反相液相色谱下淀粉2-苯甲酸酯-3-(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)-6-(

反相高效液相色谱法测定化妆品中几种防腐剂作者：王健辉， 胡家庆， 张欣荣， 尹笋君， 刘小宇， 杨峰， WANG Jian-hui， HU Jia-qing ， ZHANG Xin-rong， YIN Sun-jun， LIU Xiao-yu， YANG Feng作者单位：王健辉,张欣荣,尹笋君,杨峰,WANG Jian-hui,ZHANG Xin-rong,YIN Sun-jun,YANG Feng(第二军医大学药学院无机化学教研室,上海,200433)， 胡家庆,HU Jia-qing(海军医学研究所,上海,200433)， 刘小宇,LIU Xiao-yu(第二军医大学基碲部生物化学与分子生物学教研室,上海,200433)刊名：日用化学工业英文刊名：CHINA SURFACTANT DETERGENT & COSMETICS年，卷(期)：2009，39(2)被引用次数：1次1.中华人民共和国卫生部化妆品卫生规范 20022.SIRICHAI S.HASAJTTO C Separation of preservatives in cosmetic products by micellar electrokinetic chromatography 2004(12)3.OZTEKIN N.ERIM F B Determination of cationic surfactants as the preservatives in an oral solution and a cosmetic product by capillary electrophoresis 2005(05)4.MEMON N.BHANGER MI.KHUHAWER MY Determination of preservatives in cosmetics and food samples by micellar liquid chromatography 2005(07)5.DE ROSSI A.DESIDERIO C Fast capillary electrochromatographic analysis of parabens and 4-hydroxybenzoic acid in drugs and cosmetios 2002(19)6.龙朝阳.许秀敏食物中4种常用尼泊金酯的高效液相色谱法测定[期刊论文]-中国卫生检验杂志 2005(01)7.胡俊明.王骏反相离子对色谱法测定化妆品中溴硝丙醇等11种防腐剂[期刊论文]-色谱 1999(05)8.王萍.丁晓静胶束电动毛细管色谱快速测定化妆品中的防腐剂[期刊论文]-色谱 2005(03)9.谢华林.胡波年.苑世领反相高效液相色谱法测定化妆品中防腐剂[期刊论文]-日用化学工业 2004(06)10.张晓霞.周卯星.张高勇高效液相色谱法测定蛇床子萃取物中的蛇床子素[期刊论文]-日用化学工业 2006(06)1.期刊论文王超.马强.王星.WANG Chao.MA Qiang.WANG Xing反相高效液相色谱法同时测定化妆品中的16种激素-色谱2006,24(6)糖皮质激素对皮肤具有一定的嫩白作用,短时间使用含有糖皮质激素的化妆品可使皮肤光滑细腻、红润白嫩,有着较好的美容效果[1].但长期使用糖皮质激素,通过皮肤的吸收可引起全身的副作用,导致面部皮肤损害、骨质疏松、肌肉萎缩、生长发育迟缓、诱发或加重感染和消化性溃疡、情绪异常、代谢紊乱等各种不良反应.化妆品中添加雌激素、雄激素、孕激素等性激素能够在短时间内促进毛发生长,防止皮肤老化,有除皱、增加皮肤弹性等作用.但长久使用会导致色素沉积、产生黑斑、皮肤萎缩变薄,甚至具有致癌性,引发细胞癌、乳腺癌、卵巢癌等疾病.我国<化妆品卫生标准>[2]、<化妆品卫生规范>[3]和欧盟化妆品规程(Directive 76/768/EEC)[4]中均明确规定,糖皮质激素、雌激素、雄激素、孕激素等激素为化妆品组分中禁用物质.化妆品中激素的检验对于严格控制化妆品的产品质量,确保化妆品的使用安全,保障人民身体健康具有重要的意义.2.期刊论文郑艳明.郭新东.冼燕萍.杜志峰.罗海英.吴玉銮.李慧勇.ZHENG Yan-ming.GUO Xin-dong.XIAN Yan-ping.DU Zhi-feng.LUO Hai-ying.WU Yu-luan.LI Hui-yong化妆品中7种氟喹诺酮类药物的反相高效液相色谱法测定-分析测试学报2009,28(2)建立了反相高效液相色谱同时测定膏霜类化妆品中7种氟喹诺酮类药物(诺氟沙星、培氟沙星、环丙沙星、丹诺沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、双氟沙星)的方法.样品先用乙腈-水(0.1%甲酸)(体积比5 ∶ 95)溶液提取,经正己烷脱脂净化后用反相高效液相色谱法测定.添加水平为1.0 ～10.0 mg/kg时,回收率为87% ～108%,相对标准偏差为2.3% ～5.8%.结果表明,该法操作简便、灵敏、准确,适用于膏霜类化妆品中氟喹诺酮类药物的测定.3.期刊论文王小芳.王菁.任韧.虞爱旭.杨忠乔.孙华.Wang Xiao-fang.Wang Jing.Ren Ren.Yu Ai-xu.Yang Zhong-qiao.Sun Hua反相高效液相色谱法同时测定化妆品中的7种性激素-中国卫生检验杂志2008,18(11)目的:建立一种简单、准确、灵敏、同时测定化妆品中7种性激素(雌二醇、雌三醇、雌酮、睾酮、甲基睾酮、孕酮、己烯雌酚)的高效液相色谱检测方法.方法:样品经甲醇提取、净化后,在XTerra RP18色谱柱(5um,4.6 mm×150 mm)上,以水/甲醇/乙腈(50:30:20,v/v/v)为流动相,利用二极管阵列检测4.期刊论文武婷.王超.李楠.WU Ting.WANG Chao.LI Nan反相高效液相色谱法同时测定祛痘类化妆品中的禁用物质-色谱2006,24(6)建立了用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定祛痘类化妆品中禁用物质安体舒通、过氧化苯甲酰和维A酸的含量.采用甲醇超声提取,HPLC法分离测定.3种被测物在11 min内均得到良好的分离.在1～200 mg/L范围内其浓度与峰面积呈良好的线性关系(r≥0.999 9);在添加质量浓度为1～10 mg/L时,回收率为88.2%～106.7%,相对标准偏差小于3.1%;最低检出限(S/N=3)为安体舒通0.101 μg,过氧化苯甲酰0.100 μg,维A酸0.107 μg.该法简便、快速、准确,可用于祛痘类化妆品中以上3种禁用物质的检测.5.期刊论文缪晓琴.金抒反相高效液相色谱法测定化妆品中的3-O-乙基维生素-日用化学工业2008,38(4)采用反相高效液相色谱法测定化妆品中的3-O-乙基维生素C,色谱条件:SHIMADZU Shim-pack VP-C18ODS(150 mm×4.6/mm,5μm)色谱柱;C18ODS保护柱芯;流动相V(甲醇):V(0.025 mol/L KH2PO4)=20:80;流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;紫外检测器检测,检测池温度:40℃,波长:254 nm.结果表明,在此条件下,3-O-乙基维生素C在0～100 mg/L与相应的峰面积具有良好的线性关系(r=0.999 2),线性回归方程为A=31.170 3ρ,回收率在97.75%～100.60%,方法精密度RSD约为2.6%(n=5).6.期刊论文马杰.林雏宣.MA Jie.LIN Wei-xuan反相高效液相色谱法测定化妆品中的几种防晒剂-日用化学工业2010,40(3)采用反相高效液相色谱法测定化妆品中的10种防晒剂,用色谱柱为Waters Symmetry shield C18柱(250mm ×4.6 mm i.d,5 μm),V(甲醇):V(水)=85:15为流动相,检测波长310 nm,回收率为98.1%～101.0%,相对标准偏差小于5%.7.期刊论文何瑞云.王超.李楠.王星.武婷.陈娟.HE Rui-yun.WANG Chao.LI Nan.WANG Xing.WU Ting.CHEN Juan反相高效液相色谱法测定化妆品中11种禁用和限用有机含氯化合物-日用化学工业2008,38(5)建立了反相高效液相色谱法同时测定化妆品中11种禁用和限用有机含氯化合物的方法.以甲醇和柠檬酸水溶液为流动相(pH=2.56)进行梯度洗脱,Kromasil反相C18柱为分离柱,柱温42℃,采用程序可变波长检测,11种含氯化合物在20 min内被检出.检出限0.052 mg/L～0.498 mg/L(S/N=3),低、中、高3种质量浓度水平的加标回收率88.0%～109.2%,线性相关系数均在0.999 8以上.8.期刊论文谢华林.胡波年.苑世领.胡汉祥.李爱阳反相高效液相色谱法测定化妆品中防腐剂-日用化学工业2004,34(6)采用反相高效液相色谱法测定化妆品中山梨酸、苯甲酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯和对羟基苯甲酸丁酯等6种防腐剂,用Zorbax ODS(5μm,4.6 mmi.d.×150mm)柱,V(磷酸二氢钾):V(乙腈)为90:10作流动相,加入磷酸调pH值为2.0,检测波长为254 nm.样品用乙醇-水-冰乙酸(体积比为70:29.5:0.5)提取,回收率为90.8%～105.7%,相对标准偏差为3.1%～8.5%.9.学位论文武婷化妆品中功能成分的检测技术研究2006本论文采用高效液相色谱法建立了三种化妆品检测方法，分别用于检测化妆品中芦荟蒽醌类、祛痘类禁用物质和四环素类抗生素三类物质的含量。

手性氨基酸的合成及生物活性研究进展专业：物理化学学号：M110393 姓名：秦锦摘要：综述了近年来手性氨基酸的制备方法及其生物活性，包括化学拆分法、不对称合成法、结晶法、微生物法、酶法、配位萃取法、膜拆分法以及色谱法等制备方法，还介绍了手性氨基酸作为手性药物的生物活性作用，并对其研究的前景进行了展望。

关键词：手性,氨基酸,制备,拆分,生物活性随着人们对手性氨基酸的深入研究，发现有些物质的D－(－)－异构体和L －(＋)－异构体在生物体中的活性差异很大。

对这一问题的探讨，有助于了解生命过程中药物作用的化学基础与生物基础。

本文综述了近年来手性氨基酸的制备方法及其生物活性作用，并展望了其研究的前景。

1 手性氨基酸化合物的制备方法1.1 化学拆分法DL-对羟基苯甘氨酸可用化学拆分剂进行拆分，常用的拆分剂有溴化樟脑磺酸a－苯基乙胺，酒石酸，脱氢枞胺等。

Yamada S．等用溴化樟脑磺酸(d－BCS)作为拆分剂，对DL-对羟基苯甘氧酸进行拆分，D－对羟基苯甘氨酸的收率可达92％。

但此法反应步骤长、收率低，关键是选择使用周期长、回收容易的拆分剂。

严兆明等应用嗜热菌蛋白酶通过酶促由DL-苯丙氨酸－I－C与Z－L－广丙氨酸合成Z－L-Ala－L－Phe－OMe(1－C)二肽，藉此达到消旋苯丙氨酸的拆分，然后将二肽用嗜热菌蛋白酶在N－甲基吗啉缓冲溶液中进行酶促水解反应，从而获得L－苯丙氨酸。

Umemura等开发了由麦芽假丝酵母不对称降解DL-丙氨酸生产制备D－丙氨酸的实用工艺。

最适降解条件为3O摄氏度、pH6.0、通风量1.0vvm和振荡(1200r ／min)。

此工艺在200g／L DL-丙氨酸规模下，L－丙氨酸在40h内完全降解，剩余的D－丙氨酸可很容易地从反应混合液中分离出来，最终可得99．0％的化学纯和99．9％旋光纯度的D－丙氨酸90g。

Yokoaeki等以醛为原料，经Bucherer反应合成DL-5－取代乙内酰脲，然后用恶臭假单胞菌的二氢嘧啶酶催化选择性水解为N－氨甲酰D－氨基酸，再经化学法或酶法脱氨甲酰基得D－氨基酸，拆分DL-5－对羟基苯乙内酰胺生产D－对羟基苯甘酸，由30 g／L DL-5氨－对羟基苯乙内酰胺生产D－对羟基苯甘氨酸，收率达92％。

课题检索实习报告检索题目：唑类抗真菌药物的手性分离研究一、课题简介(选题意义、课题主要内容等，约300字)唑类抗真菌药物是临床上应用最广泛的抗真菌药物。

由于已有唑类抗真菌药物（如：氟康唑，伊曲康唑）存在一定的毒性和疗效不甚理想，迫切需要研发出广谱，高效，低毒的新型深部真菌感染三唑类抗真菌药物。

但是唑类抗真菌药物往往具有手性中心，目前上市的大部分为唑类药物的外消旋体。

众所周知，手性药物的对映体往往是两个不同的物质，其药理活性，代谢过程及毒性等存在很大差异。

因而需要建立手性分析方法以利于此类新药研究。

目前已有少数报道此类药物的手性分析方法，但未系统的加以研究方法和机理。

本课题拟选取多种环糊精作为手性选择剂，通过HPLC/CE的方法，对酮康唑，益康唑，咪康唑，布康唑，异康唑，芬替康唑，舍他康唑和噻康唑等多种进行筛选。

二、中文文献检索（一）中国生物医学文献数据库SinoMed(1978-)（按需使用主题词和自由词途径检索）1、检索步骤（按屏幕显示的格式记录有效检索式）#1 6350 主题词:三唑类/全部树/全部副主题词#2 69986 主题词:色谱法, 高压液相/全部树/全部副主题词#3 2709 主题词:电泳, 毛细管/全部树/全部副主题词#4 365 缺省[智能]:手性拆分#5 332 缺省[智能]:手性分离#6 4783 缺省[智能]:三唑类#9 7 ((#6 or #1) and (#3 or #2)) and (#5 or #4)2、检索结果（列出5篇最相关文献的题录：著者、题目、期刊、年、卷、期、页）[1]明永飞,赵亮,张红丽等.戊唑醇对映体在新型纤维素键合手性固定相上的拆分[J].高等学校化学学报,2007,28(2):258-260[2]李武宏,张欣荣,吴思等.新型三唑类抗真菌活性化合物毛细管电泳手性拆分及手性识别机理分子模拟研究[J].分析化学,2012,40(7):1031-1036[3]申刚义,崔箭,杨新玲等.新型三唑氮杂环β-环糊精固定相的制备及其气相色谱性能研究[J].分析试验室,2009,28(4):47-50[4]侯莹,纪松岗,赵亮等.毛细管区带电泳对5种三唑类化合物的手性分离[J].药学实践杂志,2008,26(3):214-217[5]汪永忠.伏立康唑对映体的手性高效液相色谱分离[J].中国药师,2006,9(3):231-232（二）维普数据库1、检索步骤(任意字段=手性与范围=全部期刊) 与((题名或关键词=唑与任意字段=高效液相与范围=全部期刊) 或者(题名或关键词=唑与任意字段=毛细管电泳与范围=全部期刊))2.检索结果[1’]田芹,任丽萍,吕春光等.反相色谱条件下三唑类手性农药对映异构体的拆分[J].分析化学,2010,38(5):688-692[2’]侯莹,纪松岗,赵亮等.毛细管区带电泳对5种三唑类化合物的手性分离[J].药学实践杂志,2008,26(3):214-217[3’]张艳川,李朝阳,李巧玲等.三唑类农药手性分离的研究进展[J].农药,2009,48(9):629-632[4’]王鹏,江树人,邱静等.纤维素衍生物手性固定相对戊唑醇对映体的拆分[J].色谱,2004,22(2):181-181[5’]李武宏,张欣荣,吴思等.新型三唑类抗真菌活性化合物毛细管电泳手性拆分及手性识别机理分子模拟研究[J].分析化学,2012,40(7):1031-1036三、英文文献检索(一)PubMed数据库(利用词语自动匹配功能进行智能检索，并进行修改)1、检索步骤(按Detail或History显示的格式记录有效检索式)((chiral[All Fields] AND ("divorce"[MeSH Terms] OR "divorce"[All Fields] OR "separation"[All Fields])) AND ("Chromatography, High Pressure Liquid"[Mesh] OR "Electrophoresis, Capillary"[Mesh])) AND "Triazoles"[Mesh]2、检索结果(列出5篇最相关文献的题录：著者、题目、期刊、年、卷、期、页）[6]: Luo M, Liu D, Zhou Z, Wang P. A new chiral residue analysis method for triazole fungicides in water using dispersive liquid-liquid microextraction(DLLME). Chirality. 2013 Sep;25(9):567-74.[7]: Mochizuki T, Taniguchi S, Tsutsui H, Min JZ, Inoue K, Todoroki K, Toyo'oka T. Relative quantification of enantiomers of chiral amines by high-throughput LC-ESI-MS/MS using isotopic variants of light and heavy L-pyroglutamic acids as the derivatization reagents. Anal Chim Acta. 2013 Apr 22;773:76-82.[8]: Bhushan R, Nagar H. Indirect enantioseparation of proteinogenic amino acids using naproxen-based chiral derivatizing reagent and HPLC.Biomed Chromatogr. 2013 Jun;27(6):750-6.[9]: Li J, Dong F, Cheng Y, Liu X, Xu J, Li Y, Chen X, Kong Z, Zheng Y. Simultaneous enantioselective determination of triazole fungicide difenoconazole and its main chiral metabolite in vegetables and soil by normal-phase high-performance liquid chromatography. Anal Bioanal Chem. 2012 Oct;404(6-7):2017-31.[10]: Zhang H, Qian M, Wang X, Wang X, Xu H, Wang Q, Wang M. HPLC-MS/MS enantioseparation of triazole fungicides using polysaccharide-based stationary phases. J Sep Sci. 2012 Apr;35(7):773-81.(二)EmBase数据库1、检索步骤(按显示的格式记录有效检索式)#1 13,215 'triazole'/exp OR 'triazole'#2 195,853 'high performance liquid chromatography'/exp#3 24,587 'capillary electrophoresis'/exp#5 470 #1 AND (#2 OR #3)#6 281,922 'antifungal'/exp OR antifungal#7 7,219 chiral AND separation#8 22 #1 AND #6 AND #7 AND (#2 OR #3)2、检索结果(3篇最相关文献的题录：著者、题目、期刊、年、卷、期、页）(11)Wang P., Jiang S., Liu D., Wang P., Zhou Z., Direct enantiomeric resolutions of chiral triazole pesticides by high-performance liquid chromatography. Journal of Biochemical and Biophysical Methods (2005) 62:3 (219-230)(12)Liu Y., Zou H.,High-performance liquid chromatographic evaluation of a coated cellulose tris(3,5-dimethylphenylcarbamate) chiral stationary phase having a small-pore silica support.Journal of Chromatography A (2008) 1178:1-2 (118-125)(13)Ye J., Wu J., Liu W.,Enantioselective separation and analysis of chiral pesticides by high-performance liquid chromatography.TrAC - Trends in Analytical Chemistry (2009) 28:10 (1148-1163)四、全文获取要求：1、利用图书馆的全文数据库、PubMed等途径获取上述文献的全文并下载；2、如果没有找到全文，请注明通过哪些途径和方法进行了查找。

大赛璐多糖衍生物反相手性柱产品概述：CHIRALPAK AD-H，AS-H和CHIRALCEL OD-H，OJ-H在正相领域中获得了广泛的应用，大赛璐同时也开发了相应的反相手性柱。

与正相柱相比较，反相柱涂敷的手性聚合物与正相柱相同，但是所用的硅胶不同。

反相高效液相色谱手性系列柱CHIRALPAK AD-RH、CHIRALPAK AS-RH、CHIRALCEL OD-RH和CHIRALCEL OJ-RH是分别将淀粉-3，5-二甲苯基氨基甲酸酯、淀粉-s-a-甲基苄基氨基甲酸酯、纤维素-3，5-二甲苯基氨基甲酸酯和纤维素-4-甲苯甲酸酯涂敷在5μm的硅胶表面。

反相柱也适合应用于LC/MS中。

CHIRALPAK AD-3R、CHIRALPAK AS-3R、CHIRALCEL OD-3R和CHIRALCEL OJ-3R 是填料粒径为3μm 的反相手性色谱柱，使用了高通用性的手性选择剂，可对各类化合物进行光学拆分。

由于能实现很高的理论塔板数，即使是短柱也可以在缩短分析时间的基础上显示出优异的分离能力。

更小粒径填料的优点：更高效更快出峰时间优化HPLC系统一般而言，这四种反相手性柱的应用范围和手性分离性能与它们各自相应的正相柱（CHIRALPAK? AD、CHIRALPAK? AS、CHIRALCEL? OD和CHIRALCEL? OJ）相似，但需要说明的是反相柱里的色谱填料基质与正相柱有所不同。

为避免损坏手性柱，正相与反相两类手性柱不宜混用。

反相柱使用水－有机溶剂流动相，适合分析水溶性样品（比如生物活性样品），或者对pH有特定要求的样品。

要避免极端pH，因为这样会损伤固定相的硅胶基质。

反相柱主要适用于下列分析对象：1. 使用含水的流动相进行手性拆分；2. 手性拆分水溶性样品；3. 离解或可离解样品的拆分；另外，反相手性柱在必要时可以与通常的非手性普通反相柱（如ODS柱）串联使用，以便使待分离组分与样品中的其他杂质分开。

高效液相色谱法在手性药物拆分中的应用纲要：外消旋化合物的手性分别是获取单调对映体的方法之一。

跟着人们对纯光学药物的需求日趋增添，各样手性分别技术得以快速发展。

近几十年来，在这些手性分别技术中，高效液相色谱法( HPLC ) 被公以为是一种强盛、快速、高效的分别技术，它已成功应用于对映体药物的分别剖析和制备中。

HPLC 用于敌手性药物分别的研究已获得很大进展，而且研发了大批可应用于手性小分子和聚合物分别的手性固定相，大大提升HPLC 的手性辨别能力。

本文以HPLC 的手性药物分别为焦点，介绍了近几年高效液相色谱法手性固定相的新发展和应用。

重点词：高效液相色谱法手性药物手性拆分Application of High Performance Liquid Chromatography in Chiral Separation of PharmaceuticalsAbstract：Resolution of racemic compounds is one of the potential ways of obtaining both enantiomers. The increasing demand for enantiopure drugs has led to the development of a variety of stereoselective separation technologies. Among several resolution techniques in the past few decades, high performance liquid chromatography ( HPLC ) is well recognized as a powerful, fast and efficient technique, which has been successfully employed for analysis and preparation of enantiomers of drugs. Enantioseparation by HPLC has significantly advanced, and a large number of chiral stationary phases ( CSPs ) for HPLC have been developed using both chiral small molecules and polymers with chiral recognition abilities. This review focuses on various HPLC methods for chiral separation of pharmaceuticals, many new developments and applications are introduced in chiral stationary phase of HPLC in recent years.Keywords：HPLC; Chiral drug; Chiral separation;引言手性药物是指药物分子构造中引下手性中心后，获取的一对互为实物与镜像的对映异构体，是当前药物研究领域的热门之一。

分析测试新成果 (280 ~ 285)直链淀粉三(3, 5-二甲基苯基氨基甲酸酯)-聚醚砜手性膜色谱研究普　娜，赖亚琳，高顺秋，蒋雪菲，袁黎明（云南师范大学 化学化工学院，云南 昆明　650500）摘要：以直链淀粉三(3, 5-二甲基苯基氨基甲酸酯)为材料，利用相转化法制备直链淀粉三(3, 5-二甲基苯基氨基甲酸酯)-聚醚砜手性高分子膜. 使用自制的手性膜色谱装置与高效液相色谱仪结合，对手性物质盐酸普萘洛尔和美托洛尔进行了手性膜色谱分离研究. 研究了进样量、流速、膜尺寸对分离效果的影响. 在优选分离效果的条件下，手性膜色谱以纯水为流动相，测得盐酸普萘洛尔的分离因子（α）和分离度（Rs ）分别为3.00和0.95，美托洛尔的α和Rs 分别为1.65和0.46. 为手性化合物的分离分析开拓了新的途径.关键词：手性膜色谱；手性分离；盐酸普萘洛尔；美托洛尔中图分类号：O657. 7 文献标志码：B 文章编号：1006-3757（2023）03-0280-06DOI ：10.16495/j.1006-3757.2023.03.005Chiral Membrane Chromatography Study Based on Amylose-tris-(3, 5-dimethylphenylcarbamate)-PolyethersulfonePU Na ， LAI Yalin ， GAO Shunqiu ， JIANG Xuefei ， YUAN Liming（Department of Chemistry and Chemical Engineering , Yunnan Normal University , Kunming 650500, China ）Abstract ：The chiral membrane of amylose-tris-(3, 5-dimethylphenylcarbamate)-polyethersulfone was prepared by phase conversion method using the amylose-tris-(3, 5-dimethylphenylcarbamate) as the material. The chiral membrane chromatographic separation of propranolol hydrochloride and metoprolol were studied by using the self-made chiral membrane chromatographic device combined with a high performance liquid chromatograph. The effects of injection volume, flow rate and membrane size on the separation of membrane were studied. Under the optimal conditions, the separation factors (α) and resolution (Rs ) with water as mobile phase were 3.00 and 0.95 for propranolol hydrochloride,1.65 and 0.46 for metoprolol, respectively. The study opens up a new way for the isolation and analysis of chiral compounds.Key words ：chiral membrane chromatography ；chiral separation ；propranolol hydrochloride ；metoprolol手性化合物在手性环境中体现出了理化性质的差异，影响到生活中的方方面面，渐使人们对手性化合物的拆分展开了必要的研究[1]. 到目前为止，手性液相色谱是使用最广泛的分离分析技术[2-5]，但其易耗品手性柱价格高、寿命短、分析时间较长，使用的流动相大多对环境和人体有害.膜色谱[6-8]涵盖了高效液相色谱分离速度快、操作压力低和样品容量大的优点，尤其是可以使用收稿日期：2023−06−07；　修订日期：2023−07−13.基金项目：国家自然科学基金项目（22174125） [Thin-slice Gas Chromatography Column Study Based on Two-dimensionalMaterials (22174125)]作者简介：普娜（1998−），女，硕士，主要从事手性分离研究，E-mail ：通信作者：袁黎明，男，博士，教授，主要从事手性分离方面的研究，E-mail ：.第 29 卷第 3 期分析测试技术与仪器Volume 29 Number 32023年9月ANALYSIS AND TESTING TECHNOLOGY AND INSTRUMENTS Sep. 2023水为溶剂，消除有机溶剂污染. 另外其所用膜很薄，有利于仪器的小型化. 手性膜色谱是一种能用于手性药物分离分析的膜色谱技术.手性固膜在生命体中已经客观存在，并在生命体系中起着非常重要的作用[9-10]. 手性固膜的研究一直受到膜研究人员的重视[11-12]. 目前，许多基于聚合物、碳纳米材料、金属有机骨架材料和其他一些无机材料的膜已被用于手性分离. 盐酸普萘洛尔和美托洛尔属于非选择性β-肾上腺素受体阻滞药[13-14].聚醚砜（PES）是综合性能优异的膜材料之一[15]. 1987年，Okamoto课题组研制出了直链淀粉三(3, 5-二甲基苯基氨基甲酸酯)（ADMPC，以下简称AD）作手性固定相[16]. 时至今日，AD仍以其分离分析效果显著且手性识别范围广泛而著称. 基于以上，本文利用浸没沉淀相转化的方法制备直链淀粉三(3, 5-二甲基苯基氨基甲酸酯)-聚醚砜（AD-PES）手性膜，将AD-PES手性膜根据膜色谱装置的大小裁剪为对应尺寸，裁剪好的AD-PES手性膜放置在膜色谱装置中，然后用其代替高效液相色谱柱连接到高效液相色谱仪上，以纯水为流动相进行手性分离，探究且优化了多种手性分离条件. 试验结果证明：AD-PES手性膜在液相色谱仪上对盐酸普萘洛尔和美托洛尔有较好的分离效果.1　试验部分1.1　仪器与试剂LC-15C高效液相色谱仪（日本岛津）；As 3120超声波清洗仪（天津奥特赛恩斯仪器有限公司）；DJ-1磁力搅拌器（常州申光仪器有限公司）；AL 204电子天平（梅特勒-力拓多仪器有限公司）；CLXXXUVM2超纯水机（英国 ELGA Lab Water）；Spectrum 100傅立叶变换红外光谱仪（FI-IR，美国PerkinElmer公司）；Nova NanoSEM 450扫描电子显微镜（SEM，美国FEI公司）.聚醚砜（PES，化学纯，德国巴斯夫）购于成都科隆化学有限公司；N, N-二甲基甲酰胺（DMF，99.5%）、甲醇（99.5%）购于成都科隆化学有限公司；丙酮（99.5%）购于云南省汕滇药业有限公司；苯（98%）、氧化钡（BaO，97%）、高锰酸钾（KMnO4，99%）、碳酸钾（K2CO3，99%）、1, 3, 5-三叔丁基苯（98%）均购于北京伊诺凯科技有限公司；无纺布（100%棉）购于浙江真邦实业有限公司；正己烷（98%）、异丙醇（99.7%）购于天津市风船化学试剂科技有限公司；盐酸普萘洛尔（99%）、美托洛尔（99%）购于美国Sigma-Aldrich公司.1.2　DMF的纯化圆底烧瓶中加入500 mL DMF和50 mL苯，置于70~75 ℃的油浴搅拌器中收集水-苯共沸物. 剩余液体中加入BaO振荡，进行干燥处理后过滤. 在氮气保护下进行减压蒸馏，收集76 ℃下的馏分. 1.3　丙酮的纯化250 mL丙酮中加入2.5 g KMnO4，于蒸馏装置中回流，收集馏分. 再用无水K2CO3进行干燥，静置后过滤，收集滤液. 于蒸馏装置中保持55~58 ℃进行蒸馏，收集馏分备用.1.4　AD-PES手性膜的制备称取1.0 g的PES于50 mL圆形烧瓶中，加入3.5 mL无水DMF搅拌24 h. AD是根据文献[16]合成的，其结构式如图1所示. 称取15 mg的AD 于50 mL圆形烧瓶中，加入1.5 mL无水丙酮搅拌1 h. 将以上两者溶液混合后连续搅拌24 h得到AD-PES铸膜液.OCONH-R R=CH3CH3OOOCONH-RR-HNOCO图1　AD的分子结构式Fig. 1　Molecular structure of AD制备好的铸膜液脱气泡后静置3~4 h，将无纺布铺平后在其表面缓慢、均匀地浇筑铸膜液，使用特制刮膜刀（制膜厚度0.2 mm）刮出适当大小的AD-PES手性膜，干燥片刻后放入纯水中进行浸没沉淀相转化，12 h后取出，根据需要裁成适当大小备用.PES膜使用未添加AD丙酮溶液的PES-DMF 溶液按照相同方法制备.1.5　膜色谱装置1.5.1　膜色谱装置展示膜色谱涵盖了高效液相色谱分离速度快、操作压力低和样品容量大的优点，尤其是可以使用水为溶剂，消除有机溶剂污染，另外因其所用膜较薄，十分有利于仪器的小型化. 本试验使用3种不同直径的膜色谱装置，示意图如图2所示. 观察图2，在使用膜色谱装置的过程中，首先将制备好的膜放入凹第 3 期普娜，等：直链淀粉三(3, 5-二甲基苯基氨基甲酸酯)-聚醚砜手性膜色谱研究281槽内，然后在膜上放置过滤芯，过滤芯的主要作用是降低并分散流动相对膜单一流径处的冲力，使流动相尽可能均匀地透过膜，提高膜的有效使用面积.将高效液相色谱仪的输液管分别与膜色谱装置上方的输入孔与下方的输出孔相连接. 膜色谱装置具体参数如表1所列.过滤芯输出孔图2　膜色谱装置（左）正面及（右）截面示意图Fig. 2　Schematic views of (left) front and (right) cross-section of membrane chromatography device表 1 三种膜色谱装置具体参数Table 1　Specific parameters of three membranechromatography devices /mm 型号凹槽直径凹槽深度过滤芯厚度过滤芯直径孔道直径整体高度大号331 2.0330.525中号221 1.5220.525小号1311.5130.5271.5.2　膜色谱装置死时间、死体积的测量死体积（V 0）是造成分析物拖尾的原因之一，因此V 0是衡量膜色谱装置的重要参数，根据公式（1）计算：其中，t 0代表死时间，min ；v 代表流速，mL/min. 通过测量死时间来计算死体积. 本试验选用1, 3, 5-三叔丁基苯测试死时间，检测波长设置为254 nm ，流速为0.03 L/min ，流动相为甲醇. 将制备好的PES 膜作为基膜，分别剪成直径为13、22、33 mm 的圆形后，置于膜色谱装置中，连接高效液相色谱. 大、中、小号的膜色谱所测得死时间分别为2.4、1.5、0.9 min ，对应死体积分别为0.24、0.15、0.09 mL.1.6　膜色谱计算公式采用k 1，k 2表示保留因子，α表示分离因子，Rs表示分离度. k 1，k 2，α，Rs 的计算公式如式（2）~（5）所列：其中，t 1、t 2代表两个峰的的保留时间，min ；t 0代表死时间，min ；W 1/2(1)、W 1/2(2)代表第一个峰和第二个峰的半峰宽，min.2　结果与讨论2.1　AD-PES 手性膜的表征对比PES 膜与AD-PES 手性膜的红外光谱图（图3），能看出AD-PES 手性膜（曲线b ）不同于PES 膜（曲线a ）的红外吸收. 在吸收曲线b 中，3 310cm −1处有明显的N-H 伸缩振动峰，1 650 cm −1处有酰胺的伸缩振动峰. 说明AD 成功固载到PES 中.Wavenumber/cm −14 0003 500ab3 0002 500 2 000 1 500 1 000500图3　（a ）PES 膜，（b ）AD-PES 手性膜的傅里叶红外光谱图Fig. 3　FT-IR spectra of (a) PES membrane, (b) AD-PESchiral membrane图4为AD-PES 手性膜的扫描电子显微镜（SEM ）图. 如图4（a ）所示，AD-PES 手性膜的表面呈现出光滑平整的特征. 图4（b ）为AD-PES 手性膜揭去无纺布后的截面图，截面呈现出海绵状孔道，孔道内径分布在2~12 µm. 加上支撑层无纺布AD-PES 手性膜的平均厚度约为185 µm.2.2　AD-PES 手性膜对盐酸普萘洛尔分离性能的研究在检测波长为230 nm ，流速为0.03 mL/min ，流动相为纯水，进样量为3 µL 的色谱条件下，使用中282分析测试技术与仪器第 29 卷号膜色谱装置对盐酸普萘洛尔进行分离，其谱图及结构式如图5所示.t /minV o l t a g e /m V010203040HClOOH HNCH 3CH 3100200300400500图5　盐酸普萘洛尔分离色谱图及其结构式Fig. 5　Chromatogram and structural formula ofpropranolol hydrochloride2.2.1　进样量对分离效果的影响使用1.3节中所示的膜色谱装置将制备好的复合膜放入其中，全程保持膜是湿润的，按序连接好装置（注意需在各个螺纹接口处裹紧生胶带以防漏液）. 色谱条件：检测波长为230 nm ，流速为0.03mL/min ，流动相为纯水，膜装置为中号. 变量因素为进样量，分别为1、2、3、4、5 µL. 色谱计算公式如式（2）~（5）所列. 分离数据如表2所列.表 2 不同进样量条件下盐酸普萘洛尔的分离结果Table 2　Separation results of propranolol hydrochlorideunder different injection volumes进样量/µLk 1k 2αRs 1 4.2011.53 2.750.682 3.9911.06 2.770.823 3.5010.50 3.000.954 3.2710.06 3.080.8853.5410.162.870.74由表2可看出，在进样量为3 µL 时，AD-PES 手性膜对盐酸普萘洛尔的分离效果最好. 当进样量过多时，膜上的手性位点与样品作用已达到饱和状态，导致部分盐酸普萘洛尔无法被分离.2.2.2　流速对分离效果的影响色谱条件：检测波长为230 nm ，进样量为3 µL ，流动相为纯水，膜装置为中号. 变量因素为流速，分别为0.01、0.02、0.03、0.04、0.05 mL/min. 分离数据如表3所列.表 3 不同流速下盐酸普萘洛尔的分离结果Table 3　Separation results of propranolol hydrochlorideunder different flow rates流速/ (mL/min)k 1k 2αRs 0.0114.4634.25 2.370.780.02 6.7518.00 2.670.800.03 3.5010.50 3.000.950.04 3.408.83 2.600.840.052.466.202.520.77由表3可看出，固定其他色谱条件，只改变流速时，在流速为0.03 mL/min 时分离效果最好. 若流速设置过慢，会导致峰形较差，拖尾严重. 而流速过快会使盐酸普萘洛尔来不及与膜中的手性识别位点作用就被流动相冲走，导致试验结果不准确，分离效果不理想.2.2.3　膜尺寸对分离效果的影响本试验通过使用3种不同直径的膜色谱装置，探究膜的尺寸对分离效果的影响. 将色谱条件设置为：检测波长230 nm ，进样量3 µL ，流速0.03 mL/min ，流动相为纯水. 变量因素为膜的尺寸，分别为33、22、13 mm. 分离数据如表4所列.表 4 不同膜尺寸下盐酸普萘洛尔的分离结果Table 4　Separation results of propranolol hydrochlorideunder different membrane sizes膜尺寸/mmk 1k 2αRs 33 5.1712.83 2.480.8822 3.5010.50 3.000.95133.649.662.650.87由表4可知，在固定其他色谱条件不变的情况下，通过使用不同直径的膜色谱装置来改变膜的尺2 μm 20 μm图4　AD-PES 手性膜的SEM 图（a ）AD-PES 手性膜表面,（b ）AD-PES 手性膜截面Fig. 4　SEM images of AD-PES chiral membrane (a) surface of AD-PES chiral membrane, (b) cross-section ofAD-PES chiral membrane第 3 期普娜，等：直链淀粉三(3, 5-二甲基苯基氨基甲酸酯)-聚醚砜手性膜色谱研究283寸，在膜尺寸为22 mm 时盐酸普萘洛尔的分离效果最佳. 膜尺寸增大时，虽然手性识别位点在增多，但是死体积也在增加. 所以，选用合适尺寸的手性膜也是衡量分离效果的重要因素之一.2.3　AD-PES 手性膜对美托洛尔分离性能的研究在检测波长为230 nm ，流速为0.03 mL /min ，流动相为纯水，进样量为3 µL 的色谱条件下，使用中号膜色谱装置对美托洛尔进行分离，其谱图及结构式如图6所示.t /minV o l t a g e /m V051015OOOH HN 50100150200250图6　美托洛尔分离色谱图及其结构式Fig. 6　Chromatogram and structural formula ofmetoprolol2.3.1　进样量对分离效果的影响色谱条件：检测波长230 nm ，流速0.03 mL/min ，流动相为纯水，膜装置使用中号，膜直径为22 mm.变量因素为进样量，分别为1、2、3、4、5 µL. 分离数据如表5所列.表 5 不同进样量条件下美托洛尔的分离结果Table 5　Separation results of metoprolol under differentinjection volumes进样量/µLk 1k 2αRs 1 2.43 3.44 1.420.382 2.39 3.41 1.430.433 1.70 2.80 1.650.464 2.34 3.43 1.460.3752.453.431.400.25由表5可看出，在进样量为3 µL 时，AD-PES 手性膜对美托洛尔的分离效果最好. 当进样量过多时，膜上的手性位点与美托洛尔作用已达到饱和状态，导致部分样品无法被分离.2.3.2　流速对分离效果的影响色谱条件：检测波长230 nm ，进样量为3 µL ，流动相为纯水，膜装置使用中号，膜直径为22 mm. 变量因素为流速，分别为0.01、0.02、0.03、0.04、0.05mL/min. 分离数据如表6所列.表 6 不同流速下美托洛尔的分离结果Table 6　Separation results of metoprolol under differentflow rates流速/ (mL/min)k 1k 2αRs 0.01 6.558.69 1.330.380.02 4.84 6.59 1.360.400.031.702.80 1.650.460.04 1.61 2.41 1.490.430.050.500.941.880.33由表6可看出，固定其他色谱条件，只改变流速时，在流速为0.03 mL/min 时对美托洛尔的分离效果最好. 若流速设置过慢，会导致峰形较差，而流速过快手性药品被流动相冲走，导致试验结果不准确，分离效果不理想.2.3.3　膜尺寸对分离效果的影响本试验通过使用3种不同直径的膜色谱装置，从而探究膜的尺寸对分离效果的影响. 将色谱条件设置为：检测波长230 nm ，进样量为3 µL ，流速0.03mL/min ，流动相为纯水. 变量因素为膜的尺寸，分别为33、22和13 mm. 分离数据如表7所列.表 7 不同膜尺寸下美托洛尔的分离结果Table 7　Separation results of metoprolol under differentmembrane sizes膜尺寸/mmk 1k 2αRs 33————22 1.70 2.80 1.650.46131.482.131.440.41由表7可知，在固定其他色谱条件不变，通过使用不同直径的膜色谱装置来改变膜的尺寸时，在膜尺寸为33 mm 下无法分离美托洛尔，在膜尺寸为22 mm 时美托洛尔的分离效果最佳. 理论上膜尺寸越大，手性识别位点越多，与手性物质作用的有效位点也越多，分离效果越好，而事实并不是膜尺寸越大越好. 膜尺寸增大，死体积及压力也在增大，使得理论塔板数降低，分离效果变差. 所以，选用合适尺寸的手性膜也是衡量分离效果的重要因素之一.284分析测试技术与仪器第 29 卷3　结论本文使用AD 与PES 制备铸膜液，经过浸没沉淀相转化后，得到AD-PES 手性膜. 通过特制的膜色谱装置结合高效液相色谱对盐酸普萘洛尔和美托洛尔进行了分离. 对AD-PES 手性膜进行了一系列评价，同时探讨了进样量、流速、膜尺寸对分离效果的影响. 当流速为0.03 mL/min 、进样量为3 µL 、膜直径为22 mm 时，对盐酸普萘洛尔和美托洛尔的分离效果最佳. 目前，膜分离技术应用在手性分离领域的研究才刚刚起步，具有巨大的发展空间，相信在不久的未来能取得长足进步.参考文献：Wu S K, Snajdrova R, Moore J C, et al. Biocatalysis:enzymatic synthesis for industrial applications [J ]. An-gewandte Chemie (International Ed in English)，2021，60 （1）：88-119.［ 1 ］Choi Y, Park J Y, Chang P S. Integral stereoselecti-vity of lipase based on the chromatographic resolution ofenantiomeric/regioisomericdiacylglycerols [J ].Journal of Agricultural and Food Chemistry ，2021，69（1）：325-331.［ 2 ］袁黎明. 手性识别材料[M ]. 北京: 科学出版社,2010. [YUAN Liming. Chiral recognition materials [M ]. Beijing: Science Press, 2010.]［ 3 ］李克丽, 袁黎明, 章俊辉, 等. 色谱手性分离研究[J ].分析测试技术与仪器，2017，23（3）：159-164. [LI Keli, YUAN Liming, ZHANG Junhui, et al. Study on chiral separation of chromatography [J ]. Analysis and Testing Technology and Instruments ，2017，23 （3）：159-164.]［ 4 ］刘家玮, 刘湘唯, Habib Ur Rehman, 等. 金属有机框架色谱固定相的研究进展[J ]. 分析测试技术与仪器，2021，27（2）：65-76. [LIU Jiawei, LIU Xiangwei,Habib Ur Rehman, et al. Progress in metal-organic frameworks as stationary phase for chromatographic separation [J ]. Analysis and Testing Technology and Instruments ，2021，27 （2）：65-76.]［ 5 ］Chen J, Yu B, Cong H L, et al. Recent developmentand application of membrane chromatography [J ].［ 6 ］Analytical and Bioanalytical Chemistry ，2023，415（1）：45-65.Ghosh R. Ultrahigh-speed, ultrahigh-resolution prepar-ative separation of protein biopharmaceuticals using membrane chromatography [J ]. Journal of Separation Science ，2022，45 （12）：2024-2033.［ 7 ］Orr V, Zhong L Y, Moo-Young M, et al. Recent ad-vances in bioprocessing application of membrane chromatography [J ]. Biotechnology Advances ，2013，31 （4）：450-465.［ 8 ］Zhang S Y, Chen X, Sun L D, et al. β-cyclodextrin-self-assembled nanochannel membrane for the separation of chiral drugs [J ]. ACS Applied Nano Materials ，2020，3 （5）：4351-4356.［ 9 ］蔡志威, 梁键谋, 陈超. 扫描电子显微镜-能谱联用在鉴别药包材上的应用[J ]. 分析测试技术与仪器，2022，28（3）：260-266. [CAI Zhiwei, LIANG Jian-mou, CHEN Chao. Application of scanning electron microscopy-energy dispersive spectroscopy in identi-fication of pharmaceutical packaging materials [J ].Analysis and Testing Technology and Instruments ，2022，28 （3）：260-266.]［ 10 ］Han H D, Liu W, Xiao Y, et al. Advances of enanti-oselective solid membranes [J ]. New Journal of Chem-istry ，2021，45 （15）：6586-6599.［ 11 ］Liu T Q, Li Z, Wang J J, et al. Solid membranes forchiral separation: a review [J ]. Chemical Engineering Journal ，2021，410 ：128247.［ 12 ］Kalam M N, Rasool M F, Rehman A U, et al. Clinicalpharmacokinetics of propranolol hydrochloride: a review [J ]. Current Drug Metabolism ，2020，21 （2）：89-105.［ 13 ］Zamir A, Hussain I, Rehman A U, et al. Clinical phar-macokinetics of metoprolol: a systematic review [J ].Clinical Pharmacokinetics ，2022，61 （8）：1095-1114.［ 14 ］Sahebi S, Phuntsho S, Woo Y C, et al. Effect of sulph-onated polyethersulfone substrate for thin film com-posite forward osmosis membrane [J ]. Desalination ，2016，389 ：129-136.［ 15 ］Okamoto Y, Aburatani R, Fukumoto T, et al. Usefulchiral stationary phases for HPLC Amylose tris(3, 5-dimethylphenylcarbamate)andtris(3, 5-dichloro-phenylcarbamate) supported on silica gel [J ]. Chem-istry Letters ，1987，16 （9）：1857-1860.［ 16 ］第 3 期普娜，等：直链淀粉三(3, 5-二甲基苯基氨基甲酸酯)-聚醚砜手性膜色谱研究285。

大赛璐手性柱AD-H、OD-H操作常见问题及解决办法1.正相手性色谱柱AD-H、OD-H使用前需要注意什么?将正相手性色谱柱AD-H、AS-H、OD-H、OJ-H接上液相色谱仪之前先要保证液相色谱系统中的所有管路均为正相流动相。

如果液相系统里面是反相溶液，比如水/乙腈=50/50(v/v)。

那么需要先用无水乙醇或者无水异丙醇冲洗液相的所有管路（包括所有溶剂入口、六通阀、检测器等），然后用正相流动相冲洗液相的所有管路，最后再接上正相手性色谱柱；如果液相系统的反相流动相中含有缓冲盐，要先用纯水冲洗HPLC系统，然后用无水乙醇或者无水异丙醇冲洗液相的所有管路，最后用正相流动相冲洗。

2.正相手性色谱柱中保存液是什么?正相手性色谱柱AD-H、AS-H、OD-H、OJ-H中的保存液是正己烷/异丙醇=90/10(v/v)。

其它手性色谱柱的保存液请查阅使用说明书上的说明。

3.新柱CHRALPAK IA和CHRALPAK IB与原来的大赛璐手性柱有什么区别？CHRALPAK IA和CHRALPAK IB是将多糖衍生物共价键合在硅胶上，而大赛璐原来的手性柱固定相都是将多糖衍生物涂敷在硅胶表面的。

正因为是共价键合，所以CHRALPAK IA和CHRALPAK IB柱能使用任何液相流动相，比如四氢呋喃、氯仿、丙酮、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯等。

CHRALPAK IA和CHRALPAK IB与大赛璐原有的正相柱相比，扩大了溶剂选择的范围，增加了新的分离选择性，在原来大赛璐手性色谱柱上分不开的化合物有可能在CHRALPAK IA和CHRALPAK IB上得以分开。

4.CHIRALPAK AD-H、CHIRALPAK AS-H、CHIRALCEL OD-H、CHIRALCEL OJ-H四款正相色谱柱的区别是什么？区别是固定相的种类不同。

CHIRALPAK AD-H、AS-H的硅胶表面涂敷的是直链淀粉衍生物；CHIRALCEL OD-H、OJ-H的硅胶表面涂敷的是纤维素衍生物。

反相CHIRALPAK® / CHIRALCEL®柱1．前言反相高效液相色谱手性系列柱CHIRALPAK® AD-RH、CHIRALPAK® AS-RH、CHIRALCEL® OD-RH和CHIRALCEL® OJ-RH是分别将淀粉-3，5-二甲苯基氨基甲酸酯、淀粉-s-α-甲基苄基氨基甲酸酯、纤维素-3，5-二甲苯基氨基甲酸酯和纤维素-4-甲苯甲酸酯涂敷在5µm的硅胶表面。

这些衍生物的化学分子结构式如图1所示。

CHIRALPAK® AD-RH CHIRALPAK® AS-RH图1 四种反相色谱固定相的化学结构示意图一般而言，这四种反相手性柱的应用范围和手性分离性能与它们各自相应的正相柱（CHIRALPAK® AD、CHIRALPAK® AS、CHIRALCEL® OD和CHIRALCEL® OJ）相似，但需要说明的是反相柱里的色谱填料基质与正相柱有所不同。

为避免损坏手性柱，正相与反相两类手性柱不宜混用。

反相柱主要适用于下列分析对象：1.使用含水的流动相进行手性拆分；2.手性拆分水溶性样品；3.离解或可离解样品的拆分；另外，反相手性柱在必要时可以与通常的非手性普通反相柱（如ODS柱）串联使用，以便使待分离组分与样品中的其他杂质分开。

2 使用前注意事项2.1 原装柱中的溶剂反相CHIRALCEL® 和CHIRALPAK® 柱出厂时，使用下述比例的含水乙腈溶液封装。

表1 四种反相原装柱出厂时封装溶液色谱柱水/乙腈 (v/v)CHIRALPAK AD-RH 60/40CHIRALPAK AS-RH 60/40CHIRALCEL OD-RH 60/40CHIRALCEL OJ-RH 80/202.2 色谱系统清洗在柱子连接到HPLC之前，要彻底清洗仪器流路。

收稿日期:20201009基金项目:国家自然科学基金资助(No.91856123)作者简介:祝金艳(1994 ),女,硕士研究生,研究方向:高效液相色谱,E-mail:1532005280@;通讯作者:袁黎明(1961 ),男,教授,研究方向:手性色谱和手性高分子膜,E-mail:727836807@㊂doi :10．16597/j．cnki．issn．1002154x．2020．11．001酸性手性药物在直链淀粉手性固定相上的拆分祝金艳㊀徐㊀文㊀艾㊀萍㊀袁黎明(云南师范大学化学化工学院,云南昆明650500)摘㊀要㊀本文采用实验室自合成的直链淀粉三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)(ADMPC )涂覆的4种不同衍生化大孔硅胶以及纯大孔硅胶制成5种手性固定相㊂考察了4种流动相下5种手性柱对布洛芬㊁扁桃酸㊁DNB -亮氨酸㊁酮洛芬和氟比洛芬的拆分㊂这5种酸性手性药物在5种手性柱上都有不同程度的拆分,不同样品的最佳拆分条件有一定差异,ADMPC 涂覆在反相大孔硅胶上对5种酸性手性药物的整体拆分效果优于氨基化大孔硅胶和纯大孔硅胶㊂为这五种手性药物的拆分提供了参考㊂关键词㊀手性药物㊀直链淀粉手性固定相㊀高效液相色谱㊀对映体分离Separations of Acid Chiral Drugs on Amylose Stationary Phase in HPLCZhu Jinyan㊀Xu Wen㊀Ai Ping㊀Yuan Liming(College of Chemistry and Chemical Engineering,Yunnan Normal University,Yunnan Kunming 650500)Abstract ㊀In this paper,Amylose tri(3,5-dimethyl phenyl carbamate)(ADMPC)was synthesized and coatedon pure or derivative macroporous silica gel to obtain five chiral stationary phases.With four mobile phases,ibuprofen,mandelic acid,DNB-leucine,ketoprofen and flurbiprofen was resolved on those chiral columns.The experimental results confirm that five chiral drugs have different degrees of resolution on five chiral columns,and the optimal separation conditions of different samples are different.ADMPC coated on macroporous silica gel usually has a good resolution.This research provides a way for the actual resolution of the five chiral drugs.Keywords ㊀chiral drug㊀amylose chiral stationary phase㊀high performance liquid chromatography (HPLC)㊀enantiomeric separation㊀㊀手性药物是一类非常重要的化合物,目前临床药物有3500余种,其中约一半为合成药,而合成药物中约一半是外消旋体[1]㊂外消旋体药物与生物大分子对映体之间具有立体选择性,导致手性药物在生物体内显现出不同药理活性㊂研究发现某些外消旋体药物中,一种立体异构体具有药效,而另一种则无效或有毒副作用㊂因此研究手性药物的拆分方法,对手性药物的药理学㊁毒理学的研究和开发具有重要意义[23]㊂高效液相色谱手性固定相法是分离手性化合物对映体最常用的分析方法之一㊂在众多的手性固定相中,应用最广的是由Y.Okmoto 课题组开发的多糖衍生物类手性固定相,该课题组经过大量的研究,开发出了以纤维素和直链淀粉为手性分离材料的商品㊀2020.Vol.34,No.11㊀科技进展‘Advances in Science&Technology“柱㊂张美[4]等人用4根商品手性色谱柱OD㊁AD㊁IA㊁Whelk,根据说明书中推荐的最佳流动相正己烷异丙醇(90ʒ10,V/V)㊁正己烷乙醇(90ʒ10,V/V)拆分了扁桃酸㊁DNB-亮氨酸㊁布洛芬㊁酮洛芬㊁氟比洛芬在内的38个手性化合物㊂邵红[5]用键合纤维素衍生物手性固定相在流动相为正己烷-异丙醇(95ʒ5, V/V)拆分酮洛芬㊂目前大部分的文献报导是用直链淀粉柱在正相模式下拆分手性药物,与其相比,反相模式的流动相具有低成本㊁污染小㊁应用范围广等优势,所以反相模式拆分是液相手性固定相法拆分手性化合物的发展趋势,具有较好的应用前景㊂本文将自合成的直链淀粉三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)分别涂覆到5种表面不同衍生化的硅胶上,在反相流动相(甲醇ʒ水的3种不同比例)下拆分5种酸性手性药物,并与正相流动相(正己烷ʒ异丙醇=9ʒ1)下的情况做了对比㊂目前还未见系统研究直链淀粉三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)分别涂覆到不同衍生化硅胶上的比较研究㊂本文研究的5个药物对映体的结构如图1所示㊂图1㊀扁桃酸(a)㊁DNB-亮氨酸(b)㊁布洛芬(c)㊁酮洛芬(d)㊁氟比洛芬(e)化学结构Fig.1㊀The chemical structures of mandelic acid(a), DNB-leucine(b),ibuprofen(c),ketoprofen(d),and flurbiprofen(e)1㊀实验部分1.1㊀仪器和试剂DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌器(巩义市予华仪器有限责任公司),EYELA磁力搅拌低温恒温水槽(PSL-1810,上海爱朗仪器有限责任公司),RE 5298A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂),DHG-9035A电热鼓风干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司),AL204梅特勒-托利多电子天秤(上海梅特勒-托利多仪器有限公司),PHS-25雷磁pH计(上海精密科学仪器有限公司),Model1666Slurry Packer 高效液相色谱装柱机(美国All-tech公司), XL30ESEM-TMP型扫描电子显微镜(荷兰飞利浦公司),高纯水机(英国ELGA Lab Water),高效液相色谱仪(配有Elite P1201高压恒流泵㊁Elite P1201紫外检测器㊁EC2006型色谱工作站,大连依利特分析仪器有限公司)㊂大孔硅胶(粒径7μm,孔径100nm,日本Daisoge公司);直链淀粉㊁3-氨丙基三乙氧基硅烷㊁3,5-二甲基苯基氨基异氰酸酯(阿达玛斯试剂有限公司);十八烷基三氯硅烷(95%,阿达玛斯试剂有限公司);正辛基二甲基氯硅烷(阿拉丁试剂有限公司);正丁基二甲基氯硅烷(98%,阿尔法试剂有限公司);所用溶剂(天津市风船化学试剂科技有限公司)(分析纯);手性化合物(西格玛和阿拉丁试剂有限公司)㊂1.2㊀手性固定相的合成直链淀粉三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯) (ADMPC)的合成[67]:将1g直链淀粉加入到圆底烧瓶中,在100ħ下真空干燥6h,冷却至室温㊂N2保护下,加40mL无水吡啶搅拌1h,让直链淀粉溶胀,再加入3.9mL3,5-二甲基苯基氨基异氰酸酯,在85ħ下搅拌回流24h,冷却至室温,将产物倒入大量的甲醇中,白色絮状物析出,搅拌过夜,减压抽滤,用甲醇洗涤,65ħ下真空干燥24h,得到白色固体㊂C4大孔硅胶的合成:N2保护下,称取10g活化大㊀祝金艳等.酸性手性药物在直链淀粉手性固定相上的拆分㊀2020.Vol.34,No.11孔硅胶于250mL圆底烧瓶中,加入100mL无水甲苯,4mL正丁基二甲基氯硅烷和10mL吡啶,110ħ搅拌回流6h㊂冷却后加入1mL三甲基氯硅烷,110ħ搅拌回流4h㊂反应完成后,冷却减压抽滤,依次用甲苯㊁甲醇㊁二氯甲烷多次洗涤,然后在50ħ下真空干燥5h,得到C4反相大孔硅胶㊂C8反相大孔硅胶的合成:步骤同C4大孔硅胶㊂C18反相大孔硅胶的合成:N2保护下,依次将8g 活化后的硅胶,100mL无水甲苯,10mL十八烷基三氯硅烷加入到圆底烧瓶中,110ħ搅拌回流24h㊂冷却后减压抽滤,并用无水甲苯多次洗涤㊂将抽滤后的硅胶迅速加入到圆底烧瓶中,抽真空,充N2,在N2保护下加入100mL无水甲苯,1mL三甲基氯硅烷,在110ħ搅拌回流6h,冷却后减压抽滤,依次用甲苯㊁甲醇㊁二氯甲烷多次洗涤,在50ħ下真空干燥5h,得到C18反相大孔硅胶㊂氨丙基大孔硅胶的合成:N2保护下,将10g活化硅胶加入到150mL圆底烧瓶,150ħ条件下干燥6h,冷却至室温㊂在N2保护下,先加100mL无水甲苯搅拌10分钟,再加1.2mL无水吡啶搅拌10min,最后加1.6mL3-氨丙基三乙氧基硅烷,在100ħ下搅拌回流24h,反应结束后,冷却减压抽滤,洗涤多次,真空干燥,得到氨丙基大孔硅胶㊂1.3㊀直链淀粉三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)手性固定相的制备㊀㊀取5个25mL的烧瓶中,分别加入0.3g ADMPC 和8mL吡啶将其溶解,采用旋转蒸发法,将上述溶液分别涂覆于1.7g的5种硅胶表面,即得到相应的固定相:ADMPC-C4大孔硅胶(CSP-A)㊁ADMPC-C8大孔硅胶(CSP-B)㊁ADMPC-C18大孔硅胶(CSP-C)㊁ADMPC-NH2大孔硅胶(CSP-D)㊁ADMPC-大孔硅胶(CSP-E)㊂1.4㊀液相色谱柱的制备将上述制备的5种手性固定相过250目筛,采用高压匀浆法装柱,分别将1.2g固定相加入适量的(V正己烷ʒV异丙醇=9ʒ1)溶液做顶替液,在40~50MPa 压力下装柱,制备了柱维为2.0ˑ250mm的液相色谱柱㊂1.5㊀色谱的拆分条件以V正己烷ʒV异丙醇=9ʒ1㊁甲醇㊁V甲醇ʒV水=9ʒ1㊁V甲醇ʒV水=3ʒ1为流动相,流动相中均添加0.2%的三氟乙酸,并经0.45mm的滤膜过滤,流速为0.1mL/min,检测波长为254nm㊂扁桃酸㊁DNB-亮氨酸㊁布洛芬㊁酮洛芬㊁氟比洛芬用流动相进行溶解㊂2㊀结果与讨论2.1㊀手性固定相的核磁表征在常温下以氘代吡啶为溶剂,测ADMPC的核磁氢谱㊂如图2,化学位移7.20ppm㊁7.55ppm㊁8.69ppm 是吡啶的氢峰;1.50~2.10ppm㊁2.10~2.50ppm分别是直链淀粉结构2-和3-位引入3,5-二甲基苯基氨基异氰酸酯上-CH3的质子峰和6-位引入3,5-二甲基苯基氨基异氰酸酯上-CH3的质子峰;3.00~6.00ppm为直链淀粉结构上的质子峰;6.00~8.00ppm为苯环上的质子峰;9.00~11.50ppm 为氨基的质子峰㊂由核磁氢谱可以确认直链淀粉上2-㊁3-和6-位的羟基被3,5-二甲基苯基氨基异氰酸酯反应,表明成功合成了ADMPC㊂图2㊀直链淀粉三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)的核磁氢谱图Fig.2㊀NMR spectrogram of amylose tri(3,5-dimethylphenylcarbamate)2.2㊀手性固定相的扫描电镜表征高分子溶液具有一定的黏度,将其涂覆到硅胶表面时,需尽量避免硅胶颗粒之间的粘连,商品化的多糖手性柱能做到固定相颗粒的高度分散,该技术是多糖手性柱厂家的核心技术之一㊂图3中(A)㊁(C)㊁(E)㊁(G)㊁(I)是硅胶表面未涂覆ADMPC的扫描电镜图,硅胶表面相对光滑㊂图(B)㊁(D)㊁(F)㊁(H)㊁(J)是ADMPC涂覆后的5种不同硅胶,可见硅胶颗粒表面有附着物㊂另外由于大孔硅胶孔径大,部分涂覆溶液可能进入到大孔的内部㊂㊀2020.Vol.34,No.11㊀科技进展‘Advances in Science &Technology “图3㊀10种硅胶的扫描电镜图.(A )C 4大孔硅胶;(B )CSP-A ;(C )C 8大孔硅胶;(D )CSP-B ;(E )C 18大孔硅胶;(F )CSP-C ;(G )NH 2大孔硅胶;(H )CSP-D ;(I )大孔硅胶;(J )CSP-EFig.3㊀Scanning electron microscope images of 10silica gel.(A )C 4macroporous silica gel ;(B )CSP-A ;(C )C 8macroporous silica gel ;(D )CSP-B ;(E )C 18macroporous silica gel ;(F )CSP-C ;(G )NH 2macroporous silica gel ;(H )CSP-D ;(I )macroporous silica gel ;(J )CSP-E2.3㊀5种酸性手性化合物在不同流动相下的拆分表1㊀手性药物在5种色谱柱CSP -A 至CSP -E 上的拆分数据Tab.1㊀Separation data of chiral drugs on five column CSP -A to CSP -E正己烷ʒ异丙醇∗=9ʒ1CSP -A CSP -B CSP -C CSP -D CSP -E k 1αRs k 1αRs k 1αRs k 1αRs k 1αRs 扁桃酸 3.68 1.150.79 2.76 1.150.64 1.51 1.140.89 1.92 1.19 1.16 1.88 1.130.76DNB -亮氨酸 6.54 1.45 2.18 5.20 1.44 2.24 2.97 1.48 2.43 3.51 1.49 2.38 3.50 1.41 2.04布洛芬 酮洛芬 4.01 1.140.77 2.97 1.130.76 1.55 1.18 1.19 1.95 1.18 1.09 1.61 1.140.73氟比洛芬1.471.341.481.081.341.520.451.511.740.561.491.810.521.381.36㊀㊀∗流动相中添加0.2%的三氟乙酸㊀㊀将ADMPC 分别涂覆在4种不同衍生化大孔硅胶及纯大孔硅胶上制得CSP -A㊁CSP -B㊁CSP -C㊁CSP -D㊁CSP -E,以V 正己烷ʒV 异丙醇=9ʒ1为流动相,表1为5种色谱柱对5种酸性手性药物的拆分性能㊂实验结果表明,扁桃酸㊁DNB -亮氨酸㊁酮洛芬㊁氟比洛芬四种酸性手性药物在这5根色谱柱均有一定的拆分效果,其中DNB -亮氨酸拆分效果最佳,均能达到基线分离㊂将上述的5根色谱柱分别在流动相为甲醇㊁V 甲醇ʒV 水=9ʒ1㊁V 甲醇ʒV 水=3ʒ1的条件下的拆分5种酸性手性药物㊂实验结果见表2,结果表明扁桃酸和酮洛芬在这三种流动相中无拆分,DNB -亮氨酸和氟比洛芬在这三种流动相中均有不同程度的拆分,其中氟比洛芬在流动相为V 甲醇ʒV 水=3ʒ1的条件下拆分效果优于流动相V 正己烷ʒV 异丙醇=9ʒ1㊂当流动相为V 正己烷ʒV 异丙醇=9ʒ1时,布洛芬在CSP -A ~CSP -E 上均无拆分效果;当流动相为V 甲醇ʒV 水=3ʒ1时,布洛芬在CSP -A ~CSP -D 上得到了一定的拆分㊂㊀祝金艳等.酸性手性药物在直链淀粉手性固定相上的拆分㊀2020.Vol.34,No.11表2㊀手性药物在5种色谱柱CSP-A至CSP-E上的拆分数据Tab.2㊀Separation data of chiral drugs on five column CSP-A-CSP to E手性药物甲醇ʒ水∗CSP-A CSP-B CSP-C CSP-D CSP-Ek1αRs k1αRs k1αRs k1αRs k1αRs扁桃酸1ʒ0 9ʒ1 3ʒ1DNB-亮氨酸1ʒ00.21 1.390.470.14 1.400.420.14 1.300.400.11 1.430.41 9ʒ10.68 1.47 1.010.52 1.49 1.010.29 1.550.870.31 1.570.83 1.08 1.130.51 3ʒ1 3.36 1.51 1.41 2.93 1.58 1.12 2.73 1.63 1.37 2.13 1.65 1.10 2.16 1.320.83布洛芬1ʒ0 9ʒ1 3ʒ1 1.80 1.190.67 1.54 1.210.78 1.10 1.110.420.97 1.190.48酮洛芬1ʒ0 9ʒ1 3ʒ1氟比洛芬1ʒ00.24 1.600.820.19 1.600.830.10 1.930.820.06 2.89 1.020.14 1.580.64 9ʒ10.70 1.86 2.190.57 1.88 2.200.33 2.09 2.090.33 2.15 2.330.77 1.33 1.42 3ʒ1 3.11 1.94 3.67 2.84 1.94 3.34 2.59 1.90 3.12 1.88 1.97 3.19 1.28 1.53 1.89㊀㊀∗流动相中添加了0.2%的三氟乙酸2.4㊀5种酸性手性化合物的最佳拆分条件对5种酸性手性化合物的拆分条件进行优化,得到5种酸性手性化合物的分离最佳谱图㊂图4(a)是扁桃酸在CSP-D,流动相为V正己烷ʒV异丙醇=9ʒ1上的色谱图;图4(b)是DNB-亮氨酸在CSP-C,流动相为V正己烷ʒV异丙醇=9ʒ1上的色谱图;图4(c)是布洛芬在CSP-B,流动相为V甲醇ʒV水=3ʒ1上的色谱图;图4(d)是酮洛芬在CSP-C,流动相为V正己烷ʒV异丙醇= 9ʒ1上的色谱图;图4(e)是氟比洛芬在CSP-A,流动相为V甲醇ʒV水=3ʒ1上的色谱图㊂图4的其他色谱条件如下:流速:0.1mL/min;柱温:25ħ;紫外检测波长:254nm㊂(a)㊀(b)㊀(c)(d)㊀(e)图4㊀5种酸性手性药物的最佳分离谱图Fig.4㊀Chromatograms of5acid chiral drugs(下转第36页)㊀2020.Vol.34,No.11㊀教改论坛动人员的管理积极性,保证管理工作的高效化落实㊂首先,应该明确实验室教师㊁学生的责任,要求按照有关的操作标准开展实验活动,一旦因为教师或是学生操作不规范出现仪器设备问题或是化学药品应用问题,要对负责人严厉惩罚,调动人员的积极性㊂其次,高校应该明确实验室管理人员的工作责任,落实奖惩制度,对于管理效果较好㊁仪器设备与化学药品资源利用率较高的人员,要给予一定的奖励,而对于管理工作能力较低的人员,要适当惩罚,这样可以调动相关人员的积极性,有效规避出现实验室管理工作问题,形成系统化的实验室管理工作模式,最终实现高效化㊁规范化的管理目标[7]㊂上述分析的几点问题解决对策,在使用之后可以有效提升高校化学化工实验室学生操作的安全性和规范性,提升仪器设备的利用效率,预防出现资源浪费和环境污染问题,提升实验室管理工作质量㊂由此可见,上述所提出的问题解决对策非常有效,高校在化学化工的实验室管理工作中必须要积极采用此类管理方式,以保证各方面管理工作的有效实施,提升化学化工实验室管理工作水平㊂4㊀结语综上所述,目前在高校的化学化工实验室实际管理工作中还存在安全管理问题㊁仪器设备管理问题与环境污染管理问题,不能确保各方面实验室管理工作的有效实施㊂这就需要相关管理部门在具体的工作中,树立正确的安全管理工作观念,强化宣传教育力度,有效开展仪器设备资源配置和管理工作,提升资源利用率,同时还需树立绿化管理的观念意识,规避环境污染和浪费问题,保证各方面管理工作的效果㊂参考文献[1]张思科,戴传波,邹晏秋,等.浅析高校化学化工实验室的管理工作[J].科技资讯,2018,16(33):153,155. [2]宋长友.高校化学化工实验室环保管理的探索与实践[J].山东化工,2018,47(24):128129.[3]沈启慧,张俭,刘岩.化工类高校化学实验室的管理与建设[J].高校实验室工作研究,2016,45(3)133155. [4]赵会吉.应用绿色化学原理构建化学实验室安全体系的思路和方法[J].实验室研究与探索,2019,38(6):277282.[5]王敏.高校化工实验室安全管理体系的构建[J].化工管理,2020,12(11):2627.[6]李艳,任顺麟,何东贤.高校化学类实验室安全管理机制探索[J].广州化工,2020,48(5):198199,211. [7]许伟锋.民办高校化学实验室安全管理探索[J].化工设计通讯,2019,45(12):181,235.ʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏʏ(上接第5页)3㊀结论实验结果表明,5种酸性手性药物在5种手性柱上都有不同程度的拆分,不同样品的最佳拆分条件有一定差异,在反相大孔硅胶上涂覆ADMPC拆分5种酸性手性药物的整体效果优于氨基化大孔硅胶和纯大孔硅胶;流动相的选择对样品的拆分也有一定的影响,当样品在大极性流动相下能够得到拆分时,流动相含水量较高时拆分性能较好;这些不同的手性柱在两种模式的流动相下拆分酸性手性药物有一定的互补性㊂本实验为后续相关药物的对映体分离研究提供了参考㊂参考文献[1]袁黎明.手性识别材料[M].北京:科学出版社,2010:13.[2]刘天天,王爱平,靳洪涛手性药物研发进展与相关指导原则介绍[J].药物评价研究,2018,41(12):23622368.[3]解笑瑜,甄雪燕,于航等.2018年度药物分析技术研究进展[J].药物分析杂志,2020,40(05):767784. [4]张美,奚文汇,字敏等.高效液相色谱的4种商品手性柱对38种手性化合物的拆分研究[J].分析化学,2010, 38(02):181186.[5]邵红.键合纤维素衍生物手性固定相拆分酮洛芬对映体[J].中国医药指南,2014,12(10):5759. [6]谌学先,张鹏,何义娟等.(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)衍生的纤维素手性固定相[J].色谱,2019,37(12): 12751281.[7]于兆文,刘月启,刘快之等.直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)手性固定相分离硒代甘油醚对映体[J].分析化学,1999(10):11641167.。

反相高效液相色谱测定化妆品中几种防腐剂摘要：建立了反相高效液相色谱法测定化妆品中四种对羟基苯甲酸酯类防腐剂的含量，并对相关的实验条件进行了优化：采用乙醇作为提取剂提取化妆品中的对羟基苯甲酸酯类防腐剂，色谱柱为Shimpack VP-ODS C18烷基柱（4.6mm i.d×150mm，5μm）；进样体积为5uL；流动相为乙醇：2%的醋酸水溶液=45：35（v/v）；流速为0.8ml/min；柱温为30℃；紫外检测器，检测波长是254nm。

实验结果表明在25~1000μg/mL浓度范围内各防腐剂的含量与色谱峰面积有良好的线性关系，线性回归方程分别为对羟基苯甲酸甲酯(MP) y=2.556224×10-5 x-4.237644；对羟基苯甲酸乙酯(EP) y=2.62564×10-5 x＋1.636635；对羟基苯甲酸丙脂(PP)y=2.704263×10-5x＋7.964306；对羟基苯甲酸丁酯(BP) y=3.016108×10-5 x＋1.567237。

相关系数分别为R2=0.9997、0.9999、0.9994、0.9999（n=5）。

回收率为88.748%－115.042%，平均回收率为98.448%。

相对标准偏差（n=6）分别为4.56%、0.95%、2.56%、1.04%，而所测各种防腐剂在3倍噪音下的最低检测限分别为：1.35×10-4ug、0.8×10-4ug 、0.77×10-4ug 和5.85×10-4ug。

该实验体现了反相高效液相色谱法简便、快速、稳定，能准确测定化妆品中对羟基苯甲酸酯类防腐剂的含量的优势。

关健词：反相高效液相色谱法；化妆品；防腐剂Determination of preservatives in Cosmetic Products byReversed-Phase High Performance Liquid ChromatographyAbstract：In this paper, RP-HPLC was used to measure the content of preservatives in cosmetics.In RP-HPLC method, on the relevant experimental conditions were optimized, such as :the use of ethyl alcohol as the extraction solvent extraction of cosmetics preservative Parabens; column system was alkyl Shimpack VP-ODS C18 column (4.6mm i.d × 150mm, 5μm); Injection volume was 5ul；Mobile phase of acetonitrile：2% acetic acid aqueous solution = 45：35 (v / v)；The flow rate was 0.8ml/min；The column temperature was 30 ℃；the detector was UV detector and its wavelength was 254nm.The results show that the concentration in the range of 25 ~ 1000μg/mL preservative content of each chromatographic peak area with a good linear correlation and their Linear regression equation were Methylparaben (MP) y=2.556224×10-5 x-4.237644；Ethylparaben(EP) y=2.62564×10-5x＋ 1.636635；Propylparaben(PP) y=2.704263×10-5x＋7.964306；Butylparaben(BP) y=3.016108×10-5x＋1.567237 and their calibration coefficients were about 0.9997、0.9999、0.9994、0.9999（n=5）.Method recoveries were parabens content recovery was 88.748% -115.042% and the average recovery was 98.448%. Experiments show that the relative standard deviation（n=6）were 4.56%、0.95%、2.56%、1.04% .Measured that each antiseptic's limits under 3 time of noises lowest examination were 1.35×10-4ug、0.8×10-4ug 、0.77×10-4ug and 5.85×10-4ug.So the RP-HPLC method is simple, fast, stable and accurate determination of Parabens in cosmetics preservative content advantage.Key words : RP-HPLC；cosmetics；preservative目录摘要： (I)Abstract： (II)1前言 (1)1.1目前化妆品使用的防腐剂 (1)1.2防腐剂的性质 (1)1.3防腐剂的危害 (2)1.4目前防腐剂检测方法及其不足 (2)1.5本文防腐剂检测方法的选择 (3)1.6本研究的目的与意义 (4)2实验部分 (5)2.1实验仪器 (5)2.2 实验试剂 (5)2.3 色谱条件 (6)2.4标准溶液的制备 (6)2.4.1标准储备液的配制 (6)2.4.2标准使用液的配制 (6)2.4.3标准混合使用液的配制 (6)2.5 化妆品样品的选取及处理 (6)2.5.1化妆品的选取 (6)2.5.2化妆品萃取方法的选取 (6)2.5.3化妆品的处理 (6)3结果与讨论 (6)3.1检测波长的选择 (6)3.2固定相的选择 (7)3.3流动相的要求与选择 (8)3.4最佳色谱条件下各标准防腐剂样品的色谱图 (9)3.5对羟基苯甲酸酯类标准曲线的制作及检出限 (10)3.5.1对羟基苯甲酸酯类标准曲线的制作 (10)3.5.2对羟基苯甲酸酯类的检测限 (11)3.6精密度实验 (11)3.7准确度实验 (12)3.8实际化妆品样品的测定 (13)3.9某些化妆品样品的测定色谱图 (13)4 结论 (14)参考文献 (16)致谢 ...................................................... 错误！未定义书签。

直链淀粉三 3 5 二氯苯基氨基甲酸酯键合硅胶
直链淀粉-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)键合硅胶是一种新型的硅胶模型，它与传统的硅胶类型相比，具有很多优点，受到越来越多的关注。

直链淀粉-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)键合硅胶是一种以直链淀粉为基础，以三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)为键合剂，经过特殊工艺制成的硅胶。

它与传统的硅胶类型相比，有很多优点，具有良好的耐水性、耐热性、耐油性和耐腐蚀性，也具有优良的胶黏性和抗老化性，可以确保硅胶的使用寿命。

此外，直链淀粉-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)键合硅胶还具有优良的机械性能，可以有效抵抗外力的冲击，并能够承受一定程度的拉伸、压缩和扭转，可以满足现代工业对硅胶强度和耐久性的要求。

另外，直链淀粉-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)键合硅胶还具有优良的电绝缘性能，可以有效抑制电磁干扰，保证元器件的正常运行，可以满足电子行业的要求。

此外，直链淀粉-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)键合硅胶还具有良好的环保性，通过有机溶剂、水环境下，可以有效地降低有害物质的排放，从而达到环保的效果。

因此，直链淀粉-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)键合硅胶在现代工业中应用非常广泛，它可以用于制造电子、电气、汽车、船舶、机械、家具、橡胶制品等产品，对于实现优质的产品质量和环保要求，都有很大的帮助。

总之，直链淀粉-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)键合硅胶是一种新型的硅胶类型，与传统的硅胶类型相比，具有良好的性能、耐久性和环保性，可以有效满足现代工业对硅胶的需求，受到越来越多的关注。

直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)手性固定相分离硒
代甘油醚对映体
于兆文;刘月启;刘快之;蒋生祥;陈立仁
【期刊名称】《分析化学》
【年(卷),期】1999(027)010
【摘要】合成出了直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)手性固定相.用该固定相首次拆分了一系列硒代甘油醚对映异构体.讨论了流动相组成和样品结构对保留和拆分的影响.
【总页数】4页(P1164-1167)
【作者】于兆文;刘月启;刘快之;蒋生祥;陈立仁
【作者单位】河南大学化学化工学院,开封,475001;中国科学院兰州化学物理研究所,兰州,730000;河南大学化学化工学院,开封,475001;中国科学院兰州化学物理研究所,兰州,730000;中国科学院兰州化学物理研究所,兰州,730000
【正文语种】中文
【中图分类】O65
【相关文献】
1.纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)涂敷氧化锆手性固定相拆分外消旋硒代缩水甘油醚 [J], 敦惠娟;韩小茜;柳春辉;李永民;陈立仁
2.单硫代和双硫代甘油醚在直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)固定相上的手性拆分 [J], 于兆文;刘霞;蒋生祥;陈立仁
3.直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)手性固定相在正反相条件下拆分硒代缩水甘油醚 [J], 刘艳华;韩小茜;李军;魏燕;王明权;刘峻
4.三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)多糖手性固定相拆分芳基硒代甘油醚对映体 [J], 徐秀青;阮源萍;王进贤
5.直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)手性固定相在正相条件下对氟环唑外消旋体的直接拆分 [J], 常静;韩小茜;仇伟;魏燕;刘艳华
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

反相高效液相色谱法同时测定防晒化妆品中的防腐剂和防晒剂李洁;康君行;吴大南
【期刊名称】《色谱》
【年(卷),期】2000(18)5
【摘要】用反相高效液相色谱法实现了对化妆品中4种防腐剂(对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯)和6种防晒剂(2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮-5-磺酸、2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮、水杨酸苯酯、对甲氧基
肉桂酸辛酯、对二甲基氨基苯甲酸辛酯、水杨酸辛酯)的分离测定.各组分回收率
(n=6)为87.2%～106.5%;相对标准偏差(n=6)为1.2%～3.3%.
【总页数】3页(P462-464)
【作者】李洁;康君行;吴大南
【作者单位】北京市卫生防疫站,北京,100013;北京市卫生防疫站,北京,100013;北
京市卫生防疫站,北京,100013
【正文语种】中文
【中图分类】O658;O657.7;TQ658.2+4
【相关文献】
1.反相高效液相色谱法同时测定化妆品中15种防晒剂 [J], 许醉笑
2.反相高效液相色谱法测定化妆品中的防晒剂 [J], 姚孝元;郑星泉;秦效英
3.反相高效液相色谱法测定化妆品中的几种防晒剂 [J], 马杰;林雏宣
4.气相色谱法测定防晒化妆品中14种防晒剂的含量 [J], 朱惠斌;王雪平
5.反相高效液相色谱法测定食品中防腐剂和甜味剂探析 [J], 王棋棋
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。