生物选修1-专题2-微生物的培养与应用导学案(高三复习)
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专题二微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养导学案设计【考纲要求】1、微生物的培养(实验与探究能力)2、微生物的分离(实验与探究能力)【考纲解读】1、了解有关培养基的种类、成分、制备。
2、根据微生物对营养成分和特殊条件的需求分离纯化微生物。
3、了解消毒和灭菌方法。
【学习目标】1.知识目标a.了解有关培养基的基础知识。
b.了解消毒和灭菌方法。
2.能力目标a.进行无菌技术操作。
b.进行微生物培养。
3.情感目标形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神。
【课时安排】2课时第1课时完成基础知识:培养基、无菌操作技术、培养基的配制第2课时完成纯化大肠杆菌【学习提纲】一、培养基1.根据物理性质划分的培养基种类、用途。
2.1.主要方面(1)对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒(2)将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌;(3)为避免周围微生物污染,实验操作应在酒精灯火焰附近旁进行;(4)避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。
2.3.(1)消毒方法:①日常生活经常用到的是煮沸消毒法;②对一些不耐高温的液体,则使用巴氏消毒法;③对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以增强消毒效果,然后使用紫外线进行物理消毒。
④实验操作者的双手使用酒精进行消毒;⑤饮水水源用氯气进行消毒。
(2)灭菌方法:①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法;②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法,所用器械是干热灭菌箱;③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法,所用器械是高压蒸汽灭菌锅。
三、实验操作1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)操作步骤计算→称量→溶化→调PH →灭菌→倒平板(2)倒平板的方法及注意事项a.请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程:丙→乙→甲→丁。
b.甲、乙、丙中的灭菌方法是灼烧灭菌。
c.丁中的操作需要等待平板冷却凝固才能进行。
问题:平板倒置的目的?答:防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染,避免培养基中水分过快挥发。
微生物的培养与应用一.书本知识梳理实验原理目的要求材料用具方法步骤二.思维拓展培养基配制步骤:称量,溶化,调PH,培养基分装,加棉塞,包扎。
灭菌与消毒:前者常见有高压蒸气灭菌法,火焰灼烧灭菌法等,其理化性质变化剧烈,是指杀死一定环境中所有微生物的细胞芽孢和孢子。
后者理化性质变化温和,指杀死表层有害物,主要是有害病原体和微生物营养体。
高压蒸气灭菌法杀菌效力强的原因:湿热穿透力强,空气中有潜热存在,蛋白质容易凝固。
关键操作原由:培养基分装与调酸碱度要在灭菌前否则会造成培养基污染培养基分装要趁热否则培养基变成固体不好分装培养基高度不能超过试管的五分之一否则搁置斜面时会占到棉塞,影响透气性污染培养基培养基分装后要用普通棉塞比脱脂棉好,因为容易透气灭菌时要用牛皮纸包住试管,可防止冷凝水润湿棉塞影响透气性污染培养基接种操作要在火焰旁因为那里形成一个无菌区对木屑培养基灭菌要进行第二及第三次加热是为了杀死芽孢彻底灭菌分装平菇培养基时要用木棒钻洞,因为它是需氧型微生物,钻洞能增加底部氧气含量,促进基内菌丝生长接种划线要注意(1)划线方向应该从里向外(2)线条要细而密(3)不要重复划线三.跟踪训练1B.在一定温度下,湿热灭菌比干热灭菌的效果好C.高温能引起蛋白质发生不可逆的变性。
D.高温能改变蛋白质中氨基酸的排列顺序.2. 下列关于平菇培养技术的叙述中,不合理的是( )A. 棉紫壳培养基属于天然固体培养基,但是必须加入适量水.B 分装培养基时,需要木棒钻洞,以利于菌丝生长繁殖C 对培养基进行高压灭菌时,应使压力维持在98KPa左右加压20MIND 待菌丝张出后,应保持适宜的温度和较大的湿度3搁置斜面最佳温度是()A.30℃B.40℃C.50℃D.60℃4.分装培养基高度应为试管高度的()A.1/2B.1/3C. 2/3D.1/55高压蒸汽灭菌时的正常压力是()A.49 kPaB.98. kPaC.980 kPaD.89kPa6.细菌培养基通常在121℃压力锅中灭菌,若只是在100℃下灭菌,以下那一种生物还会存活()A .大肠杆菌 B.青霉菌C枯草芽孢杆菌D沙门杆菌7多数真菌最适PH为()A.5.0~6.0B.6.0~7.0C.4.0~5.0D.3.5~4.58细菌培养实验中使用滴定法调整PH时,滴入液体是()A,HCL B.NaOH C.水 D.琼脂9要从多种细菌中分离某种球形细菌,培养基要用()A.加入青霉素的培养基B加入高浓度食盐的培养基C固体培养基D液体培养基10(多选)在培养基配制中下列那些操作是正确的()A趁热将培养基装到洁净试管中,培养基高度是试管的1/5B在溶化过程中的最后阶段要补加蒸馏水至100mlC在调PH时,要随时使用PH测定PHD试管加塞后,每10支用绳捆扎好,就可以进行灭菌11(多选)下列关于灭菌和消毒的理解中正确的是()A灭菌是指杀死一定环境中所有微生物的细胞芽孢和孢子B消毒和灭菌实质上是相同的C接种环用烧灼法灭菌D常用灭菌方法有加热法、过虑法、紫外线法、化学药品法12(多选)通过选择培养基可以从混杂微生物群体分离出所需微生物,在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌;在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。
专题2 微生物的培养与应用
尿素分解菌和纤维素分解菌的分离与鉴定的比较
分离选择条件鉴定方
法现象
鉴定原理步骤差异
尿素分解菌尿素为
唯一氮
源
培养基中加入
酚红指示剂,
变红色
细菌等微生物生成脲酶,
使尿素中肽键断裂产生
NH3,使pH升高,加入酚
红变红色
土壤取样→制备培养
基→样品梯度稀释→
涂布平板→培养观察
纤维素分解菌纤维素
为唯一
碳源
在以CMCNa
为碳源的培养
基上,应用刚
果红染色法,
出现透明圈
分解纤维素的微生物产
生纤维素酶,将纤维素分
解为纤维二糖或葡萄糖,
使纤维素—刚果红复合
物降解而出现透明圈
土壤取样→制备培养
基→选择培养→富集
培养→梯度稀释→涂
布培养→刚果红染色
法→挑取菌落→进一
步鉴定。
生物技术实践专题2微生物的培养的应用考纲要求(1)微生物的分离和培养(2)某种微生物数量的测定(3)培养基对微生物的选择作用(4)利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用课题1 微生物的实验室培养一、基础知识:(一)培养基概念:按照微生物对的不同需求,配制出供其的营养基质——培养基。
成分:、、、无机盐有的有特殊要求:、特殊物质、氧气例如,培养乳酸杆菌加,培养霉菌PH 性,细菌性或微性,培养厌氧微生物要(二)无菌技术1、无菌技术是围绕什么展开的?包括哪些方面?避免污染主要包括以下几个方面:(1) 空间、衣着、手,和。
(2) 器皿、接种用具和培养基等。
(3) 实验操作在酒精灯附近进行。
(4) 已灭菌的材料用具与周围物品。
2、消毒和灭菌消毒:用较为的物理或化学方法物体表面或内部的微生物(不包括芽孢和孢子)。
灭菌:用强烈的理化因素物体内外所的微生物,包括芽孢和孢子。
【旁栏思考】1、无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?2、请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。
如果需要,请选择合适的方法。
(1)培养基与培养(2)玻棒、试管、烧瓶和吸管(3)实验操作者的双手(1)、(2)需要;(3)需要。
二、实验操作:用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养。
(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1、计算2、称量3、溶化4、灭菌:培养基放入锥形瓶,塞上棉花塞,包上牛皮纸,锅中灭菌培养皿用箱灭菌。
5、倒平板:培养基冷却到℃左右,在酒精灯附近倒平板。
2d后观察平板,无杂菌污染才可用来接种.1、培养基灭菌后,需冷却到50 ℃左右时,才能用来倒平板。
你用什么办法来估计培养基的温度?用手触摸锥形瓶,刚刚时2、为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?防止瓶口的污染3、平板冷凝后,为什么要将平板倒置?使更好挥发,防止皿盖上的水珠落入。
4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?空气中的可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,最好不用(二)纯化大肠杆菌微生物的接种方法:平板划线法:用接种环在固体培养基表面划线,将聚集的菌种逐步分散,分离到个细胞繁殖的个菌落.稀释涂布平板法:【问题讨论】1、为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?第一步:每次划线前:结束时:2、在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?3、在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?使菌数随划线次数的增加而,得到个细菌繁殖而来的菌落。
高中生物专题二微生物的实验室培养导学案新人教版选修1微生物的培养与应用课题:微生物的实验室培养【本节目标解读】【课程目标】了解培养基的基础知识,进行微生物培养和无菌技术的操作。
【课题重点】无菌技术的操作【课题难点】无菌技术的操作【基础知识】一、培养基1、概念:人们按照微生物对的不同需求,配制出供其的营养基质叫培养基。
可分为培养基和培养基。
2、分类方式:分类标准类型备注培养基的培养基、培养基和半固体培养基培养基中加入凝固剂(有琼脂、明胶、硅胶等)即为培养基。
培养基实验室中最常用的培养基之一微生物的种类细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养培养基的特殊用途基础培养基、加富培养基、选择培养基和鉴别培养基选择培养基:允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
鉴别培养基:是在培养基中加入某种试剂或化学药品,使培养后会发生某种变化,从而区别不同类型的微生物。
如鉴别大肠杆菌的伊红美蓝培养基,鉴别纤维素分解菌的刚果红培养基。
3、营养构成:各种培养基一般都含有、、和,此外还要满足微生物生长对、以及的要求。
4、培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。
5、E、coli指。
〖思考1〗从细胞的化学元素组成来看,培养基中为什么都含有这些营养成分?【补充】碳源:如CO2、糖类、脂肪酸等有机物,构成微生物的结构物质和分泌物,并提供能量。
氮源:如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等,主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。
含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源,又可以作为氮源,如氨基酸等。
二、无菌技术:1、关键防止的入侵。
围绕如何避免杂菌的污染展开。
2、无菌技术(1)对实验操作的、操作者的和进行。
(2)将用于微生物培养的、和等器具进行。
(3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在附近进行。
(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。
高考生物复习选修一生物技术实践教案—第2讲微生物的培养和应用考情研读·备考定位考点展示核心素养考点一微生物的实验室培养自主回顾·素养储备基础梳理1.培养基(1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。
(2)营养构成:一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。
此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
(3)种类①按照物理性质可分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基。
②按照成分的来源可分为天然培养基和合成培养基。
③按照功能用途可分为选择培养基、鉴别培养基等。
(4)培养基的制备步骤:计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板。
2.无菌技术(1)目的:获得纯净的培养物。
(2)关键:防止外来杂菌的入侵。
(3)常用方法:灭菌和消毒,二者的比较见下表。
3.大肠杆菌的纯化培养(1)原理:在培养基上将聚集的菌种稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是纯化的细菌菌落。
(2)两种微生物纯化培养的方法比较将菌液进行一系列的梯度稀释和涂布①临时保藏法:对于频繁使用的菌种,先将菌种接种到试管的固体斜面培养基上培养,然后将试管放入4 ℃的冰箱中保藏。
②甘油管藏法:对于需要长期保存的菌种,先将菌液转入灭菌后的甘油中,充分混匀后放在-20 ℃冷冻箱中保存。
[易错警示](1)灼烧接种环,待其冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。
(2)划线时最后一区的划线不要与第一区相连。
(3)划线时用力大小要适当,这是为了防止用力过大将培养基划破。
(4)用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,这是因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。
思维辨析易错整合,判断正误。
(1)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,有时还需要加入一些特殊的物质(√)(2)由于物理状态的不同,培养基只有液体培养基和固体培养基两种类型(×)(3)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害(√)(4)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌(×)(5)配制培养基时应先灭菌再调pH(×)(6)平板划线法中每一次划线后要将接种环灼烧(√)(7)倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上(×)(8)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时,只要稀释度足够高,就能在培养基表面形成单个菌落(√)(9)斜面培养基中含有大量营养物质,可在常温下长期保存菌株(×)(10)为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落(×)延伸探究1.选择无菌技术的原则是什么?[提示](1)考虑无菌技术的效果:灭菌的效果比消毒要好。
《微生物的培养与应用》导学案含教学反思案例说课稿人教版高中生物选修一专题2微生物的培养与应用第5课时微生物的实验室培养目标导航1.了解有关培养基的基础知识,掌握无菌操作技术的有关内容。
2.了解消毒和灭菌常用的方法及二者的区别。
3.学会以大肠杆菌为材料进行微生物培养与分离纯化的方法。
一、培养基与无菌技术1.培养基(1)概念:人们按照微生物对________________的不同需求,配制出供其________________的________________。
(2)成分:一般含有______、________、________、________,此外还要满足微生物对__________________(即生长因子)、________以及氧气的需求。
病毒的是活鸡胚。
2.无菌技术(1)概念:防止一切外来杂菌的侵入,并保持灭菌物品及无菌区域不再被污染的方法,称为无菌技术。
注意在微生物的实验室培养中,无菌技术的核心是________________,________________。
(2)无菌技术的具体内容①对实验操作的________、操作者的________________进行清洁和消毒。
②将用于微生物培养的__________、接种用具和培养基等进行________。
③为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在________________进行。
④实验操作时应避免已________处理的材料用具与周围的物品相接触。
(3)消毒和灭菌的概念①消毒:消毒是指使用________的物理或化学方法杀死物体表面或内部的________________(不包括芽孢和孢子)。
②灭菌:灭菌是指使用__________的理化因素杀死物体内外________________,包括____________。
③消毒与灭菌的区别:两者最大的区别是________________________。
拓展深化某些细菌在其生长发育后期,可在细胞内形成一个圆形的抗逆性休眠体,称为芽孢。
【高考新动向】1、微生物的分离和培养2、培养基对微生物的选择作用3、某种微生物数量的测定4、利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用【考纲全景透析】一、微生物的分离和培养1、微生物的营养:碳源、氮源、水、无机盐和生长因子。
1、培养基(1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质(2)成分:一般都含有水、碳源、氮源无机盐,还需满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
(3)分类:固体培养基:含凝固剂,如琼脂液体培养基:不含凝固剂2、无菌技术(1)含义:指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法(2)关键:防止外来杂菌的入侵(3)方法:消毒:煮沸消毒法,化学药剂消毒法,紫外线消毒法灭菌:灼烧灭菌,干热灭菌,高压蒸汽灭菌区别消毒和灭菌3、纯化大肠杆菌以及菌种的保藏(1)制作牛肉膏蛋白胨固体培养基方法步骤:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。
(2)纯化大肠杆菌①原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是一个细胞繁殖而来的子细胞群体。
②方法:平板划线法、稀释涂布平板法。
(3)菌种的保藏①短期保存:将菌种接种到试管的固体斜面培养基上4℃保存,菌种易被污染或产生变异。
②长期保存:-20℃甘油管在冷冻箱中保藏。
二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1、分离的原理(1)土壤中的细菌之所以能够分解尿素,是因为它们体内能合成脲酶。
这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起催化作用。
(2)实验室中微生物的筛选应用的原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
2、统计菌落数目的方法稀释涂布平板法和显微镜直接计数。
3、细菌分离与计数的实验流程土壤取样→样品稀释→取样涂布→微生物培养→观察并记录结果→细菌计数三、分解纤维素的微生物的分离1、纤维素酶纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶,前两种酶使纤维素分解成纤维二糖,第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。
中学高效课堂高二生物导学案利用,而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为,这是因为细菌能合成。
2、教材22页上的培养基配方中,为微生物的生长提供碳源的是,提供氮源的的是,琼脂的作用是。
该培养基对微生物(具有,不具有)选择作用。
如果具有,其选择机制是。
3、选择培养基:在微生物学中,将允许种类的微生物生长,同时和其他种类微生物生长的培养基,称作选择培养基。
4、配制选择培养基的依据根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。
例如,培养基中不加入有机物可以选择培养型微生物;培养基中不加入氮元素,可以选择培养的微生物.加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。
5、在统计菌落数目时,常用来统计样品中活菌数目的方法是。
除此之外,也是测定微生物数量的常用方法。
6、采用稀释涂布平板法统计菌落数目时,培养基表面生长的一个菌落,来源于。
通过统计,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
为了保证结果准确,一般选择菌落数在的平板进行计数。
7、统计的菌落数比活菌的实际数目。
这是因为当两个或多个细胞在一起时,平板上观察到的只是菌落。
因此,统计结果一般用来表示。
8、对照实验是指除了的条件外,其他条件都的实验。
满足该条件的称为,未满足该条件的称为组。
【合作探究】1、教材22页左上角培养基配方为本课题使用的培养基,该培养基是固体培养基还是液体培养基?为什么?2、该培养基为什么能分离出分解尿素的细菌?4、为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度?5、培养过程中培养基的PH是否有变化?如何观察出PH有变化?6、如果某同学用教材22页左上角培养基配方(但不加尿素)也在培养基上发现菌落产生,这些菌落是分解尿素的细菌吗?为什么?当堂检测1.不同的微生物对营养物质的需要各不相同。
下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中,不正确的是( )A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素 B.碳源物质也是该微生物的能源物质C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D.水是该微生物的营养要素之一2.下列说法正确的是( )A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B.培养基只有两类:液体培养基和固体培养基C.除水以外的无机物只能提供无机盐D.无机氮源不可能提供能量3.在缺乏氮源的培养基上,大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长;在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。
2019-2020年人教版高中生物选修1专题2微生物的培养与应用复习(教案)复习要点1.培养基的制备2.无菌技术3.平板划线法和稀释涂布平板法的比较4.分离分解尿素的细菌和分离分解纤维素的微生物方法比较5. 稀释涂布平板法计数复习过程一、培养基的制备【知识点讲解】1.基本成分(1)碳源:提供碳元素的物质,如CO2、NaHCO3、糖类、脂肪酸、石油、花生粉饼等。
(2)氮源:提供氮元素的物质,如N2、NH3、氨盐、硝酸盐、尿素、牛肉膏、蛋白胨等。
(3)水:细胞生命活动必不可少的物质,主要来源于培养基、大气、代谢产物。
(4)无机盐:提供除碳、氮元素以外的各种重要元素,包括某些大量元素的物质,主要来源于培养基、大气。
【方法点拨】不同种类的微生物对培养基中营养物质的需求不同(1)自养型微生物所需的主要营养物质是无机盐,碳源可来自大气中的CO2,氮源可由含氮无机盐提供。
(2)异养型微生物所需的营养物质主要是有机物,即碳源必须由含碳有机物提供,氮源也主要是由有机物提供,部分异养型微生物也可以利用无机氮源。
2种类(1)目的要明确:配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。
(2)营养要协调:注意各种营养物质的浓度和比例。
(3)pH要适宜:细菌为6.5~7.5,放线菌为7.5~8.5,真菌为5.0~6.0,培养不同微生物所需pH 不同。
4.培养基的制备计算→称量→溶化→灭菌→倒平板【例题讲解】高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。
研究者从热泉中筛选出了能高效生产高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如下图所示。
(1)Ⅰ号培养基从物理状态来看,属于固体培养基,配制时要加入________作为凝固剂,从用途来看属于选择培养基,应以________作为唯一碳源。
(2)配置固体培养基的基本步骤是( )A.计算、称量、倒平板、溶化、灭菌B.计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C.计算、称量、溶化、灭菌、倒平板D.计算、称量、灭菌、溶化、倒平板(3)溶化时,烧杯中加入琼脂后要不停地________,防止琼脂糊底引起烧杯破裂。
中学高效课堂高二生物选修1导学案课题专题2 课题1 微生物的实验室培养导学案备课时间授课时间编号备课教师备课组长课型学习目标1.了解培养基的用途、种类及一般成分,2.掌握培养基制作的一般的步骤,3.掌握微生物分离中的划线法和涂布法。
4.学会一般的消毒、灭毒的方法,进行无菌技术的操作。
德育渗透通过本节学习,了解和掌握生物技术在日常生活中的应用,所以要认真学好生物知识。
学习重点培养基的制备、微生物的培养的操作。
学习难点培养基的制备和微生物的分离。
学法指导课前预习,完成自主学习内容。
课前阅读教材,完成自主学习部分,为课上合作探究作好准备。
自主学习内容教师活动(一)培养基1.概念:人们按照微生物对的不同需求,配制出供其营养基质称为培养基。
可分为培养基和培养基。
2.营养构成:各种培养基一般都含有水、、和无机盐,此外还要满足微生物生长对、特殊营养物质以及氧气的要求。
3.培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。
(二)无菌技术A、获得纯净培养物的关键是防止外来的人侵,具体操作如下:1.对实验操作的、操作者的和进行清洁和消毒。
2.将用于微生物培养的、接种用具和培养基等器具进行。
3.为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在附近进行。
4.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。
B、消毒和灭菌1.消毒是指使用较为的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。
常用的方法有消毒法和消毒法。
2.灭菌是指使用的理化因素杀死物体内外的微生物。
常用的方法有:灭菌、灭菌、灭菌。
(三)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板1.计算:根据比例,计算100mL培养基各成分用量。
2.称量:牛肉膏较黏稠,可用玻棒挑取,同一同称量。
称取牛肉膏和蛋白胨时动作要迅速,目的是防止牛肉膏吸收空气中水分。
3.溶化:加水加热熔化牛肉膏与称量纸→取出称量纸→加入蛋白胨和氯化钠继续加热→加入→用蒸馏水定容到100mL(整个过程不断用玻棒搅拌,目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂)。
高三生物选修1 专题2 微生物的培养与应用导学案(一)微生物的实验室培养1. 培养基(1)概念:人们按照微生物对______的不同需求,配制出供其______的营养基质叫培养基。
按物理性质可分为____培养基和____培养基。
(2)营养构成:各种培养基一般都含有____、_____、___和______。
从细胞的化学元素组成来看,培养基中都含有这些营养成分的原因是:______________________________(3)在上述主要营养物质的基础上,还要满足微生物生长对___、________以及____的要求,例如:培养乳酸杆菌时需在培养基中添加_____、培养霉菌时需将培养基PH调至____、培养细菌时需将PH调至__________、培养厌氧微生物则需提供_____条件。
2. 无菌技术(1)获得纯净培养物的关键是______________,具体操作如下:①对实验操作的_____、操作者的____和___进行__________。
②将用于微生物培养的_____、______和______等器具进行____。
③为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在__________附近进行。
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与__________相接触。
(2)消毒和灭菌①消毒是指___________________________(不包括芽孢和孢子)。
日常生活中常用的方法有________;不耐高温的液体用______;人们也常使用(如酒精、氯气、石炭酸、煤酚皂溶液等)消毒、____消毒。
②灭菌是指_________________________________(包括芽孢和孢子)。
常用的方法有:______、______、________。
③无菌技术除了防止培养物被污染外,还能__________________。
④利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤,避免___________。
⑤物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后,要首先打开排气阀,煮沸并排除锅内冷空气,其目的是______________;随后关闭排气阀继续加热,气压升至____,温度为_____,并维持_____min;最后切断热源,使温度自然降温,气压务必降至___时打开锅盖,其目的是防止_____________3.实验操作(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基①基本操作步骤:___→____→____→调pH→____→_______。
②相关问题:a.在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中,动作要迅速,原因是防止_______________________b.溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是__________________c.牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供的营养物质有:___、_____和_____。
d.倒平板操作时,待培养基冷却至____℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。
e.倒平板时,瓶口通过火焰的目的是:_____________________f.平板冷凝后,要将平板倒置的目的:_____________________g. 若皿盖和皿底之间粘有培养基,则该平板___。
(能,不能)培养微生物;原因是:______________________________________h. 配制斜面培养基作用是:______________,试管要加塞棉塞的目的是:_______________________。
(2)纯化大肠杆菌①微生物接种最常用的是_________法和____________法。
②平板划线法是_______________________________的操作,将聚集的菌种逐步__________分散到培养基的表面。
a. 取菌种前灼烧接种环的目的是_____________________;b. 除第一次划线外,其余划线前都要灼烧接种环的目的是____________;c. 取菌种和划线前都要求接种环____后进行,其目的是____________d. 最后灼烧接种环的目的是________________________e. 在第1次划线后都从上次划线__端开始的目的是______________。
③稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度______,然后将________________________________________进行培养。
当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成的____________。
a. 移液管需要经过_________b. 操作中试管口和移液管应在______________________。
c. 整个操作过程中不能使用____________移液管4. 结果分析与评价①培养未接种培养基的作用是___,若有菌落形成,说明____________。
②在某培养基上出现了3种特征不同的菌落,原因有_________或____等。
③频繁使用的菌种利用______保存。
即利用固体斜面培养基培养后,保存在__℃冰箱中,每3~6个月转种培养一次,缺点是__________________④长期保存菌种的方法是_____。
即将菌种与________等量体积混合后保存在______℃冷冻箱中。
(二)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1.研究思路(1)筛选菌株:①尿素是一种重要的氮肥,但农作物不能直接吸收利用,需要先通过土壤中的某些能合成____的细菌将尿素分解为________。
②实验室中微生物筛选的原理:人为提供有利于________生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时____或____其他微生物生长。
③选择培养基:在微生物学中,将允许____种类的微生物生长,同时___或___其他种类微生物生长的培养基,称作选择培养基。
④配制选择培养基的依据:根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。
例如,培养基中不加入有机物可以选择培养____微生物;培养基中不加入氮元素,可以选择培养________的微生物;加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。
(2)统计菌落数目:①测定微生物数量的常用方法有______________和_____________。
后一种方法难以分辨细菌的死活。
②稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的________足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个________。
通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。
为了保证结果准确,一般选择菌落数在________的平板进行计数。
③利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是________。
④统计的菌落数比活菌的实际数目____。
这是因为当两个或多个细胞在一起时,平板上观察到的只是____菌落。
因此,统计结果一般用________来表示。
(3)设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中___________对实验结果的影响,提高实验结果的_____。
例如为了排除培养基是否被杂菌污染了,需以培养_______的培养基作为空白对照。
2. 实验设计(1(2)实验过程①土壤取样:从肥沃、湿润的土壤中取样。
应先________3 cm左右,再取样。
②样品的稀释:分离不同的微生物采用不同的稀释度,其原因是__________其目的是保证获得____________、________的平板。
细菌稀释度为________,放线菌稀释度为________,真菌稀释度为______③涂布平板与培养:培养不同微生物往往需要不同培养温度。
细菌一般_____℃培养1~2d,放线菌一般在____℃培养5~7d,霉菌一般在____℃的温度下培养3~4d。
④菌落计数:在菌落计数时,每隔____h统计一次菌落数目。
选取________时的记录作为结果,以防止因____________而导致遗漏菌落的数目。
⑤菌落的特征包括______、______、______、______等方面。
3. 结果分析与评价(1)对分离的菌种作进一步的鉴定,还需要借助________的方法。
(2)在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的____将尿素分解成了氨。
氨会使培养基的碱性____,PH____。
因此,我们可以通过检测培养基____变化来判断该化学反应是否发生。
(3)在以____为唯一氮源的培养基中加入____指示剂。
培养某种细菌后,如果PH升高,指示剂将变____,说明该细菌能够________。
(三)分解纤维素的微生物的分离1. 基础知识(1)纤维素和纤维素酶①纤维素的化学组成:________三种元素,是一种____糖。
②纤维素酶的作用:纤维素酶是一种________,一般认为它至少包括三种组分,即____酶、____酶________酶,前两种酶使纤维素分解成_____,第三种酶将纤维二糖分解成________。
(2)纤维素分解菌的筛选①筛选方法:________染色法。
能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选。
②筛选原理:刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成______,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应,当纤维素被______分解后,红色复合物无法形成,出现以________为中心的_______,我们可以通过________来筛选纤维素分解菌。
2.实验设计(1)实验流程土壤取样→________→梯度稀释→将样品涂布到__________上→____________。
(2)实验操作①土壤取样:采集土样时,应选择____________的环境。
②选择培养:a. 选择培养的目的:增加_______________,以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。
b. 制备选择培养基:纤维素分解菌选择培养基属于____培养基,原因是_____。
c. 培养基选择作用机制是__________________________。
d. 若设置一个对照实验说明选择培养的作用,应控制的变量是__________。
e. 选择培养的操作:称取土样20g,在无菌条件下加入装有30mL培养基的摇瓶中。
将摇瓶置于____上,在____℃下振荡培养1~2d,至培养基变____。
(3)梯度稀释:依次将培养液进行等比稀释________倍。
(4)将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上:将稀释度为104~106的菌悬液各取0.1 mL涂布在平板培养基上,30℃倒置培养。
每个稀释度下需涂布____个平板(5)刚果红染色法分离:①染色方法:方法一:先________,再加入刚果红进行颜色反应。
方法二:在_____时就加入刚果红。
②挑选产生________的菌落,一般即为分解纤维素的菌落。
3.结果分析与评价(1)为了确定分离得到的是纤维素分解菌,还需要进行________实验,纤维素酶的发酵方法有________发酵和________发酵。