药物分析实验 COMPANY LOGO 双黄连口服液的质量检验 1 实验目的 2 实验仪器与试剂 3 实验内容 4 பைடு நூலகம்实验注意事项 5 讨论与思考题 COMPANY LOGO COMPANY LOGO 实验目的 1、掌握中成药特征成分的薄层对照品法及药材 法的鉴别。 2、掌握中成药的HPLC含量测定的方法。 COMPANY LOGO R 2 (tR1 tR2 ) W1 W2 COMPANY LOGO COMPANY LOGO (3)计算黄芩苷的含量(外标法) C样 A样
C标 A标 C样 C标 A样 A标 m V C样 D 其中:C—浓度(mg/ml); A—峰面积; m—黄芩苷的质量(mg); D—稀释倍数; V—每支样液的体积(ml) COMPANY LOGO 实验注意事项 制备样品时,一定要用唯恐滤膜过滤 进样时进样器一定要清洗干净 进样前色谱仪一定要用流动相平衡 进样完毕后,一定要清洗色谱柱后方可关机。 COMPANY LOGO 讨论与思考题 1、在中成药及中药材的薄层色谱鉴别中何时采 用对照药材法? 2、中药材及制剂高效液相色谱测定的注意事项 有哪些? COMPANY LOGO 2、对照品溶液的配制 取黄芩苷对照品用50%甲醇溶解配制称0.1mg /ml 的对照品溶液 3、供试品溶液的制备 COMPANY LOGO 精密量取装量项下的本品0.5ml,置25ml量 瓶中,加50%甲醇适量,超声处理20分钟,放置至室 温,加50%甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。 薄层鉴别实验 供试品溶液:取本品1ml,加甲醇5ml,振摇使溶解,静置, 取上清液,即得。 对照药材溶液:另取连翘对照药材0.5g,加甲醇10ml,置水 浴上加热回流20分钟,滤过,滤液即为。 展开条件:点样量各为5μl,硅胶G薄层板,展开剂:氯仿甲醇(5:1),显色剂:10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热 数分钟显色。 结果:供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显 相同颜色的斑点。 含量测定 COMPANY LOGO A 色谱条件及系统适应性 B 对照品溶液的配制 C 供试品溶液的制备 D 样品溶液的测定 E 计算公式 COMPANY LOGO 1、色谱条件与系统适用性试验 ODSC18柱;流动相:甲醇-水-冰醋酸(50:50:1);检 测波长:274nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于 1500。 COMPANY LOGO 4、样品溶液的测定 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl, 注入液相色谱仪,测定,根据峰面积来计算每支 口服液中黄芩苷的含量,即得。 5、计算公式 (1)计算理论塔板数(按黄芩苷计) n 5.54 ( tR )2 W1/ 2 (其中:A=1.065×h×w1/2) (2)计算分离度 3、黄芩苷高效液相色谱含量测定中,流动相中 的冰乙酸有何作用? 实验仪器与试剂 仪器:回流提取器、高效液相色谱仪、微量进样 器、层析缸 试剂:黄芩苷 、连翘药材、氯仿、甲醇、冰醋酸 实验内容 COMPANY LOGO 鉴别试验 含量测定 鉴别试验的项目 A 性状鉴别 B 薄层鉴别 COMPANY LOGO COMPANY LOGO 性状鉴别 本品为棕红色的澄清液体;味甜,微苦。