鲎素对菌壁膜电荷的影响

细菌内毒素试验（鲎试验）的全面解析一般细菌毒素可分为两类，一类为外毒素(Exotoxin)；它是一种毒性蛋白质，是细菌在生长过程中分泌到菌体外的毒性物质。

产生外毒素的细菌主要是革兰氏阳性菌。

如白喉杆菌、破伤风杆菌、肉毒杆菌、金黄色葡萄球菌以及少数革兰氏阴性菌。

另一类为内毒素(Endotoxin)，是革兰氏阴性菌的细胞壁的产物。

细菌在生活状态时不释放出来，只有当细菌死亡自溶或粘附在其它细胞时，才表现其毒性，内毒素的主要化学成分是脂多糖中的类脂A成分。

和热原的关系热原(pyrogen)系指能引起恒温动物体温异常升高的致热物质。

它包括细菌性热原、内源性高分子热原、内源性低分子热原及化学热原等。

热原是否就是内毒素？细菌内毒素是热原的一种，即细菌性热原。

细菌内毒素被认为是热原的本质，此事在学术上仍有争议，热原不仅是细菌内毒素。

但在药检的范畴，细菌内毒素是主要的热原物质，可以说无内毒素就无热原，控制内毒素就是控制热原。

热原反应：含有热原的注射剂注入人体可引起发热反应，使人体产生发冷、寒战、体温升高、出汗、恶心、呕吐等症状，有时体温可升至40℃，严重者甚至昏迷、虚脱，如不及时抢救，可危及生命。

来源和控制方法1、细菌内毒素的特性2、去除细菌内毒素的方法(1)吸附法此法是利用活性炭对热原的吸附作用达到去除作用的方法。

常用的吸附剂中，活性炭对热原的吸附作用最强，一般用量为总容量的0.1%-0.5% ，将溶液加热到70℃左右保温一定时间效果更好。

使用的活性炭应符合药典规定要求。

(2)蒸馏法此法是利用热原具有不挥发性而达到去除目的。

因此，凡适于蒸馏的药品均可用蒸馏法除去热原。

(3)热破坏法此法是利用热高温能破坏热原质达到去除目的。

因此，凡适用于高温处理的如热原检查试验中接触药液的容器，可用180℃干烤3小时，或250℃干烤30min以上。

(4)强酸强碱处理法此法利用强酸强碱能破坏热原而达到去除的目的。

(5)其他，也可以采用过滤等方法去除热原。

细菌内毒素与鲎试剂反应机理
细菌内毒素是一种由细菌产生的有毒物质，对人体健康带来严重的威胁。

鲎试剂是一种常用于检测细菌内毒素的试剂。

本文将探讨细菌内毒素与鲎试剂反应的机理。

鲎试剂是由鲎血清制成的，其中含有一种叫做鲎凝集素的蛋白质。

细菌内毒素与鲎凝集素之间存在一种特殊的相互作用。

细菌内毒素可以与鲎凝集素结合，形成一个复合物。

这个复合物会导致鲎凝集素发生聚集，形成一种凝集物。

通过观察鲎试剂在细菌内毒素存在下的凝集反应，我们可以判断细菌内毒素的存在与浓度。

当细菌内毒素浓度较高时，凝集反应会更明显。

而当细菌内毒素浓度较低时，凝集反应会较弱或不明显。

这种凝集反应的机理是基于鲎凝集素与细菌内毒素之间的亲和性。

鲎凝集素可以识别并结合特定的糖分子，而细菌内毒素上的一些糖分子与鲎凝集素具有亲和性。

当细菌内毒素存在时，鲎凝集素会与其结合，从而导致凝集反应的发生。

细菌内毒素与鲎试剂反应机理的研究对于细菌内毒素的检测和预防具有重要意义。

通过了解细菌内毒素与鲎试剂的相互作用，我们可以快速、准确地检测细菌内毒素的存在与浓度，从而采取相应的措施保护人体健康。

细菌内毒素与鲎试剂之间的反应机理是基于鲎凝集素与细菌内毒素之间的亲和性。

通过观察鲎试剂的凝集反应，我们可以判断细菌内毒素的存在与浓度。

这一研究对于细菌内毒素的检测和预防具有重要意义。

鲎检测细菌的原理
鲎检测细菌的原理是利用鲎（Amoeba）作为宿主（host），通过感染鲎细胞来检测细菌的存在。

首先，选择合适的细菌，通常是一种可以感染鲎细胞的细菌。

将该细菌培养并增殖到一定数量。

然后，收集培养好的细菌，经过适当处理，如洗涤、离心等，获得细菌悬浮液。

接下来，将鲎细胞投入到细菌悬浮液中，使细菌与鲎细胞接触。

细菌感染鲎细胞，进入鲎体内，并开始繁殖。

此时，细菌数量会逐渐增加。

检测的关键在于观察鲎细胞是否发生了变化。

正常情况下，鲎细胞有活力，能够吞噬食物颗粒等，且有规律地变形和移动。

而当鲎细胞被细菌感染后，由于细菌的繁殖和破坏，鲎细胞会发生明显的变化，如失去活力、不能律动等。

通过观察鲎细胞的形态、运动状态和活力，可以判断细菌是否存在，并且根据细菌感染的程度和数量对细菌进行定量或定性检测。

需要注意的是，鲎检测细菌的方法属于一种间接检测方法，仅能通过观察宿主细胞的变化来推断细菌的存在与否，结果可能受到其他因素的影响，因此，在实际
应用中需配合其他检测方法进行验证。

鲎试验检查细菌内毒素应注意的问题鲎试验检查细菌内毒素应注意的问题发布时间02年09月05日 09时18分方法：通过对干扰鲎试验准确性干扰因素的分析(包括鲎试剂本身、操作条件、配制原料等)，提出了鲎试验中应注意的问题。

结果：只要克服了检查中的干扰因素，鲎法具有比家兔法更简便、快速、灵敏度高、重现性好等优点。

鲎试验是利用鲎的变形细胞与微量内毒素产生凝集反应的现象，作为判断供试品中细菌内毒素限量是否符合规定的一种方法[1]。

它具有比家兔法更简便、快速、灵敏度高、重现性好等优点。

中国药典1995年版已收载细菌内毒素检查法(简称鲎试验)，但只用于几种输液的检查。

根据现有的实验证明，凡不干扰细菌内毒素检查或虽有干扰，但可以克服的药品注射剂，将能够全部以鲎法代替家兔热原检查法。

但是该法受到许多因素的影响，故在做鲎试验检查时，应注意下列问题。

1鲎试剂本身1.1鲎试剂灵敏度 为了保证检查细菌内毒素结果的准确性，用于试验的鲎试剂应首先核对灵敏度。

因为在我们的实际工作中，发现鲎试剂均符合药典规定标准前提下，由于生产厂家不同，部分鲎试剂的实测灵敏度与标示值有差异而导致检测同一检品时，用相同标示值的鲎试剂，出现不同结果。

因而先核对灵敏度可避免因鲎试剂本身造成的判断失误。

建议法定部门和生产单位应注意鲎试剂的质量检查。

1.2供试品稀释 在取样品时，一定要熟悉中国药典的内容，不能直接取大输液原液0.1ml进行检查，这是排除干扰因素的简单有效的方法。

因药典已明确规定试验中鲎试剂的灵敏度不超过0.5EU/ml，根据供试品的稀释公式： 供试品稀释倍数= L/λυL ：供试品的内毒素限量(1EU/ml)λυ：鲎试剂灵敏度的标示值(EU/ml)故检测大输液均应稀释后才能进行试验，如选用更高灵敏度的鲎试剂，则应增加样品的稀释倍数。

稀释用的细菌内毒素检查用水药典作了规定。

在4h内不得与鲎试剂产生凝集反应。

如果直接用供试品原液试验，就会使供试品的内毒素提高到0.5EU/ml或0.5EU/ml以下，这样，根据目前大输液的生产和贮藏条件，有些就会达不到，鲎法检出的阳性率会提高，兔法复核的机遇也将增多，势必会浪费人力物力。

抗菌肽鲎素的研究进展李寒梅;唐勇军;王顺启;代建国【摘要】已报道的抗菌肽鲎素 (tachyplesins, TPs) 共分5种, 均由鲎血细胞分离产生, 是鲎先天免疫系统的重要功能物质, 为鲎机体抵抗病原物入侵提供天然防御屏障.近30年的研究表明, TPs抗菌肽显示出广谱生物活性、较低正常细胞毒性、不易产生微生物抗性等特点, 作为一种全新型的肽类药物备受关注.文中主要从TPs 的分子结构, 对微生物、藻类细胞、肿瘤细胞及一些病毒的抑杀活性, 作用机制, 以及工程表达情况等方面进行介绍, 综述TPs的应用前景, 并对当前研究瓶颈进行评述.%Antibacterial peptides tachyplesins (TPs), isolated from the hemocytes of horseshoe crabs and divid-ed into five kinds, play an important role in immunological function in the limulus immune system and pro-vide a natural defense barrier for the invasion of pathogens. Nearly 30 years of research shows that TPs ex-hibit broad-spectrum bioactivities, low cytotoxicity toward normal cells, and low levels of acquired resistance in microbes. As an entirely new type of peptide drug, TPs have become an intensely studied topic. Herein, the molecular structure of TPs, bioactivity against all kinds of microorganisms and tumor cells, action mech-anisms and engineering expression are introduced. The application and the bottleneck of current research of TPs are also described.【期刊名称】《生命科学研究》【年(卷),期】2018(022)004【总页数】7页(P338-344)【关键词】抗菌肽鲎素(TPs);生物活性;作用机制;基因工程;应用;瓶颈【作者】李寒梅;唐勇军;王顺启;代建国【作者单位】南昌大学生命科学学院, 中国江西南昌 330031;深圳职业技术学院应用化学与生物技术学院,中国广东深圳 518000;深圳职业技术学院应用化学与生物技术学院,中国广东深圳 518000;南昌大学生命科学学院, 中国江西南昌330031;深圳职业技术学院应用化学与生物技术学院,中国广东深圳 518000【正文语种】中文【中图分类】Q74鲎又称马蹄鲎(horseshoe crab),是一种非常古老的海洋动物,其血液为蓝色,出现在古生代寒武纪,且近4亿年来形态未发生变化,具有“生物活化石”的称号[1]。

细菌内毒素与鲎试剂反应机理引言细菌内毒素是由细菌产生的一类有毒化合物，可以对人体和其他生物产生严重的危害。

鲎试剂是一种常用于检测细菌内毒素的试剂，通过与细菌内毒素发生反应来实现检测。

本文将介绍细菌内毒素与鲎试剂的反应机理，包括反应过程、影响因素以及实验方法等内容。

1. 细菌内毒素概述细菌内毒素是一类由细菌产生的有毒化合物，常见的包括脂多糖（LPS）和外毒素等。

这些化合物可以引起炎症反应、损伤组织和器官，并在严重情况下导致败血症等危险疾病。

2. 鲎试剂概述鲎试剂是一种常用于检测细菌内毒素的试剂，其原理是通过与细菌内毒素发生特异性反应来实现检测。

鲎试剂通常由两部分组成：辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗体和底物。

3. 反应机理细菌内毒素与鲎试剂的反应机理如下：1.鲎试剂中的抗体能够识别并结合特定的细菌内毒素。

2.细菌内毒素与抗体结合后，形成一个复合物。

3.复合物中的细菌内毒素能够与HRP标记的抗体发生反应。

4.HRP在适当条件下可以催化底物发生氧化反应，产生可检测的信号。

4. 影响因素细菌内毒素与鲎试剂反应的效果受到多种因素的影响，包括以下几个方面：1.温度：适宜的温度有助于提高反应速率和灵敏度。

一般情况下，常温或37摄氏度是常用的温度条件。

2.pH值：pH值对于鲎试剂反应具有重要影响。

不同细菌内毒素与鲎试剂之间可能存在最适宜pH值差异。

3.时间：反应时间需要根据具体实验条件进行优化。

过短或过长的反应时间都可能导致结果不准确。

4.细菌内毒素浓度：细菌内毒素浓度的高低直接影响反应的灵敏度和线性范围。

5. 实验方法以下是一种常用的实验方法，用于检测细菌内毒素与鲎试剂的反应：1.准备样品：收集待检测的细菌培养物，并将其离心沉淀。

将沉淀物重新悬浮于适当的缓冲液中。

2.添加试剂：将鲎试剂中标记有HRP的抗体加入样品中，充分混合。

3.反应条件：根据实验要求，调节温度、pH值和反应时间等条件。

4.反应停止：加入适当的停止液，停止反应，并阻断进一步产生信号。

一、实验目的1. 了解鲎试验法的基本原理和操作步骤。

2. 学会使用鲎试验法检测细菌内毒素。

3. 掌握细菌内毒素对生物体的危害及预防措施。

二、实验原理鲎试验法是一种检测细菌内毒素的方法，其原理是鲎血液中的凝固酶在细菌内毒素的作用下，会发生凝固反应。

通过观察鲎血液凝固的情况，可以判断样品中是否含有细菌内毒素。

三、实验材料1. 鲎血液试剂2. 细菌内毒素标准品3. 待测样品4. 实验器材：移液器、试管、恒温水浴锅、计时器等四、实验步骤1. 准备工作（1）将鲎血液试剂置于37℃恒温水浴锅中预热10分钟。

（2）取试管若干，标记为A、B、C、D，分别加入鲎血液试剂。

2. 标准曲线绘制（1）取标准品，按照说明书要求，用生理盐水进行稀释，得到一系列浓度梯度的标准品溶液。

（2）取试管A，加入鲎血液试剂1ml，再加入标准品溶液0.1ml，混匀。

（3）按照相同方法，分别向试管B、C、D中加入不同浓度的标准品溶液，混匀。

（4）将试管置于37℃恒温水浴锅中孵育30分钟。

（5）观察各试管凝固情况，记录凝固时间。

3. 待测样品检测（1）取试管E，加入鲎血液试剂1ml，再加入待测样品0.1ml，混匀。

（2）将试管E置于37℃恒温水浴锅中孵育30分钟。

（3）观察试管E凝固情况，记录凝固时间。

4. 结果分析（1）以标准品浓度为横坐标，凝固时间为纵坐标，绘制标准曲线。

（2）根据待测样品的凝固时间，从标准曲线上查得对应的细菌内毒素浓度。

五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：通过绘制标准曲线，可以得到标准品浓度与凝固时间之间的关系，为待测样品的检测提供依据。

2. 待测样品检测：根据待测样品的凝固时间，从标准曲线上查得细菌内毒素浓度为5EU/ml。

六、实验结论本实验采用鲎试验法成功检测出待测样品中的细菌内毒素，浓度为5EU/ml。

结果表明，鲎试验法是一种简单、快速、灵敏的细菌内毒素检测方法，适用于临床和科研领域。

七、实验讨论1. 鲎试验法具有操作简便、快速、灵敏等优点，是一种理想的细菌内毒素检测方法。

一、实验目的1. 了解鲎的生物学特征及实验操作方法。

2. 掌握鲎血细胞凝集反应的原理及操作步骤。

3. 观察鲎血细胞凝集现象，分析实验结果。

二、实验原理鲎是一种生活在海洋中的节肢动物，其血液中含有一种特殊的酶——凝固酶。

当鲎血液接触到细菌或毒素时，凝固酶会被激活，使血液凝固。

因此，鲎血液凝固反应可以作为一种检测细菌和毒素的方法。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：鲎血液、细菌悬液、毒素悬液、生理盐水、试管、滴管、显微镜等。

2. 实验仪器：离心机、恒温水浴锅、计时器等。

四、实验步骤1. 准备工作（1）将鲎血液和生理盐水分别加入试管中，混匀。

（2）将细菌悬液和毒素悬液分别加入试管中，混匀。

2. 鲎血细胞凝集反应（1）取一试管，加入鲎血液和生理盐水各1ml。

（2）用滴管取适量细菌悬液，滴入试管中，混匀。

（3）将试管放入恒温水浴锅中，计时30分钟。

（4）观察鲎血细胞凝集现象。

3. 结果分析（1）若鲎血细胞发生凝集，说明细菌存在。

（2）若鲎血细胞未发生凝集，说明细菌不存在。

4. 清洗与消毒（1）将实验操作过程中用过的试管、滴管等实验器材进行清洗。

（2）使用消毒液对实验操作区域进行消毒。

五、实验结果在实验过程中，观察到鲎血液与细菌悬液混合后，血液凝固，出现凝集现象。

因此，可以判断实验中的细菌存在。

六、实验讨论1. 鲎血液凝固酶在实验过程中发挥了重要作用，通过观察鲎血细胞凝集现象，可以判断细菌的存在。

2. 实验过程中，要注意操作规范，避免细菌污染和实验误差。

3. 鲎实验作为一种检测细菌和毒素的方法，具有操作简便、结果直观等优点，在微生物学、医学等领域具有广泛的应用。

七、实验总结本次实验通过对鲎血液凝固反应的观察，了解了鲎的生物学特征及实验操作方法，掌握了鲎血细胞凝集反应的原理及操作步骤。

实验结果表明，鲎实验在检测细菌和毒素方面具有实际应用价值。

在今后的学习和工作中，我们将继续深入研究鲎实验，为微生物学、医学等领域的发展贡献力量。

鲎法测定细菌内毒素影响因素的研究进展董培智（山西省药品检验所太原030001 peizhid@）鲎试剂法是利用鲎血细胞溶解物（Limulus Amebocyte Lysate, LAL;Tachypleus Amebocyte Lysate,TAL）与微量（pg/ml级）细菌(主要是革兰氏阴性细菌,G-)的内毒素反应,从而检出被检物中内毒素的一种生物体外检测新技术。

因为其具有快速、简便、经济、灵敏度高、重现性好、一次可同时测几个样品等优点，自从一九六四年美国学者Levin 和Bang 发现此法以来[1]，鲎法正被日益广泛地应用于医药卫生、食品卫生、环境卫生、分子生物学、以及微生物学中。

鲎法大致可分为凝胶法（Gel-colt end point or Gel-colt method,Gelation Assay）、比浊法（Turbridimetric Assay）色原基质法（Chromogenic Substrate method）、以及免疫法（Immunology Assay）等。

本文依据文献报道，总结了近年来国内外学者在用这些方法测定细菌内毒素时发现的一些影响因素及其消除方法的研究进展，以供试验者参考。

1 试验条件与操作培养条件、操作环境可能引起各次实验之间、各实验室之间的结果差异[2]。

1.1 时间鲎试剂在液态时极不稳定, 室温放置太久会影响反应灵敏度，故加样结束后,应立即放入恒温水浴中。

[3]延长保温时间，可提高LAL的灵敏度。

[4]有研究者[5]发现细菌内毒素国家标准品和工作标准品的不同混合时间与相对活性之间具有一定的规律，即５分钟时混合点的活性最强，混合时间越长，活性反而降低，但在三十分钟以内的各混合点测定的灵敏度均在规定范围之内。

在显色法中灵敏度与时间有关，故实验过程中既要严格控制每个环节的保温时间，又要严格控制终止时间[2][6][7]。

1．2 温度凝胶试验规定的孵化温度为37℃。

鲎素对几种常见基因工程菌的抑杀研究简琛;张燕;代建国;张丽君;朱俊晨【摘要】@@%采用肉汤微量稀释法和MTT法分别测定了鲎素对基因工程菌大肠杆菌BL21、枯草芽孢杆菌WB800、枯草芽孢杆菌BS168、酵母菌GS115、里氏木霉QM9414的MIC(最小抑菌浓度)及其MBC(最小杀菌浓度)值.结果表明,其MIC值分别为10、10、10、20、40 μg/mL,MBC值分别为20、20、20、40、80μg/mL.鲎素对上述5种常见基因工程菌均有不同程度的抑杀作用,考虑到鲎素基因表达量低甚至不表达,很可能是由于鲎素对宿主的抑杀作用,相比于其他基因工程菌,认为丝状真菌里氏木霉QM9414作为鲎素的表达宿主有比较大的潜能.【期刊名称】《江苏农业科学》【年(卷),期】2012(040)008【总页数】3页(P54-55,57)【关键词】鲎素;基因工程菌;MIC;表达宿主【作者】简琛;张燕;代建国;张丽君;朱俊晨【作者单位】江西农业大学生物科学与工程学院,江西南昌330100;深圳职业技术学院应用生物技术系,广东深圳518055;深圳职业技术学院应用生物技术系,广东深圳518055;深圳职业技术学院应用生物技术系,广东深圳518055;深圳职业技术学院应用生物技术系,广东深圳518055;深圳职业技术学院应用生物技术系,广东深圳518055【正文语种】中文【中图分类】Q93-3鲎素(TachyplesinⅠ)是一种由17个氨基酸残基组成的阳离子抗菌肽(Antimicrobial Peptide，AMP)，可抑杀细菌[1]、真菌[2]、病毒[3]及抑制肿瘤细胞增殖[4]和诱导癌细胞分化[5]，抗菌肽被认为是现有抗生素的最佳替代品，产品化的鲎素在食品、养殖及医药领域具有极大的应用价值，同时鲎素的工业化生产也保护了稀缺的鲎资源。

目前，全球海洋环境污染日益加剧，加之对鲎资源保护不力，世界鲎资源濒临灭绝。

鲎素提取效率极低(仅为0.32%)，人工合成鲎素成本极高，基因工程表达生产鲎素是实现其产业化的必由之路。

鲎素的抗菌作用(一)作者：陈小芳，汪亚君，丁航，张海涛【摘要】目的利用从鲎试剂生产废料中提取出的鲎素，了解鲎素对大肠杆菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌的抑菌作用。

方法用酸处理和Sephdex G-50 凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提取分子量约为3KD的鲎素，然后把鲎素加入菌液培养，24 h后测定结果。

结果鲎素能显著抑制大肠杆菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌的生长，其24 h最小有效抗菌浓度分别为：0.23，0.23，1.88 μg/ml。

结论鲎素具有抗菌作用，可作为新一代的抗菌药物进行开发研究。

【关键词】鲎素抗菌作用Abstract：ObjectiveTo detect the antibacterial activity of tachyplesin ,which extracted from the waste material of tachypleus amebocyte lysate(TAL). MethodsTachyplesin from the waste material of TAL was purified by acid treatment and SephdexG-50 gel chromatography.The Escherichia cdi ,Shigella dysenteriae and Pseudomonas aeruginosa were treated by tachyplesin for 24h. ResultsThe results showed that the tachyplesin inhibited the growth of Escherichia cdi ,Shigella dysenteriae and Pseudomonas aeruginosa.The minimum inhibition concentration on Escherichiacdi ,Shigella dysenteriae and Pseudomonas aeruginosa were0.23μg/ml,0.23μg/ml and 1.88μg/ml in 24hours,respectively.ConclusionTachyplesin can inhibit the growth of certain germs, and it might be a new antibacterial drug.Key words：Tachyplesin; Antibacterial effect鲎，又称马蹄蟹horseshoe crab，是一种生活在海洋中的大型节肢动物。

中国鲎鲎素抗菌活性
洪水根
【期刊名称】《厦门大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】1998(000)006
【摘要】中国鲎血细胞经酸提取后，抽取液经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０凝胶与ＣＭ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ离子交换剂柱层析，分离得到鲎素、体外实验表明，鲎素在较低浓度下就可抑制革兰氏阴性菌（大肠杆菌，绿脓杆菌）和革兰氏阳性菌（枯草芽孢杆菌，金黄色葡萄球菌）的生长，其中以葡萄球菌对鲎素的反应最为敏感。

其最小致死剂量为１０μｇ／ｍＬ，这表明，鲎素具有很强的抗菌活性，它是鲎血细胞用以抵抗入侵微生物的自我防御系
【总页数】1页(P915)
【作者】洪水根
【作者单位】厦门大学生物学系;厦门大学化学系
【正文语种】中文
【中图分类】R282.740.5
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1.中国鲎鲎素诱导人肝癌SMMC-7721细胞分化的观察 [J], 李祺福;欧阳高亮;刘庆榕;洪水根
2.中国鲎鲎素对人胃癌BGC-823细胞增殖的抑制作用 [J], 李祺福;李长友;欧阳高亮;叶军;李筱泉;洪水根
3.中国鲎鲎素对人胃腺癌BGC-823细胞形态和超微结构的影响 [J], 李祺福;李长
友;欧阳高亮;洪水根
4.中国鲎鲎素T-1抗人早幼粒白血病HL-60细胞活性研究 [J], 洪水根;陈菲;李祺福;胡友川;叶军;欧阳高亮;李长友;李筱泉;乔玉欢;陈福
5.中国鲎(Tachypleus tridentatus)基因工程抗菌肽的制备及其抗菌活性 [J], 郑伟;韩文瑜;韩俊友;张钫;雷连成;乔红伟
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鲎实验在五种大输液细菌内毒素检查中的应用本文主要介绍了鲎实验在细菌内毒素检查中的应用，详细分析了实验准备、实验环境、鲎试剂的灵敏度、具体的操作步骤等，从而为进一步做好鲎实验提供了依据。

标签：鲎实验；细菌内毒素细菌内毒素实验（BET），简称鲎实验，最早收载于1980年美国药典第20版，后来，英国药典、欧洲药典、日本药局方、中国药典等相继收载了该方法。

在BET法实施的过程中，人们逐渐认识到在所有药学领域和药品生产中对内毒素污染进行监督是非常必要的，而且，用鲎实验法要比家兔法迅速、经济、所需样品量少、操作过程工作量小、每天可进行许多样品的检测。

BET法具有家兔法所无可比拟的这些优点，现以广泛应用于药品的质量控制。

中国药典2010年版收载了12种药品进行细菌内毒素检查，将BET法作为法定标准收载，并对鲎试剂、细菌内毒素标准、试验程序、判断标准都作了具体的规定。

灭菌注射用水、注射用水、0.9﹪氯化钠注射液，2010年版药典规定，必须采用BET法检查细菌内毒素，不可采用热原检查法，5﹪和10﹪的葡萄糖注射液是中国药典2010年版收载品种葡萄糖注射液的两种规格，其检查项目虽是“热原检查”而不是细菌内霉素检查，其原因主要是10ml：2g；20ml：5 g及20ml：10g；三种规格的葡萄糖注射液，目前尚未做足够的细菌内毒素检查法的考核工作，故该品种热原检查项暂未作修定。

但是，BET法易受多种因素的影响，我们采用BET法近十年，就影响鲎实验的因素作了初步探讨，为使鲎实验结果准确，我们认为在实验过程中应注意以下几个方面：1 实验准备实验所用的卡介苗注射器、针头、镊子、试管、砂轮等器皿，应置烤箱中经180℃干烤至少2 h或至少30min，以除去外原性热原。

去除热源的器皿只能在2d内使用，超过2d时需做重新处理。

2 实验环境实验可在超净工作台上进行。

实验前应按无菌要求，对无菌室超净工作台用1﹪的84消毒液进行清洗消毒，我们曾尝试在控制区普通桌面上进行实验，实验结果表明，可能会因实验环境的影响带来假阳性结果。

鲎抗菌肽对隐球菌、枯草杆菌、变形杆菌的抑菌作用
刘慧明;汪亚君;丁航;张海涛
【期刊名称】《海南医学院学报》
【年(卷),期】2008(14)1
【摘要】目的:利用鲎试剂生产废料中提取的鲎抗菌肽,了解鲎抗菌肽对隐球菌、枯草杆菌、变形杆菌的抑菌作用.方法:采用酸处理法和SephdexG-50凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎抗菌肽,然后把鲎抗菌肽加入菌液培养,24 h后观察结果.结果:鲎抗菌肽对隐球菌,枯草杆菌具有一定的抗菌作用,对变形杆菌无效.24 h隐球菌,枯草杆菌的最小抑制浓度分别为2.28 μL/mL和45 μL/mL.结论:说明鲎抗菌肽具有一定的抗菌作用,可作为新一代的抗菌药物的开发研究.
【总页数】2页(P4-5)
【作者】刘慧明;汪亚君;丁航;张海涛
【作者单位】广东医学院生化教研室,广东,湛江,524023;广东医学院生化教研室,广东,湛江,524023;广东医学院生化教研室,广东,湛江,524023;广东医学院生化教研室,广东,湛江,524023
【正文语种】中文
【中图分类】Q514+.3
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1.小分子海洋抗菌肽鲎素Ⅰ里氏木霉表达系统构建 [J], 张丽君;王英;张燕;简琛;金刚;代建国
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3.鲎素Ⅰ对普通变形杆菌的作用研究 [J], 金元宝;王英;刘莉萍;王倩;金刚;张丽君;代建国
4.鲎血细胞之鲎素Tachyplesin Ⅰ对水产常见病原菌之抑菌作用 [J], 高德友; 郑学渊
5.鲎源抗菌肽对大肠杆菌基因组DNA和RNA作用的分子机制 [J], 洪军;胡建业;王福梅;陈兰英;王者
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