下载文档原格式
人参膏的做法在生活当中都特别的注意，吃一些中药来滋补身体，因为现在大多数的人体质都不是很好，偏差的体制会让我们在生活当中很难混下去，所以这个时候大家，希望去吃一些能对身体有调理作用的食物，关于人参膏的制作方法有哪些呢，来学一学制作的技巧和方式。
人参膏【药物组成】人参1两，白术半两，丁香半两，藿香半两，白扁豆1分。
【制备方法】上为细末，炼蜜为丸，如绿豆或麦粒大。
1.开水冲服，每天2次每次3克，饭后半小时服用2.煲汤时可放入5-10g滋补全家3.可以作为面膜使用，美白润肤，祛斑。
【附注】本方方名，据剂型当作"人参丸。
"用人参10两细切，以活水20盏浸透，装入银石器内，桑柴火缓缓煎取10盏，滤汁后放在一边。
在渣里再加水10盏，煎取5盏，合煎成膏，用于瓶子收藏，随后做汤使用。
人参膏简介:人参膏是把新鲜的人参熬制后而形成。
由于熬制后所剩均为人参的精华，所以又名人参精华，其功效是普通人参的7-8倍。
因服用方便，深受广大朋友的喜爱.人参适合人群：1.适宜身体虚弱者、气血不足者、气短者、贫血者、神经衰弱者。
2.实热证、湿热证及正气不虚者禁服。
人参食疗作用：人参味甘、微苦，性微温，归脾、肺、心、肾经，气雄体润，升多于降；具有补气固脱，健脾益肺，宁心益智，养血生津的功效；主治大病、久病、失血、脱液所致元气欲脱，神疲脉微；脾气不足之食少倦怠，呕吐泄泻；肺气虚弱之气短喘促，咳嗽无力；心气虚衰之失眠多梦，惊悸健忘，体虚多汗；津亏之口渴，消渴；血虚之萎黄，眩晕；肾虚阳萎，尿频，气虚外感。
人参食物相克：人参不宜与茶同服，反黎芦，畏五灵脂，恶皂荚、卤碱，黑豆，动紫石英。
人参膏制作方法人参膏是一种传统的中药制剂，以人参为主要原料，通过浸泡、研磨、加热等工艺制作而成。
人参膏具有补血益气、健脾开胃、提神醒脑等功效，对于调节体质、缓解疲劳有一定的作用。
本文将分享一种简单易行的人参膏制作方法，希望对您有所帮助。
材料准备•人参：选购新鲜的人参，质地坚实、色泽红润，最好选择3-5年的人参。
•水：适量，约为人参的5倍。
制作步骤1.将人参清洗干净，切成小块或者片。
2.将切好的人参放入容器中，加入适量的水，水量约为人参的5倍。
3.将容器盖好，放置在室温下浸泡24小时。
这个过程中，人参膏会逐渐浸泡出来。
4.将浸泡好的人参放入研磨机中，搅拌成细膏状。
如果没有研磨机，可以用刀将人参磨成细膏。
5.将搅拌好的人参膏倒入炒锅中，加热至水分蒸发，膏状物开始变得浓稠。
6.转小火，不断搅拌煮制，直到人参膏呈现出粘稠状，不粘锅为止。
7.将煮好的人参膏静置冷却，放入密封容器中保存即可。
注意事项•人参的选择：优质的人参质地坚实、色泽鲜红，且多为较长的须根，贫瘦呈圆锥形。
最好选择3-5年的人参，因为这个年限的人参含有丰富的活性成分。
•水的比例：人参的浸泡水量约为人参的5倍，这样可以充分提取人参的有效成分。
•炒制的火候：炒制人参膏时要注意火候，避免过高温度导致人参膏煮焦。
建议使用小火慢慢煮制，以充分挥发水分，使人参膏达到浓稠的状态。
使用方法•每次服用人参膏约15-20克，可直接食用或加入热水中冲泡。
•最佳服用时间为早晨空腹或睡前1小时。
•每天服用一次，坚持使用一段时间能够更好地发挥人参膏的功效。
注意事项•人参膏性质较温热，体质虚寒者不宜多服或低剂量使用。
•若出现过敏反应或不适症状，应立即停止使用并就医。
结语以上就是制作人参膏的方法，人参膏是一种传统的中药制剂，具有多种功效。
通过以上步骤，您可以在家中轻松制作出人参膏，但在使用时仍需注意适量使用和注意事项。
希望这个方法对您有所帮助，祝您健康！。
中药护肤品制作方法（中药护肤配方制作）人参如何制作护肤品1、接下来，我们需要准备一个大碗或容器。
将切好的人参放入碗中，然后加入适量的水。
记住，水的温度也很重要。
一般来说，使用温水会更有利于提取人参中的有效成分。
所以，在制作过程中，我们可以将水加热到适当的温度。
2、自制中药美容面膜人参润肤面膜：材料与做法：人参、当归、桔梗、玄参、白芨磨成粉末，加上天花粉、上好珍珠粉等调成。
3、方法：将人参珍珠母粉加入蜂蜜。
再加入椰汁，使其具有可涂抹性，但这种面膜不能过稀，用面膜刷将面膜均匀地涂抹在皮肤上，让其发挥25分钟效应后，用温水将其洗净，最后搽上护肤霜扑上人参珍珠母粉进行保养。
4、只要家里具备人参这种原材料就可以把它碾成细末状，与温开水直接调和，适当的加入一点蜂蜜或者柠檬汁，这也要看人们具体的爱好与及使用方法。
5、人参粉是有很多用途的，生活中不少人拿来护肤。
人参粉怎么做面膜？人参粉面膜有什么功效？人参粉怎么做面膜入参面膜(外敷) 取新鲜人参洗净，切作小块，捣如烂泥后用来外敷。
6、雪花秀人参面霜使用方法雪花秀人参面霜怎么用早晚使用于滋阴乳液后，取适量轻柔地涂抹于脸部和颈部，然后用手指轻轻按压，帮助肌肤吸收有效成分。
如要上妆，待完全吸收后进行效果更佳。
如何自制中药美白面霜和晚霜1、我们需要加入适量的香精和防腐剂。
香精可以给产品增添一种令人愉悦的香气，而防腐剂可以延长产品的保质期。
根据个人喜好和需要，选择适当的香精和防腐剂添加到容器中，并再次进行充分搅拌。
2、平时加蜂蜜牛奶调面膜效果也很好，我现在就在用。
3、制法：先把白茯苓磨成粉状（可以请药材铺帮你磨粉），把两汤匙白茯苓粉混入两茶匙蜜糖内，搅匀成糊状。
用法：把糊状的“美白面膜”厚厚及均匀地涂在面上（避开眼部四周），敷20分钟。
用温水把面洗净即可。
每周做2-3次。
4、自制中药护肤品一：杏仁美容膏杏仁、云母粉各100克，滑石粉200克，白芷50克，蜂蜜适量。
将以上材料都打成粉末调匀，用的时候取适量与蜂蜜调成软膏即可。
中药美容改善肌肤松弛的秘方现代社会的快节奏生活，加上环境污染和生活习惯等因素的影响，使得许多人的肌肤逐渐出现松弛、无弹性的现象。
中草药作为中医美容的重要组成部分，具有独特的优势和疗效，可以帮助改善肌肤松弛的问题。
本文将介绍几种常见的中药美容秘方，帮助您恢复紧致、有弹性的肌肤。
一、参芪保湿面膜配方：人参粉2克、黄芪粉2克、蜂蜜1茶匙、面粉适量方法：将人参粉、黄芪粉和蜂蜜混合，加入适量的面粉调成糊状。
洗净面部后，将调配好的面膜敷在面部，静置15-20分钟后用清水洗净。
作用：人参和黄芪具有收敛肌肤、提升肌肤弹性的功效，蜂蜜能够保湿滋润肌肤，面粉则起到稠定面膜的效果。
经常使用该面膜能够改善肌肤松弛问题，使肌肤更加紧致有弹性。
二、红枣熬粥配方：红枣20克、黑米50克、莲子30克、百合20克、水适量方法：将红枣、黑米、莲子和百合洗净，加入适量的水熬煮成粥状。
每天早晚空腹食用一碗。
作用：红枣具有滋补肌肤、增加肌肤弹性的功效，黑米、莲子和百合富含胶原蛋白和维生素E，能够促进皮肤的新陈代谢，减少肌肤松弛现象出现，使肌肤更加紧致有光泽。
三、白鲜敷脸配方：白鲜膏适量方法：将白鲜膏涂抹于洁净的面部，轻轻按摩至吸收。
每周使用2-3次，持续使用一个月以上。
作用：白鲜膏是一种中草药配方，能够渗透皮肤有效改善松弛的肌肤。
白鲜膏含有丰富的维生素C和天然植物精华，能够提高肌肤弹性和紧致度，使肌肤恢复紧致有弹性，延缓肌肤衰老。
四、参芪养颜汤配方：人参5克、黄芪10克、枸杞10克、红枣10克、水适量方法：将人参、黄芪、枸杞和红枣洗净，加入适量的水煮沸后改小火炖煮15-20分钟。
每周饮用1-2次，连续饮用一个月以上。
作用：该养颜汤具有补益气血、提升肌肤弹性的功效。
人参和黄芪能够增加肌肤的紧致度，枸杞和红枣则能够滋补肌肤，使肌肤更加饱满有弹性。
中药美容改善肌肤松弛问题，是一种安全有效的方法。
以上介绍的几种中药美容秘方，都是通过中草药的独特功效来帮助肌肤恢复紧致、有弹性。
人参膏的制作方法简介人参膏是一种常见的中药制剂，以人参为主要原料制作而成。
人参膏具有补气养血、强身健体的功效，是许多人喜爱的滋补品。
本文将介绍人参膏的制作方法。
原料准备下面是制作人参膏所需的原料：•人参：150克•红枣：50克•枸杞：20克•蜂蜜：适量制作步骤1. 准备材料按照上述原料准备好所需材料。
2. 洗净人参将150克的人参用清水冲洗干净，去掉表面的土壤和杂质。
3. 蒸煮人参将净洗的人参放入蒸锅中，加入适量清水，然后盖上锅盖，用中火蒸煮30分钟。
4. 准备红枣和枸杞在人参蒸煮的过程中，可以准备红枣和枸杞。
将50克的红枣洗净，去掉核，然后用刀切成小块。
将20克的枸杞用水浸泡10分钟。
5. 熬制人参膏当人参蒸煮好之后，把它捣碎成泥状。
然后将人参泥放入锅中，加入适量的清水，再加入红枣和枸杞。
6. 煮沸将锅中的人参泥、红枣和枸杞放在火上煮沸，然后转小火慢慢煮熬。
煮至水分减少，形成糊状。
7. 加入蜂蜜在熬制好的人参膏中加入适量的蜂蜜，用小火继续搅拌均匀。
8. 冷却将制作好的人参膏倒入容器中，待其冷却后盖上盖子。
储存与服用制作好的人参膏可以保存在冰箱中，保鲜期一般约为1个月。
每天早上空腹服用一勺人参膏，可以直接食用或者配合开水稀释后食用。
注意事项•孕妇和儿童不适宜食用人参膏，因其性偏温热，容易上火。
•人参膏适量食用，不宜过量，以免引起不适。
•存放人参膏时，注意密封并放置在阴凉干燥处。
以上就是制作人参膏的方法，希望能对您有所帮助。
享用美味的人参膏，愿您身体健康、气血充盈！。
七白膏的美白作用
全雪莲;张广中
【期刊名称】《吉林中医药》
【年(卷),期】2015(035)002
【摘要】古代医家非常重视颜面皮肤美容的外治法,并且留下了许多珍贵的美容美白方及丰富的中医美容相关治法理论,据有文字记载起,可追溯至两千年前,而现代在中医理论的指导下外用中医美容美白方药收到了较好的疗效,可安全而有效地改善皮肤色泽和质地,其机理逐步被现代药理所证明.七白膏作为爱美女性喜爱的美白方之一,时至今日,各种美白产品中也有它的影子,为了正确评价七白膏外用美白的疗效,并对七白膏的临床应用及相关产品研发提供有益的参考.
【总页数】3页(P167-169)
【作者】全雪莲;张广中
【作者单位】首都医科大学附属北京中医医院,北京 100010;北京中医药大学,北京100029;首都医科大学附属北京中医医院,北京 100010
【正文语种】中文
【中图分类】R289.1
【相关文献】
1.七白挺子膏变方与原方美白保湿疗效对比研究 [J], 周盈;张健真;雷明;刘仁重;祁雄飞
2.七白膏及改良处方美白功效的实验研究 [J], 王冬艳;华欣;季琰;李芹;江秀玲
3.响应面法优化林蛙皮-人参美白保湿膏的基质配方 [J], 衣铭慧;孙志双;施溯筠
4.复合美白剂OCH的美白作用及在牙膏中的应用 [J], 陈敏珊;李毅苹
5.复合美白剂OCH的美白作用及在牙膏中的应用 [J], 陈敏珊;李毅苹
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
养生与健美方法-美容-几种润肤膏的自制（一）杏仁皮软膏：用杏仁皮五十克，蛋黄、甘油、酒精各十至十五克，加入樟脑油一滴，搅拌而成软膏。
有皱纹的正常皮肤直接用这种软膏擦脸。
皮肤干燥者，则先用橄榄油搽脸，然后每隔一分钟搽一层软膏，搽完三层之后停留十五分钟，用温水洗干净。
假如皮肤油性多，则软膏中的蛋黄改用蛋白，搽脸时，先用洗肤剂擦脸，然后抹上一层薄薄的软膏，过十至十五分钟后用棉签把脸擦干净。
（二）酵母润肤膏：用二十克酵母加水，过氧化氢、牛奶（或黄油）适量，和成浓膏，搽在脸上约十至十五分钟，用水洗去，再抹上一层羊毛脂软膏，这种润肤膏适用于多孔的较为粗糙的面部皮肤。
（三）水果和蔬菜润肤膏：这是用水果或蔬菜制成的软膏，例如柠檬软膏、草杨梅软膏、木瓜软膏、黄瓜较膏等等。
其制法是用水和甘油同某一种水果汁或蔬菜汁搅匀。
使用时，先在脸上搽一层，过十五分钟后再稍敷上一点香粉。
这种水果蔬菜软膏对各种类型的面部皮肤都适用。
特别值得一提的是，目前国外广泛使用黄瓜软膏，因为黄瓜有舒展皮肤、消除面部皱纹的特殊功效。
如何选择护肤润湿剂中性皮肤的人适宜选择水基型润湿剂，它以水为主要成分，在给皮肤补充水分的同时，所含的油又使水分能够保留在皮肤表面。
一些乳液类的润肤品都是水基型的润湿剂。
干性皮肤的人，可以使用油基型润湿剂。
它含油量高，足以补充干性皮肤的油脂，使表皮的水解脂肪膜形成，降低皮肤水分的散失。
一般来说，脂类的润肤品都是这种油基产品。
油性皮肤的人，选用只含少量或不含天然油的润湿剂比较好，这类润湿剂用合成成分取代天然油，其中还加进了调节皮肤油脂分泌的物质。
过敏性皮肤的人，应选用含油量高并掺进了保护性成分的润湿剂，以免引起皮肤过敏。
参白润肤膏的制备及质量评定作者：潘旭王梦昱宫凯敏刘军何其睿来源：《中国民族民间医药·下半月》2020年第10期【摘要】目的：研究參白润肤膏的处方和制备工艺，并通过稳定性留样评价对其工艺进行进一步优化。
方法：将不同处方的样品通过耐热、耐寒实验、长期稳定性实验进行质量对比评定，优选出最佳的工艺，并在临床进行志愿患者试用调查。
结果：优选出参白润肤膏的最佳处方为中药浸膏16 g，卡波姆2 g，山梨酸0.05%、乙醇3 g，甘油30 g，纯化水115 g，硬脂酸10 g，十八醇10 g，司班-60 3 g，白凡士林15 g，山茶油10 g，羟苯乙酯0.1%、当归挥发油0.5 g，三乙醇胺10g。
按照该处方制备的乳膏工艺稳定、成型性较好。
结论：优选的参白润肤膏处方质量稳定、可控，临床应用效果较好，可进一步深入研究临床疗效和中试规模生产。
【关键词】参白润肤;乳膏;制备工艺;质量评定【中图分类号】R285 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2020）20-0050-04Preparation and Quality Evaluation of Shenbai Moisturizing CreamPAN Xu WANG Mengyu GONG Kaimin LIU Jun* HE QiruiYinchuan Hospital of Traditional Chinese Medicine， Yinchuan 750001，ChinaAbstract：Objective To study the prescription and preparation process of Shenbai moisturizing cream， and to further optimize its process through the evaluation of stability retention.Methods Samples of different prescriptions were compared and evaluated for quality through heat resistance，cold resistance experiments， and long-term stability experiments， the best process was selected，and a trial investigation of volunteer patients was conducted in the clinic.Result The best prescription for choosing Shenbai moisturizing cream is traditional Chinese medicine extract 16 g， carbomer 2 g， sorbic acid 0.05%，ethanol 3 g， glycerin 30 g，purified water 115 g，stearic acid 10 g，Stearyl alcohol 10 g， Span-60 3 g，white vaseline 15 g，camellia oil 10 g，ethyl paraben 0.1%，angelica essential oil 0.5 g and triethanolamine 10 g.The cream paraben 0.22 g，angelica essential oil 0.5 g and triethanolamine 10 g.The cream prepared according to this prescription has a stable process and good in formability.Conclusion The optimal prescription of Shenbai moisturizing cream is stable and controllable， and its clinical application effect is good. It can further study the clinical efficacy and pilot scale production.Keywords：Shenbai Moisturizing Skin; Cream; Preparation Process; Quality Assessment参白润肤膏中所含浸膏的中药处方来源于银川市中医医院皮肤科胡艳君主任的经验方，组方有人参、当归、川芎、玫瑰花等药，具有活血化瘀、美白淡斑等功效，临床应用十余年，疗效确切，受到众多患者肯定，但也存在着使用不便的问题。
人参美容养颜秘方，皮肤减龄十岁！
人参富含多种人参皂苷、氨基酸、维生素及矿物质，极易被吸收，经常使用，肌肤可保持白净润泽，光泽柔嫩，不易生斑，抗皱美肤，延缓衰老等。
自古就是宫廷御用的美容极品。
人参具有补益与抗衰老的作用，活性物质可以抑制黑色素的生成，使皮肤洁白光滑。
研究表明人参皂苷大多具有明显的抗氧化作用，促进新陈代谢，清除自由基。
使肌肤保持光洁细腻人参中含有多种人参皂苷、氨基酸、维生素及矿物质，促进皮下毛细血管的血液循环，增加皮肤的营养供应，防止动脉硬化，调节皮肤水分平衡。
能延缓皮肤衰老，防止皮肤干燥脱水，增加皮肤的弹性，保护皮肤光泽柔嫩，防止和减少皮肤皱纹！人参富含人参皂苷，具有护肤、抗紫外线功能。
人参提取液具有很强的抑菌消炎作用，对妇女雀斑、褐斑、蝴蝶斑及老年皮肤色素沉着疗效显著赵老从汉唐古方中选用护肤极品人参、当归、珍珠、甘草、灵芝、马齿苋、红花等组方，用现代科技从天然中药材中萃取精华。
既解决内部问题，也解决外部问题，效果立竿见影！每天临睡前敷一片，连敷3天，肌肤缺水，晦暗长斑，毛孔粗大，松弛干燥等问题即可改善。
然后每隔一天用1片，连敷一月，以上症状改善甚大！长期使用，这些珍贵药材的芳香物质，经过新陈代谢，将香气从身体散发出，从而产生淡淡的体香。
林蛙皮中透明质酸含量分析
姜大成;修伟晶;刘丹
【期刊名称】《吉林中医药》
【年(卷),期】2013(033)008
【摘要】目的分析林蛙皮中透明质酸(HA)的含量,为相应产品开发做实验基础.方法利用水提醇沉法提取林蛙皮粗品,采用紫外-可见分光光度法分析透明质酸的含量.结果林蛙皮透明质酸粗品提取率为1.47％,林蛙皮中透明质酸含量不少于0.383 5 mg/g.结论林蛙皮来源广泛,成本较低,可作为美容保健产品的原材料.
【总页数】2页(P816-817)
【作者】姜大成;修伟晶;刘丹
【作者单位】长春中医药大学,长春130117;长春中医药大学,长春130117;长春中医药大学,长春130117
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.响应面法优化林蛙蛙皮中蛋白质的提取工艺 [J], 侯召华;孙晓东;宁浩然;张宇;金春爱;崔松焕
2.陶瓷膜过滤在分离提取中国林蛙皮中透明质酸的应用研究 [J], 鲍悦;孙尚志;孙佳明;张辉
3.气相色谱/质谱法分析林蛙皮中的脂肪酸 [J], 祝洪艳;李洪波
4.基于聚类分析中国林蛙皮
不同时期多不饱和脂肪酸含量变化规律 [J], 汪卓明;孙敬蒙;张小雯;宁劲涛;辛宇;高文义
5.基于聚类分析中国林蛙皮不同时期多不饱和脂肪酸含量变化规律 [J], 汪卓明;孙敬蒙;张小雯;宁劲涛;辛宇;高文义
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
中国林蛙皮多糖类天然保湿因子的提取与鉴定
王大为;张艳荣;沙坤
【期刊名称】《吉林农业大学学报》
【年(卷),期】2002(024)006
【摘要】采用复合酶解法从中国林蛙皮中分离提取出天然保湿因子,并采用红外吸收光谱法对天然保湿因子进行了定性测试,采用咔唑(carbazole)法和Elron-Morgan法对天然保湿因子的含量及纯度进行了测定.结果表明:采用本研究方法分离、提纯的天然保湿因子为透明质酸(Hyaluronic acid,HA),其外观呈白色粉末状,葡糖醛酸含量43.2%,氨基葡糖含量39.7%,无臭、无味、无毒,具有强保湿性,可应用于保健食品、化妆品及眼科药物.
【总页数】5页(P99-102,106)
【作者】王大为;张艳荣;沙坤
【作者单位】吉林农业大学食品工程学院,吉林,长春,130118;吉林农业大学食品工程学院,吉林,长春,130118;吉林农业大学食品工程学院,吉林,长春,130118
【正文语种】中文
【中图分类】S966.35;Q53
【相关文献】
1.中国林蛙皮抗菌肽的提取纯化及抑菌活性检测 [J], 王战勇;李宁;苏婷婷
2.陶瓷膜过滤在分离提取中国林蛙皮中透明质酸的应用研究 [J], 鲍悦;孙尚志;孙佳明;张辉
3.天然保湿因子与保湿化妆品(一) [J], 虞瑞尧
4.天然保湿因子与保湿化妆品(二) [J], 虞瑞尧
5.乙醇沉淀法提取石榴皮中多糖类研究 [J], 周孟清;吕寻钊
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
响应面法优化高效美白霜功效成分配比陈丹;魏天宝;吴培诚;洪延涵;闻庆;刘卫【摘要】通过优化美白功效成分配比,为开发高效美白霜提供试验依据.以酪氨酸酶抑制率和自由基清除率为评价指标,通过响应面试验设计,优化不同美白功效成分的复合配比,制备高效美白霜.模拟最大化意愿预测结果,获得最佳的功效成分质量配比为m(α-熊果苷)︰m(光甘草定)︰m(Vc乙基醚)︰m(烟酰胺)=269.8︰2.23︰231.9︰104.5,此复配比例下的酪氨酸酶抑制率为95.81％,自由基清除率为86.17％.试验结果表明,用响应面法模拟预测的酪氨酸酶抑制率、自由基清除率与实测值重合性好,响应面法可有效应用于高效美白霜中功效成分配比的研究.【期刊名称】《香料香精化妆品》【年(卷),期】2019(000)004【总页数】8页(P65-71,76)【关键词】响应面设计法;高效美白霜;酪氨酸酶抑制率;自由基清除率【作者】陈丹;魏天宝;吴培诚;洪延涵;闻庆;刘卫【作者单位】武汉百思凯瑞生物科技有限公司,湖北武汉 430075;华中科技大学生命科学与技术学院,湖北武汉 430074;华中科技大学国家纳米药物工程技术研究中心,湖北武汉 430075;广东药科大学基础学院,广东广州 510006;武汉百思凯瑞生物科技有限公司,湖北武汉 430075;武汉百思凯瑞生物科技有限公司,湖北武汉430075;华中科技大学生命科学与技术学院,湖北武汉 430074;华中科技大学国家纳米药物工程技术研究中心,湖北武汉 430075【正文语种】中文由于工作、生活压力的增加和自然环境日趋恶劣，皮肤暗黄、色素沉着等不良症状越来越多见，因此，美白祛斑化妆品越来越受到人们的青睐。
皮肤中的黑色素含量决定了肤色的深浅，酪氨酸酶被视为黑色素合成过程中的关键酶与限速酶，抑制该酶活性直接影响黑素合成速率与数量[1]。
氧自由基可诱导皮肤角质层释放α - 黑素细胞刺激素等因子，从而促进黑素合成[2]。
林蛙皮、卵活性成分提取方法及药理作用的研究进展刘洋;赵鹤鹏;张扬【摘要】林蛙皮、卵中含有多种对人体有益的活性成分,对其深入研究有利于林蛙资源的综合利用.本文对林蛙皮、卵的主要活性成分提取方法及药理作用进行综述,为其在药品、保健品、化妆品等大健康领域的开发利用提供参考.【期刊名称】《吉林化工学院学报》【年(卷),期】2019(036)001【总页数】6页(P15-20)【关键词】林蛙皮;林蛙卵;活性成分;提取方法;药理作用【作者】刘洋;赵鹤鹏;张扬【作者单位】吉林化工学院化学与制药工程学院,吉林吉林132022;吉林化工学院党政办公室,吉林吉林132022;吉林化工学院化学与制药工程学院,吉林吉林132022【正文语种】中文【中图分类】R931.6中国林蛙(Rana chensinensis)又称哈士蟆，主要生长在我国吉林、辽宁和黑龙江三省，现已形成规模化养殖，是一种集食药用于一身的经济蛙种[1,2].林蛙油是雌性林蛙的干燥输卵管，具有补肾益精、养阴润肺等功效，是一种补益类传统中药材，1985年收录中国药典至今[3].由于林蛙油市场价格昂贵，多数养殖户是为了获取林蛙油，在取油同时，多数林蛙皮和卵作为废物白白丢弃.近年来，研究人员发现林蛙皮、卵同样富含多种活性成分，具有广泛的药理作用，这引起了广泛关注，对其研究也逐渐深入.本文综述了林蛙皮和卵的主要成分和药理作用，为进一步开发提供参考.1 活性成分提取方法1.1 蛋白郑淼等[4]利用羟脯氨酸法提取林蛙皮中胶原蛋白，在温度37 ℃，胃蛋白酶30 mg条件下浸提72 h后，经盐析、透析和真空冷冻干燥，得林蛙皮胶原蛋白，收率15%，蛋白含量54.1%.吕玲玲等[5]利用木瓜蛋白酶提取林蛙皮中胶原蛋白，在pH 5.5，料液比120，加酶量1%，室温条件下浸提36 h，林蛙皮胶原蛋白提取率为 24.71%，纯度72.03%.相比于羟脯氨酸法，木瓜蛋白酶辅助提取法的得率和纯度都有所提高，可作为林蛙皮胶原蛋白的制备方法.李永政等[6]对东北林蛙卵蛋白的酶解工艺和抗疲劳活性进行了研究.结果表明，在pH 8.0，温度55 ℃，料液比 15.5(m/V)，加酶量3 000 U/g条件下提取5 h，所得粗产品中蛋白质的含量为80.07%.在抗疲劳试验中，林蛙卵酶解物可显著延长小鼠负重游泳时间、降低血乳酸含量，显示良好的抗疲劳作用.季晓枫等[7]应用响应面法优化酶法制备林蛙卵蛋白.研究表明，在pH 8.8，温度58 ℃，料液比15，加酶量1.9%的条件下浸提4 h，林蛙卵蛋白提取率为9.63%.陶凤云等[8]对林蛙卵蛋白进行分离纯化，得到一种具有选择性细胞毒性的小分子核糖核酸酶，为肿瘤的治疗提供了新的候选蛋白分子.1.2 多糖Wang等[9]采用响应面法优化提取林蛙皮多糖，在温度100 ℃，料液比160，提取时间4.96 h，多糖得率2.03 0.14%，经分离纯化得到RCSP Ⅱ，该组分具有较强的体外抗氧化活性.酶辅助提取是是制备天然多糖的重要手段之一，赵玉红等[10]应用超声波-双酶法提取林蛙皮多糖，在料液比140(g/mL)，功率600 W条件下提取25 min，多糖得率1.18%.在此基础上，在pH 9.0，温度45 ℃，碱性蛋白酶添加量2.3%，胰蛋白酶添加量2.8%条件下酶解4 h，多糖得率升至2.286%.陈大勇等[11]应用木瓜蛋白酶从林蛙卵中提取多糖，并对其抗氧化活性进行研究.在pH 6.0，料液比120(g/mL)，酶添加量70 mg/g的条件下浸提2.5 h，林蛙卵多糖提取率2.67%，该条件下得出的林蛙卵多糖对DPPH自由基的半数清除率为1.81 mg/mL，说明其具有明显的抗氧化作用.1.3 生物活性肽生物活性肽是一类分子量小于6 000 Da，且具有特殊生理和生化功能的肽类化合物[12].许多来自两栖动物皮肤的抗菌肽已被分离、纯化并进行了结构表征，为新型药物的研究提供了思路.林蛙皮肤分泌物中含有大量的生物活性肽，Zhang等[13]从林蛙皮中分别得到了酸法提取物(ARPs)和酶法提取物(ERPs)，通过UV、FT-IR、HGLC、MS、MTS和流式细胞技术等方法对两者的理化性质进行了鉴定，并对其促增殖和抗凋亡作用进行了研究.结果表明，ARPs和ERPs的提取率分别为0.65%和0.52%；ARPs(1.6 g/L)和ERPs(0.8 g/L)抗HACAT细胞的增殖率分别为1.6倍(P<0.001)和2.1倍(P<0.001)；在UVB刺激下，细胞凋亡率分别下降2.6倍(P<0.001)和3.4倍 (P<0.001).杨闯等[14]比较了甲醇提取法、超声波辅助酶解法和超声波提取法制备林蛙皮生物活性肽，并对其抗菌活性进行研究.结果表明，超声波辅助酶解法提取效果较好，在加酶量为1.5 mg/g，温度40 ℃，提取时间4 h，提取率7.51%，且抗菌活性较高.Shang等[15]对来自林蛙皮肤分泌物的一种富含精氨酸/组氨酸的抗菌肽-香豆素缀合物进行了制备和的抗菌活性研究.结果表明，该缀合物具有选择性的抗菌作用，对革兰氏阳性菌有抑制作用，对阴性菌活性较差，安全性较高，对人红细胞无溶血作用.在此基础上，Shang等[16]研探索了林蛙蛋白肽的抗菌构效关系，发现：用5～6个赖氨酸取代α-螺旋亲水表面的中性和非极性氨基酸残基，提高其抗菌活性；用D-赖氨酸代替L-赖氨酸时，在保持净电荷和平均疏水性值的同时，对其抗菌活性影响较小，但能显著降低溶血活性. 1.4 透明质酸透明质酸是一种酸性粘多糖，对维持机体水分、保持皮肤水分有良好的效果.袁海恋等[17]利用Box-Benhnken中心组合设计原理和响应面分析法优化双酶水解法制备林蛙皮透明质酸的方法，在温度为50 ℃，加酶量55 000 U/g的条件下酶解14 h，透明质酸平均提取得率达27.683 9 mg/g.1.5 林蛙卵油林蛙卵油能抑制自由基的产生，降低高脂血症血清胆固醇的含量和过氧化脂质含量，能够有效预防心血管疾病[18].金莉莉等[19]将林蛙卵经石油醚和超临界CO2流体萃取制备林蛙卵油，并分析其中脂肪酸成分，研究表明，林蛙卵油中主要富含十六碳烯酸、亚油酸、油酸、二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸等.赵超等[20]应用微波辅助法提取林蛙卵油.将林蛙卵浸泡3.33 h后，在料液比19.82(g/mL)，微波功率600 W条件下微波30 min，提取率为20±0.67%.1.6 氨基酸李妍妍等[1]采用高效液相色谱法测定了林蛙皮、卵中氨基酸的种类与含量见表1.结果表明，林蛙皮中氨基酸总量高于林蛙卵，但林蛙卵中必需氨基酸含量高于林蛙皮.表1 林蛙皮、卵氨基酸含量(单位:g/100 g，色氨酸单位:mg/100 g)氨基酸AspThr∗SerGluProGlyAlaCysVal∗Met∗ Ile∗林蛙皮6.473.024.2810.395.9210.946.301.622.691.38 2.31林蛙卵 5.563.724.687.92 1.732.042.381.122.441.393.47氨基酸Leu∗TyrPhe∗His Lys∗ArgTrp∗氨基酸总量必需氨基酸量林蛙皮4.942.222.61 1.404.035.0430.4 75.5921.01林蛙卵5.093.432.16 2.153.563.5287.2 56.4521.922 药理作用2.1 蛋白林蛙卵蛋白具有抗疲劳和调节免疫的作用.张肃[21]等对东北林蛙卵蛋白的抗疲劳活性进行了研究.结果表明，东北林蛙卵蛋白对小鼠体重增长无显著影响，可降低运动后小鼠血乳酸含量，增加小鼠负重游泳时间及肝糖原含量.这表明，东北林蛙卵蛋白具有增加小鼠抗疲劳的活性作用.李永政[22]等分别口服给予小鼠林蛙卵蛋白和其酶解物，测定小鼠的负重游泳时间、肝糖原及血乳酸含量.结果表明，两者均能显著延长小鼠负重游泳时间，增加肝糖原含量，且酶解物在延缓疲劳和加速消除疲劳方面作用效果更明显，这说明，林蛙卵蛋白及其酶解物均有明显的抗疲劳功效，且酶解物作用更强.Shen等[23]研究了中国林蛙在冬眠前输卵管中c-kit受体的免疫反应，从林蛙卵中提取总蛋白进行Westernblotting分析.结果表明，在冬眠前期林蛙卵组织中检测到c-kit受体和PCNA的阳性信号，这说明c-kit受体可能在林蛙卵中起到免疫调节作用.2.2 多糖多糖提取物具有不同程度的清除超氧阴离子、羟基自由基和DPPH自由基的能力，由此判断林蛙皮具有一定的抗氧化功效[24].Wang等[25]对从中国林蛙皮中分离得到的多糖组分RCSPⅡ进行了表征及体内外抗氧化活性研究.结果表明，RCSPⅡ由葡萄糖、半乳糖和甘露糖组成，摩尔比为87.822.771.54，分子量为12.8 kDa.体外抗氧化活性测定表明，在2.5 g/L的浓度下，RCSPⅡ对DPPH自由基的清除率为75.2%；在4.0 g/L时，对亚铁离子的鳌和率为85.1%.体内抗氧化结果进一步表明，RCSPⅡ能提高抗氧化酶的活性，降低丙二醛的含量，提高D-半乳糖诱导氧化损伤小鼠肝脏和血清的抗氧化能力.2.3 生物活性肽生物活性肽具有一定程度的抗肿瘤，调节免疫和促进细胞增值作用.Temporin-1CEa是从林蛙皮分泌物中分离得到的一种抗菌肽，Wang等[26]采用MTT法、电镜观察、荧光染色和流式细胞术分析研究了Timein-1CEa对人乳腺癌细胞株Bcap-37的细胞毒性.MTT分析表明，Timein-1CEa暴露1 h可导致细胞迅速死亡，但对其是否存在浓度依赖有待进一步研究.电镜观察提示，Timein-1CEa暴露可导致Bcap-37细胞发生显著的形态学改变.荧光成像和流式细胞仪分析表明，Timein-1CEa具有以诱导细胞表面磷脂酰丝氨酸暴露为特征的膜破坏特性、质膜透性和快速跨膜电位去极化.这表明，Timein-1CEa通过膜破坏和线粒体参与的胞内机制，在Bcap-37细胞中触发了快速的细胞毒性.该发现有利于进一步研究抗菌肽在哺乳动物癌细胞中的作用机制.Wang等[27]进一步探讨了Timein-1CEa对两种人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和MCF-7的快速细胞毒作用机制.结果表明，Timein-1CEa暴露1 h，可导致细胞毒性，并与剂量成依赖性.电镜形态学观察表明，Timein-1CEa暴露1 h后，MDA-MB-231和MCF-7细胞均发生了明显的形态学改变.Timein-1CEa的膜破坏特性进一步表现为磷脂酰丝氨酸在细胞表面的暴露，提高质膜透性和快速去极化跨膜电位.此外，Timein-1CEa还可诱发细胞内钙离子和活性氧升高以及线粒体膜电位的紊乱.这说明，Timein-1CEa可快速引发乳腺癌细胞死亡，这种快速的细胞毒作用可能是由膜破坏和细胞内钙机制共同介导的. 巢警殳[28]等研究了林蛙皮活性肽对小鼠免疫功能的影响，将小鼠随机分为阳性对照组、空白对照组和低、中、高剂量组.结果表明，林蛙皮生物活性肽可明显促进Con A 诱导的淋巴细胞增值，增加抗体生成细胞数量，增强血清溶血素抗体效价水平，这说明林蛙蛙皮生物活性肽对小鼠的细胞免疫和体液免疫功能均具有增强作用.李俊峰[29]等研究发现，林蛙卵中含有的孕酮和雌二醇也具有调节人体内分泌，促进身体的生长发育的功能.张鑫等[30]研究了林蛙皮多肽对HaCaT 细胞增殖及其凋亡的影响.结果显示，在50 mg/mL～800 mg/mL浓度范围内，随着浓度升高，林蛙皮多肽对HaCaT细胞增殖作用效果增强；当浓度为800 mg/mL时，细胞凋亡率比正常对照细胞降低了(2.7±0.3)%(P<0.01)，说明林蛙皮活性多肽对HaCaT细胞的增殖有显著的促进作用，并对其凋亡有显著的抑制作用.Zhang等[31]制备了含有林蛙皮肽(RCSPs)的聚L-丙交酯(PLLA)/醇溶蛋白(Zein)纳米纤维垫.在电纺纳米纤维中加入RCSPs能显著改善材料的力学性能.人包皮成纤维细胞的细胞通透性实验结果表明，PLLA/Zein-RCSPs纳米纤维垫的细胞生长明显高于PLLA/Zein纳米纤维垫.结果表明，含RCSPs的纳米纤维垫有望成为创面敷料的候选材料.2.4 林蛙卵油彭飞[32]等采用离子对反相液相色谱-电化学检测法，以士的宁为致惊厥剂，评价林蛙卵油抗惊厥活性的时效和量效关系.结果显示，在灌胃给药30 min时其抗惊厥作用效果最好，且效果与剂量成良好的线性关系.佟岩[33]等对林蛙卵油的抗焦虑活性进行了研究.结果表明，林蛙卵油能显著延长大鼠在十字迷路开放通路中的连续停留时间，增加大鼠进入开放通路次数，而对封闭通路连续停留时间和进入封闭通路次数无明显影响，小鼠站立数明显减少而爬梯数无显著差异.苑春莉等[34]探究林蛙卵油对成年大鼠妇科内分泌激素水平的影响.结果显示，模型组子宫及卵巢重量明显低于正常组(P<0.001)，而林蛙卵油各剂量均可明显增加子宫及卵巢的重量(P<0.001)，高剂量组增加的最为明显；模型组卵巢体重比明显低于正常组(P<0.001)，而林蛙卵油各剂量均可明显增加卵巢体重比(P<0.001)，高剂量组增加的最为明显.这说明林蛙卵油可以发挥保护卵巢的作用，进而调节妇科内分泌功能.尹云厚等[35]探究了东北林蛙卵油脂肪酸的体外抗氧化作用和保湿作用.抗氧化试验结果表明林蛙卵油脂肪酸对DPPH自由基清除作用的IC50为5.08 mg/m L，最大清除率为95.91%，对ABTS+自由基清除作用的IC50为9.84 mg/mL，最大清除率为98.58，;对羟自由基清除作用的IC50为7.87 mg/mL.其还原力也随着林蛙卵油脂肪酸的溶液浓度的增加而增加.保湿性试验结果为0～12 h，林蛙卵油脂肪酸保湿性极显著低于透明质酸、甘油和1，2-丙二醇,而24 h时,其保湿性与甘油和1，2-丙二醇差异不显著，说明东北林蛙卵油脂肪酸具有持久的保湿效果.根据这两个性能，可以进一步将其应用到抗氧化和保湿型化妆品当中.沈雪等[36]研究表明林蛙油口服液在D-半乳糖诱导的氧化损伤模型小鼠体内具有良好的抗氧化的作用.2.5 核糖核酸酶林蛙卵核糖核酸酶具有抗肿瘤功效.赵丹玉等[37]从林蛙卵中提取RNase,并用酶谱分析进行鉴定，结果表明，林蛙蛙卵RNase对鼠S180肿瘤细胞株生长和淋巴细胞转化具有较强的抑制作用，并随着林蛙卵RNase浓度的增加，对S180肿瘤细胞生长率和淋巴细胞转化率的抑制作用随之增加，呈现剂量依赖性.说明林蛙卵RNase对S180肿瘤细胞的生长率和淋巴细胞转化率具有明显的抑制作用.2.6 黑色素吴世玉等[38]对林蛙卵黑色素的抗氧化活性实验表示.林蛙卵黑色素在紫外区域都有强烈的吸收，并且伴随波长的逐渐增加，吸光度呈现下降的趋势；元素分析表明林蛙卵黑色素的S∶N为0.05；红外光谱表明林蛙卵黑色素含有OH、NH2、C=C、C=N、C=O、C-N和苯环.体外抗氧化试验表明林蛙卵黑色素对DPPH自由基的IC50为0.404 mg/mL，对超氧阴离子的IC50为1.250 mg/mL，对羟自由基的IC50为0.662 mg/mL，这说明林蛙卵黑色素是真黑色素,并且具有较强的抗氧化活性.3 结论林蛙作为集食用药用为一身的经济动物，在我国已经显现出越来越大的价值.东北地区林蛙产量逐年递增，除了林蛙油外，林蛙皮、卵等同样具有很高的营养价值，然而由于深入开发不够，大多被白白浪费掉，不能发挥其最大价值.相信在不久的将来，随着对林蛙全身活性成分的深入探究，林蛙皮、卵的价值会被充分的利用，相信二者的同样具有巨大的开发前景.【相关文献】[1] 李妍妍,郑卫星,王昕,等.林蛙营养成分的多元分析[J].食品科学,2007,28(12):472-475.[2] 沈雪,崔浩,杨秀东,等.林蛙油水溶性蛋白质的制备与相对分子量测定[J].吉林化工学院学报,2016,33(9):11-14.[3] Zhang Y,Liu Y,Zhu K,et al.Acute Toxicity,Antioxidant,and Antifatigue Activities of Protein-Rich Extract from Oviductus ranae [J].Oxidative Medicine and Cellular Longevity,2018(21):1-14.[4] 郑淼,周亚丹,赵敏.东北林蛙皮中胶原蛋白含量的测定及提取工艺[J].东北林业大学学报,2008,36(7):81-83.[5] 吕玲玲,金香淑,施溯筠.林蛙皮胶原蛋白的提取及抗氧化性[J].食品研究与开发,2013(10):20-22.[6] 李永政,胡春晓,王铮,等.东北林蛙卵蛋白酶解工艺及其酶解物的抗疲劳活性[J].食品科学,2012,33(9):235-239.[7] 季晓枫,林凤,邱芳萍.响应面法优化水酶法提取林蛙卵蛋白[J].长春工业大学学报(自然科学版),2013,34(2):137-144.[8] 陶凤云,赵伟,林强,等.中国林蛙卵核糖核酸酶的分离纯化及其抗肿瘤作用[J].中国生物工程杂志,2010,30(5):103-109.[9] Wang Z,Zhao Y,Su T.Extraction and antioxidant activity of polysaccharides fromRana chensinensis skin[J].Carbohydr Polym,2015,115(115):25-31.[10] 赵玉红,赵小旭,姜晓青.超声波-双酶法协同提取林蛙皮多糖的工艺优化[J].食品工业科技,2012,33(11):230-234.[11] 陈大勇,杨靖,李硕,等.林蛙卵多糖的提取工艺及其抗氧化作用研究[J].西北农林科技大学学报(自然科学版),2013(12):149-154.[12] 侯召华,金春爱,孙晓东,等.蛙类皮肤生物活性肽的研究进展[J].食品科技,2013(5):260-264.[13] Zhang X,Cheng Y,Yang Y,et al.Polypeptides from the Skin ofRana Chensinensis Exert the Antioxidant and Antiapoptotic Activities on HaCaT cells[J].Animal Biotechnology,2017,28(1):1-10.[14] 杨闯,王俊玲,张传军,等.林蛙皮生物活性肽3种提取方法的比较研究[J].黑龙江畜牧兽医,2015(5):174-235.[15] Shang D,Wang C,Wei S,et al.Membrane interaction and antibacterial properties of chensinin-1,an antimicrobial peptide with atypical structural features from the skin ofRana chensinensis[J].Appl.Microbiol.Biotechnol,2012,96(6):1551-1560.[16] Shang D,Li X,Sun Y,et al.Design of Potent,Non-Toxic Antimicrobial Agents Based upon the Structure of the Frog Skin Peptide,Temporin-1CEb from Chinese Brown Frog,Rana chensinensis[J].Chemical Biology & Drug Design,2012,79(5):653-662.[17] 袁海恋,施溯筠.响应面法优化林蛙皮中透明质酸的提取工艺[J].食品工业科技,2016,37(8):196-200.[18] 张晶,胡春霞,王战勇,等.林蛙卵油的提取研究[J].氨基酸和生物资源,2008,30(1):10-12.[19] 金莉莉,王秋雨,娄虹,等.林蛙卵油脂肪酸组分的分析研究[J].食品科学,2004,25(10):232-234.[20] 赵超,叶海青,侯萍萍,等.微波辅助提取林蛙卵油的工艺优化及脂肪酸组成分析[J].食品科学,2017,38(22):263-268.[21] 张肃,胡春晓,金莉莉,等.东北林蛙卵蛋白抗疲劳活性研究[J].特产研究,2010,32(1):7-9.[22] 李永政,胡春晓,王铮,等.东北林蛙卵蛋白酶解工艺及其酶解物的抗疲劳活性[J].食品科学,2012(9):235-239.[23] Shen Y,Liu Y,Ma J,et al.Immunoreactivity of c-kit receptor protein during the prehibernation period in the oviduct of the Chinese brown frog,Ranachensinensis[J].Journal of Veterinary Medical Science,2012,74(2):209.[24] 薛冰,金在久,施溯筠.林蛙皮的抗氧化性研究[J].华西药学杂志,2010,25(4):431-433.[25] 苏玉春,陈光,郭会楠,等.林蛙卵黑色素的提取工艺及其抗氧化活性[J].西北农林科技大学学报(自然科学版),2017,45(2):196-202.[26] Wang Z,Zhao Y,Su T,et al.Characterization and antioxidant activity in vitro and in vivo of polysaccharide purified fromRana chensinensis,skin[J].Carbohydr Polym,2015(126):17-22.[27] Che W,Yang Z,Song L,et al.Anticancer mechanisms of temporin-1CEa,an amphipathic helical antimicrobial peptide,in Bcap-37 human breast cancer cells[J].LifeSciences,2013,92(20-21):1004-1014.[28] Wang C,Tian L L,Li S,et al.Rapid Cytotoxicity of Antimicrobial Peptide Tempoprin-1CEa in Breast Cancer Cells through Membrane Destruction and Intracellular Calcium Mechanism[J].Plos One,2013,8(4):e60462.[29] 巢警殳,杜鹃,刘雅娟.林蛙皮活性肽对小鼠免疫功能影响的试验研究[J].安徽农业科学,2012,40(21):10894-10895.[30] 李俊峰.中国林蛙资源的综合利用和开发[J].安徽农学通报,2009,15(3):159-160.[31] 张鑫, 李思明,邓晨,等.林蛙皮多肽对HaCaT细胞增殖及凋亡的影响[J].中国兽医学报,2014,34(6):946-950.[32] Mei Z,Li X,Li S,et al.Electrospun poly(l-lactide)/zein nanofiber mats loaded with Rana chensinensis,skin peptides for wound dressing[J].Journal of Materials Science Materials inMedicine,2016,27(9):136.[33] 彭飞,徐峰,赵倩,等.中国林蛙卵油的抗惊厥作用及其与单胺神经递质的关系[J].中国药学杂志,2005,39(12):912-915.[34] 苑春莉,孙连坤,康劲松.林蛙卵油灌胃对于雄激素预处理大鼠妇科内分泌的影响[J].中国实验诊断学,2010,14(2):196-198.[35] 尹云厚,陈宁宁,常雷,等.东北林蛙(Ranadybowskii)卵油脂肪酸体外抗氧化性和保湿性研究[J].经济动物学报,2018(1):30-36+35.[36] 沈雪,杨秀东,张艳,等.林蛙油口服液在D-半乳糖诱导氧化损伤模型小鼠体内的抗氧化作用[J].吉林化工学院学报,2016,33(7):17-20.[37] 赵丹玉,侯长余,王艳杰,等.林蛙卵核糖核酸酶的抗肿瘤作用及对淋巴细胞转化的影响[J].中国生化药物杂志,2010,31(4):228-230.[38] 吴世玉,孟祥敏,刘俊梅,等.林蛙卵黑色素的理化性质及其抗氧化活性研究[J].食品研究与开发,2018(14):25-29.。
第44卷第1期2018年3月延边大学学报(自然科学版)J o u r n a l o fY a n b i a nU n i v e r s i t y (N a t u r a l S c i e n c e )V o l .44N o .1M a r .2018收稿日期:20171121*通信作者:施溯筠(1972 ),女,博士,副教授,研究方向为朝药资源与活性成分研究.文章编号:1004-4353(2018)01-0058-05响应面法优化林蛙皮-人参美白保湿膏的基质配方衣铭慧, 孙志双, 施溯筠*(延边大学药学院,吉林延吉133002)摘要:以林蛙皮和人参为主要原料设计了一种林蛙皮人参美白保湿膏剂,以膏剂的外观㊁耐寒性㊁耐热性㊁乳化性和离心稳定性为评价指标,利用单因素实验㊁B o x -B e n h n k e n 中心组合设计原理和响应面分析法研究硬脂酸㊁单硬脂酸甘油酯㊁甘油的添加量对膏剂的影响.研究结果显示,膏剂的最佳基质配比为:硬脂酸8%㊁单硬脂酸甘油酯1.5%㊁甘油12%,最佳基质组成配方的综合评分为9.34.该结果说明响应面法优化可有效提高林蛙皮人参美白保湿膏剂的综合评分,且方法准确可行.关键词:响应面法;基质配方;林蛙皮;人参中图分类号:R 944.2 文献标识码:AO pt i m i z a t i o no f t h em a t r i x f o r m u l a o fR a n a c h e n s i n e n s i s s k i n -P a n a x g i n s e n g w h i t e n i n g a n dm o i s t u r i z i n gc r e a mb y r e s po n s e s u r f a c em e t h o d Y IM i n g h u i ,S U NZ h i s h u a n g ,S H I S u yu n *(C o l l e g e o f P h a r m a c y ,Y a n b i a nU n i v e r s i t y ,Y a n ji 133002,C h i n a )A b s t r a c t :R a n a c h e n s i n e n s i s s k i n a n d P a n a x g i n s e n g w a s u s e d a s t h em a i n r a w m a t e r i a l t o d e s i g nR a n a c h e n s -i n e n s i s s k i n -P a n a x g i n s e n g w h i t e n i n g m o i s t u r i z i n g c r e a m ,t h e a d d i t i o n q u a n t i t y e f f e c t o f s t e a r i c a c i d ,g l y c e r y l m o n o s t e a r a t e a n d g l y c e r i n ew a s a n a l y z e d u s i n g s i n g l e f a c t o r e x p e r i m e n t ,B o x -b e h n k e n d e s i g n a n d r e s p o n s e s u r -f a c em e t h o d ,t o t a k e t h ea p p e a r a n c e ,c o l dr e s i s t a n c e ,h e a t r e s i s t a n c e ,e m u l s i f i c a t i o na n dc e n t r i f u g a l s t a b i l i t ya s i n d e x .T h eo p t i m a l f o r m u l aw a ss t e a r i ca c i d (8%),g l y c e r y lm o n o s t e a r a t e (1.5%),g l yc e r i n (12%),t h e c o m p r e h e n s i v e s c o r e o f t h eo p t i m a lm a t r i xc o m p o s i t i o n w a s9.34.T h i s i m p l y t h er e s p o n s es u r f a c e m e t h od s we r e p r o v e d t o e n h a n c e t h e c o m p r e h e n s i v e s c o r e of R a n a c h e n s i n e n s i s s k i n -P a n a xg i n s e n g whi t e n i n g a n dm o i s -t u r i z i n g cr e a m ,a n d t h em e t h o d i s a c c u r a t e a n d f e a s i b l e .K e yw o r d s :r e s p o n s e s u r f a c em e t h o d ;m a t r i x f o r m u l a ;R a n a c h e n s i n e n s i s s k i n ;P a n a x g i n s e n g 林蛙(R a n ac h e n s i n e n s i s )在水㊁陆环境中能够生存的主要原因是因为其机体表面具有完善的保湿系统.林蛙皮中天然保湿因子含量较高,如透明质酸[1]㊁胶原蛋白[2]等.透明质酸和胶原蛋白协同作用能更好地渗透皮肤,对修复微创面㊁恢复皮肤屏障具有很好的效果[3].人参(P a n a x g i n s e n g )中的美白活性物质人参皂苷不仅对皮肤具有收缩作用,调节真皮水分平衡,还有抑制黑色素的原性能,使皮肤变得光滑㊁柔嫩㊁洁白的功效[4].在目前的美容产品中,未发现有将林蛙皮和人参作为主要原料而开发的美容产品.基于此,本文将林蛙皮和人参为主要原料,设计一种林蛙皮人参美白保第1期衣铭慧,等:响应面法优化林蛙皮人参美白保湿膏的基质配方湿膏剂,并以膏剂的外观㊁耐寒性㊁耐热性㊁乳化性和离心稳定性为评价指标,利用单因素实验㊁B o x-B e n h n k e n中心组合设计原理和响应面分析法研究硬脂酸㊁单硬脂酸甘油酯㊁甘油的添加量对膏剂的影响,以期得到膏剂的最佳配方.1实验材料与仪器新鲜林蛙皮由安图长白山辉煌生物科技有限公司提供,在-80ħ的冰箱中冷冻备用.人参购于延吉市西市场.硬脂酸㊁单硬脂酸甘油酯㊁甘油十八醇㊁氢氧化钾均为分析纯,天津市科密欧试剂有限公司生产.U V-2201型紫外可见分光光度计,岛津公司生产.2实验方法2.1林蛙皮与人参的前处理剪切新鲜林蛙皮,进行脱色[6]和脱腥处理[7]后真空干燥,粉碎过200目筛,备用.采用B i t t e r-M u i r咔唑法[8]测得林蛙皮中透明质酸含量为15.6m g/g.采用W o r s s n e r比色法测得其胶原蛋白含量为243.5m g/g.水煎煮法[9]提取人参粗提物,测得其人参总皂苷含量为41.22m g/g.2.2膏剂的制备膏剂的制备参照文献[10]中的方法进行.水相制备:在蒸馏水中加入适量氢氧化钾,搅拌,85ħ水浴20m i n.油相制备:称取硬脂酸㊁单硬脂酸甘油酯㊁十八醇㊁甘油后置于干燥烧杯中混合均匀,水浴加热至85ħ,搅拌至全部溶解成澄清液体,保持20 m i n灭菌.皂化:在80~90ħ的水浴中边搅拌边慢慢将水相加入到油相中,搅拌45m i n以上.成膏:皂化反应完成后,加入适量尼泊金酯类防腐剂,搅拌20~25m i n,稍冷(45ħ)后加入适量林蛙皮粉末和人参粗提物,继续搅拌至室温,成膏状后装瓶密封保存.2.3各项指标检测以外观㊁耐寒性㊁耐热性㊁乳化性㊁离心稳定性为指标,对样品进行综合评价[11].每个指标设1~10分,共50分.1~2分表示极差,3~4分表示较差,5~6分表示一般,7~8分表示较好,9~10分表示极好.将各指标评分乘以系数0.19,其综合评分作为考察指标.2.3.1外观性状观察样品色泽是否均匀,有无明显的麻点,是否细腻易涂布.2.3.2耐寒实验将样品20g置于样品瓶中,放入(-8ʃ1)ħ的冰箱中,24h后取出,待升至室温后,与常温放置的样品比较,观察其是否有变稀㊁分层㊁变色等现象.2.3.3耐热实验将样品20g置于样品瓶中,放入(40ʃ1)ħ的恒温箱中,24h后取出,待降至室温后,与常温放置的样品进行比较,观察其是否有变稀㊁分层㊁变色等现象.2.3.4乳化稳定性实验取样品0.1g加入50 m L去离子水,50ħ下搅拌均匀,冷却至室温;以水作参比,测定其在380~800n m范围内的最低透光率.透光率越低,乳化体越稳定[7].透光率为0.8~1,给0~2分;透光率为0.6~0.8,给2~4分;透光率为0.4~0.6,给4~6分;透光率为0.2~0.4,给6~8分;透光率为0~0.2,给8~ 10分.2.3.5离心实验称取样品1g,置于离心管中离心30m i n(3000r/m i n),观察有无油水分层破乳现象.2.4单因素实验2.4.1硬脂酸对膏剂(样品)制备的影响硬脂酸是膏剂的主要辅助原料,主要起乳化剂的作用.图1为硬脂酸添加量对膏剂的影响.由图1可以看出,硬脂酸添加量低于8%(质量分数)时,样品的总体效果随硬脂酸添加量的增加而增高;当硬脂酸的质量分数为8%时,综合评分最高,为8. 87;之后,随着添加量的升高,总体效果呈下降趋势.因此本文选择硬脂酸的添加量为8%.2.4.2单硬脂酸甘油酯对膏剂制备的影响图2为单硬脂酸甘油酯添加量对膏剂的影响.由图2可以看出,当单硬脂酸甘油酯用量低于1.5%(质量分数)时,样品的总体效果呈缓慢上升的趋势;当单硬脂酸甘油酯的质量分数为1.5%时,样品的总体效果最好,综合评分为8.93;之后,随着用量的增加,总体效果呈下降趋势.因此本文选择单95延边大学学报(自然科学版)第44卷硬脂酸甘油酯的添加量为1.5%.图1硬脂酸添加量对膏剂的影响图2 单硬脂酸甘油酯添加量对膏剂的影响2.4.3 甘油对膏剂制备的影响 甘油在膏剂中主要起防冻的作用.图3为甘油添加量对膏剂的影响.由图3可以看出,当甘油的添加量小于12%(质量分数)时,样品的综合评分与甘油添加量呈正相关关系;当甘油的质量分数为12%时,样品的乳化效果最好,综合评分为9.02;当甘油的添加量大于12%时,样品的效果呈现下降的趋势.因此,本文选择甘油的添加量为12%.图3 甘油添加量对膏剂的影响3 响应面实验3.1 响应面分析依次改变硬脂酸(A )㊁单硬脂酸甘油酯(B )和甘油(C )的用量,通过确定3因素3水平的最佳参数进行响应面分析,试验中的编码及水平见表1.表1 响应面分析因素及水平因素水平-11A/%6.08.010.0B/%0.51.52.5C/%9.012.015.03.2 响应面实验设计及结果选取A ㊁B ㊁C 3个因素作为自变量,以样品的综合评分作为响应值,采用响应面分析方法对工艺参数进行优化,实验设计及结果见表2.表2 响应面实验设计及结果实验号A B C 综合评分10008.89210-16.2331016.0240-1-17.3951105.916-10-18.5370008.9580009.0290-116.9610-1018.6111-1-108.72120117.67130009.0414-1108.371501-17.83160009.24171-105.723.3 拟合模型与显著性检验由表2的数据得到如表3所示的回归方程方差分析表,利用D e s i g n -E x p e r t 8.0.6软件对表3进行非线性回归的二次多项式拟合,得到如下预测模型:Y =9.03-1.29A +0.12B -0.090C +0.14A B -0.073A C +0.067B C - 0.98A 2-0.87B 2-0.70C 2.回归方差分析表明,所得模型回归显著(P <0.0001),说明该模型有意义.失拟项P =0.0696大于0.05(不显著),说明模型模拟数据与试验值06第1期衣铭慧,等:响应面法优化林蛙皮人参美白保湿膏的基质配方的差异较小.模型的总决定系数R 2=0.9856,调整决定系数R 2A d j =0.9670,说明该模型能解释92.57%的响应值变化.以上说明该回归模型拟合性较好,可用于本实验的预测和分析[3].表3为回归方程模型的方差分析表.由表3可以看出,A 达到极显著水平,B 和C 均达到显著性水平;3个因素对综合评分影响的顺序是:A >B >C .回归方程二次项中A B ㊁A C ㊁B C 3项的P 值均大于0.05,说明因素之间的交互作用不显著,各实验因素对响应值的影响不是简单的线性关系.二次项中A 2㊁B 2㊁C 2的P 值均小于0.001,达到极显著水平.依上述配方进行3次实验,实验所得的综合评分为9.34.图4 图6为各因子交互作用的响应面分析图和等高线分析图.考察所拟合的响应曲面的形状,可分析出A ㊁B ㊁C 的添加量对样品综合评价的影响.等高线的形状趋于圆形表示2个因素之间的交互作用不显著,趋于椭圆形则相反.由图中响应面的最高点和等高线可以看出,在所选的范围内存在极值,该极值点既是响应面的最高点,同时也是等高线最小椭圆的中心点,这说明实验因素所选择的水平区间是合理的.表3 回归方程模型的方差分析因素平方和自由度均方和F 值P 值回归模型24.0392.6753.11<0.0001A 13.39113.39266.39<0.0001B 0.1210.122.440.1624C 0.06510.0651.290.2936A B 0.07310.0731.450.2676A C 0.02110.0210.420.5384B C 0.01810.0180.360.5661A 24.0614.0680.70<0.0001B 23.1613.1662.89<0.0001C 22.0612.0640.930.0004残差0.3570.050失拟项0.2830.0945.340.0696纯误差0.07040.018总变异24.3816R 2=0.9856R 2A d j =0.9670 注:*表示差异显著,P <0.05;**表示差异极显著,P <0.001图4 硬脂酸和甘油相互影响的响应面分析图(a )及等高线分析图(b)图5 硬脂酸和单硬脂酸甘油酯相互影响的响应面分析图(a )及等高线分析图(b)16延边大学学报(自然科学版)第44卷图6 单硬脂酸甘油酯和甘油相互影响的响应面分析图(a )及等高线分析图(b)4 结论本文研究了硬脂酸㊁单硬脂酸甘油酯㊁甘油3种物质的添加量对林蛙皮人参美白保湿膏剂综合评分的影响,通过B o x -B e h n k e n 中心组合设计原理以及响应面分析法确定了膏剂的最佳基质组成,因素的主效应关系和最佳工艺条件.经检验,拟合模型合理可靠,能很好地预测膏剂的综合评分,本文结果可为提高基质配方和开发更多新型医学护肤品提供参考.参考文献:[1] 袁海恋,施溯筠.响应面法优化林蛙皮中透明质酸的提取工艺[J ].食品工业科技,2016,37(8):196-200.[2] 朱瑞霞,施溯筠.冰乙酸和胃蛋白酶依次提取新鲜林蛙皮胶原蛋白[J ].延边大学学报(自然科学版),2013,39(3):202-205.[3] 马骁.透明质酸钠和胶原蛋白在激光术皮肤护理品中的应用研究[D ].上海:复旦大学,2013:29-40.[4] 贾越光,丁志英,肖嘉婧,等.人参皂苷纳米乳的美白抗衰作用及其安全性评价[J ].中国生化药物杂志,2015,35(9):19-22.[5] 衣铭慧,袁海恋,施溯筠.响应面法优化榆黄蘑中多糖的提取工艺[J ].延边大学学报(自然科学版),2016,42(2):143-146.[6] 石硕,孙丽娜,仙靓,等.神仙草叶多糖提取及过氧化氢脱色工艺研究[J ].现代中药研究与实践,2017,31(3):50-54.[7] 王振华.泥鳅脱腥方法及脱腥对泥鳅品质的影响[D ].重庆:西南大学,2016:58-70.[8] B i t t e rT ,M u i rH M.A m o d i f i e du r o n i ca c i dc a r -b a z o l e r e a c t i o n [J ].A n a l y t i c a lB i o c h e m i s t r y,1962,4(4):330-334.[9] 齐晋楠.人参㊁西洋参和高丽参水提物成分比较及体外抗氧化活性分析[D ].长春:长春中医药大学,2011:16-20.[10] 郑嘉雯,黄嘉琪,陈结莹,等.薰衣草精油雪花膏的研制[J ].广州化工,2015,43(14):59-61.[11] 宛骏,杨全,庞玉新,等.B o x -B e h n k e n 设计响应面法优化艾纳香祛斑霜的配方[J ].香料香精化妆品,2016,2(1):37-41.26。
