目录1 概述 (3)2 目的 (3)3 范围 (3)4 职责 (3)5 参考依据 (3)6 性能确认执行前检查 (3)7. 性能确认 (4)7.1 输液泵性能确认 (4)7.1.1 流量准确度确认 (4)7.1.2 流量精密度确认 (7)7.1.3 梯度准确度确认 (8)7.2 柱温箱性能确认 (10)7.2.1 控温速率确认 (10)7.3 自动进样器性能确认 (11)7.3.1 进样重复性确认 (11)7.4 紫外检测器性能确认 (11)7.4.1 灯能量测试确认 (11)7.4.2 基线漂移与基线噪声测试确认 (12)7.5 蒸发光散射检测器性能确认 (13)7.5.1 基线漂移与基线噪声测试确认 (13)7.6 确认偏差记录 (13)7.7 验证周期 (13)8 修订记录 (14)9 相关附件 (14)1 概述高效液相色谱仪作为现代制药企业最常用的分析仪器，在我公司主要用来分析药品的含量和有关物质，为保证药品的分析质量，我们特制定本文件来对高效液相色谱仪可能影响分析结果准确性的因素进行全面的确认。
本次验证的Agilent 1200高效液相色谱仪55012007010100是由在线脱气机、四元泵、自动进样器、柱温箱、紫外检测器、蒸发光散射检测器以及相关管路等组成，该仪器为2007年购买，主要用于小儿清热止咳口服液盐酸麻黄碱含量测定及中药材及原辅料含量测定。
该仪器前一次性能确认为2012年7月26日完成，验证周期内为正常使用状态，并按照经批准预防性维护计划执行日常维护和备品备件的跟换；除日常使用中出现的微小故障及时排除外，无明显影响仪器性能的故障维修记录和部件更换记录，此次性能确认为正常周期确认。
2 目的此确认方案的目的是对国药控股深圳中药有限公司安装在检验室仪器室Ⅳ的Agilent 1200型高效液相色谱仪55012007010100进行性能再确认并文件记录。
3 范围本方案适用于国药控股深圳中药有限公司检验室使用的Agilent 1200型高效液相色谱仪55012007010100的性能确认。
4 职责5 参考依据5.1 《中国药典》2010年版5.2 《中国药品检验标准操作规程》2010年版5.3 PIC/S关于验证的指南PI006-15.4 《药品生产质量管理规范（2010年修订）》5.5 JJG705-2002《液相色谱仪检定规程》5.6 《1990国际温标纯水密度表》6 性能确认执行前检查6.1性能确认方案执行前，根据以下表格证实系统/设备的所有必需的预执行项目已到位，可以开始执行性能确认。
7. 性能确认7.1 输液泵性能确认7.1.1 流量准确度确认a) 目的确认四元泵流量准确度符合使用要求。
b) 方法将输液系统与泵连接好，以纯化水为流动相，待流速稳定后，分别设定流速为0.5、1.0和2.0ml/min进行测试，在流动相排出口用事先清洗、干燥并已称重的容量瓶收集流动相，0.5ml/min时用秒表计时收集10分钟，1.0和2.0ml/min时用秒表计时收集5分钟，在分析天平上称重，每个流速测定3次，记录水温t，查表得该温度下水密度ρ，按下列计算流量设定值误差S S和稳定性误差S R，即得。
计算S S=（F平-F S）/F S×100％S R＝（F max-F min）/F平×100％F m=（W2-W1）/（ρ.t）式中：F平-----为同一组测量的算术平均值，ml/min；F max-----为同一组测量中流量最大值，ml/min；F min-----为同一组测量中流量最小值，ml/min；Fs------为流量设定值，ml/min；W1------为容量瓶的质量，g；W2------为容量瓶与流动相的质量，g；ρ------为试验温度下流动相的密度，g/ml；t-------为收集流动相的时间，min。
c) 可接受标准流量设定值误差S S：0.5ml/min:＜±5%；1.0ml/min:＜±3%；2.0ml/min:＜±2%流量稳定性误差S R：0.5ml/min:＜3%；1.0ml/min:＜2%；2.0ml/min:＜2%d) 结果A流路水温：℃ρ：g/mlB流路水温：℃ρ：g/mlC流路水温：℃ρ：g/mlD流路水温：℃ρ：g/ml7.1.2 流量精密度确认a) 目的确认四元泵流量精密度符合使用要求。
b) 方法将输液系统与泵连接好，以纯化水为流动相，待流速稳定后，设定流量为1.0ml/min（A、B、C、D四个管路的比例都设为25%），在流动相排出口用已称重的容量瓶收集流动相，同时计时收集10分钟，称重，记录水温t，查表得该温度下水密度ρ，计算即得实际每分钟流出量，共收集10次，计算流量精密度RSD。
c) 可接受标准收集10次流量的RSD＜1%d) 结果7.1.3 梯度准确度确认a) 目的确认四元泵梯度准确度符合使用要求。
b) 方法本次性能确认的仪器为四元梯度泵，分A、B、C和D四个通道，将A通道流动相为超纯水，B通道流动相为0.3%丙酮水溶液。
编辑梯度表使其在一定时间内将100%通道A转换成100%通道B，这样使A、B成分按梯度表的变化来混合。
根据响应值（吸收值）的峰高与丙酮的比例（浓度）成正比的关系，计算通道中实际丙酮的比例（浓度）。
同法测定通道C、D。
响应值L mi 和L m 值计算梯度准确度T ci ，取T ci 值最大值者作为仪器梯度准确度误差。
T ci ＝(L mi －L m )/L m ×100%式中：T ci ——第i 段梯度准确度(％)；L mi ——第i 段输出信号响应与前一段输出信号响应差值L m ——各段输出信号响应与前一段输出信号响应差值的平均值。
c) 可接受标准 梯度准确度＜±3% d) 结果 梯度设定A 、B 泵梯度设定C、D泵7.2 柱温箱性能确认7.2.1 控温速率a) 目的确认柱温箱控温速率符合使用要求。
b) 方法将仪器及工作站打开，待系统稳定后按照仪器生产商所提供的工作站上附带的方法进行测试，测得柱温箱左右两个模块各自的控温速率。
c) 可接受标准升温速率：＞3℃/min冷却速率：＞2℃/mind) 结果7.3 自动进样器性能确认7.3.1 进样重复性测试a) 目的确认自动进样器进样重复性符合使用要求。
b) 方法将输液系统与检测器连接好，以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，100%甲醇为流动相，流速为1.0ml/min，检测器波长设定为254nm,开机预热，待仪器稳定后，将仪器厂家配备的含0.15%邻苯二甲酸二乙酯，0.01%萘和0.03%醌的标样置于进样瓶，按上述测试条件测试共进样6针，记录峰面积。
求6针面积RSD。
以邻苯二甲二乙酯、萘、醌的峰面积计算仪器的定量重复性。
c) 可接受标准进样器重复性＜2.0%d) 结果7.4 紫外检测器性能确认7.4.1 灯能量测试a) 目的确认紫外检测器灯能量符合使用要求。
b) 方法连接好液相色谱仪管路系统，将色谱柱切换为限流毛细管柱，流动相切换为纯化水，流速设置为2ml/min，将检测器氘灯打开，待系统稳定1小时后，按照仪器生产商所提供的工作站上附带的方法进行灯能量测试。
c) 可接受标准高能量：大于10000cts平均能量：大于5000cts低能量：大于200ctsd) 结果7.4.2 基线漂移与基线噪声测试a) 目的确认紫外检测器灯能量符合使用要求。
b) 方法将输液系统与检测器连接好，取限流毛细管柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0ml/min，检测器波长设定为254nm,开机预热，待仪器稳定后（约60min）记录基线60min，从30min内基线上读出噪音值；从60min基线上读出基线漂移值。
c) 可接受标准基线噪声：≤5×10－4AU基线漂移：≤5×10－3AU/hd) 结果7.5 蒸发光散射检测器性能确认7.5.1 基线漂移与基线噪声测试a) 目的确认紫外检测器灯能量符合使用要求。
b) 方法将输液系统与检测器连接好，取限流毛细管柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0ml/min，氮气流量1.5L/min,蒸发管温度70℃，增益值为2。
开机预热，待仪器稳定后（约60min）记录基线60min，从30min内基线上读出噪音值；从60min基线上读出基线漂移值。
c) 可接受标准基线噪声：≤1.0mV基线漂移：≤10.0mV/hd) 结果7.6 确认偏差记录记录过程中产生的每个偏差，在整个确认过程中产生的所有偏差均按照《验证偏差管理规程》进行管理，并对确认过程中产生的偏差进行记录。
7.7 验证周期7.7.1 实验条件发生改变（如关键设备或系统的改动）必须重新进行安装、运行和性能确认；7.7.2 仪器更新或大修需重新进行性能确认；7.7.3 经过一段使用时间，对仪器性能进行再确认，再确认周期为两年。
8 修订记录NA。
9 相关附件。
