体交配,得到3个基因得杂合体ec ct +/+ + cv (ec、ct、cv得排
列不代表它们在X染色体得真实顺序),取其中3杂合体雌蝇再与 3隐性体ec ct cv/Y雄蝇测交,测交后代如下表。
ec ct +/ + + cv× ec ct cv/Y测交后代数据
序号 1 2 3 4 5 6 7 8
合计
构建遗传图谱 构建物理图谱
M1
M2
染色体步移: Chromos未测序得物种可通过染色体步移得方法进行定位,但就是 比较费时费力,而对于水稻、拟南芥等基因组测序工作已经完成得物种, 则不在利用染色体步移得方法进行定位,直接从构建遗传图谱到构建物
图位克隆得特点就是无需预先知道基因得DNA顺序,也无 需预先知道其表达产物得有关信息,但应有以下两方面得 基本情况。
一就是有一个根据目得基因得有无建立起来得遗传分离群 体,即定位群体,如:F2、DH、BC、RI等。
二就是开展以下几项工作:(1)首先找到与目得基因紧密
连锁得分子标记;(2)用遗传作图与物理作图将目标基因 定位在染色体上得特定得重叠群;(6)通过染色体步行、登陆或跳跃 获得带有目得基因得大片段克隆;(7)通过亚克隆获得带 有目得基因得小片段克隆;(8)通过遗传转化与功能互补 验证最终确定目标基因得碱基序列
F2群体构建
引物设计常用软件及网站
设计软件: primer3、0
primer5、0(寻找酶切位点,设计引物)
Webprimer
序列分析软件: DNAstar(分析序列特征,引物质量,编辑序列)
基因得初步定位(BSA法)
筛选亲本间多态性引物 筛选池间多态性引物
小群体验证
初步定位带型分析