高效液相色谱分析技术—方法开发(陈桂良)

高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林的含量-药学论文-基础医学论文-医学论文——文章均为WORD文档，下载后可直接编辑使用亦可打印——阿司匹林肠溶片为非甾体类抗炎药，临床可用于抗血栓，也可用于治疗不稳定性心绞痛，是《国家基本药物目录》列入的品种。

本文采用高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林的含量，该方法简单，快速，重现性好，回收率高，可用于该制剂的质量控制。

1 仪器与试药1.1 仪器：大连依利特P230 型高效液相色谱仪；UV230+紫外可见检测器；手动进样器；超声仪（型号KQ5200E，功率200W，频率40KHz）；电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司，0.0001g）。

1.2 试药：阿司匹林对照品（中国食品药品检定研究院，批号：100113）；阿司匹林肠溶片（亚宝药业太原制药有限公司，批号：131210；石家庄康力药业有限公司，批号：121037；神威药业集团有限公司，批号：1306072），甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果2.1 色谱条件：色谱柱为Hypersil ODS2 柱（250mm4.6mm，5m）；流动相：甲醇∶0.5%乙酸溶液（37∶63）；流速：0.8mlmin-1；柱温：25∶；检测波长：267nm；理论板数按阿司匹林计不得少于3000。

2.2 溶液的制备：对照品溶液的制备：精密称取一定量阿司匹林对照品，置100ml 量瓶中，加1%醋酸甲醇溶解并定容制成100gml-1的对照品溶液。

供试品溶液的制备：取供试品（石家庄康力药业有限公司，批号：121037）约0.03g，精密称定，置100ml 量瓶中，用1%冰醋酸甲醇溶液溶解并定容，过滤，取续滤液，作为供试品溶液。

阴性样品溶液的制备：按处方比例取辅料制成空白制剂，按供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液。

2.3 专属性实验：在2.1色谱条件下，分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性样品溶液各10L，注入液相色谱仪，记录色谱图。

药物检验中超高效液相色谱法的应用策略发布时间：2021-09-01T09:41:22.473Z 来源：《健康世界》2021年11期作者：张春侠高继军[导读] 超高效液相色谱分析法是一种高速有效的分析分离技术张春侠高继军普洛药业股份有限公司浙江省东阳市 322118摘要：超高效液相色谱分析法是一种高速有效的分析分离技术，常用于对药物及食品的检测和检验。

超高效液相色谱法为研究高通量和分离复杂混合物的工作提供了更为有效的方法，在检测微量药物及药剂样品方面更为突出，在药品质量检验、药品成分识别、药物分子的代谢组合等方面应用较为广泛。

鉴于此，文章重点就药物检验中超高效液相色谱法的应用策略进行研究分析，以供参考和借鉴。

关键字：药物检验；超高效液相色谱技术；应用策略引言随着社会的发展与生活水平的提高，人们对食品以及药物质量的要求也不断提高，各种分离分析技术也层出不穷。

超高效液相色谱法具有样品组分容易吸收、样品处理方法简单、检测自动化、适用范围广、药物成分分离效率高、检测灵敏度高以及分离速度快等诸多优点，为监测药品及食品的质量安全提供了更为有效的平台。

1超高效液相色谱技术原理分析所谓超高效液相色谱技术，实质上是融合了超高压系及小颗粒填料色谱柱的新型检测技术。

在使用该项技术时，主要影响色谱柱性能的因素是固定相颗粒度，随着颗粒度参数的不断缩小，色谱柱性能逐渐趋于良好。

因此，在实际运用该项技术进行药物检验中，可以通过降低固定相颗粒度的方式，达到提升检测和分析灵敏度的实质性目的。

与此同时，也可以有效的减少药品分析的时间。

然而当前对于药物检验和分析质量要求不断提升，这对于超高效液相色谱的分离速度和效率提出了更高的要求，需要加强技术的创新和升级，具体如下：第一，对自动进样体积进行改进。

在整个超高效液相色谱技术体系当中，进样环节十分关键，会影响到检验结果的准确性。

通常尽可能的对进样死体积进行缩小，一方面可以缓解极端高压力波所产生的干扰，另一方面还可以加快进样的速度，达到提升检验和分析效率目的；第二，提高输液泵效率。

高效液相色谱法测定大败毒胶囊中橙皮苷的含量摘要】目的建立大败毒胶囊中橙皮苷含量的高效液相色谱法。

方法采用Agela Venusil MP C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm），以甲醇-醋酸溶液（每1000mL水中含冰醋酸25mL）（35:65）为流动相，流速为 1.0mL/min，检测波长为284nm，柱温30℃。

结果橙皮苷进样量在0.0352～1.1264μg（r=0.9999）范围内与峰面积积分值具有良好线性关系，平均加样回收率为98.18%,RSD为0.99%（n=9）。

结论该法简便、灵敏、准确可靠，可用于该药的含量测定。

【关键词】高效液相色谱法大败毒胶囊橙皮苷含量【中图分类号】R927.2 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2013）32-0343-02大败毒胶囊为《卫生部药品标准中药成方制剂》第十二册收载的品 [1]，由大黄、蒲公英、赤芍、陈皮、黄柏等17味中药组成，具有清血败毒、消肿止痛等功效。

用于治疗脏腑毒热、血液不清引起的梅毒、血淋、白浊、尿道刺痛、大便秘结、疥疮等症。

原标准中无含量测定方法，方中陈皮为主要药味之,其有效成分为橙皮苷，为能有效地控制该药品质量，本试验采用HPLC法测定橙皮苷的含量，效果较好。

1 仪器与试药DIONEX UltiMate 3000 pump，DIONEX UltiMate 3000 Diode Array Detector液相色谱仪；橙皮苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号为110721-200613，供含量测定用，含量100%）；大败毒胶囊（批号121003、130301、130603，内蒙古通辽制药股份有限公司生产）；水为纯化水；甲醇为色谱纯；其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱：Agela Venusil MP C18柱（250mm×4.6mm,5μm）；流动相：甲醇-醋酸溶液（每1000mL水中含冰醋酸25mL）（35:65）；检测波长：284nm；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；进样量10μL。

高效液相色谱法在黄连解毒药剂质量检测上的应用作者:梅景良黄连解毒汤中的黄芩具有抗菌消炎、降压利尿、解热、镇静、利胆解痉等作用，是此方的主要药物，而黄芩苷是黄芩中的主要有效成分，因此测定其含量已成为黄连解毒药质量控制标准之一。

目前医药界检测黄芩苷含量大多采用高效液相色谱法。

本文就高效液相色谱法在黄芩苷含量测定上的应用情况及其存在的问题作一简述。

1 黄芩苷含量常用测定方法简介1．1 薄层层析——比色法将含黄芩苷的药剂经过薄层层析分离，紫外光下定位，用一定溶剂洗脱后，利用其结构上的酚羟基及其还原性进行显色。

在721型分光光度计或72型光电分光光度计上测定其在黄芩苷吸收度，计算其含量。

在该法中，薄层层析的回收率是含量测定精确与否的判断标准。

该法与紫外法比较无明显差异。

1．2 薄层层析——紫外分光光度法含黄芩苷的样品经薄层层析分离后，紫外光下定位，经洗脱在751G或752型分光光度计上测定其大最大吸收波长处的吸收度，计算其含量。

须绘制黄芩苷的标准曲线，或求出回归方程。

然后在标准曲线上查出相当于黄芩苷的含量，或用回归方程计算含量。

在测定样品含量前，首先应对不同剂型的制剂进行一定的处理，再行测定。

该测定法的缺点是制剂成分复杂、干扰组分多时，会影响测定结果，且薄层回收率受固定相、洗脱剂的影响，必须预先选择适宜的固定相和洗脱剂，才能得到令人满意的回收率。

1．3 双波长分光光度法含黄芩苷的复方制剂可不经分离，直接在751G或Uv一265紫外分光光度计及UV-3000型双波长双光束自记式分光光度计上测定λ1(参比波长)和λ2(测定波长)处的吸收度，得吸收度差值ΔA，由此计算黄芩苷的含量。

λ2为测定波长，是测定样品中黄芩苷的最大吸收波长，λ1为参比波长，是测定样品中干扰成分与黄芩苷等吸收处的波长。

干扰成分在此波长处不影响黄芩苷的吸收度，不同成分的样品参比波长不同，须实际测定来确定。

在λ1和λ2处黄芩苷的吸收度差只与样品中黄芩苷的浓度成一定的函数关系，且在一定浓度范围内两者为线性关系。

高效液相色谱法同时测定葡萄酒中5种酸性物质分析葡萄酒是用新鲜的葡萄或葡萄汁经发酵酿制而成的一类酒精饮品。

通常分红葡萄酒和白葡萄酒两种。

因蕴含多种氨基酸、矿物质、维生素等对人体有益成分，其营养价值得到了广泛认可。

近年来，有关葡萄酒制假售假现象屡有报道，为了增强红葡萄酒的色泽同时降低生产成本，有不法企业向葡萄酒中添加人工合成色素，从而达到以假乱真的目的。

长期饮用此类假酒，会对人的肝脏、肾脏等产生危害。

因此对葡萄酒中可能添加的外来色素进行检测具有重要意义。

坚牢红（又名酸性红13）、偶氮玉红（又名酸性红）、孟加拉红（又名酸性红94）、奇通红S（又名酸性红52）和荧光桃红（又名酸性红92）均属于偶氮染料。

GB2760-2011《食品添加剂使用标准》中明确规定偶氮玉红不得在葡萄酒中添加[1]，其它四种色素在我国和欧盟等国家也均不允许在食品中使用。

目前食品中合成色素的检测方法主要有高效液相色谱法[2～8]、液质联用法[9]、电动毛细管色谱法[10]和极谱法[11]。

但同时测定葡萄酒中坚牢红、偶氮玉红、孟加拉红、奇通红S、和荧光桃红等5种酸性红色素的方法尚不多见。

为有效监控酸性工业染料在食品中的滥用，本实验建立了高效液相色谱法同时快速测定葡萄酒中5种酸性红色素的检测方法。

1材料与方法1.1仪器与试剂Waters 2695型高效液相色谱仪，配二极管阵列检测器；AL204 电子天平，梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司；MS3基本型旋涡混合仪，德国IKA；KQ5200超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司。

甲醇，色谱纯；醋酸铵，分析纯；坚牢红、偶氮玉红、孟加拉红、奇通红S、荧光桃红，Dr. Ehrenstorfer公司。

1.2标准溶液的制备将5种色素配制成质量浓度为50 mg/L的混合标准储备液，置于4℃冰箱中保存。

将混合标准储备液用水依次稀释成0.5、1.0、5.0、10.0、50.0 mg/L 的标准系列溶液。

1.3高效液相色谱条件色谱柱：Symmetry C18柱（250 mm×4.6 mm， 5 μm）；流速：1.0mL/min；柱温：35℃；采集波长：200～630 nm；进样量：10 μL。

高效液相色谱法在制药行业中的应用--陈诗语制药1081 1081604118 高效液相色谱法（HPLC）是20世纪70年代发展起来的一项高效、快速的分离分析技术已被广泛用于各个领域，它是以经典的液相色谱为基础，引入气相色谱的理论与实验方法，将流动相改为高压输送，并采用高效固定相及在线检测等手段，发展而成的分析、分离方法。

以其灵敏度高、选择性好，可分析微量组成甚至痕量样品等特点，成为医药分析领域应用最广、发展最快的现代分析技术之一。

有的已被列入药典，成为环境污染物检测技术及化工产品质量检验中的标准方法。

1．高效液相色谱的结构、原理和特点高效液相色谱仪主要由色谱泵及控制器、进样器、色谱柱、检测器和数据处理及控制五大部分组成，分离原理是一个物理过程，流动相携带着待分析化合物和其他一些共存物质流过色谱柱，利用不同物质在固定相上的保留时间不同，从而出峰时间不同而达到分离，利用保留时间定性，峰高或者峰面积定量，在将分离后的各个成分依次通过一紫外检测器时就可检测出各化合物的浓度来。

高效液相色谱法有“三高一广一快”的特点：（1）高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。

（2）高效：分离效能高。

可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。

（3）高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。

（4）应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。

（5）分析速度快、载液流速快：较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30 min，有些样品甚至在5min内即可完成，一般小于1h。

此外HPLC还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点。

2．高效液相色谱的研究应用进展药物与人类的健康，生活质量的提高关系极大，许多药品由于受到纯度的影响，药效不能充分发挥，甚至产生毒副作用；有时服用前需作各种试验，带来很多麻烦。

高效液相色谱法测定六味地黄胶囊中丹皮酚含量.txt等余震的心情，就像初恋的少女等情人，既怕他不来，又怕他乱来。

听说女人如衣服，兄弟如手足，回想起来，我竟然七手八脚地裸奔了二十多年！今天心情不好，我只有四句话想说，包括这句和前面的两句，我的话说完了！高效液相色谱法测定六味地黄胶囊中丹皮酚含量更新日期：2010-12-22 点击：张忠春管玉民王健王官连提要采用HPLC法测定六味地黄胶囊中丹皮酚的含量，流动相为70%甲醇，检测波长274 nm，平均回收率99.48%。

方法简便，准确，重现性好。

关键词六味地黄胶囊；丹皮酚；高效液相色谱法Determination of Paeonol in Liuweidihuang Capsule by HPLCZhang Zhongchun, Guan Yumin, Wang Jian, et alShandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250012Abstract HPLC method has been used for the determination of paeonol in Liuweidihuang capsule with 70% methanol as mobile phase and detecting wavelength of 274 nm. The average recovery is 99.48%. The method is simple and accurate.Key words Liuweidihuang capsule; Paeonol; HPLC六味地黄胶囊是传统名中药六味地黄丸的改革剂型品种，有滋阴补肾之功效，由熟地黄、牡丹皮、山茱萸、泽泻、茯苓、山药组成，收载于部颁标准第8册。

标准中是水蒸气蒸馏—紫外分光光度法测定样品中丹皮酚的含量。

我们在实验中发现该方法操作繁琐费时，且结果不准确，而改用HPLC法测定，方法简便，快速，准确，重现性好。

高效液相色谱方法开发
高效液相色谱方法开发是一个系统性的过程，涉及到多个步骤和决策。

以下是一个一般性的方法开发流程：
1.目标分析物确定：首先明确需要分析的目标化合物或类化合物的性质，包括分子量、结构式、极性等信息。

2.选择合适的色谱柱：根据目标化合物的性质选择合适的色谱柱。

例如，对于分子量较小、极性较大的化合物，可以选择亲水性较好的色谱柱；对于分子量较大、非极性较强的化合物，可以选择疏水性较强的色谱柱。

3.确定流动相：根据目标化合物的性质和色谱柱的特性，选择合适的流动相。

流动相的选择对于色谱分离效果和目标化合物的保留时间都有重要影响。

4.优化色谱条件：在确定了色谱柱和流动相之后，需要进行色谱条件的优化。

这包括流速、进样量、检测波长等参数的调整，以达到最佳的分离效果和灵敏度。

5.验证色谱方法：在优化了色谱条件之后，需要对方法进行验证。

这包括重复性、稳定性和耐用性等方面的测试，以确保方法的可靠性和重现性。

6.数据处理和分析：使用相应的数据处理软件对色谱数据进行处理和分析，包括峰识别、定量分析等。

7.方法优化和改进：根据数据处理和分析的结果，对色谱方法进行优化和改进。

这可能包括调整流动相的比例、改变色谱柱的类型或
规格等。

需要注意的是，高效液相色谱方法开发是一个迭代的过程，需要不断地进行实验和调整，以达到最佳的分离效果和分析结果。

同时，也需要根据具体的应用场景和需求进行针对性的优化和改进。