总磷,正磷工作曲线的绘制(抗坏血酸法)

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总磷,正磷工作曲线的绘制(抗坏血酸法)

一试剂和溶液

1 浓硫酸及C(1/2H2SO4)=0.5 mol/L

2 过硫酸铵

3 抗坏血酸

4 甲酸

5 乙二胺四乙酸二钠

6 磷酸二氢钾

7 酒石酸锑钾

8 钼酸铵溶液:称6.0克钼酸铵溶于约500ml水中,加入0.2克酒石酸锑钾及83ml浓硫酸,冷却后稀释至1升,混匀储存于棕色瓶中备用。

9 抗坏血酸溶液:称取17.6克抗坏血酸溶于500ml水中,加入0.2克乙二胺四乙酸钠及8ml甲酸,用水稀释至1升,混匀,储存于棕色瓶中备用。

10 过硫酸铵溶液:称取6克过硫酸铵于250ml容量瓶中,加水稀释至刻度,此溶液含过硫酸铵0.12g/5ml。

11 磷标准溶液(母液):称取0.7165克预先在110---105°C干燥过的磷酸二氢钾溶于水中,并移入1升容量瓶中,用水稀释至刻度摇匀备用,此溶液浓度为1ml=0.5mgPO43-

12 正磷工作液:用移液管吸取10ml磷标准液溶于500ml容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀备用,此溶液浓度为1ml=10ugPO43-,供绘制正磷标准曲线使用。

13 总磷工作液:用移液管吸取20ml磷标准液于500ml容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀备用,此溶液浓度为1ml=20ugPO43-供绘制总磷标准曲线使用。

二曲线绘制

1 正磷标准曲线:取8个50ml容量瓶依次加入0,1,2,3,4,5,6,7ml正磷工作溶液,其浓度分别为1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.2,1.4mg/l,各加入约20ml水,5ml钼酸铵溶液,3ml抗坏血酸溶液,然后用水稀释至刻度,摇匀,在25--30°C下放置10分钟,以试剂空白为对照,将分光光度计调零,用该仪器714nm波长和3cm比色皿,测定吸光度,以50ml标准溶液PO43-的浓度mg/L为横坐标,对应的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。

2 总磷标准曲线:取6个50ml容量瓶依次加入0,0.5,0.7,0.9,1.1,1.3ml总磷工作液,其浓度分别为0,0.2,0.28,0.36,0.44,0.52mg/L,各加入约20ml水,5ml钼酸铵溶液及3ml抗坏血酸溶液,用水稀释至刻度,摇匀,在25--30°C下放置10分钟,以试剂空白为对照,将分光光度计调零,用该仪器714nm和3cm比色皿测定吸光度,以50ml标准溶液PO43-的浓度mg/L为横坐标,对应的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。