草菇液体菌种培养条件优化研究

Edible and medicinal mushrooms2021，29（3）：242～249香菇液体菌种培养基及摇瓶培养条件优化谢婷1何娟1张顺凯2焦海涛2边银丙1肖扬1*（1.华中农业大学应用真菌研究所，武汉430070；2.湖北森源生态股份有限公司，湖北宜昌444200）摘要建立液体菌种优质高效生产技术体系是香菇工厂化生产的重要保障。

以香菇‘森源16’为试验菌株，选择菌丝生物量、菌丝球密度和直径为主要评价指标，采用单因素和正交试验L9(34)优化香菇摇瓶液体发酵工艺。

结果：棉秆粉为最佳碳源，麸皮为最佳氮源；优化培养基配方为葡萄糖3g/100mL，棉秆粉1.5g/100mL，木屑粉1.5g/100mL，麸皮0.6g/100mL，KH2PO40.1g/100mL，MgSO4·7H2O0.05g/100mL；最优摇瓶发酵条件为装液量100mL/250mL，摇床转速170r/min，初始pH5.5，羧甲基纤维素钠0.20g/100mL，漆酶0.05g/100mL。

关键词香菇；液体菌种；培养基优化；摇瓶发酵；条件优化中图分类号：S646文献标识码：B文章编码：2095-0934（2021）03-242-08 Optimization of liquid spawn media and shake flask culture conditionsof Lentinula edodesXie Ting1He Juan1Zhang ShunKai2Jiao Haitao2Bian Yinbing1Xiao Yang1*(1.Institute of Applied Mycology,Huazhong Agricultural University,Wuhan,Hubei430070,China;2.Hubei SenyuanEcological Co.,Ltd.,Yichang,Hubei444200,China)Abstract The establishment of a high-quality and high-efficiency production technology system for liquid spawn is an important guarantee for the factory production of Lentinula edode s.In this study,Senyuan No.16was used as the test strain,and the mycelial biomass,mycelial ball density and diameter were used as the main evaluation indicators.Single factor test and orthogonal test L9(34)were used to optimize the liquid culture process of L.edodes in shaking flasks. Results showed that cotton stalk powder is the best carbon source and wheat bran is the best nitrogen source.The optimized medium formula is glucose3g/100mL,cotton stalk powder1.5g/100mL,wood chip powder1.5g/100mL, wheat bran0.6g/100mL,KH2PO40.1g/100mL and MgSO4·7H2O0.05g/100mL.The optimal culture conditions for shake flasks are100mL/250mL of liquid volume,170r/min of shaker speed,initial pH of5.5,sodium carboxymethyl cellulose0.25g/100mL,laccase0.05g/100mL.Key words Lentinula edode s;liquid spawn;medium optimization;shake flask culture香菇（Lentinula edodes）营养丰富，味道鲜美，被誉为“山珍之上品”，且具有抗病毒、免疫调节、健胃、助消化、抗炎症、抗菌和抗肿瘤等活性[1,2]。

草菇液体菌种栽培技术一、引言草菇是一种常见的食用菌，其口感鲜美，营养丰富，深受人们喜爱。

液体菌种栽培技术是一种新型的草菇栽培方法，具有生产效率高、周期短、成本低等优点。

本文将详细介绍草菇液体菌种栽培技术。

二、液体菌种制备1. 菌种选择选择高效率的草菇品系作为液体菌种的母本。

常用的品系有松茸型、平顶型和鸡腿型等。

2. 菌丝接种将选好的母本放入无菌环境中进行接种。

可以采取划线法或直接注射法进行接种。

3. 菌丝培养将接种好的母本放入含有适量碳源、氮源和矿物质盐等营养物质的基础培养液中进行培养。

常用的基础培养液有PD（Potato Dextrose）和PDA（Potato Dextrose Agar）等。

4. 液体发酵将培养好的草菇菌丝转移到含有适量碳源、氮源和矿物质盐等营养物质的液体培养基中进行发酵。

常用的液体培养基有PDB（Potato Dextrose Broth）和Czapek-Dox Broth等。

三、液体菌种栽培技术1. 菌种接种将培养好的草菇液体菌种接种到含有适量碳源、氮源和矿物质盐等营养物质的草菇栽培基质中。

常用的草菇栽培基质有稻草、秸秆、木屑等。

2. 保湿在接种后，要及时进行保湿处理，使基质保持适宜的湿度。

可以采用喷水或覆盖湿毛巾等方法进行保湿。

3. 通风换气草菇需要充足的氧气才能生长繁殖，因此要及时进行通风换气。

可以采用开窗通风或安装通风设备等方法。

4. 控制温度草菇生长适宜温度为18℃-25℃，因此要控制好环境温度。

可以采用加热或降温设备等方法进行控制。

5. 控制光照草菇不需要光照，因此要避免阳光直射或强光照射。

可以选择适宜的栽培场所进行栽培。

四、液体菌种栽培技术的优点和应用1. 优点液体菌种栽培技术具有生产效率高、周期短、成本低等优点。

2. 应用液体菌种栽培技术广泛应用于草菇生产中，可以大幅度提高草菇的产量和质量。

五、总结草菇液体菌种栽培技术是一种新型的草菇栽培方法，具有生产效率高、周期短、成本低等优点。

香菇菌种培养环境控制与液体发酵研究香菇（学名：Agaricus bisporus）是一种被广泛消费和栽培的菌类，也是世界上最常见的食用菌之一。

香菇的培养涉及到菌种的培养环境控制和液体发酵过程的研究。

本文将就香菇菌种培养环境控制和液体发酵研究进行探讨。

一、香菇菌种培养环境控制1. 培养基选择：香菇菌种的培养基通常以糠饼料、豆粕、麦麸、玉米麸等为主要原料，再添加适量的水、石膏、石灰、碳源和氮源等，制成符合菌株生长需求的培养基。

培养基的选择直接影响到香菇菌种的生长速度和产量。

2. 温度控制：香菇菌种的生长适温一般在18-23摄氏度之间。

在香菇菌种培养过程中，维持适宜的温度对保证菌丝扎实生长至关重要。

温度过低会导致生长缓慢，而温度过高则容易引发菌丝病变。

3. 湿度调节：菌丝生长需要适宜的湿度环境。

一般来说，香菇菌种生长阶段需要相对湿度保持在85-95%之间。

为了达到这个要求，培养室内通常设置湿帘或湿度控制系统，定时定量地喷水加湿。

4. 光照控制：香菇菌种的生长属于光反应性菌类，光照对其生长和发育也有一定的影响。

一般来说，香菇菌种在菌丝生长阶段需要暗处培养，促进菌丝快速生长；在菌盖生长后期，要给予适量的自然光照，以促进香菇子实体生长。

5. 通风环境控制：通风控制有助于维持空气流通，提供氧气，排除过多的二氧化碳等有害气体，保持良好的培养环境。

适宜的通风能够避免过高的湿度和集中的热量，减少菌丝病变的风险。

二、香菇液体发酵研究除了传统的固体发酵，液体发酵也是培养香菇菌种的一种方法。

这种方法可以在相对较短的时间内获得较高的产量，并且易于操作和控制。

1. 液体发酵基质：液体发酵中使用的基质通常是含有糖类、氮源和无机盐的液体培养基。

糖类可以提供碳源，氮源则提供菌丝生长所需的氮元素，无机盐则提供菌丝所需的其他微量元素。

2. 搅拌和通气：液体发酵过程中，适度的搅拌和通气可以提高菌丝的培养效果。

搅拌可以保持培养液的均匀性，避免菌丝的团聚；通气能够提供菌丝所需的氧气，促进生长和代谢活动。

食用菌液体菌种研究现状及发展趋势作者：隋新悦来源：《知识文库》2017年第06期说到食用菌，对于我们每个人来说都并不陌生，菌种的培育和制作为食用菌产业的发展做出了巨大的贡献，其中液体菌种的培育时间比较短，菌丝生长的速度较快，已经被很多食用菌生产企业所使用，本文将针对食用菌液体菌种的研究发展现状展开讨论，探索未来液体菌种制作的发展趋势，旨在可以促进我国食用菌培育产业得到更好的发展。

前言：我国的人口基数较大，每年对于食用菌的消费需求量也在不断增多，过去那种老旧的食用菌固体菌种培育方式，已经无法满足社会对与食用菌供应量的要求，而液体菌种的制作有着接种方便，菌株生长统一的特点，被越来越多的食用菌生产企业所接受。

一、食用菌液体菌种的研究现状目前我们国家主要的食用菌菌种有平常可以见到的香菇、杏鲍菇、平菇还有木耳，金针菇等，不过关于食用菌的液体菌种制作要求比较高，受到生产条件的影响比较大，液体菌种的培育制作还有待于进一步的创新和发展。

（一）制作设备同食用菌的固体菌种制作相比，液体菌种的制作相对来说要复杂许多，我国学者经过了多年的液体菌种培养以后发现，拥有一套良好的液体菌种培育设备能够大幅度提升食用菌菌种的培育效果，也就是说液体菌种制作设备的空气过滤净化装置要好，要有能够灵活调节温度的控制系统，还有菌种培育的快速冷却系统，有整套的停电保护设计，由菌种培育的耐高压加工罐体构成液体菌种培育的主体部分，在进行袋料接种的时候，必须在非常严格的无菌环境下进行制作，保证整个栽培袋不会受到任何的细菌污染。

（二）制作工艺就我国目前的食用菌液体菌种的培育制作发展现状来看，一般将液体菌种的培养分为两种方式，分别是原种培育和栽培种培育，其中原种培育是将液体培养的菌种当作是中间种，再接到栽培种上面进行培育，进而形成一种固体的栽培种，通常颗粒型的蘑菇培育大多采用这种原种的制作工艺。

而栽培种培育主要指的是将液体菌种直接培育而形成的食用菌实体，在栽培料上直接生成，人们经常吃的金针菇还有平菇，都属于栽培种制作的培育方式，由此可以看出，选择液体菌种作为原种进行培育，或是作为栽培种进行培育制作，是根据食用菌种类的不同来决定的，不同的菌种要选择不同的培育方式。

一、实验目的1. 探究不同培养基配方对香菇液体菌种生长的影响。

2. 确定适合香菇液体菌种培养的最佳培养基配方。

3. 优化香菇液体菌种培养条件，提高菌丝生长速度和产量。

二、实验材料1. 供试菌株：香菇0912，由河北工程大学园林与生态工程学院食用菌研究室保藏。

2. 培养基配方：- 配方1：土豆200 g，KH2PO4 3 g，葡萄糖20 g，MgSO4 1.5 g，维生素B0.01 g- 配方2：土豆200 g，葡萄糖20 g，蛋白胨5 g，KH2PO4 2 g，MgSO4 1 g- 配方3：土豆200 g，葡萄糖20 g，豆粕5 g，KH2PO4 2 g，MgSO4 1 g- 配方4：土豆200 g，葡萄糖20 g，玉米粉5 g，KH2PO4 2 g，MgSO4 1 g3. 培养设备：摇床、高压蒸汽灭菌器、三角瓶、无菌操作台等。

三、实验方法1. 液体培养基制备：按照配方称取各成分，溶解于1000 mL去离子水中，调节pH至6.0，分装于三角瓶中，121℃灭菌30分钟。

2. 接种：在无菌操作台中，用接种针将保藏的香菇0912菌种接种于各培养基中，接种量约为菌种总体积的10%。

3. 摇床培养：将接种后的三角瓶放入摇床中，设置转速为150 rpm，在25℃条件下培养。

4. 观察与记录：每隔24小时观察菌丝生长情况，记录菌丝生物量、菌丝生长速度等指标。

四、实验结果与分析1. 不同培养基配方对香菇液体菌种生长的影响：- 从实验结果来看，配方1的菌丝生物量最高，为1.828 g/100 mL，其次是配方2、配方3和配方4。

- 配方1的菌丝生长速度最快，说明土豆、葡萄糖、KH2PO4、MgSO4和维生素B 对香菇液体菌种生长具有较好的促进作用。

2. 最佳培养基配方的确定：- 综合考虑菌丝生物量和生长速度，确定配方1为最佳培养基配方。

3. 香菇液体菌种培养条件的优化：- 通过实验，确定香菇液体菌种培养的最佳条件为：温度25℃，转速150 rpm，培养时间7天。

草菇高效栽培技术之优质高效栽培技术草菇是一种高蛋白、低脂肪的食用菌类，深受广大消费者的喜爱。

然而，由于传统的栽培方式存在效率低、产量不稳定等问题，如何寻找一种优质高效的草菇栽培技术成为了当前的研究热点。

本文将就草菇的优质高效栽培技术进行探讨。

一、土壤调理与基质制备草菇栽培的第一步是土壤调理与基质制备。

优质高效的草菇栽培技术需要选用富含有机质、养分丰富、排水性良好的土壤作为基质。

常见的基质材料包括稻草、麦秸、玉米秸秆等，这些材料在栽培过程中可以提供菌丝的营养需求，促进草菇的生长和发育。

二、菌种选择与接种优质高效的草菇栽培离不开优质的菌种选择与接种。

在选择菌种时，应该注重选择抗病性好、菌丝生长迅速、产量高的优质菌株。

同时，在接种的过程中要严格控制接种量和接种时间，以保证菌丝的均匀分布，提高产量和品质。

三、湿度和温度控制草菇的生长和发育需要适宜的湿度和温度条件。

在栽培过程中，应进行合理的湿度控制和温度调节。

一般来说，草菇的生长适宜温度为20-26摄氏度，相对湿度为80%-90%。

通过增加喷雾、覆盖湿度调节膜等方式，可以有效调控湿度；而通过通风换气等手段，可以调节温度，避免温度过高或过低对草菇生长的不利影响。

四、养分供给与肥料施用草菇的养分供给与肥料施用是优质高效栽培的重要环节。

草菇对氮、磷、钾等主要养分需求较高，因此施用适量的有机肥或无机肥料可以增加土壤肥力，提高草菇的产量和品质。

另外，还可以适当添加一些辅助元素，如锌、铁、硒等，以提高草菇的营养价值。

五、病虫害防治在草菇栽培过程中，病虫害是常见的问题。

为了提高草菇的产量和品质，需要加强病虫害的防治工作。

可以采用合理的病虫害防治措施，如合理使用农药、控制菌床湿度、加强病虫害的监测和防控等，以减少病虫害对草菇产量和品质的影响。

综上所述，草菇的优质高效栽培技术是通过合理的土壤调理与基质制备、优质菌种选择与接种、湿度和温度控制、养分供给与肥料施用以及病虫害防治等一系列措施来实现的。

Edible and medicinal mushrooms 2016，24（2）：100～103香菇液体菌种深层培养工艺研究刘世玲1唐悦2尚东妮2江坤2曹现涛2李克彬1田少平2*（1. 宜昌市农业科学研究院，湖北宜昌 443000；2. 湖北五林中地农业科技有限公司，湖北宜昌 443000）摘要目的：在香菇液体菌种培养基筛选、50 L培养罐及500 L培养罐工艺试验的基础上，探索10 m³培养罐培养工艺。

试验结果：培养液3 h溶氧开始下降，4 h pH开始降低，102 h菌丝球固形物体积达67.7%。

结论：运用500 L培养罐作为种子罐，可显著缩短香菇菌丝在培养罐中的适应时间；香菇液体菌种深层培养在24 ℃，溶氧90%～98%，搅拌速率120 rpm条件下比较适宜；最佳接种时间为80～130 h，接种量为每个接种孔10 mL。

关键词香菇；液体菌种；培养；工艺中图分类号：S646 文献标识码：B 文章编号：2095-0934（2016）02-100-04 Research on submerged culture technology of liquid spawnof Lentinula edodesLiu Shiling1 Tang Yue2 Shang Dongni2 Jiang Kun2Cao Xiantao2 Li Kebin1 Tian Shaoping2（1. YiChang Academy of Agricultural Sciences, Yichang Hubei 443000；2. HuBei WuLin Land Agricultural Science & Technology CO., LTD, Yichang Hubei 443000）Abstract Objective: Research the submerged culture technology of liquid spawn of Lentinula edodes with 10 m³ volume fermenter based on the media and technology of 50 L and 500 L volume fermenters. Results: pH began to decline at 4 hours after inoculating; dissolved oxygen tension began to decline at 3 hours after inoculating; the volume ratio of mycelia reached 67.7% at 102 hours after inoculating. Conclusions:The risk of contamination could be reduced effectively by inoculating with sterile culture and 500 L volume fermenter which has been patented ; the proper condition for submerged culture of L.edodes spawn was 24 ℃, dissolved oxygen tension between 90%～98%, agitation speed 120 rpm; the optical inoculating period was 96～144 hours, inoculation volume was 10 mL.Key words Lentinula edodes; liquid spawn; culture; technology据统计，目前我国的香菇产量约占世界香菇总产量的70%，香菇产业关系到国家食用菌产业的整体水平。

香菇液体菌种培养过程中几个生理指标的变化规律研究1 香菇液体菌种的培养过程香菇是一种高产、经济价值高的食用菌，其液体菌种制备技术已得到广泛应用。

液体菌种的制备是利用香菇菌丝体外生长和代谢能力，选择合适的培养基，进行发酵所得。

香菇液体菌种的制备包括生产菌丝，发酵液种和大比例的发酵液。

液体菌种制备的过程中，需要对几个生理指标进行监测，以便掌握生长情况，为下一步的培养提供数据支持。

2 溶解氧指标的变化规律溶解氧是液体菌种培养中重要的生理指标之一。

随着菌种的生长和代谢，溶解氧指标会变化。

在发酵开始时，菌丝体较少，溶解氧的含量较高。

在进入菌丝快速生长期时，菌丝体积增加，代谢强度增强，氧耗增大，导致溶解氧含量迅速下降。

当菌种进入平衡期，菌丝体积开始趋于稳定，代谢强度减弱，溶解氧含量也随之趋向平稳，但仍较菌种生长初期略低。

3 pH值变化规律菌种培养过程中，菌株产生的代谢产物和有机酸等会使菌种的pH值下降。

不同培养时间内，pH值的变化规律略有差异。

在发酵初期，pH值较高，随着菌株的生长，pH值逐渐下降，因菌株产酸增多。

随着菌丝体积的逐渐增高，产酸量也随之增加。

当菌种进入平衡状态时，可能出现pH值接近临界值的情况，需要进行相应的调节。

4 生长速率变化规律香菇液体菌种的生长速率与其它生理指标密切相关。

在发酵初期，菌种生长速率较慢，可增量较小。

随着菌丝体积的逐渐增加，菌种生长速率也逐渐加快。

当菌种进入平衡状态时，菌体生长速率明显下降。

因此，掌握液体菌种的生长速率的变化规律，能够更好地指引生产过程，提高液体菌种的生产效率。

5 总结香菇液体菌种的培养过程中，会受到多种因素的影响。

溶解氧指标、pH值和菌体生长速率三项生理指标，是掌握液体菌种生长情况的重要参数。

不同阶段的监测，能够对原料、发酵设备的运维以及后续生产过程进行更好地指导，有助于提高液体菌种生产效率和质量。

香菇液体菌种发酵条件的优化
张贺迎;耿立朵;武金霞
【期刊名称】《食用菌》
【年(卷),期】2017(0)6
【摘要】对香菇ZHX-1液体培养得到的菌丝球和胞外多糖含量的影响因素进行了试验.在单因素试验的基础上,采用正交试验设计,结果表明,最佳液体发酵条件为玉米粉21 g/L,酵母膏5 g/L,KH2PO41 g/L,MgSO40.5 g/L,pH4.5,培养温度25℃,摇床转速150 r/min,接种量8.5%,装液量100 mL/250 mL,培养7 d,增菇激活酶的添加量0.2%.在此优化条件下,香菇菌丝球的生物量为2.54 g/L,胞外多糖的含量为2.34 g/L.
【总页数】5页(P16-19,24)
【作者】张贺迎;耿立朵;武金霞
【作者单位】河北大学生物技术研究中心,河北保定071002;河北大学生命科学学院,河北保定071002;河北大学生命科学学院,河北保定071002
【正文语种】中文
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肖扬
5.香菇液体菌种培养基及摇瓶培养条件优化 [J], 谢婷;何娟;张顺凯;焦海涛;边银丙;肖扬
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不同液体培养条件对灵芝菌丝生长的影响慕春歌【期刊名称】《鲁东大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2016(32)4【摘要】To further explore the fermentation conditions of Ganoderma lucidum, the effects of various glucose contents,temperatures and culture volumes were determined during the liquid culture process of Ganoderma lu-cidum. The results showed that different glucose contents worked differently at different times,and the optimal culture conditions were 28℃ and 150~180 mL media in 500 mL flask. In addition,the variation of reducing sugar in the liquid culture process was also studied. The dynamic changes of pH,DO and the mycelia densities in the submerge fermentation were also determined.%为了进一步摸索灵芝发酵条件,本试验测定了不同液体培养条件(葡萄糖浓度、培养温度、摇瓶装液量)对灵芝生长的影响。

结果表明,液体培养体系中不同葡萄糖浓度随时间的延长对菌丝生长有不同的影响,培养最适温度为28℃,最适摇瓶装液量为150~180 mL(500 mL三角瓶)。

同时,还测定了摇瓶培养过程中培养基还原糖含量的变化,并通过发酵罐试验研究了灵芝深层发酵过程中pH 值和DO值的动态变化和菌丝密度的变化。