～
共 沉 淀 可 加 速 肝 脏 内胆 固 醇 转 化 为 胆
中 于
，
3 7 ℃ 恒温 培 养 3 6
。
48h
，
选择 已
酸 的速度
含量
。
，
从 而 降 低 血 液 中胆 固 醇 的
，
器
，
上 海 华线 医 用 核 子 仪器 有 限公 司
一
凝试管
维普资讯
L 孑L 孚
口
^
,
IZl IZ l
／1 工 J 4 上
“
高 效 降解 胆 固 醇 乳 酸 茵 的
选育及 其应用效果研究
张 宏立
邢 春艳 王 淑 娟
天 津 完 达 LLI ~L 品 有 限 公 司 随着 生 活 水 平 的提 高
入 过量 带来 的高 脂 血 症
。
至 10 g
，
于 其 中添 加 适 量 的 胆 固 醇
．
使
2
实验方法
培养基 灭 菌
：
越 受 到 关注
目 前 脱 除食 品
：
中胆 固 醇
化 学 法和
胆 固 醇含 量 达 到 0 4
H Z Q F 16 0 全 温
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降解胆 固 醇 乳酸菌 的筛 选
乳 酸 菌 应 用 到 高胆 固 醇 食 品 ( 鸡 蛋 ) 中
观 察 降解 效 果
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，
将 分 离 纯 化 出 的 乳 酸 茵 菌 株 分 别接 种 于 已 灭 菌 的 改 良培 养 基 中 干
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高 效 降解 胆 固 醇 乳 酸 茵 的
选育及 其应用效果研究
张 宏立
邢 春艳 王 淑 娟
天 津 完 达 LLI ~L 品 有 限 公 司 随着 生 活 水 平 的提 高
入 过量 带来 的高 脂 血 症
。
至 10 g
，
于 其 中添 加 适 量 的 胆 固 醇
．
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2
实验方法
培养基 灭 菌
：
越 受 到 关注
目 前 脱 除食 品
：
中胆 固 醇
化 学 法和
胆 固 醇含 量 达 到 0 4
一株降胆固醇乳酸菌的筛选及其在模拟消化环境活性的研究
收稿 日期 ：２０１７—０６—１７ 基金项 目：黑 龙江省杰 出青年基金项 目０Ｃ２０１４１５）；黑龙 江省院所创新
能 力提 升专项计 划项 目（ＹＣ１３Ｄ００５）；东北农业 大学 学术骨 干 （１５ＸＧ２６）。 作者简介 ：范颖 （１９９２－），女 ，硕 士研 究生 ，研究方 向为食 品科 学。 通 讯作者 ：姜毓君
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ ＴＤ １０９ ｗｈｉｃｈ ｈａｓ ｒｅｌａｔｉｖｅｌｙ ｓｕｐｅｒ ｉｏｒ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ—ｌｏｗｅｒ ｉｎｇ ｅｆｅｃｔ ｗａｓ ｓｃｒｅｅｎｅｄ ｆｒｏｍ ２５ ｃｔｉｃ ａｃｉｄ ｂａｃｔｅｒｉａ． Ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｔｈｅ ｓｉｍ ｕｌａｔｅｄ ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ ＴＤ １０９ ｗａｓ ａｌｓｏ ｅｖａｌｕａｔｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅ，；ｕｌｔｓ ｓｈｏｗ ｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ ｒｅ— ｍ ｏｖａ ｌ ｒａｔｅ ｏｆ Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ ＴＤ １０９ ｗ ａｓ ４７．８９％ ．Ｔｈｅ ｖｉａｂｌｅ ｃｏｕｎｔｓ ｃａｎ ｂｅ ｕＤ ｔｏ １０ ｃｆｕ／ｍＬ ｉｎ ｐＨ ３．０ ｆｏｒ ３ ｈ．Ｔｈｅ １％ ｂｉｌｅ ｓａ ｌｔ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｒａｔｅ ｗａｇ ２４．０６％ ．Ｔｈｅ ｖｉａｂｌｅ ｃｏｕｎｔｓ ｃａｎ ｂｅ ｕＤ ｔｏ １０ ｃｆｕ／ｍＬ ａｔ ｓｏ￣ｕｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｏｆ ７ ｇ／１００ ｍＬ．Ｔｈｅ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｒａｔｅ ｉｎ ｓｉｍｕｌａｔｅｄ ｇａｓｔｒｉｃ ｆ ｌｕｉｄ ａｎｄ ｉｎｔｅｓｔｉｎａ ｌ ｆ ｌｕｉｄ ｗｅｒｅ １３．４１％ ａｎ ｄ ４７．６６％．ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ ＴＤ１Ｏ９ ｃａｎ ｂｅ ａｓ ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉａ ｌ ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ ｗｉｔｈ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ—ｌｏｗｅｒ ｉｎｇ ａｃｔ ｉｖｉｔｙ． Ｋ ｅｙ ｗ ｏｒｄｓ：Ｌａｃｔｉｃ ａｃｉｄ ｂａｃｔｅｒｉａ；Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ；Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ－ｌｏｗ ｅｒ ｉｎｇ；Ｔｏｌｅｒａｎｃｅ
能 力提 升专项计 划项 目（ＹＣ１３Ｄ００５）；东北农业 大学 学术骨 干 （１５ＸＧ２６）。 作者简介 ：范颖 （１９９２－），女 ，硕 士研 究生 ，研究方 向为食 品科 学。 通 讯作者 ：姜毓君
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ ＴＤ １０９ ｗｈｉｃｈ ｈａｓ ｒｅｌａｔｉｖｅｌｙ ｓｕｐｅｒ ｉｏｒ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ—ｌｏｗｅｒ ｉｎｇ ｅｆｅｃｔ ｗａｓ ｓｃｒｅｅｎｅｄ ｆｒｏｍ ２５ ｃｔｉｃ ａｃｉｄ ｂａｃｔｅｒｉａ． Ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｔｈｅ ｓｉｍ ｕｌａｔｅｄ ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ ＴＤ １０９ ｗａｓ ａｌｓｏ ｅｖａｌｕａｔｅｄ．Ｔｈｅ ｒｅ，；ｕｌｔｓ ｓｈｏｗ ｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ ｒｅ— ｍ ｏｖａ ｌ ｒａｔｅ ｏｆ Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ ＴＤ １０９ ｗ ａｓ ４７．８９％ ．Ｔｈｅ ｖｉａｂｌｅ ｃｏｕｎｔｓ ｃａｎ ｂｅ ｕＤ ｔｏ １０ ｃｆｕ／ｍＬ ｉｎ ｐＨ ３．０ ｆｏｒ ３ ｈ．Ｔｈｅ １％ ｂｉｌｅ ｓａ ｌｔ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｒａｔｅ ｗａｇ ２４．０６％ ．Ｔｈｅ ｖｉａｂｌｅ ｃｏｕｎｔｓ ｃａｎ ｂｅ ｕＤ ｔｏ １０ ｃｆｕ／ｍＬ ａｔ ｓｏ￣ｕｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｏｆ ７ ｇ／１００ ｍＬ．Ｔｈｅ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｒａｔｅ ｉｎ ｓｉｍｕｌａｔｅｄ ｇａｓｔｒｉｃ ｆ ｌｕｉｄ ａｎｄ ｉｎｔｅｓｔｉｎａ ｌ ｆ ｌｕｉｄ ｗｅｒｅ １３．４１％ ａｎ ｄ ４７．６６％．ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｌ．ｐｌａｎｔａｒｕｍ ＴＤ１Ｏ９ ｃａｎ ｂｅ ａｓ ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉａ ｌ ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｓ ｗｉｔｈ ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ—ｌｏｗｅｒ ｉｎｇ ａｃｔ ｉｖｉｔｙ． Ｋ ｅｙ ｗ ｏｒｄｓ：Ｌａｃｔｉｃ ａｃｉｄ ｂａｃｔｅｒｉａ；Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ；Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ－ｌｏｗ ｅｒ ｉｎｇ；Ｔｏｌｅｒａｎｃｅ
6种乳酸菌降解胆固醇的体外试验
6种乳酸菌降解胆固醇的体外试验
刘丽莉;董铁有;杨协立
【期刊名称】《河南科技大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2005(26)6
【摘要】分析了6种安全的乳酸菌菌种在不同条件下接种于体外高胆固醇的MRS-CHOL培养基中降解胆固醇的情况,以及培养液的pH值与胆固醇降解率的关系.结果表明,所用的6个菌种均可有效降解胆固醇,依次为Lp菌(28.088%)、3#菌(25.059%)、4#菌(24.922%)、Lf菌(24.554%)、Ld菌(22.248%)和5#菌(18.513%),降解率随接种量的增加和培养时间的延长而增加,除Lf菌外,其它菌株都随胆固醇浓度的变化而出现先升后降的趋势,培养液的pH值与胆固醇的降解率呈负相关性,且都不显著.
【总页数】4页(P85-88)
【作者】刘丽莉;董铁有;杨协立
【作者单位】河南科技大学,食品与生物工程学院,河南,洛阳,471003;河南科技大学,食品与生物工程学院,河南,洛阳,471003;三门峡双洋商贸有限公司,河南,三门
峡,472000
【正文语种】中文
【中图分类】TS201.3
【相关文献】
1.金属离子对乳酸菌降解胆固醇的影响 [J], 王菁;李尧;张羽竹;樊明涛
2.降解胆固醇乳酸菌的筛选及中草药与乳酸菌的协同作用 [J], 王瑞君
3.东北传统发酵食品中降胆固醇乳酸菌的筛选及其降解机制 [J], 任大勇; 曲天铭; 杨柳; 安彬; 王国超; 冯时蓉
4.乳酸菌降胆固醇作用及降解机制研究进展 [J], 刘孝芳;雷文平;迟珺曦;刘成国
5.降解胆固醇乳酸菌株的体外筛选及其酸乳发酵特性研究 [J], 刘建利;袁凤霞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
乳酸菌降胆固醇作用研究现状_剧柠
微生物学通报 JAN 20, 2009, 36(1): 125~129 Microbiology © 2009 by Institute of Microbiology, CAStongbao@*通讯作者：Tel: 86-471-4309230; : jinyeyc@收稿日期：2008-06-05; 接受日期：2008-08-25专论与综述乳酸菌降胆固醇作用研究现状剧 柠1 王晓兰2 李 泽1 靳 烨1*(1. 内蒙古农业大学食品科学与工程学院 内蒙古 呼和浩特 010018)(2. 内蒙古工业大学 内蒙古 呼和浩特 010051)摘 要: 本文综述了国内外关于乳酸菌在体内及体外降低胆固醇的研究进展, 并对乳酸菌降胆固醇的作用机制进行了探讨, 提出目前在研究中存在的一些问题, 以期对乳酸菌的进一步开发和利用提供帮助。
关键词: 乳酸菌, 降胆固醇, 作用机制The State of the Art on the Mechanisms of LacticAcid Bacteria in Reducing CholesterolJU Ning 1 WANG Xiao-Lan 2 LI Ze 1 JIN Ye 1*(1. Inner Mongolia Agricultural University , Hohhot , Inner Mongolia 010018, China )(2. Inner Mongolia University of Technology , Hohhot , Inner Mongolia 010051, China )Abstract: This paper reviewed the research progression in lactic acid bacteria which can reduce the choles-terol in vivo and in vitro. It also approached the function and the mechanism of lactic acid bacteria in de-creasing serum cholesterol, proposed some problems existing in the research. All these will be useful to the exploitation and utilization of lactic acid bacteria.Keywords: Lactic acid bacteria, Assimilation cholesterol, Mechanism 血清胆固醇水平直接关系到人们的健康。
降胆固醇乳酸菌的体外筛选及其降胆固醇机理探讨
摘 要：目的：从开菲尔粒和陈年泡菜水中分离出具有降胆固醇能力的乳酸杆菌，探讨其降解小鼠血清胆固醇的机 理。方法：以耐酸性、胆盐耐受性、疏水性、胆盐水解酶活性以及降胆固醇特性筛选出1 株性状优良的植物乳杆菌 （Lactobacillus plantarum DMDL 9010）。将50 只8 周龄的Sprague Dawley大鼠随机分为正常组、模型组、阳性组、 9010高组、9010低组，分别饲喂28 d和70 d采血，测定总胆固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride， TG）、高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein-cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein-cholesterol，LDL-C）的含量，70 d取肝组织细胞实时荧光逆转录聚合酶链式反应检测胆固醇合成限速 酶3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reducase，HMGCR）的相对表达量。结 果：筛选得到1 株具有降胆固醇能力的L. plantarum DMDL 9010，胆固醇去除率为37.58%，胆盐耐受性为35.48%， 疏水性高达40%，具有较好的耐酸性。饲喂第28天，成功建出高脂模型大鼠，饲喂第70天，9010高组能显著降低高 脂大鼠血清TC（23.03%）和LDL-C（28.00%），9010低组和阳性组无明显差异。阳性组和9010高组分别下调肝脏 中HMG-CoA基因mRNA的表达（79.92%和62.86%）（P＜0.05）。结论：实验获得了1 株在体内外均具有高效降胆 固醇能力的L. plantarห้องสมุดไป่ตู้m DMDL 9010，可进一步开发为功能性微生态制剂。 关键词：降胆固醇；乳酸菌；分离；鉴定；3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶
降胆固醇实验方法
降胆固醇实验方法降胆固醇乳酸菌的筛选、鉴定及降解机制的研究浙江工商大学汪晓辉一、降胆固醇培养基的制备根据Razin等[48]提供的方法制备胆固醇胶束，作为高胆固醇培养液中的胆固醇源。
准确称取220 mg卵磷脂和100 mg胆固醇于具塞试管，加入三氯甲烷溶剂5 mL，超声波振荡溶解。
氮气流吹干溶剂，加入10 mL无菌水。
试管放入冰浴，通氮气条件下超声波(130 w, 20 kHz)处理15 min，停止5 min保持温度平衡，循环三次；所得的溶液于4℃，10000 r/min离心20 min，所得的上清液即为卵磷脂-胆固醇胶束溶液。
4℃保存，当天使用，作为胆固醇源添加于MRS培养基中，用于以下的实验。
二、邻苯二甲醛法测定胆固醇含量[49]取1 mL样品，加入3 mL 95%乙醇和2 mL 50% (w/v)氢氧化钾，旋涡振荡。
于60℃下恒温水浴10 min冷却后加入5 mL正己烷。
旋涡振荡萃取1-2 min, 加入2 mL蒸馏水，振荡均匀，静置分层，取2 mL 上层正己烷，60℃水浴氮气吹干，加入4 mL 0.5 mg/mL( w/v )邻苯二甲醛溶液(用冰醋酸定容)和2 mL浓硫酸，显色反应20 min，于553 nm处测定吸光度值。
三、胆固醇标准曲线的测定准确称取0.1 g胆固醇粉末，正己烷定容1 mg/mL的溶液。
然后分别取0.02, 0.04, 0.06, 0.08, 0.1, 0.12, 0.14 mL到比色管中，60℃水浴氮气吹干后，加入4 mL 0.5 mg/mL邻苯二甲醛溶液和2 mL浓硫酸，显色反应20 min，在553 nm处测定吸光度值，以胆固醇含量为横轴，吸光度值为纵轴作标准曲线。
四、降胆固醇乳酸菌的体外筛选将乳酸菌接种于MRS液体培养基，37℃静置培养I2 h转接3次活化后，按2% ( v/v)接种量接种于5 mL降胆固醇筛选培养基中，摇匀后立即取样1 mL, 4000 r/min离心5 min，取上清液用邻苯二甲醛比色法测定胆固醇含量。
乳酸杆菌的分离、鉴定及其益生功能的体外评价
乳酸杆菌的分离、鉴定及其益生功能的体外评价目的从母乳标本和健康新生儿粪便标本中筛选出具有耐酸、耐胆盐能力的乳酸杆菌,并通过体外实验对其进行降胆固醇,抑制病原菌,抗毒素和免疫调节能力的评价,以期获得具有良好益生功能的乳酸杆菌作为益生菌候选株进行进一步地研究和开发。
方法一、乳酸杆菌的分离和鉴定:将母乳标本和新生儿粪便标本系列稀释后均匀接种于MRS培养基中,培养48h后通过观察菌落形态挑选可能的乳酸杆菌;再通过16s rDNA的初步鉴定以及耐酸、耐胆盐实验的筛选;最后对所得菌株进行API 50 CHL生化鉴定。
二、(1)体外降胆固醇能力评价:采用Wako试剂盒检测实验菌株培养上清中的胆固醇含量;观察细菌活性、培养时间和接种量对降胆固醇能力的影响;利用无水乙醇洗脱沉淀中的胆固醇探索菌株的降胆固醇机制。
(2)体外拮抗病原微生物能力评价:采用琼脂扩散法初步比对了实验菌株发酵上清对E.coli 0157:H7、Shigalla sonnei和Salmonella typhimurium的抑菌能力;采用蛋白酶K干预和调节pH值的方法对发酵上清进行处理,研究影响抑菌效果的因素。
(3)体外抗毒素能力评价:vibrioulnificus(Vv)和E.coli 0157:H7的无细菌培养上清(Cell free culture supernatant,CFCS)与待测乳酸杆菌共同孵育3h 后分别与Caco-2细胞和Vero细胞作用,12h后用LDH释放法检测含毒素上清引起的细胞毒性变化。
三、植物乳杆菌DOMLa的抗炎能力评价:选择合适剂量的Vv 诱导小鼠腹腔巨噬细胞(PM)建立体外炎症模型,同时加入不同剂量的植物乳杆菌DOMLa 干预,作用3h后,采用LDH释放法检测细胞毒作用,并采用ELISA法检测炎性细胞因子IL-6、IL-1(3和TNF-α的释放量。
结果一、筛选得到10株具有耐酸、耐胆盐能力的乳酸杆菌,经鉴定它们为:植物乳杆菌Y7-4,植物乳杆菌Y13、德氏乳杆菌Y20,嗜酸乳杆菌H104-2,发酵乳杆菌H109、发酵乳杆菌H115-5以及植物乳杆菌H121-2、植物乳杆菌H137-1、植物乳杆菌H155-2和植物乳杆菌H172-2。
乳酸菌降胆固醇体外筛选的培养基研究_王晓君
2010No．4Serial No．217China Brewing血清胆固醇水平的提高是引发冠心病的主要危险因素之一。
益生菌作为来源于宿主并对宿主健康有一定促进作用的微生物活体，其保健功能越来越受到人们的重视。
许多体外或体内实验研究表明，益生菌有一定的降胆固醇作用[1-5]。
同时体外研究也表明，某些乳酸菌可以降低培养基中的胆固醇[6-9]。
GILLILAND S E 等[10-11]报道了嗜酸乳杆菌从实验培养基中吸收胆固醇的现象，条件为厌氧且存在胆酸盐的环境，吸收能力有菌株特异性。
GILLILAND S E 等的实验结果与王俊国等[12]的实验结果一致，表明只有能降低培养基中胆固醇的菌株才能对猪的胆固醇水平有显著作用，因此能否降低培养基中胆固醇的体外研究成为筛选降血脂益生菌的初筛条件。
本研究探讨了乳酸菌在3种不同胆固醇源培养基中的生长状况以及降解胆固醇情况，旨在为乳酸菌降胆固醇体外筛选培养基的选择提供参考。
1材料与方法1.1材料1.1.1菌种植物乳杆菌（L.plantarum ）XZ45304、嗜酸乳杆菌（L.acidophilus ）NCFM4356、肠球菌（E.faecalis ）wz47-1-1、干酪乳杆菌（L.casei ）AG8-3、瑞士乳杆菌（L.helveticu ）mgh2-3-2由内蒙古农业大学乳品中心实验室提供；瑞士乳杆菌（L.helveticu ）T2从德琪饮乐多活性乳酸菌饮料中分离并保存；嗜热链球菌（S.thermophilus ）SD 从市售得益酸乳中分离并保存；嗜热链球菌（S.thermophilus ）9从市售蒙牛酸乳中分离并保存；保加利亚乳杆菌（L.bulgaricus ）LB 、干酪乳杆菌（L.casei ）C ：本实验室保存。
1.1.2培养基高胆固醇MRS-broth 培养基I ：MRS-broth 培养基中加入超声乳化的鸡蛋黄（按1%加入）；高胆固醇MRS-broth 培养基II [13]：采用RAZIN 等[14]研究的方法，把配制好的胆固醇胶束溶液快速加入到MRS-broth 培养基中（0.1mg/mL ），边加入边搅拌；高胆固醇MRS-broth 培养基III ：先用无水乙醇配制浓度为10mg/mL 的胆固醇溶液,然后按一定比例添加到MRS-broth 培养基中使胆固醇最终浓度为100μg/mL 。
一种乳酸菌去除胆固醇的体外评价方法[发明专利]
![一种乳酸菌去除胆固醇的体外评价方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s1/m/8b963e9ff46527d3250ce060.png)
专利名称：一种乳酸菌去除胆固醇的体外评价方法
专利类型：发明专利
发明人：姜毓君,印伯星,周炜,杨仁琴,吴慧,杨忠良,蒋丽娜,王锦荣,吴长清
申请号：CN201810443224.8
申请日：20180510
公开号：CN108613938A
公开日：
20181002
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种乳酸菌去除胆固醇的体外评价方法，属于食品微生物技术领域。
该方法是将乳酸菌接种至MRS培养基培养，传代培养两代后为工作液；分别配制不同浓度的胆固醇溶液，氮吹后加入邻苯二甲醛溶液，加入浓HSO混匀后，静置测定吸光值，绘制胆固醇标准曲线；将工作液接种至MRS‑CHOL‑THIO培养基中培养，离心取上清液，依次加入乙醇和氢氧化钾溶液，水浴后冷却至室温，加入正己烷和蒸馏水，振荡后静置分层，取正己烷层氮吹，加入邻苯二甲醛溶液，静置后加入浓硫酸，静置测定吸光值，根据胆固醇标准曲线回归方程计算胆固醇质量浓度，并利用公式计算胆固醇脱除率。
该方法简单易行，可准确评价乳酸菌去除胆固醇能力。
申请人：扬州市扬大康源乳业有限公司
地址：225004 江苏省扬州市食品产业园鼎兴路88号
国籍：CN
代理机构：哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司
代理人：邓宇
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一株具有降胆固醇及产胞外多糖能力的乳酸乳球菌[发明专利]
![一株具有降胆固醇及产胞外多糖能力的乳酸乳球菌[发明专利]](https://img.taocdn.com/s1/m/4b8bd33684254b35effd3469.png)
专利名称：一株具有降胆固醇及产胞外多糖能力的乳酸乳球菌专利类型：发明专利
发明人：王艳萍,王菁蕊,冯武
申请号：CN201110025200.9
申请日：20110124
公开号：CN102604851A
公开日：
20120725
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一株乳酸乳球菌分离株及其应用，该菌株具有降胆固醇及产胞外多糖能力，涉及生物技术领域，特别涉及功能性乳酸菌生产开发领域。
其步骤为：(1)通过培养基从西藏传统发酵乳制品Kefir中获得乳酸菌；(2)通过菌种鉴定结合邻苯二甲醛比色法、苯酚-硫酸法和薄层色谱法筛选出具有降胆固醇及产胞外多糖能力的乳酸乳球菌。
使用本发明菌株生产得到的发酵乳制品具有良好的风味特征及感官特性，同时本发明制成的乳酸菌菌粉安全无毒，生产工艺简单，具有良好的开发前景。
申请人：天津科技大学
地址：300457 天津市经济技术开发区第十三大街29号
国籍：CN
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降胆固醇乳酸菌的分离鉴定
降胆固醇乳酸菌的分离鉴定胡勇;文晓荣;常自超;丁雪垒;安春红【期刊名称】《中国乳品工业》【年(卷),期】2015(043)002【摘要】为分离筛选具有降胆固醇作用的乳酸菌,以含碳酸钙的MRS为选择性培养基,从泡菜、酸奶及健康成人粪便中分离乳酸菌,硫酸铁铵比色法测定各分离乳酸菌株体外降胆固醇能力.结果共分离筛选到具有降胆固醇作用的乳酸菌21株,其中菌株LPC15具有较高的降胆固醇能力,其胆固醇去除率达68％,且呈现较好的耐酸和耐胆盐特性,在pH值为1.5的MRS培养基中存活至少3h,在含0.3％胆盐的MRS培养基中生长良好,经形态、生化和分子生物学等特征鉴定为嗜热链球菌.【总页数】4页(P20-23)【作者】胡勇;文晓荣;常自超;丁雪垒;安春红【作者单位】重庆理工大学药学与生物工程学院,重庆400054;重庆理工大学药学与生物工程学院,重庆400054;重庆理工大学药学与生物工程学院,重庆400054;重庆理工大学药学与生物工程学院,重庆400054;重庆理工大学药学与生物工程学院,重庆400054【正文语种】中文【中图分类】Q93-331【相关文献】1.猪源降胆固醇乳酸菌的分离鉴定 [J], 刘长建;齐小辉;刘秋;蒋本国;闫建芳;石若瑜2.降胆固醇乳酸菌的体外筛选及其降胆固醇机理探讨 [J], 黄燕燕;郭均;黎恒希;杨爱君;冯立科;彭小霞;刘冬梅3.发酵酸肉中降胆固醇乳酸菌的筛选、鉴定及降胆固醇作用 [J], 丁苗;刘洋;葛平珍;王丹;周才琼4.酸菜汁中乳酸菌的分离鉴定及其体外降胆固醇能力研究 [J], 章秀梅;刘昭明;黄翠姬;贤乾隆;黄源波5.高效降胆固醇降甘油三酯乳酸菌的分离鉴定和功能分析 [J], 吴慧昊; 牛锋; 钟琦; 杨迪因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
一株乳酸乳球菌的降胆固醇特性及其作用机制
一株乳酸乳球菌的降胆固醇特性及其作用机制
国立东;王丽群;蒋琛;刘晓艳;于纯淼;孟丹
【期刊名称】《中国酿造》
【年(卷),期】2015(034)007
【摘要】探讨了乳酸乳球菌乳亚种HUCM 201的降胆固醇特性及其体外去除胆固醇的机制.乳酸乳球菌乳亚种HUCM 201菌株可从培养基中去除33.1％的胆固醇,其中14.3％的胆固醇发生共沉淀并重新溶解在洗涤液中,18.1％的胆固醇被吸收到菌体细胞内.HUCM201菌株对5种结合型胆酸盐分别表现出了不同的胆盐水解酶活性,其中对甘氨胆酸钠的水解能力最强,总酶活为0.279 U/mL,比酶活为0.076 U/mg.
【总页数】3页(P53-55)
【作者】国立东;王丽群;蒋琛;刘晓艳;于纯淼;孟丹
【作者单位】黑龙江中医药大学药学院,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江省农业科学院食品加工研究所,黑龙江哈尔滨150086;黑龙江中医药大学药学院,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学药学院,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学药学院,黑龙江哈尔滨150040;黑龙江中医药大学药学院,黑龙江哈尔滨150040
【正文语种】中文
【中图分类】TS201.3
【相关文献】
1.一株乳酸乳球菌对高胆固醇血症小鼠血脂轮廓的改善作用 [J], 国立东;刘倩;刘爱芳;刘晓艳;于纯淼
2.分离自酸菜汁的乳酸乳球菌体外去除胆固醇特性 [J], 尹军霞;沈国娟;谢亚芳
3.一株乳酸乳球菌所产细菌素的生物学特性 [J], 唐春梅;陈俊亮;任广跃
4.一株降胆固醇菌株的筛选鉴定及安全性评价 [J], 谢晓娜;张元秋;杨郑州;侯保朝;廖丽琴
5.一株植物乳杆菌体内降胆固醇的作用机制 [J], 靳妲;马微微
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降胆固醇益生乳酸菌的体外筛选
降胆固醇益生乳酸菌的体外筛选郭东起;侯红漫;刘阳;陈莉【期刊名称】《中国乳品工业》【年(卷),期】2007(035)008【摘要】从传统发酵制品中筛选出6株降胆固醇的乳酸菌并在体外测定了降胆固醇的能力,其中菌株GL-10和LBA-11高达45%;同时测试了这些菌株的耐酸和耐胆盐性、细胞黏附、抑菌性的益生特性.结果表明,菌株GL-A-11,GL-11,ZPC-15能在pH值为2蒸馏水下存活1 h;GL-10,GL-A,ZPC-13能在质量分数为2%的胆盐混合液中存活12 h;GL-10对人结肠腺癌细胞系HT-29细胞黏附性最强,达4.8个/细胞,其次是菌株GL-A,ZPC-13,GL-11为3.7个/细胞左右,所有菌株对常见致病菌都有明显抑制作用.从中选择出乳酸菌GL-A作为今后益生菌制剂和功能性乳制品开发的潜在菌种.【总页数】4页(P11-14)【作者】郭东起;侯红漫;刘阳;陈莉【作者单位】大连轻工业学院,生物与食品工程学院,辽宁,大,连116034;大连轻工业学院,生物与食品工程学院,辽宁,大,连116034;大连轻工业学院,生物与食品工程学院,辽宁,大,连116034;大连轻工业学院,生物与食品工程学院,辽宁,大,连116034【正文语种】中文【中图分类】Q93-331【相关文献】1.降胆固醇乳酸菌的体外筛选及其降胆固醇机理探讨 [J], 黄燕燕;郭均;黎恒希;杨爱君;冯立科;彭小霞;刘冬梅2.乳酸菌降胆固醇体外筛选的培养基研究 [J], 王晓君;潘道东;张佳程3.几株乳酸菌益生潜力及降胆固醇的研究 [J], 李妍;张兰威4.降胆固醇乳酸菌体外筛选模型 [J], 胡梦坤;岳喜庆;李晓婷;高正5.降胆固醇乳酸菌的筛选及其益生元干预生长作用分析 [J], 玛丽娜·库尔曼;巩燕妮;包洪涛;包怡红因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
6种乳酸菌降解胆固醇的体外试验
第26卷第6期2005年 12月河南科技大学学报(自然科学版)Journal of Henan Universi ty of Science and T echnology(Natural Science)Vol.26No.6Dec.2005基金项目:国家十五科技攻关资助项目(2001BA533C)作者简介:刘丽莉(1974-)女,河南洛阳人,讲师.收稿日期:2005-04-30文章编号:1672-6871(2005)06-0085-046种乳酸菌降解胆固醇的体外试验刘丽莉1,董铁有1,杨协立2(1.河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳471003;2.三门峡双洋商贸有限公司,河南三门峡472000)摘要:分析了6种安全的乳酸菌菌种在不同条件下接种于体外高胆固醇的MRS-CHOL培养基中降解胆固醇的情况,以及培养液的p H值与胆固醇降解率的关系。
结果表明,所用的6个菌种均可有效降解胆固醇,依次为Lp菌(28.088%)、3#菌(25.059%)、4#菌(24.922%)、Lf菌(24.554%)、Ld菌(22.248%)和5#菌(18.513%),降解率随接种量的增加和培养时间的延长而增加,除Lf菌外,其它菌株都随胆固醇浓度的变化而出现先升后降的趋势,培养液的pH值与胆固醇的降解率呈负相关性,且都不显著。
关键词:微生物;乳酸菌;胆固醇;降解率中图分类号:TS201.3文献标识码:A0 前言近年来,国内外微生态学家发现微生物菌群中的乳酸菌、双歧杆菌以及肠球菌等与胆固醇的降解有一定的关系,大量的体内外研究也证实了某些乳酸菌具有降低血清胆固醇含量的功效[1~3]。
为此,人们对于乳酸菌降低胆固醇的机理进行了广泛的研究[4]。
对于降解机理相关报道有3种看法:(1)Gilliland 等[5]提出并证明了乳酸菌对于胆固醇具有同化作用。
(2)乳酸菌在胆盐的作用下与胆固醇产生共沉淀作用。
(3)现在人们大多倾向于同化作用和共沉淀作用的共同结果。
乳酸菌降胆固醇作用研究现状
乳酸菌降胆固醇作用研究现状
韩俊华;盛晓甘;董彩凤;葛春美;张柏林
【期刊名称】《中国乳品工业》
【年(卷),期】2002(030)003
【摘要】乳酸菌及其相关制品具有降低介质以及血清中胆固醇的能力,已被体内及体外的大量实验所证实.然而,国内外对于乳酸菌降低胆固醇的作用机理尚存在不同的观点,主要体现在:①乳酸菌细胞直接吸收胆固醇;②乳酸菌的胆盐水解酶活性使胆盐由结合态转变为脱结合态,与胆固醇发生共同沉淀;③其他理论,如抑制胆固醇合成途径中的酶等.对涉及上述作用机理的相关研究作了评述,提出和分析了研究中所存在的问题.
【总页数】5页(P16-20)
【作者】韩俊华;盛晓甘;董彩凤;葛春美;张柏林
【作者单位】河北农业大学,河北保定071001;甘肃好为尔生物科技股份有限公司,甘肃兰州730070;河北农业大学,河北保定071001;河北农业大学,河北保定071001;河北农业大学,河北保定071001
【正文语种】中文
【中图分类】TS252.1
【相关文献】
1.发酵酸肉中降胆固醇乳酸菌的筛选、鉴定及降胆固醇作用 [J], 丁苗;刘洋;葛平珍;王丹;周才琼
2.乳酸菌降胆固醇作用研究现状 [J], 剧柠;王晓兰;李泽;靳烨
3.降胆固醇乳酸菌的益生特性及其作用机理 [J], 付永岩;赵悦含;王毅超;高达;孙长豹;姜瞻梅;刘飞;侯俊财
4.乳酸菌降胆固醇作用及降解机制研究进展 [J], 刘孝芳;雷文平;迟珺曦;刘成国
5.降胆固醇乳酸菌的筛选及其益生元干预生长作用分析 [J], 玛丽娜·库尔曼;巩燕妮;包洪涛;包怡红
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2010No．4Serial No．217China Brewing血清胆固醇水平的提高是引发冠心病的主要危险因素之一。
益生菌作为来源于宿主并对宿主健康有一定促进作用的微生物活体，其保健功能越来越受到人们的重视。
许多体外或体内实验研究表明，益生菌有一定的降胆固醇作用[1-5]。
同时体外研究也表明，某些乳酸菌可以降低培养基中的胆固醇[6-9]。
GILLILAND S E 等[10-11]报道了嗜酸乳杆菌从实验培养基中吸收胆固醇的现象，条件为厌氧且存在胆酸盐的环境，吸收能力有菌株特异性。
GILLILAND S E 等的实验结果与王俊国等[12]的实验结果一致，表明只有能降低培养基中胆固醇的菌株才能对猪的胆固醇水平有显著作用，因此能否降低培养基中胆固醇的体外研究成为筛选降血脂益生菌的初筛条件。
本研究探讨了乳酸菌在3种不同胆固醇源培养基中的生长状况以及降解胆固醇情况，旨在为乳酸菌降胆固醇体外筛选培养基的选择提供参考。
1材料与方法1.1材料1.1.1菌种植物乳杆菌（L.plantarum ）XZ45304、嗜酸乳杆菌（L.acidophilus ）NCFM4356、肠球菌（E.faecalis ）wz47-1-1、干酪乳杆菌（L.casei ）AG8-3、瑞士乳杆菌（L.helveticu ）mgh2-3-2由内蒙古农业大学乳品中心实验室提供；瑞士乳杆菌（L.helveticu ）T2从德琪饮乐多活性乳酸菌饮料中分离并保存；嗜热链球菌（S.thermophilus ）SD 从市售得益酸乳中分离并保存；嗜热链球菌（S.thermophilus ）9从市售蒙牛酸乳中分离并保存；保加利亚乳杆菌（L.bulgaricus ）LB 、干酪乳杆菌（L.casei ）C ：本实验室保存。
1.1.2培养基高胆固醇MRS-broth 培养基I ：MRS-broth 培养基中加入超声乳化的鸡蛋黄（按1%加入）；高胆固醇MRS-broth 培养基II [13]：采用RAZIN 等[14]研究的方法，把配制好的胆固醇胶束溶液快速加入到MRS-broth 培养基中（0.1mg/mL ），边加入边搅拌；高胆固醇MRS-broth 培养基III ：先用无水乙醇配制浓度为10mg/mL 的胆固醇溶液,然后按一定比例添加到MRS-broth 培养基中使胆固醇最终浓度为100μg/mL 。
1.1.3主要试剂冰乙酸，正己烷，95%vol 乙醇，浓硫酸，50%KOH 溶液均为分析纯；胆固醇（生化试剂，上海三杰生物技术有限公司）；邻苯二甲醛（化学纯，上海同纳环保科技有限公司）；牛胆盐（化学纯，中国惠兴生化试剂有限公司）。
1.2方法1.2.1发酵液的制备供试菌试验前在无菌MRS-broth 中连传3代，调整菌液OD 620值（在波长620nm 处测得菌液的吸光度值）为同一水平，按1%的接种量转接到高胆固醇MRS-broth 培养基I 、II 、III 中，37℃培养24h 。
同时未接菌的含胆固醇MRS-broth 培养基，在5℃保存备用。
1.2.2胆固醇降低率测定乳酸菌降胆固醇体外筛选的培养基研究王晓君1，潘道东2，张佳程1*（1.青岛农业大学食品学院，山东青岛266109；2.南京师范大学食品科学与工程学院，江苏南京210097）摘要：许多体外或体内实验研究表明,益生菌有一定的降胆固醇作用。
探讨了10株不同的益生菌在3种不同胆固醇源的高胆固醇MRS-broth 培养基中的降胆固醇效果以及生长状况，结果发现，这些益生菌在3种高胆固醇培养基中，37℃培养24h 后,均表现出降胆固醇活性，其中胆固醇胶束溶液配制的高胆固醇MRS-broth 具有较好的筛选效果。
关键词：益生菌；培养基；降胆固醇中图分类号：Q93-335文献标识码：A文章编号：0254-5071（2010）04-0026-03Medium for screening cholesterol-lowering lactic acid bacteria by in vitro modelWANG Xiaojun 1,PAN Daodong 2,ZHANG Jiacheng 1*(1.College of Food Science,Qingdao Agricultural University,Qingdao 266109,China ；2.College of Food Science and Technology,Nanjing Normal University,Nanjing 210097,China)Abstract:In vitro and in vivo studies showed that probiotics can lower cholesterol levels.Growth and effects of cholesterol-lowering of ten probiotics strains in three kinds of high cholesterol MRS-broth medium made by different sources of cholesterol were evaluated and analyzed.The results indi-cated that all strains showed cholesterol-lowering capacity after incubation for 24h at 37℃in medium with high concentration of cholesterol.And the MRS-broth with cholesterol micellar solution was the best.Key words:probiotics;medium;cholesterol-lowering收稿日期：2010-01-26基金项目：国家高技术研究发展计划（863计划）（2007AA10Z357）作者简介：王晓君（1983-），女，硕士研究生，研究方向为乳品科学与技术；张佳程*，通讯作者。
Research Report26··中国酿造2010年第4期总第217期发酵液在5000r/min离心10min，取1mL上清液，采用邻苯二甲醛显色法（OPA法）[15]测定胆固醇的含量；同时配制0.1mg/mL、0.2mg/mL、0.3mg/mL、0.4mg/mL、0.5mg/mL、0.6mg/mL浓度的胆固醇正己烷溶液。
用同样的方法测定，绘制标准曲线。
胆固醇降低率（%）=（OD标准-OD样品）/OD标准×100%式中：OD标准为未接种乳酸菌的胆固醇-MRS培养基在波长554nm处的吸收值；OD样品为接种乳酸菌的胆固醇-MRS发酵液在波长554nm处的吸收值。
1.2.3发酵液pH值的测定用PHS-3C精密pH计进行测定。
1.2.4在培养基中生长情况的测定通过测定4株菌在3种高胆固醇MRS-broth培养基中的OD620值变化，比较其生长状况。
2结果与分析2.1胆固醇浓度标准曲线由图1可以看出，采用OPA法，1mL样品测定体系的曲线拟合后相关性很好（R2＝0.9947），可用于待测菌株的体外降胆固醇能力评价。
2.2配制培养基的胆固醇含量按上述方法配制的3种培养基的胆固醇含量分别为0.055mg/L（培养基I）、0.05mg/L（培养基II）、0.061mg/L （培养基III）。
在实际配制过程中，蛋黄的乳化非常重要，乳化不充分，配制的胆固醇溶液浓度不均匀，影响测定结果。
配制胆固醇胶束溶液时，虽然是按0.1mg/L的含量进行配制，但是由于配制乳化液的器壁上有残留，为了避免杂菌污染，不冲洗器壁，所以配制的浓度偏低；按一定量加入胆固醇乙醇溶液，因为胆固醇会以微小颗粒的形式析出一部分，放置一段时间会发生沉淀现象，所以得到的胆固醇含量也偏低。
2.3乳酸菌在3种高胆固醇培养基中发酵pH值的变化由图2可以看出，在培养基初始pH值相同的情况下，培养基II的pH值变化范围小。
由于乳酸菌发挥益生效果的部位是肠道，肠道pH值接近中性，所以体外筛选时，在保证乳酸菌正常生长的前提下，所选培养基pH值变化越小越理想。
2.4在3种培养基中乳酸菌的生物量变化由图3可以看出，4株乳酸菌在蛋黄-MRS培养基上生长状况稍好，但是在3种培养基上的生长状况差别并不明显，这说明培养基II配制过程中pH值的调整对菌种生长产生的影响很小，培养基III中的乙醇对乳酸菌生长的影响也不明显。
2.5在3种培养基中乳酸菌的胆固醇降低率由图4可以看出，同一株菌在不同培养基中的胆固醇研究报告27··2010No．4Serial No．217China Brewing降低率不同，不同的乳酸菌在3种培养基中的胆固醇降低趋势也不一致。
在培养基的实际配制过程中，培养基II 和培养基III 中的胆固醇是以游离态的形式存在的，但是培养基III 中的胆固醇并不能均匀分散到培养基中，这势必会影响筛选结果。
而在蛋黄中结合态的胆固醇为主要存在形式，不同的胆固醇存在形式也可能会影响筛选结果。
总体试验结果可以看出，试验菌株在培养基II 中的胆固醇降解率较高。
3讨论高胆固醇培养基的选择会影响降胆固醇乳酸菌的筛选效果。
把鸡蛋黄和胆固醇乙醇溶液加入MRS 液体培养基中，虽然配制方法简单，但是前者也要经过充分乳化才能得到胆固醇分布均匀的溶液，从筛选结果看出，蛋黄中胆固醇的存在形式会影响试验结果；后者配制的高胆固醇培养基胆固醇分布不均匀，少量胆固醇会析出甚至沉淀，这样会造成筛选结果变化幅度较大。
相比较而言，先配制胆固醇胶束溶液然后再加入MRS 培养基中得到的高胆固醇培养基具有较好的筛选效果。
参考文献：[1]PEREIRA D I A,GIBSON G R.Cholesterol assimilation by lactic acid bacteria and bifidobacteria isolated from the human gut [J].Appl Environ Microbiol ,2002,68:4689-4693.[2]潘道东,张德珍.降胆固醇乳酸菌的筛选及其降胆固醇活性研究[J].食品科学,2005，26（6）：233-237.[3]胡梦坤，岳庆喜.植物乳杆菌LP1103的筛选及其降胆固醇作用机理的研究[J].食品科学，2008，29（6）：226-229.[4]USMAN,HOSONO A.Bile tolerance,taurocholate deconjugation,andbinding of cholesterol by Lactobacillus gasseri Strains[J].J Dairy Sci ,1999,82:243-248.[5]姚菁华，肖雷,苏显中，等.降胆固醇乳酸菌的筛选[J].食品开发与机械，2007，25（6）：9-11.[6]NOH D O,KIM S H,GILLILAND S E.Incorporation of cholesterol into the cellular membrane of Lactobacillus acidophilus ATCC 431211[J].J Dairy Sci ,1997,80:3107-3113.[7]DAMBEKODI P C,GILLILAND S E.Incorporation of cholesterol into the cellular membrane of Bifidobacterium longum [J].J Dairy Sci ,1998,81:1818-1824.[8]PEREIRA D I A,MCCARTNEY A L,GIBSON G R.An in vitro study of the probiotic potential of a bile-salt-hydrolyzing Lactobacillus fermentum strain,and determination of its cholesterol-lowering properties[J].Appl Environ Microbiol ,2003,69:4743-4752.[9]KIMOTO H,OHMOMO S ,OKAMOTO T.Cholesterol removal frommedia by lactococci [J].J Dairy Sci ,2002,85:3182-3188.[10]GILLIANDSE,NELSONC R,MAXWELLC.Assimilationof cholesterolby Lactobacillus acidophilus [J].Appl En v iron Microb ,1985,49(2):377-381.[11]WALKER D K,GILLILAND S E.Relationships among bile tolerance,bile salt deconjugation,and assimilation of cholesterol by Lactobacillusacidophilus [J].J Dairy Sci ,1993,76：956-961.[12]王俊国.降胆固醇益生乳杆菌的筛选及其降胆固醇作用的研究[D].内蒙古农业大学博士论文，2008.[13]RAZIN S,KUTNER S,EFRATI H,et al.Phospholipid and cholesteroluptake by mycoplasmacells and membranes[J].Biochem Biophys Acta ,1980,56:598:628.[14]柳翰凌，周雨霞，乌尼，等.乳制品中具有降胆固醇功能乳酸菌的体外筛选[J].乳品科学与技术，2006（1）：9-11.[15]RUDEL L L,MORRIS M D.Determination of Cholesterol UsingO-phthalaldehyde [J].Lipid Res ,1973,14:364-366.笠广告笠Research Report28··。