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专题能力训练十九生物技术在其他方面的应用1.胡萝卜素是一种常用的食用色素,可以预防白内障、有助于保护眼睛晶体的纤维部分,还可以促进眼内感光色素的生成,加强视力的形成;还可以预防夜盲症,加强眼睛变色的功能。
胡萝卜素可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取,提取流程图如下,请根据胡萝卜素的提取过程及其性质,回答下列问题。
(1)培养酵母菌R时,培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌R的生长提供和。
(2)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,干燥过程应控制好和,以防止胡萝卜素分解;萃取过程中宜采用方式加热;萃取液浓缩前需进行。
(3)纸层析法可用于鉴定所提取胡萝卜素,鉴定过程中需用胡萝卜素作为。
(4)玫瑰精油的提取方法是法,该方法(填“适合”或“不适合”)胡萝卜素的提取;柠檬芳香油的制备通常用法。
2.研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用,两者的提取及应用如下图所示。
(1)柚皮易焦糊,宜采用法提取柚皮精油,该过程得到的糊状液体可通过除去其中的固体杂质。
(2)筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或接种。
采用平板划线法接种时需先灼烧接种环,其目的是。
对新配制的培养基灭菌时常用的是。
实验前需对超净工作台进行处理。
(3)培养基中的尿素可为乳酸菌A的生长提供。
(4)进行抑菌实验时,在长满致病菌的平板上会出现以抑菌物质为中心的透明圈。
可通过测定透明圈的来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。
3.胡萝卜营养价值高,被国内外营养专家誉为“小人参”,其中含有丰富的天然胡萝卜素。
胡萝卜素不溶于水,易溶于有机溶剂。
三七是一种名贵中药,其有效成分是三七皂甙,是一种非脂质有机物,易溶于水。
请回答下列有关问题。
(1)为了更容易地榨取胡萝卜汁,提高澄清度,需要加入果胶酶,该酶通常从真菌细胞中提取,从功能看,筛选真菌细胞所用的培养基为培养基。
(2)从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是。
采用该方法时需要加热,一般不用酒精灯直接加热而用水浴加热,因为。
跟踪强化训练(二十二)1．(2017·山东济南一模)腐乳是我国古代劳动人民创造出来的一种经过微生物发酵的大豆食品。
下面是腐乳制作的实验流程示意图。
请回答下列相关问题。
让豆腐上长出毛霉―→加盐腌制―→加卤汤装瓶―→密封腌制(1)从微生物培养的角度分析，豆腐块是毛霉等微生物的培养基，按照其状态称为________培养基。
现代的腐乳生产是在严格的无菌条件下，将优良的毛霉菌种接种在豆腐上，这样可以________________________________________________________________________。
(2)用盐腌制时，应注意控制________；配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在________%左右。
腐乳制作过程中，加盐的作用是________________________________________________和____________________________。
(3)吃腐乳时，会发现腐乳外部有一层致密的“皮”，其实质是微生物的________，对人体无害；各地腐乳风味迥异，在原料和菌种相同时，可通过________________制作出不同风味的腐乳。
[答案](1)固体避免其他菌种的污染，保证产品的质量(2)盐的用量12 析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质(3)(匍匐)菌丝控制发酵的条件2．(2017·郑州第三次质量预测)胡萝卜素是一种常用的备用色素，可从胡萝卜或产生胡萝卜素的微生物体中提取获得。
请回答下列问题：(1)胡萝卜素有易溶于有机溶剂的特点，可选用________(填“乙醇”或“乙酸乙酯”)作为胡萝卜素的萃取剂，不选用另外一种的理由是__________________________________________________。
萃取过程中宜采用________方式加热，以防止温度过高。
专题一基因工程与细胞工程[考纲要求] 1.基因工程的诞生(Ⅰ)。
2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)(Ⅱ)。
3.基因工程的应用(Ⅱ)。
4.蛋白质工程(Ⅰ)。
5.植物的组织培养(Ⅱ)。
6.动物的细胞培养与体细胞克隆(Ⅱ)。
7.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)。
8.DNA的粗提取与鉴定。
状元笔记1．与目的基因相关的两类“检测”(1)标记基因：检测受体细胞中是否含“重组DNA”或运载体。
——在依据标记基因(如四环素抗性基因)制备的特定选择培养基(如加入了四环素的培养基)中能够生存下来的受体细胞才可能含重组DNA(目的基因＋运载体)或运载体。
(2)DNA分子杂交技术(基因探针)检测转基因生物中是否含目的基因、在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素作标记，制作探针，以此与已提取到的转基因生物基因组DNA杂交，若显示出杂交带，则表明目的基因已插入到受体细胞基因组中。
2．动物细胞培养关键点(1)培养基的特有成分：动物血清。
(2)培养过程：原代培养、传代培养。
(3)两次使用胰蛋白酶：第一次用于制备细胞悬液，开始原代培养，第二次用于处理瓶(壁)上的细胞。
状元反思1．启动子与起始密码、终止子与终止密码有何区别？提示：启动子、终止子分别位于目的基因首端与尾端，它们均为DNA片段，而起始密码、终止密码均位于mRNA 上，它们是由DNA转录而来。
2．为何用未受精卵母细胞作细胞核移植的受体细胞？提示：(1)营养丰富。
(2)体积大，易操作。
(3)含有刺激已分化的细胞核恢复分裂能力的物质。
考点一基因工程1．(2018·全国课标卷Ⅱ，38)几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。
通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。
回答下列问题：(1)在进行基因工程操作时，若要从植物体中提取几丁质酶的mRNA，常选用嫩叶而不选用老叶作为实验材料，原因是_________________________________。
跟踪强化训练(二十一)一、选择题1．(2016·江苏卷)下列关于中学“腐乳的制作”实验，叙述正确的是( )A．加盐主要是为了调节水分，利于毛霉生长B．加料酒主要是为了灭菌，避免腐败变质C．发酵过程中起主要作用的是乳酸杆菌D．实验室制作的腐乳不宜直接食用[解析]加盐的目的是析出豆腐块中的水分，使豆腐块变硬，同时盐也能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。
由于盐分较高，此阶段包括毛霉在内的各种微生物的生长受到严重抑制，A错误。
加料酒可抑制杂菌生长，避免腐乳变质，同时也与腐乳独特的香味形成有关，B错误。
在腐乳发酵过程中起主要作用的是毛霉，而不是乳酸杆菌，C错误。
在实验室中制作腐乳，其卫生条件达不到食用标准，D正确。
[答案] D2．(2016·四川卷)下列有关实验操作或方法所导致结果的描述，不正确的是( ) A．用纸层析法分离色素时，若滤液细线画得过粗可能会导致色素带出现重叠B．用葡萄制作果醋时，若先通入空气再密封发酵可以增加醋酸含量提高品质C．提取胡萝卜素时，若用酒精代替石油醚萃取将会导致胡萝卜素提取率降低D．调查人群中色盲发病率时，若只在患者家系中调查将会导致所得结果偏高[解析]用纸层析法分离色素时，若滤液细线画得过粗，则色素分离的起点不同步，可能会导致色素带出现重叠，A正确；醋酸菌属于需氧型微生物，通入空气后密封会导致醋酸菌死亡，不能产生醋酸，B错误；胡萝卜素在酒精中的溶解度低于石油醚，故用酒精代替石油醚萃取将会导致胡萝卜素提取率降低，C正确；调查人群中色盲发病率应在人群中调查，若在患者家系中调查将会导致所得结果偏高，D正确。
[答案] B3．(2017·江苏卷)下列关于“腐乳的制作”实验，叙述正确的是( )A．控制发酵温度的主要目的是腐乳调味B．腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用C．毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉D．成品腐乳表面的粘性物质主要由细菌产生[解析]控制发酵温度的主要目的是使毛霉等微生物能更好地生存、繁殖，并通过自身代谢来制作腐乳，A项错误；腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐和调味的作用，B项正确；毛霉的主要作用是分解脂肪和蛋白质，C项错误；成品腐乳表面的粘性物质主要由毛霉产生，毛霉属于真菌，D项错误。
高考生物二轮专项检测试题（36）微生物的培养技术及应用一、选择题1．下列有关微生物营养物质的叙述，正确的是()A．是碳源的物质不可能同时是氮源B．微生物的培养都需要提供碳源、氮源、水、无机盐，缺一不可C．蛋白胨来源于植物，营养全面D．液体培养基有利于营养物质的吸收，可用于微生物的扩增培养解析：选D是碳源的物质同时也可以是氮源，如牛肉膏和蛋白胨均可作为碳源和氮源，同时还提供维生素，A错误；并非所有微生物的培养基中都必须含有碳源、氮源，自养的微生物不需要碳源，固氮微生物不需要氮源，B错误；蛋白胨来源于动物，含有糖、维生素和有机氮等营养物质，C错误；液体培养基中不加任何凝固剂，这种培养基的成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的养料，利于微生物扩增培养，D正确。
2．下列有关制备培养基和倒平板的具体描述，正确的是()①待培养基冷却至40 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板②将灭过菌的培养皿盖放在桌面上，左手拔出棉塞③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰④用左手的拇指和食指完全打开皿盖⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖⑥等待平板冷却5～10 s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上A．①③④⑤B．④⑤⑥C．①②④⑥D．③⑤解析：选D待培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，防止杂菌污染，①错误；不能将灭过菌的培养皿盖放在桌面上，因为桌面上可能有杂菌，②错误；右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰，高温可防止杂菌污染，③正确；倒平板时培养皿只需要打开一条稍大于瓶口的缝隙，④错误；右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖，⑤正确；等待平板冷却5～10 min，待培养基冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，⑥错误。
3．在微生物培养和现代生物学实验中的许多方面都要进行无菌操作，防止杂菌污染。
下列操作错误的是()①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢②接种操作要在酒精灯火焰附近进行③无菌繁殖脱毒苗时，植物的外植体要进行消毒④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌⑤培养基要进行湿热灭菌⑥加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌A．①③B．②④C．③⑤D．④⑥解析：选D无菌操作包括消毒和灭菌。
专题十五生物技术实践考向预测1.近五年的考题中，对微生物的分离和培养的考查尤为突出，侧重考查微生物的培养、分离、计数、无菌技术等基本知识，对传统发酵技术的发酵原理、制作流程等的考查频度也在不断提高。
对植物组织培养、胡萝卜素的提取仅进行了两次考查，前者侧重考查营养条件及有关植物激素的作用等；后者侧重考查胡萝卜素的萃取剂的选择等。
2．本专题以非选择题的形式考查。
常借助某一特定的微生物的分离和培养考查微生物的营养、接种方法等；对于生物技术在食品加工中的应用，常借助发酵实例考查，填充内容多为教材中一些结论性语句等。
植物组织培养技术、植物有效成分的提取的考查也多以教材基础知识为主。
3．考纲新变化：（1）删去了”植物组织培养”，增加了“某种微生物数量的测定”，将“利用微生物进行发酵来生产特定的产物” 改为“利用微生物进行发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用”。
2018年备考时应特别关注这些变化，在备考时，可以从以下几个方面来把握：(1)掌握大肠杆菌的纯化原理、主要方法及菌种的保存方法。
(2)认真分析教材中两个微生物分离与计数的实例，并掌握微生物的筛选及技术方法。
(3)利用比较法归纳总结并掌握常见传统发酵技术的原理、流程及影响因素等。
(4)列表比较玫瑰精油、橘皮精油及胡萝卜素的提取方法、原理、实验步骤等异同。
知识框架知识与技巧的梳理考点一微生物的培养、分离与计数1. 消毒和灭菌的比较2. 平板划线法每次灼烧的目的3.纯化微生物的接种方法项目平板划线法稀释涂布平板法原理通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
在数次划线后培养,可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子胞群体,即菌落将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而能在培养基表面形成单个的菌落优点可以观察菌落特征,对混合菌进行分离可以计数,可以观察菌落特征缺点不能计数吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延4.选择培养基与鉴别培养基的比较例1. 某研究小组的同学用所学的微生物的实验室培养的方法进行“变质牛奶中金黄色葡萄球菌的分离和计数实验”，部分实验处理和结果如图所示。
专题能力训练九变异、育种和进化一、判断题1.X射线处理既可以引起基因突变也可能导致染色体变异。
( )2.自然突变是不定向的,人工诱变是定向的,基因突变一定会导致生物性状改变,但不一定遗传给后代。
( )3.无论低等生物还是高等动植物,都会发生基因突变,说明基因突变是普遍存在的。
( )4.用射线照射大豆种子使其基因结构发生改变,获得性状发生变异的大豆,属于诱变育种。
( )5.基因突变中,若是碱基对替换,则基因数目不变;若是碱基对增添,则基因数目增加;若是碱基对缺失,则基因数目减少。
( )6.自然状态下,原核生物和真核生物都会发生基因重组。
( )7.染色体增加某一片段可提高基因表达水平,是有利变异。
( )8.减数分裂过程中随着非同源染色体的自由组合,非同源染色体上的非等位基因也自由组合。
( )9.将杂合的二倍体植株的花粉培育成一株幼苗,然后用秋水仙素处理,使其能正常开花结果。
该幼苗发育成的植株具有的特征是能稳定遗传。
( )10.体细胞中含有两个染色体组的个体不一定是二倍体。
( )11.由未受精的卵细胞、花药离体培养得到的植株为单倍体。
( )12.抗虫小麦与矮秆小麦杂交,通过基因重组获得抗虫矮秆小麦,属于杂交育种。
( )13.“将含抗病基因的重组DNA导入玉米细胞,经组织培养获得抗病植株”包含了基因工程技术。
( )14.用秋水仙素处理二倍体形成四倍体的过程未经过地理隔离,因而所形成的四倍体不是新物种。
( )15.生物进化过程的实质在于有利变异的保存,一般来说,频率高的基因所控制的性状更适应环境。
( )16.在长期的生物进化过程中,具有捕食关系的两种生物互为选择因素。
( )17.蚊子在兔和病毒之间的协同(共同)进化过程中发挥了作用。
( )答案:1.√2.×3.√4.√5.×6.×7.×8.√9.√10.√11.√12.√13.√14.×15.×16.√17.√二、选择题1.下图为结肠癌发病过程中细胞形态和部分染色体上基因的变化。
专题九：生物技术实践【考情分析】本专题内容包括选修一《生物技术实践》的全部内容。
本部分内容在高考中以非选择题呈现的较多，多为二选一模式。
本专题内容在高考中的主要考点有：微生物的培养基的配制、消毒、灭菌、计数分离等技术，尤其是培养和分离；传统发酵食品制作的原理、过程、条件控制；花药离体培养技术的操作及与植物组织培养的区别；植物有效成分的提取的原理、方法等；DNA、蛋白质的提取、分离的原理、方法与装置。
【知识网络】【知识综合】一、传统发酵技术的应用8二、微生物的培养及应用 12、微生物的纯化（1）平板划线法：操作简单，但是单菌落不易分离 （2）稀释涂布平板法：操作复杂，但是单菌落易分离 3、微生物的分离和计数 （1）分离：选择培养基（2）计数：常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数。
稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低。
这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
三、植物组织培养1、原理：细胞的全能性2种—培养—移栽—栽培（1） 包埋法：适合于较大的细胞 化学结合法物理吸附法（2不利于催化一系列的酶促反应五：五种重要物质的提取适用于酶的固定常用方法（1）提取方法总结（2）DNA粗提取与鉴定①哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，不适于作DNA提取的材料，但却是提取血红蛋白的理想材料。
②实验过程中两次用到蒸馏水：第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA，第二次目的是稀释NaCl溶液。
③鉴定DNA加入二苯胺试剂并沸水浴加热，观察是否出现蓝色。
④注意事项：经以血液为材料时，需加入柠檬酸钠抗凝，搅拌动作在轻缓，二苯胺在现用现配（3）血红蛋白的提取和分离操作程序①样品处理：红细胞的洗涤（除去血浆蛋白等杂质）、血红蛋白的释放（使红细胞胞破裂，血红蛋白释放出来）、分离血红蛋白溶液（经过离心使血红蛋白和其他杂质分离开来）。
②粗分离——透析：除去样品中分子量较小的杂质。
③纯化：一般采用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化。
二轮专题复习整合训练·高中生物(九)生物变异、育种与进化全员必做题1．以下关于生物变异和生物进化的叙述，正确的是()A．抗生素的使用使病原体产生了适应性的变异B．生物与生物之间、生物与无机环境之间共同进化形成了生物的多样性C．由于种群基因频率的改变，生物进化后一定会形成新的物种D．有性生殖的出现实现了生殖隔离，明显加快了生物进化的速度2．家蝇对拟除虫菊酯类杀虫剂产生抗性，原因是神经细胞膜上某通道蛋白中的一个亮氨酸替换成了苯丙氨酸。
下表是对某市不同地区家蝇种群的敏感性和抗性基因型频率调查分析的结果。
家蝇种群来源敏感性纯合子/%抗性杂合子/%抗性纯合子/%甲地区78202乙地区64324丙地区84151下列叙述，正确的是()A．上述通道蛋白中氨基酸的改变是基因碱基对缺失的结果B．甲地区家蝇种群中抗性基因频率为22%C．比较三个地区抗性基因频率可知，乙地区抗性基因突变率最高D．丙地区敏感性基因频率高是自然选择的结果3．[2021·山西省长治市高三练考]某海岛有一种中地雀，原来没有竞争者。
在记录的时间段内，1977年和2004年发生了2次旱灾；2005年具有大鸟喙的大地雀入侵，它们以大型种子为食。
下图记录了中地雀鸟喙平均尺寸的变化。
下列说法不正确的是()A．1973～2006年该岛上中地雀鸟喙的基因频率发生了变化B．1977年旱灾诱发了中地雀基因发生突变，导致鸟喙变宽C．2005年后，中地雀可能主要以大地雀不吃的小种子为食D．大地雀入侵后与中地雀竞争，可能改变其鸟喙进化方向枯草杆菌核糖体S12蛋白第55－58位的氨基酸序列链霉素与核糖体的结合在含链霉素培养基中的存活率(%)野生型…－P－K－K－P－…能0突变型…－P－R－K－P－…不能100下列叙述，正确的是()A．S12蛋白结构改变使突变型具有链霉素抗性B．链霉素通过与核糖体结合抑制其转录功能C．突变型的产生是由于碱基对的缺失所致D．链霉素可以诱发枯草杆菌产生相应的抗性突变5．[2021·江西省高三质检]有关生物育种的叙述，不正确的是()A．选择育种和杂交育种都具有育种周期长的缺点B．诱变育种和杂交育种都能选育出具新性状的品种C．多倍体育种和单倍体育种都有人工诱导的过程D．诱变育种和单倍体育种都能加速育种工作进程6．[2021·湖南省邵阳市高三第一次联考]甲海岛上的某种鸟一部分迁徙到乙、丙两个海岛(三个岛屿相互隔绝)，下图为刚迁入时和多年后决定羽毛颜色的相关基因的调查结果(B黑色、b灰色、B1黄色)。
大题1题多练九生物技术实践1.(2018四川达州第二次诊断,37)为调查某地土质状况,科研小组对该地土壤中分解尿素的细菌进行了分离和纯化培养。
请回答下列问题。
(1)分解尿素的细菌能分解尿素,而其他微生物不能,其根本原因是前者具有。
为筛选出分解尿素的细菌,在配制培养基时应选择以作为唯一氮源。
分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,但可用葡萄糖作为碳源,由此推测分解尿素的细菌是(填“自养”或“异养”)型生物。
(2)该研究小组将10 g土样进行梯度稀释,在某个稀释度下涂布接种了3个平板(接种量均为0.1 mL),经适宜培养后,3个平板均没出现菌落,分析可能的原因是。
分析原因后,科研小组用先前制作的未使用的平板重新涂布接种完成实验,在另外某个稀释度下涂布接种的3个平板,经适宜培养后均存在多种不同特征的菌落,推测最可能的原因是。
(3)科研小组从同一平板中挑选出A、B、C三种菌落进行梯度稀释并分别涂布接种在分解尿素的细菌的选择培养基上,经适宜培养后,均能检测到A、B菌落却始终检测不到C种菌落。
①由此可得出的结论是。
②推测C种细菌与A、B等在同一个平板上能生长繁殖的可能原因是。
答案:(1)控制脲酶合成的基因尿素异养(2)稀释度过高(或涂布器灼烧后没冷却) 该土样中有多种细菌能分解尿素(3)①C种菌落的细菌不能分解尿素②C种菌落的细菌可从A或B菌落的代谢产物中获得氮源2.(2018吉林长白山质量监测,37)自然界中,除了植物和动物以外的生物统称为微生物。
微生物无处不在,大多数对我们人类是有利的,少数有害。
我们只有清楚地认识它们,才能合理利用它们。
(1)传统发酵技术中,人们利用酵母菌酿制果酒、醋酸菌制醋、毛霉制作腐乳、乳酸菌制作泡菜。
①可以依据是否将酵母菌、毛霉与以上其他微生物区分开。
②利用乳酸菌制作泡菜过程中,需对发酵中生成的亚硝酸盐含量进行测定,目前常用的测定方法是。
③豆腐发酵时主要利用的是微生物产生的酶等,通过发酵,豆腐中营养物质的种类(填“减少”或“增多”),且更易于消化和吸收。
跟踪强化训练(二十一)一、选择题1．(2016·江苏卷)下列关于中学“腐乳的制作”实验，叙述正确的是( )A．加盐主要是为了调节水分，利于毛霉生长B．加料酒主要是为了灭菌，避免腐败变质C．发酵过程中起主要作用的是乳酸杆菌D．实验室制作的腐乳不宜直接食用[解析]加盐的目的是析出豆腐块中的水分，使豆腐块变硬，同时盐也能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。
由于盐分较高，此阶段包括毛霉在内的各种微生物的生长受到严重抑制，A错误。
加料酒可抑制杂菌生长，避免腐乳变质，同时也与腐乳独特的香味形成有关，B错误。
在腐乳发酵过程中起主要作用的是毛霉，而不是乳酸杆菌，C错误。
在实验室中制作腐乳，其卫生条件达不到食用标准，D正确。
[答案] D2．(2016·四川卷)下列有关实验操作或方法所导致结果的描述，不正确的是( )A．用纸层析法分离色素时，若滤液细线画得过粗可能会导致色素带出现重叠B．用葡萄制作果醋时，若先通入空气再密封发酵可以增加醋酸含量提高品质C．提取胡萝卜素时，若用酒精代替石油醚萃取将会导致胡萝卜素提取率降低D．调查人群中色盲发病率时，若只在患者家系中调查将会导致所得结果偏高[解析]用纸层析法分离色素时，若滤液细线画得过粗，则色素分离的起点不同步，可能会导致色素带出现重叠，A正确；醋酸菌属于需氧型微生物，通入空气后密封会导致醋酸菌死亡，不能产生醋酸，B错误；胡萝卜素在酒精中的溶解度低于石油醚，故用酒精代替石油醚萃取将会导致胡萝卜素提取率降低，C正确；调查人群中色盲发病率应在人群中调查，若在患者家系中调查将会导致所得结果偏高，D正确。
[答案] B3．(2017·江苏卷)下列关于“腐乳的制作”实验，叙述正确的是( )A．控制发酵温度的主要目的是腐乳调味B．腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用C．毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉D．成品腐乳表面的粘性物质主要由细菌产生[解析]控制发酵温度的主要目的是使毛霉等微生物能更好地生存、繁殖，并通过自身代谢来制作腐乳，A项错误；腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐和调味的作用，B项正确；毛霉的主要作用是分解脂肪和蛋白质，C 项错误；成品腐乳表面的粘性物质主要由毛霉产生，毛霉属于真菌，D项错误。
[答案] B二、非选择题4．(2017·湖北八校高三第一次联考)某研究小组从牛的瘤胃中采集样本，进行分解尿素的微生物的分离与计数。
实验基本步骤如下：配制培养基―→灭菌、倒平板―→接种―→培养―→观察、统计请回答：(1)分解尿素的微生物含有________，因此，配制培养基时以尿素作为唯一氮源，尿素会被分解成________使培养基的碱性增强。
(2)配制培养基时，需添加琼脂，琼脂起________作用；培养基中添加________作为指示剂，可使目标菌落的周围产生红色环带。
(3)对尿素溶液进行灭菌的最适方法是________灭菌。
A．高压蒸汽B．干热C．添加抗生素D．过滤E．紫外线照射 F．70%酒精浸泡(4)该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是_________________________________；然后将1 mL瘤胃样液稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL 稀释液；经适当培养后，3个平板的菌落数分别为49、47和45。
据此可得出每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为________，理论上，统计的菌落数往往________(填“低”“等”或“高”)于接种的实际活菌数目。
[解析](1)尿素分解菌含有分解尿素的酶即脲酶，因此，配制培养基时应以尿素作为唯一氮源来筛选，尿素会被分解成氨，使培养基的碱性增强。
(2)琼脂为凝固剂；尿素分解菌将尿素分解成氨，使培养基的碱性增强，当遇到酚红可使目标菌落的周围产生红色环带，因此在培养基中添加酚红作为指示剂。
(3)由于尿素在高温下会分解，所以对尿素溶液的灭菌要采用过滤灭菌的方法。
(4)取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，可用于检测培养基平板灭菌是否合格；由题意可知，每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为[(49＋47＋45)/(3×0.1)]×103×103＝4.7×108；由于两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以理论上，统计的菌落数往往低于接种的实际活菌数目。
[答案](1)脲酶(或分解尿素的酶) 氨(或NH3) (2)凝固剂酚红(3)D (4)检测培养基平板灭菌是否合格 4.7×108低5．(2017·山西名校联考)山西老醋历史悠久、独具风味，其生产工艺流程如下图。
淀粉类原料――→糖化葡萄糖――→酒精发酵成熟酒醅――→醋酸发酵成熟醋醅――→处理成品醋(1)在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度，这是因为酶__________________________________________________________。
(2)在酒精发酵阶段，需添加酵母菌。
在操作过程中，发酵罐先通气，后密闭。
通气能提高________的数量，有利于密闭时获得更多的酒精产物。
(3)在醋酸发酵阶段，独流老醋采用独特的分层固体发酵法，发酵30天。
工艺如下：①发酵过程中，定期取样测定醋酸杆菌密度变化，趋势如右图。
据图分析，与颠倒前相比，B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是__________________________，由此推测，影响醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是_______________________________________________________________________________________________。
②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。
发酵过程中，发酵缸中_____________________________________________________层的醋醅有利于乳酸菌繁殖，积累乳酸。
③成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少，主要原因是发酵后期营养物质消耗等环境因素的改变，加剧了不同种类乳酸菌的________，淘汰了部分乳酸菌种类。
[解析](1)酶的活性受温度的影响，在最适温度下酶的催化能力最强。
(2)发酵过程中先通气的目的是让酵母菌大量繁殖，使发酵液中的酵母菌总数达到一定量，有利于发酵的进行。
(3)①醋酸杆菌是好氧菌，据图分析，第15天将A、B层颠倒，颠倒后使原来处于下层缺氧状态的醋酸杆菌分布在上层有氧的环境，醋酸杆菌大量繁殖，其数量上升，后来因为培养液中营养物质被逐渐消耗以及呼吸产物对pH的影响，导致其数量不再增长而趋于稳定。
由此推测影响醋酸杆菌密度变化的主要因素是氧气、营养物质、pH。
②因为乳酸菌是厌氧菌，故下层(未颠倒前B 层处于下层，颠倒后A层处于下层)有利于乳酸菌繁殖。
③由题目信息可知，由于营养物质消耗、发酵环境发生改变等，生物个体之间的斗争、不同种类之间的竞争会加剧。
[答案](1)在最适温度条件下催化能力最强(2)酵母菌(3)①先快速增长后趋于稳定氧气、营养物质、pH ②颠倒前的B层和颠倒后的A(或不翻动，或下) ③种间竞争(或竞争)6．(2017·湖北七市高三联考)我国规定1升自来水中大肠杆菌不得超过3个。
在培养基中加入伊红美蓝，可以使大肠杆菌的菌落呈深紫色，并带有金属光泽。
有关部门据此对自来水中的大肠杆菌进行检测。
具体步骤大致如下：(一)用火焰灼烧自来水龙头3分钟，然后打开水龙头放水5分钟，再用无菌的三角瓶接取1000毫升水样，盖好瓶塞。
(二)将漏斗和抽滤瓶固定好，用镊子夹住滤膜边缘，将水样倒入漏斗中，边抽滤、边加水。
(三)用镊子将滤膜取出、放在无菌平板上进行培养，观察并记录实验结果。
回答下列问题：(1)实验中所用的醋酸纤维素滤膜、漏斗、抽滤瓶、镊子等实验器材和培养基都需先用________法进行灭菌。
如需检测培养基灭菌是否彻底，常用的方法是__________________________________________________________________________________________________。
(2)制作本实验所用的无菌平板时，需要加入________、水、无机盐等大肠杆菌所必需的营养成分，以及加入________，便于统计菌落外；还需要将培养基的pH调整至________性。
鉴别是否有大肠杆菌菌落，需要在培养基中加入________。
(3)按上述步骤制作的3个样品平板上所有的菌落数分别为49、51、47。
能否据此得出每升水样中大肠杆菌数约为49的结论？________。
理由是________________________________。
[解析](1)检测培养基是否灭菌彻底，可以设置空白对照，即将灭菌过的培养基在适宜的条件下培养一段时间，观察是否有菌落产生。
(2)统计微生物一般用稀释涂布平板法，需要用固体培养基，故加入琼脂，大肠杆菌生长的最适pH为中性或微碱性，伊红美蓝是专一鉴定大肠杆菌的指示剂。
(3)该培养基是鉴别培养基，在平板上生长的只是部分大肠杆菌的菌落，因此大肠杆菌的实际数值应该小于49。
[答案](1)高压蒸汽灭菌将灭菌过的培养基在适宜的条件下培养一段时间，观察培养基上是否有菌落产生(2)碳源和氮源琼脂中性或微碱伊红美蓝(3)不能培养基表面生长的菌落可能不都是大肠杆菌的菌落7．(2017·成都第三次诊断检测)近年来市民中流行自酿葡萄酒，但自酿葡萄酒时培养瓶发生爆炸的新闻时有报道。
回答下列问题：(1)自酿葡萄酒用的培养瓶爆炸，原因可能是发酵过程中产生的________过多，导致内部压强过大所致。
为避免这种危险的发生，应采取的措施是__________________________。
(2)在分离和培养酵母菌时，需要进行无菌操作，对耐高温、需要保持干燥的培养皿和金属用具，宜采用________灭菌。
将得到的菌株接种到液体培养基中混匀后，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现振荡培养的细菌生长速度更快，究其原因，振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。
(3)在酸性条件下，可用________来检测发酵产物中是否有酒精产生。
若要检测所得果酒中活体酵母菌的密度，一般采用________法，但此种方法最终计算得出的菌体数目往往比实际菌体数目少，原因是________________________________________。
[答案](1)CO2定期排气(2)干热溶解氧营养物质(3)重铬酸钾稀释涂布平板两个或多个细胞相连时，会被统计成一个菌落8．(2017·江南十校高三联考)农作物的秸秆富含纤维素，在农田中就地焚烧秸秆不仅浪费能源，而且污染环境。
