HPLC法测定双黄连颗粒中连翘苷的含量
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HPLC法测定连翘中连翘苷含量的不确定度评价【摘要】目的:使用HPLC方法来针对连翘中连翘苷含量的不确定性进行分析,总结导致不确定因素产生的成因。
方法:结合我国官修药典相应的连翘含量测定法来规范测定过程,并且针对测量过程进行分析来找出不确定度产生的成因;结果:使用HPLC这种方法来测定连翘苷含量的不确定度大约为1%,最终确定其含量不确定度的主要源为对照品称量。
【关键词】连翘;连翘苷;含量测定;不确定度;高效液相色谱法实验室质量控制可以在很大程度上决定实验结果和测量不确定度。
通过一系列不确定因素的控制就可以找到一个测量数值的合理区间,进而让一个数值变为一个阈值范围,不免将检验结果错判,保证检测结果的有效性。
连翘花是木犀科植物的一种,在民间多作为茶类饮品,对于风热感冒、咽喉肿痛等症状的治疗有奇效。
但是目前对于连翘花中的连翘苷测定的相关文献还仍然较少,本文对连翘苷含量的测定方法进行了简要介绍,并且总结了不确定度的影响要素,希望可以给相关工作的开闸能提供一些参考。
1仪器与材料戴安Ultimate3000高效液相色谱仪(CHROMELEON工作站,紫外检测器);METrLERAX205DR电子天平(瑞士);RQ一300VDE型双频数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
连翘苷对照品购自中国药品生物制品检定所(批号为110821—200508),甲醇(色谱纯,MERCK),水为高纯水。
连翘花药材2007年4月采自河南省林州市石板岩乡王相岩桃花谷,经李振国主任药师鉴定为木犀科植物连翘Forsythiasuspense(Thunb.)VaIll的干燥花。
二、连翘花中连翘苷的含量测定(一)色谱条件色谱柱为DIONEXC18色谱柱(DIONEXAcclaim,5Ixm,150x4.6am),乙腈一水(25:75)为流动相,流速1.0ml/min,柱温30℃,检测波长277nm。
(二)对照品溶液制备精密称取连翘苷对照品5.14mg置25ml容量瓶中,加甲醇使溶解并定容至刻度,摇匀,,备用。
科研动态50 中国动物保健 | 2018.11doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2018.11.028结果与标准血清结果一致后进行样品检测,以保证试验结果的准确性。
可重复的原则是科学事实成立的重要判据,是科学确定性、普遍性的奠基石。
但是对于已经产生抗体的机体来说,产生治疗效果的机体抗体水平下降需要一定的时间,因此在给药后通过鸡毒支原体抗体阳性水平的变化来评价药物的治疗效果,可能不能及时地反映出药物的真实治疗效果,所以在样品检测过程中如遇到可疑结果,有充足的待测血清进行重复验证,重复结果一致后进行样品的判定。
建议可以在给药后分不同时间对鸡毒支原体抗体水平进行检测,并通过其他检测方法同步验证鸡毒支原体抗原及抗体水平的变化。
最后,分组是科研设计的重要环节。
分组合理与否,直接影响结果的可靠性,分组处理是为了进行比较,为了做出合乎于逻辑的判断,也是为了从比较中验证研究的目的。
在本试验采集的200个样品中分析给药泰万菌素对鸡毒支原体的血清阳性水平的控制作用,设置了对照组100个样品,在对照组、给药组的试验样品一致的前提下进行结果判定,保证试验结果的科学性。
大样本时随机化分组是适宜的,而小样本时随机化不能保证组间一致,所以小样本时要用人为加随机的方法来保证组间一致性,其实质是更好地体现随机化原则。
设置公鸡母鸡不同性别的对照使得试验结果更加精细,但使得同级比较的数量减少,造成数据统计结果误差可能增大。
结合本试验各项数据结果可以发现:当药物浓度达到250ppm 饮水给药时,由中牧实业股份有限公司提供的泰万菌素对鸡体内的鸡毒支原体有良好的抑制作用,本药物能显著降低鸡体内的抗体阳性率。
3 结论由中牧实业股份有限公司提供的泰万菌素以250ppm 饮水给药连续5d,对鸡毒支原体抗原有明显的抑制作用。
泰万菌素经饮水给药,方便简洁,溶解迅速,剂量容易控制,对鸡没有不良的影响,鸡的饮欲、食欲正常,适口性良好,可用于鸡毒支原体感染预防和治疗的首选药物。
应用HPLC测定双黄连口服液中主要成分含量作者:靳慧娟来源:《科学与财富》2017年第09期摘要:目的:建立双波长高效液相色谱法梯度洗脱方法测定双黄连口服液中主要成分含量。
方法:采用HederaODS-2色谱柱,以0.2%磷酸水溶液-甲醇流动相进行梯度洗脱,流速1.0ml/min,检测波长324nm、280nm,柱温为30℃。
结果:该方法在试验浓度范围内线性关系良好、溶液稳定性、专属性良好,且与《中国药典》方法检验结果一致。
结论:本方法用于双黄连口服液主要成分含量测定,操作简便、准确。
关键词:高效液相色谱;黄芩苷;绿原酸;连翘苷;含量双黄连口服液组方金银花、黄芩和连翘。
具有疏风解表、清热解毒之功效,临床上常用于治疗细菌和病毒引起的感冒、流行性感冒以及气管炎、扁桃体炎、肺炎等症。
《中国药典》2010年版一部采用高效液相色谱法对双黄连口服液中主要成分黄芩苷、绿原酸、连翘苷含量分别进行测定。
供试品溶液需分别制备,检验时限较长,检验方法较为繁琐。
本研究通过建立双波长高效液相色谱法梯度洗脱方法用于双黄连口服液中黄芩苷、绿原酸、连翘苷含量的同时测定,操作更加简便快速,具体方法学考察如下:1.仪器与试药1.1仪器CPA225D电子天平(赛多利斯公司)Agilent1260高效液相色谱仪,HP1100型二极管阵列检测器(安捷伦科技有限公司)1.2试药黄芩苷、绿原酸、连翘苷对照品(中国食品药品检定研究院)甲醇为色谱纯试剂(迪马科技公司)磷酸为色谱纯(天津市科密欧化学试剂有限公司)试验用水为二次蒸馏的纯化水2.方法2.1色谱条件与系统适用性试验采用Hedera ODS-2色谱柱(4.6mmx250mm,5μm)。
0.2%磷酸水溶液为流动相A,甲醇为流动相B,梯度洗脱程序:0-5min,20%→30%B;5-35min,30%→45%B;35-50min,45%→70%B;50-55min,70%→20%B;55-60min,20%B。
高效液相色谱法测定双黄连口服液有效部位中连翘苷含量目的建立双黄连口服液有效部位中连翘苷的含量测定方法。
方法采用大连依利特Hypersil ODS2 C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5 ?m),流动相为甲醇-0.05%磷酸水(35∶65),流速1.0 mL/min,检测波长278 nm。
结果连翘苷在0.143 6~1.436 ?g范围内呈良好的线性关系,平均回收率为99.91%,RSD=2.95%。
结论所建立的方法简便、准确,可作为双黄连口服液有效部位的质量控制方法。
标签:双黄连口服液;连翘苷;高效液相色谱法;含量测定双黄连口服液由金银花、黄芩、连翘配伍组成,具有疏风解表、清热解毒之功效。
适用于外感风热引起的头痛身痛、恶寒发热、喉痛咳嗽诸症[1]。
我们为了纯化该复方的有效部位,提供工艺优化的依据,采用AB-8大孔树脂对复方中金银花和连翘的有效成分吸附性能及影响吸附性能的因素进行了研究,并结合药效学试验筛选出双黄连有效部位。
且根据复方有效部位及其主要化学成分的研究分析,确定以复方有效部位中主要有效成分连翘苷的含量,来控制双黄连口服液有效部位的内在质量。
本试验参考文献[2-3],建立了双黄连口服液有效部位中连翘苷反相高效液相色谱(RP-HPLC)含量测定方法,并对3批样品进行含量测定。
1 仪器与试药LC-2010A高效液相色谱仪(日本岛津),SPD-ML0Avp二极管阵列检测器(日本岛津)。
甲醇为色谱纯,乙醇为分析纯,磷酸为分析纯,水为重蒸水。
连翘苷对照品(批号110821-200508)购自中国药品生物制品检定所;连翘和黄芩药材购自河南省医药公司,金银花药材采自河南封丘金银花规范化种植基地,经河南中医学院生药学科陈随清教授鉴定,连翘为木樨科连翘属植物连翘(Forsythiae Suspense Thunb.Vahl)的干燥果实,金银花为忍冬科植物忍冬(Lonicera Japonica Thunb.)干燥花蕾或带初开的花,黄芩为唇形科植物黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的干燥根。
连翘含量测定方法(连翘苷)来源: 作者:佚名连翘为木犀科植物连翘Forsythia suspense(Thunb.)Vahl的干燥果实。
2005版《中国药典》采用高效液相色谱法测定了连翘苷的含量。
文献报道的连翘苷的含量测定方法主要有高效液相色谱法和薄层扫描法。
一、高效液相色谱法2005《中国药典》连翘含量测定项下:色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-水(25:75)为流动相,检测波长为277nm;理论板数按连翘苷峰计算应不低于3000。
供试品溶液的制备:取本品粉末约1克,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇15ml,称定重量,浸渍过夜,超声处理25分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过。
精密量取续滤液5ml,蒸至近干,加中性氧化铝0.5g拌匀,加置中性氧化铝(100~120目,1g,内径1~1.5cm)上,用70%乙醇80ml洗脱,收集洗脱液,浓缩至干,残渣用50%甲醇溶解,转移至5ml 量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
文献报道的HPLC法,流动相系统以乙腈-水为多,也有以乙腈-冰醋酸溶液为流动相的。
现总结如下:王隶书等用HPLC法测定抗病毒滴丸中连翘苷的含量。
采用日本岛津LC210AT高效液相色谱仪,紫外分光检测器;日立U23400型分光光度计;日本岛津ODS-C18柱(150mm×4.6mm,5μm);以乙腈-水(24:76)为流动相;柱温30℃;检测波长277nm。
杨德柱等采用高效液相色谱法测定夏莲颗粒剂中连翘苷的含量时,采用日本岛津公司高效液相色谱仪;色谱柱:Shim-pack ODS柱(日本岛津公司, 5μm,150mm×4.6mm);柱温:25℃;流动相:乙腈-水-三乙胺(24:76:0.02);流速:1.0mL/min;检测波长:276nm。
样品的制备方法同药典。
徐晓梅等采用RP-HPLC法测定病毒清口服液中连翘苷的含量。
高效液相色谱法测定双黄连气雾剂中连翘苷的含量
刘春凤;范宁;王建明
【期刊名称】《中医药信息》
【年(卷),期】2010(027)002
【摘要】目的:研究双黄连气雾剂中连翘苷的含量测定方法,建立相应的质量控制标准.方法: 采用高效液相色谱法,对连翘苷进行了测定.结果:连翘苷的含量可用相应的测定方法准确测出.结论:测定方法准确可靠、重现性好,可以控制产品的质量.
【总页数】2页(P30-31)
【作者】刘春凤;范宁;王建明
【作者单位】黑龙江中医药大学,黑龙江,哈尔滨,150040;哈药集团三精制药股份有限公司,黑龙江,哈尔滨,150069;黑龙江中医药大学,黑龙江,哈尔滨,150040;哈药集团三精制药股份有限公司,黑龙江,哈尔滨,150069;黑龙江中医药大学,黑龙江,哈尔滨,150040
【正文语种】中文
【中图分类】R927.1
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定双黄连口服液有效部位中连翘苷含量 [J], 王战红;谭玉彬;李淑芳;王淑美;梁生旺;张海龙;陈国琴
2.高效液相色谱法测定双黄连口服液中连翘苷含量 [J], 陈国辉
3.高效液相色谱法测定双黄连注射液中连翘苷含量 [J], 程晓英;赵明会
4.两种高效液相色谱法测定双黄连注射液中连翘苷含量的比较研究 [J], 章荣叶;罗
成江;汤赛飞;王彬;陈晓林;林仙军
5.反相高效液相色谱法测定双黄连有效部位中连翘苷的含量 [J], 孟璐;李淑芳;申凌娜;王淑美
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高效液相色谱法测定注射用双黄连中连翘甙的含量
郭淑敏;张普民
【期刊名称】《中国中医药科技》
【年(卷),期】1997(004)002
【总页数】2页(P93-94)
【作者】郭淑敏;张普民
【作者单位】黑龙江省药品检验所;大庆市药检验所
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定复方连翘口服液中连翘酯甙的含量 [J], 彭松
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3.高效液相色谱法测定金银花连翘提取物(注射用)中连翘苷的含量 [J], 仉晶;金智利
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5.高效液相色谱法测定抗病毒口服液中连翘甙的含量 [J], 郁爽;彭华
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关于高效液相色谱法测定双黄连口服液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩苷的含量【摘要】:目的建立同时测定双黄连口服液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷和汉黄芩素含量的高效液相色谱法。
方法采用VP-ODS C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈-0.2%磷酸溶液梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;检测波长:278 nm。
结果绿原酸在0.44~6.60 μg范围内线性关系良好(r=0.999 1),平均回收率为97.0%;黄芩苷在0.52~6.18 μg范围内线性关系良好(r=0.999 1),平均回收率为98.98%;连翘苷在0.20~2.04 μg范围内线性关系良好(r=0.999 3),平均回收率为103.55%;汉黄芩素在0.13~1.76 μg范围内线性关系良好(r=0.999 1),平均回收率为96.49%。
结论本方法简便可行、准确、快速,可用于双黄连口服液中上述4种成分的含量测定。
【关键词】双黄连口服液绿原酸黄芩苷连翘苷汉黄芩素高效液相色谱法含量测定Abstract:Objective To establish a HPLC method for the determination of chlorogenic acid, baicaliin, forsythin and wogonin in Shuanghuanglian oral liquid. Methods The column was VP-ODS C18 (250mm×4.6 mm, 5 μm). The mobile phase consisted of acetonitrile-0.2% phosphoric acid with gradient elution. The flow rate was 1.0 mL/min and the detection wavelength was at 278 nm. Results The calibration curves were linear within the range of 0.44~6.60 μg (r=0.999 1) for chlorogenic acid, 0.52~6.18 μg (r=0.999 1) for baicaliin, 0.20~2.04 μg (r=0.999 3) for forsythin (r=0.999 3) and 0.13~1.76 μg (r=0.999 1) for wogonin, respectively. The average recovery of them were 97.0% (RSD=1.1%), 98.98% (RSD=1.1%), 103.55% (RSD=1.1%) and 96.49% (RSD=1.1%), respectively. Conclusion The method is simple,practicable, accurate and rapid. It can be applied to content determination of chlorogenic acid, baicaliin, forsythin and wogonin in Shuanghuanglian oral liquid.Key words:Shuanghuanglian oral liquid;chlorogenic acid;baicaliin;forsythin;wogonin;HPLC双黄连口服液由金银花、黄芩及连翘经提取精制而成,具有辛凉解表、清热解毒功效,对于上呼吸道感染、扁桃体炎、咽炎、病毒性肺炎等细菌和病毒感染性疾病有一定疗效。
HPLC测定双黄连口服液中连翘苷的含量发表时间:2018-07-31T13:13:25.733Z 来源:《世界复合医学》2018年第06期作者:杜辉[导读] 本文就双黄连口服液中,连翘苷HPLC的测量进行分析,希望能够让双黄连口服液的质量,得到更好地保障,同时使用这个方法,也非常简单易于操作,重复性也非常的好。
哈药集团三精制药有限公司黑龙江哈尔滨150000【摘要】对双黄连口服液的连翘苷含量进行测定,运用HPLC的方法,来对其进行准确的测量,HPLC的测量方法,相对于其他的方法来讲,测量的方法非常的简便取得的数值相对来讲,也会比较精准,被控制在0.187-0.876μg的范围之内,同时相比较其他的材料来讲,连翘苷的线性关系也比较好,回收率平均能够打达到97.8%,本文就双黄连口服液中,连翘苷HPLC的测量进行分析,希望能够让双黄连口服液的质量,得到更好地保障,同时使用这个方法,也非常简单易于操作,重复性也非常的好。
【关键词】双黄连口服液;连翘苷;HPLC双黄连在生活中,是一种非常常见的药,并且其类型和种类也非常的多,不仅有胶囊还有口服的药液,而后者在市场中出现的时间,也是非常的长的,双黄连口服液主要运用的原料,有金银花、黄芩以及连翘等常见的中药药材,其功效不仅能够缓解感冒的症状,还能够清热解毒,其治疗效果也非常的明显,是生活中经常会用到的中药,在双黄连口服液生产的过程中,为了能够更好的保证双黄连口服液的质量,对于连翘苷的含量进行精准的测量,是非常有必要的,同时也是为了,更好的保证用药的安全性。
1材料与方法1.1材料与仪器高速液相色谱仪、紫外线检测器、数据处理器、色谱柱、双黄连口服液、连翘苷的对照药品,将甲醇作为色谱纯,实验用水均为重度蒸馏水,其他的所有实验中用到的试剂作为分析纯。
1.2方法在进行色谱系统的条件以及适用性的检验时,需要用键合性的硅胶作为实验的填充剂,流动相需要乙腈与水,其中乙腈占总体流动相的四分之一,水占总体流动相的四分之三,流速为每分钟1毫升,进行检测的波长为276nm,从理论上来看连翘苷的处于波峰处的数值应当高于或等于3000。
HPLC法测定双黄连合剂中连翘苷与绿原酸含量李娜;秦松;高海燕【摘要】目的:建立测定双黄连合剂中成分连翘苷与绿原酸含量的有效方法.方法:色谱柱为Waters C18柱(4.6mm×250mm,5μm),进样量10μL,连翘苷测定方法选用流动相为乙腈-水(23:77,v/v),流速:1.00mL/min,检测波长:277nm,柱温:30℃,绿原酸测定方法选用流动相为甲醇-水-冰醋酸(20:80:1,v/v/v),流速:0.90mL/min,检测波长:324nm,柱温:35℃.结果:连翘苷在10.02~501.0μg(r=0.9998)考察的线性范围内,且线性关系良好,连翘苷成分平均回收率93.72%(RSD=1.3%),绿原酸在11.06~177.0μg/mL(r=0.9994)考察的线性范围内,线性关系良好,绿原酸成分平均回收率94.18%(RSD=1.0%),连翘苷和绿原酸符合含量测定要求.结论:采用高效液相色谱法测定双黄连合剂中的连翘苷和绿原酸成分,方法操作简便,结果准确,可将方法用于双黄连合剂质量控制.【期刊名称】《药品评价》【年(卷),期】2017(014)011【总页数】4页(P31-34)【关键词】双黄连合剂;连翘苷;绿原酸;高效液相色谱法;含量测定【作者】李娜;秦松;高海燕【作者单位】焦作市食品药品检验所,河南焦作 454001;焦作市食品药品检验所,河南焦作 454001;焦作市食品药品检验所,河南焦作 454001【正文语种】中文【中图分类】R284双黄连合剂是由金银花、黄芩、连翘三味中药精致提取而成,具有辛凉解表,清热解毒功效[1]。
该药主要用于治疗细菌、病毒引起的发热、咽痛、咳嗽等病症。
双黄连合剂成分复杂,含有连翘苷、绿原酸、黄芩素、黄芪苷等重要成分[2-10],为确保对药物质量的严格控制,建立一套可行的检验方法尤为重要。
查阅以往对双黄连合剂化学成分测定的有关报道中,较少涉及该药的成分的研究。
HPLC法测定双黄连片中连翘苷含量
田华
【期刊名称】《中国现代药物应用》
【年(卷),期】2013(007)024
【摘要】目的建立测定双黄连片中连翘苷含量的高效液相色谱法.方法色谱柱为Waters Sunfire C18柱(4.6 mm× 250mm,5 μm);流动相为乙腈一水(22∶78);流速:1.0 ml/min;检测波长为277nm;柱温:室温,进样量:10 μl.结果连翘苷在24.12~192.03 μg/ml范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9998,平均回收率为
98.2%,RSD=2.1%(n=5).结论该方法灵敏准确,操作简便,重现性好,适合双黄连片的质量控制.
【总页数】2页(P238-239)
【作者】田华
【作者单位】418000 湖南省怀化市第一人民医院
【正文语种】中文
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1.HPLC法测定双黄连注射液中黄芩苷和连翘苷的含量 [J], 李晓云;黎晓亮
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高效液相色谱法测定双黄连口服液中连翘苷的含量张雪光;宫立新;李雪松;刘钰;张丽萍【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2004(13)9【摘要】目的:建立一种双黄连口服液中连翘苷的高效液相色谱测定方法,用于生产及市场监控.方法:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈-水(25:75)为流动相;以外标法按峰面积计算.结果:连翘苷进样量在0.496~3.422μg范围内与峰面积线性关系良好,回归方程为Y=0.027 26X+1.178×10-6(r=0.999 9).该法加样回收率为100.45%,RSD=1.10‰.结论:高效液相色谱法简便、快捷,结果准确,可用于双黄连口服液中连翘苷含量测定和质量控制.【总页数】2页(P44-45)【作者】张雪光;宫立新;李雪松;刘钰;张丽萍【作者单位】哈药集团三精制药有限公司,黑龙江,哈尔滨,150069;哈药集团三精制药有限公司,黑龙江,哈尔滨,150069;哈药集团三精制药有限公司,黑龙江,哈尔滨,150069;哈药集团三精制药有限公司,黑龙江,哈尔滨,150069;哈药集团三精制药有限公司,黑龙江,哈尔滨,150069【正文语种】中文【中图分类】R284.1【相关文献】1.高效液相色谱法测定双黄连口服液有效部位中连翘苷含量 [J], 王战红;谭玉彬;李淑芳;王淑美;梁生旺;张海龙;陈国琴2.高效液相色谱法测定双黄连口服液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩苷的含量[J], 黄敬群;杨娟;李红3.在线固相萃取/高效液相色谱法快速测定双黄连口服液及其胶囊中绿原酸与连翘苷的含量 [J], 张艳海;张大伟;孟兆青;叶明立4.近红外光谱法测定双黄连口服液中绿原酸和连翘苷的含量 [J], 戴传云;高晓燕;汤波;傅亚;刘火安5.高效液相色谱法测定双黄连口服液中连翘苷含量 [J], 陈国辉因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定连翘配方颗粒中连翘苷的含量
徐海波
【期刊名称】《时珍国医国药》
【年(卷),期】2003(14)5
【摘要】目的 :采用 HPL C法测定连翘配方颗粒中连翘苷的含量。
方法 :以 C1 8化学键合胶柱为固定相 ,乙腈 -水( 2 5∶ 75 )为流动相 ,UV检测波长为 2 77nm。
结果 :加样回收率为 96.42 % ,RSD =0 .77% ( n=5 ) ,连翘苷在 0 .40 8~ 3 .2
64μg范围内 ,进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系 ,r=0 .9999。
结论 :方法准确 ,快速 ,简便 ,重现性好。
【总页数】2页(P262-263)
【关键词】连翘香;连翘配方颗粒;高效液相色谱;含量;测定
【作者】徐海波
【作者单位】江苏江阴天江药业有限公司
【正文语种】中文
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