微生物实验报告 微生物形态观察 分布 灭菌消毒
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微生物菌落及个体形态观察,实验报告
实验目的:
观察微生物菌落的形态及个体形态,了解微生物的生长特点和性状。
实验材料和设备:
1. TSY琼脂培养基
2. 火焰灭菌器
3. 培养皿
4. 显微镜
5. 无菌培养基
6. 实验手套及护目镜
实验步骤:
1. 准备培养基:将TSY琼脂培养基按照说明书制备好,热离
心并倒入培养皿中。
2. 灭菌处理:使用火焰灭菌器对培养皿进行灭菌处理,避免外界细菌的污染。
3. 分菌涂布:将待观察的微生物菌液取少量涂布于培养皿表面,通过灭菌针均匀地划过琼脂表面。
4. 培养:将培养好的培养皿倒置放置于恒温培养箱中,设定合适的温度和湿度条件,使其适宜生长。
5. 观察生长:每隔一段时间使用显微镜观察微生物的菌落生长情况,并记录下来。
实验结果:
通过观察发现,微生物菌落的生长形态各异。
有的菌落呈圆形,
边缘光滑,整齐排列;有的菌落呈不规则的形状,边缘模糊,有分枝延伸出;还有一些菌落呈现为六边形或星形等不寻常的形状。
个体形态方面,通过显微镜观察发现微生物细胞大小不一,有的呈球形,有的呈杆状,形态多样。
实验结论:
微生物菌落的形态和个体形态具有多样性,不同的微生物具有不同的生长特点和形态。
通过观察可以初步了解微生物的外观特征,并对微生物的分类和鉴定提供参考。
不同形态的菌落和个体形态的研究对于深入了解微生物的生态环境和功能具有重要意义。
微生物实验报告微生物的分布实验报告食品微生物学实验一生物显微镜的构造和使用实验一、目的与要求(1)学习普通光学显微镜的结构、各部分功能及使用方法。
(2)观察并学会拍下现成的标本玻片在显微镜下显现的图像。
二、原理普通光学显微镱由机械装置和光学系统2大部分构成。
在光学系统中,物镱的性能最为关键,它直接影响着显微镜的分辨率。
而在普通光学显微镜中配置的几种物镱以油镱的放大倍数最大,与其它物镜相比,使用较特殊,需在载玻片与镜头之间加滴镜油,以增加照明亮度和提高分辨率。
三、材料与仪器(1)材料现成的标本玻片(2)仪器UB102i型生物显微镜(重庆奥浦光电技术有限公司),擦镜纸四、操作步骤(1)显微镜的安置置显微镜于平整的实验台上,镜座距实验台边缘3~4cm,镱检时姿势要端正。
(2)调节光源安装在镜座内的光源灯可通过调节电压以获得适当的照明亮度,而使用反光镱采集自然光或灯光作为照明光源时,应根据光源的强度及所用物镜的放大倍数选用凹面或平面反光镜度调节其角度,使视野内的光线均匀,亮度适宜。
(3)低倍镜观察将标本玻片置于载物台上,用标本夹住,移动推进器使观察对象处在物镜的正下方,下降10×物镜,使其接过标本,用粗调节器(粗调螺旋)慢慢升起镜筒,出现图像后再用细调节器(细调螺旋)调节图像至清晰。
通过标本夹推进器慢慢移动玻片,认真观察标本各部位,找到合适目的物,仔细观察。
(4)高倍镜观察在低倍镜下找到合适的观察目标并将其移至视野中心后转动物镜转换器将高倍镜移至工作位置,以聚光镜器光圈及视野进行适当调节后微调细调节器使物象清晰,利用推进器移动标本仔细观察并记录。
(5)显微镜用后处理1、上升镜筒,取下载片。
2、用擦镜纸擦去镜头上的残留物3、用擦镜纸清洁其他物镜和目镜,用绸布清洁显微镜的金属部件。
4、将各部分还原,反光镜垂直于镜座,将物镜转成“八字形”再向下旋,同时把聚光镜降下,以免物镜与聚光镜发生碰撞危险。
五、实验结果低倍镜下观察到的植物细胞组织实验二细菌培养基的配制一、实验目的1了解并掌握培养基的配制、分装方法;2掌握各种实验室灭菌方法及技术。
实验报告课程名称:生命科学趣味实验实验名称:微生物形态观察指导教师:一、实验目的:1.掌握普通光学显微镜的原理、结构、各部分的功能和使用方法。
2.了解酵母菌、霉菌的个体形态特征。
二、实验原理:显微镜成像原理:目镜、物镜各自相当于一个凸透镜,被检标本置于聚光器与物镜之间,即物镜下方1~2倍焦距之间,物镜可使标本在物镜的上方形成一个倒立放大实像(倒像),该实像正好位于目镜的下焦点(焦平面)之内,目镜进一步将它放大成一个虚像,通过调焦可使虚像落在眼睛的明视距离处。
三、实验仪器、材料酵母菌涂片、霉菌涂片。
奥林巴斯显微镜、擦镜纸等。
四、实验方法:1 显微镜安置取显微镜时一手握住镜臂,一手托住底座,使显微镜保持直立、平稳,置显微镜于平整实验台上,镜座距实验台边缘约3~4 cm,接通电源。
注意:显微镜移动时切忌用单手拎提。
2 选择物镜将低倍物镜放入光路。
3 调整光强打开显微镜主电源,调整照明度。
通过亮度调整旋钮来改变电压大小从而调整显微镜亮度强弱。
4 调整聚光器位置和孔径光阑在孔径光阑环上刻有物镜倍率(10倍,40倍),观察时将其与使用物镜相对应倍率放到正面。
5 放置标本调粗调旋钮使载物台下降,向外拉开机械式载物台样本夹自前向后将标本切片放入平台,标本放稳后,再将标本夹轻轻放回原位;通过垂直旋转移动杆和水平旋转移动杆来上下和左右移动标本。
6 聚焦① 对焦要领为:从侧面看,转动粗调旋钮,使物镜尽可能接近标本;一边看目镜,一边调粗调旋钮,使载物台下降;看到标本后,再用细调旋钮正确对焦。
② 调整瞳距:一边看目镜,一边移动双目镜筒,让左右视野一致。
标识●的位置表示瞳距。
③ 调整屈光度数:以右眼看右侧目镜,旋转粗、细调旋钮对好焦距;以左眼看左侧目镜,旋转屈光度调整环,对好焦距。
④ 目镜眼罩使用方法:戴眼镜时候,将眼罩折叠,可防止眼镜和目镜接触所造成擦痕;不戴眼镜时候,将折叠眼罩向外拉长,可防止目镜和眼睛之间射入不必要光线,利于观察。
医学微生物学实验报告(本科)实验室:姓名:学号:班级:海南医学院微生物学与免疫学教研室编写二OO四年四月第一次实验【实验内容】实验一微生物的形态与结构的观察实验二微生物的分布【结果记录及判定】实验一微生物的形态与结构的观察1、细菌正常形态及特殊结构的观察及记录(示教):绘图并描述形状:形状:排列:排列:染色性:特殊结构:霍乱弧菌破伤风梭菌芽胞形状:形状:排列:排列:特殊结构:特殊结构:肺炎链球菌荚膜伤寒沙门菌鞭毛形状:形状:排列:排列:特殊结构:特殊结构:炭疽杆菌脑膜炎球菌2、病毒包涵体观察及记录(示教):绘图并描述描述:狂犬病毒包涵体(H-E染色)3、真菌的形态观察及记录(示教):绘图并描述形状:形状:排列:排列:特殊结构:特殊结构:白假丝酵母菌皮肤癣菌4、革兰染色法结果观察及记录:绘图并描述形状:形状:排列:排列:染色性:染色性:葡萄球菌大肠埃希菌实验二微生物的分布结果记录:1、空气中的细菌种类(种):数量(个):2、水中细菌数检测(1)自来水中细菌的种类(种):数量(个):(2)污水中细菌的种类(种):数量(个):3、物品和手指上的细菌检查(记录本人结果)物品表面的细菌种类(种):数量(个):手指表面的细菌种类(种):数量(个):结论:成绩:_________________批改教师签名:____________批改时间:________________第二次实验【实验内容】实验三微生物的分离培养实验四抗菌药物敏感性试验实验五消毒、灭菌、除菌【结果记录及判定】实验三微生物的培养1、细菌分离培养方法(分区划线接种法),生长现象为:2、纯种细菌接种技术(1)琼脂斜面接种培养,大肠埃希菌生长现象:(2)液体培养基接种法,大肠埃希菌生长现象:(3)半固体培养基接种技术①标本名称:大肠埃希菌半固体培养基②标本名称:痢疾志贺菌半固体培养基穿刺线:穿刺线:培养基:培养基:结论:结论:3、沙保弱琼脂平板上的真菌菌落观察及描述(示教):类酵母型菌落:丝状菌落:实验四抗菌药物敏感性试验实验五消毒、灭菌、除菌一、紫外线灭菌法(示教)玻璃盖遮住平板的一半现象:现象:分析:分析:二、机械除菌法(示教):1、未经过滤的液体培养基培养后的现象:2、经过过滤的液体培养基培养后的现象:分析:成绩:_________________批改教师签名:____________第三次实验【实验内容】实验六细菌的致病性实验七化脓性感染的细菌学检查【结果记录及分析】实验六细菌的致病性一、透明质酸酶试验(示教,实验动物:家兔)测量试验侧与对照测的黑墨水扩散范围(cm×cm):实验侧:对照侧:分析:二、破伤风外毒素的毒素作用(实验动物:小鼠)实验现象:实验侧:对照侧:分析:实验七化脓性感染的细菌学检查一、病原性球菌的形态观察(示教):绘图并描述形状:形状:排列:排列:染色性:染色性:葡萄球菌链球菌形状:形状:排列:排列:染色性:染色性:脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌二、病原性球菌的鉴别:三、血清学试验抗“O”试验(乳胶凝集法)实验现象:阳性对照:阴性对照:标本1:标本2:结果判定:标本1为________,标本2为_________。
微生物的分布实验报告篇一:微生物实验报告微生物实验报告一环境中的微生物的检测和分离纯化实验目的:1 学习并掌握无菌操作技术原理和方法2 学习用稀释涂布法分离微生物3 认识微生物存在的普遍性,体会无菌操作的原理实验材料:1 土样溶液0.5ml,无菌生理盐水2 取液器(1000μL一支,100μL一支),培养箱,培养皿(12个),无菌有帽试管,三角瓶,无菌涂棒,接种环,1000μL无菌吸头若干,记号笔,酒精灯,火柴,试管架实验步骤:A培养基的制备(已提前制备好)B周围环境中的微生物的检测,在牛肉膏蛋白胨培养基平板上作如下实验1 取三个平板,用100μL的取液器分别吸取100μL的河水、豆浆、豆奶,均匀加在三个培养基上,并用无菌玻璃涂棒涂布均匀(要多涂几次,时间约1-2分钟,使细菌均匀分布)。
2 再取三个平板,三个同学分别用手指(未洗过)在培养基上涂抹几秒钟,一个同学对应一个平板。
3 再取一个平板,其中一个同学将手用肥皂洗过后,再在培养基上涂抹。
4 再取一个平板,打开皿盖,一个同学对着培养基咳嗽,使口腔中的气流和飞沫落到培养基上。
5 再取一个平板,打开皿盖,在空气中放置10min左右,关上皿盖。
6 将上述9个平板放置在35℃的培养箱中培养24h。
C土壤中分离微生物1 采土样,制备土壤稀释液(已准备好)2 取三个平板,每个培养基上用取液器添加100μL的土壤稀释液,并用无菌玻璃涂棒涂布均匀(要多涂几次,时间约1-2分钟,使细菌均匀分布)。
3 将平板依旧放在35℃的培养箱中培养24h。
D菌落计数培养24h后,取出培养平板,算出每个平板上的菌落数量。
其中,土样中的微生物含量可用以下式子计算土壤中的细菌含量(个/g土壤)=菌落平均数×10×稀释倍数实验结果及数据:实验结果如附图。
开盖10min 手指直接按压手指直接按压手指直接按压1号的手指经肥皂洗后按压对着培养基咳嗽豆奶河水土壤溶液土壤溶液豆浆土壤溶液实验讨论及感想:1根据你对周围环境中微生物存在的观察,你认为无菌操作要注意什么?在进行无菌操作的时候,应该要注意始终在明火旁边操作,既不能离得太远,也不能离得太近。
微生物的形态观察实验报告
通过在显微镜下观察不同类型的微生物,了解它们的形态特征和结构,从而深入了解微生物的分类和生物学特征。
实验步骤:
1. 准备样本:从不同来源,如水、泥土、食物等,收集微生物样本。
2. 制备菌片:将菌种种入适当的培养基,使其生长和繁殖。
然后在玻璃片上刮取一些菌落,通过灭菌消毒杀死细菌并干燥。
3. 加染剂:将制备好的菌片放入染液中,染色时间与染色方法与染料种类有关。
4. 滴加液滴:将染色后的菌片在显微镜下观察。
实验结果:
在显微镜下观察到了许多不同形态的微生物,如红球菌、链球菌、葡萄球菌、酵母菌等。
它们的形态、大小、颜色和结构都有所不同。
例如,链球菌呈链状,难看,通常组成串并捆扎在一起。
一个典型的酵母菌是一个圆形或卵形,有微细的细胞壁,有一些嚼口器,通常高达数微米,直径可达10微米。
结论:
通过观察不同形态的微生物,我们可以更好地了解它们之间的差异和分类,从而更好地探索它们在自然界和人类生活中的作用。
此外,对微生物形态的深入认识也有助于开发生物科技和医学治疗手段。
一、实验原理肠道杆菌的细菌为革兰氏阴性菌,大多数有鞭毛,能运动。
少数无鞭毛不能运动,不产生芽孢,需氧或兼性厌氧,在普通培养基上,一般都生长良好,均能发酵葡萄糖产酸或产气,触酶试验阳性,氧化酶试验阴性,还原硝酸盐。
这类细菌是人类和动物肠道中的细菌,有的引起腹泻、肠炎、肠热症和痢疾等。
有的为条件致病菌,有时也可引起身体各个部位的感染。
二、实验材料1.病鸡:怀疑被大肠杆菌或沙门氏菌感染2.培养基:半固体培养基麦康凯平板三糖铁高层斜面蛋白胨水葡萄糖蛋白胨水3.革兰式染色试剂:草酸铵结晶紫溶液、革兰氏碘溶液、95%酒精,沙黄水溶液4. 生化管:葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、枸橼酸盐、H2S、尿素5. 生化试剂:吲哚试剂, MR 、VP 试剂7.药敏实验试剂:青霉素、复方新诺明、氯霉素三、实验内容及其安排(一)、制备培养基:麦康凯、半固体、三糖铁高层斜面、蛋白胨水、葡萄糖蛋白胨水。
(二)、解剖实验动物,细菌分离培养:病料抹片,染色镜检。
划线接种麦康凯或S·S琼脂平板。
(三)、观察细菌培养性状,选择可疑菌落进行纯培养。
普通琼脂平板、伊红美兰琼脂平板、三糖铁琼脂斜面。
(四)、观察细菌纯培养结果,细菌抹片,革兰氏染色镜检,观察细菌抹片及纯培养情况,。
(五)做生化试验、药敏试验。
(六)观察实验结果,写实验报告。
第一天:制备培养基解剖实验动物、病料抹片、细菌分离培养1.S.S培养基:50g S·S培养基+800ml蒸馏水,煮沸溶化浇平板(15ml/块平板),无需高压2.麦康凯培养基3.三糖铁琼脂4.葡萄糖蛋白胨水:1.25g蛋白胨+1.25g葡萄糖+1.25g磷酸氢二钾+250ml水,加热溶解,调pH至7.6,分装40根短试管高压(3指半高,约5-8ml)5.蛋白胨水:1.25g蛋白胨+0.625gNaCl+125ml水,调pH至7.6,分装40根短试管,捆扎,高压,121℃15分钟(2指高,约2-4ml)6.半固体:分别称取蛋白胨5g、牛肉膏2.5g、氯化钠2.5g、磷酸氢二钾0.5g、蒸馏水500ml,加热溶解,调pH7.6,过滤称琼脂粉2g+肉汤500ml,煮沸,待琼脂粉完全溶化,分装短试管(2指高,约2-4ml)病鸡剖检的方法和步骤一、剖检要求:剖检鸡最好在死前或濒死期进行。
一、实验目的1. 了解微生物在自然界中的分布情况;2. 掌握微生物采集、分离、培养的基本方法;3. 培养无菌操作意识,提高实验技能。
二、实验原理微生物是自然界中广泛分布的一类生物,它们在土壤、水体、空气、生物体等多种环境中均有存在。
微生物的分布与各种环境因素密切相关,如温度、湿度、pH值、营养物质等。
本实验通过采集不同环境中的微生物样本,进行分离、培养和观察,了解微生物的分布规律。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:土壤、水体、空气、植物表面等;2. 仪器:无菌操作台、无菌棉签、无菌试管、培养皿、显微镜、恒温培养箱等;3. 试剂:无菌生理盐水、营养琼脂、无菌水等。
四、实验步骤1. 微生物采集(1)土壤样品:用无菌铲子取适量土壤,放入无菌试管中;(2)水体样品:用无菌吸管吸取水体样品,放入无菌试管中;(3)空气样品:将无菌棉签在无菌生理盐水中蘸湿,在空气中滚动,收集空气中的微生物;(4)植物表面样品:用无菌棉签在植物表面滚动,收集植物表面的微生物。
2. 微生物分离与培养(1)将采集的样品进行适当稀释;(2)将稀释后的样品涂布在营养琼脂平板上;(3)将平板倒置放入恒温培养箱中培养。
3. 微生物观察(1)观察培养皿上生长的微生物菌落;(2)用无菌接种环挑取菌落,进行纯培养;(3)在显微镜下观察微生物的形态。
五、实验结果与分析1. 土壤样品:在培养皿上观察到较多的微生物菌落,菌落形态多样,有圆形、椭圆形、不规则形等;2. 水体样品:培养皿上菌落较少,菌落形态与土壤样品相似;3. 空气样品:培养皿上菌落较少,菌落形态与土壤样品相似;4. 植物表面样品:培养皿上菌落较多,菌落形态与土壤样品相似。
实验结果表明,微生物在自然界中广泛分布,土壤、水体、空气、植物表面等环境中均存在大量的微生物。
微生物的形态和数量与采集环境有关,土壤中的微生物种类和数量最多,其次是植物表面和水体,空气中微生物数量最少。
六、实验结论1. 微生物在自然界中广泛分布,与各种环境因素密切相关;2. 通过微生物的采集、分离、培养和观察,可以了解微生物的分布规律;3. 无菌操作在微生物实验中至关重要,可以有效防止污染。
竭诚为您提供优质文档/双击可除显微镜观察微生物形态的实验报告篇一:微生物实验报告:微生物形态观察实验一微生物形态观察一、实验目的1.巩固显微镜的使用方法,重点练习油镜的使用;2.认识细菌、放线菌和霉菌的基本形态特征和特殊结构;3.练习手绘微生物图片。
二、实验原理1.细菌基本形态细菌是单细胞生物,一个细胞就是一个个体。
细菌的基本形态有3种:球状,杆状和螺旋状,分别称为球菌、杆菌、螺旋菌。
球菌根据细胞分裂后排列方式的不同分为单球菌、双球菌、四联球菌、八叠球菌、链球菌、葡萄球菌等。
杆菌分为单杆菌、双杆菌、链杆菌等,是细菌中种类最多的。
螺旋菌分为弧菌和螺菌。
除此之外,还有一些特殊形态的细菌。
2.细菌特殊结构细菌的特殊结构包括荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等。
荚膜是某些细菌向细胞壁表面分泌的一层厚度不定的胶状物质,具有抗干燥、抗吞噬和附着作用。
鞭毛是某些细菌表面着生的1至数根由细胞内伸出的细长、波曲的丝状体,具有运动功能,在菌体上的着生位置、数目因菌种而异。
菌毛(又称纤毛)是在细菌体表的比鞭毛更细、更短、直硬,且数量较多的丝状体,与细菌吸附或性结合有关。
芽孢又称内生孢子,是某些细菌生长到一定阶段,在菌体内部产生的圆形、椭圆形或圆柱形休眠体,具有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压等特性。
3.真菌的结构特征菌丝是构成真菌营养体的基本单位,是一种管状细丝。
可伸长并产生许多分枝,许多分枝的菌丝相互交织在一起,就叫菌丝体。
根据菌丝中是否存在隔膜可分为无隔膜菌丝和有隔膜菌丝。
为适应不同的环境条件和更有效地摄取营养满足生长发育地需要,许多真菌的菌丝可以分化成一些特殊的形态,这些特化的形态称为菌丝变态。
比如吸器、假根、子实体。
4.放线菌的结构特征放线菌的形态比细菌复杂些,但仍属于单细胞生物。
链霉菌是典型的放线菌,其细胞呈丝状分枝,菌丝直径很小,在营养生长阶段,菌丝内无隔,故一般呈多核的细胞状态。
当其孢子落在固体基质表面并发芽后,就不断伸长、分支并以放射状向基质表面和内层扩展,形成大量色浅、较细的具有吸收营养和排泄代谢废物功能的基内菌丝,同时在其上又不断向空间方向分化出颜色较深、直径较粗的分枝菌丝,这就是气生菌丝。
微生物的分布实验报告微生物的分布实验报告一、引言微生物是一类微小的生物体,包括细菌、真菌、病毒等。
它们广泛存在于自然界的各个环境中,对地球生态系统的平衡和生物多样性起着重要作用。
为了了解微生物的分布情况,我们进行了一系列的实验。
二、实验目的本实验旨在调查不同环境中微生物的分布情况,了解微生物在不同环境中的适应能力和分布规律。
三、实验材料与方法1. 实验材料:- 无菌培养基- 无菌培养皿- 无菌试管- 高温灭菌器- 显微镜- 细菌培养物2. 实验方法:a. 采集样品:我们选择了不同的环境进行采样,包括土壤、水体和空气。
在采集样品时,我们使用无菌器具,以避免外界微生物的污染。
b. 培养微生物:将采集到的样品均匀涂抹在无菌培养基上,然后将培养皿密封好,放入高温灭菌器中进行培养。
c. 观察与记录:经过一段时间的培养,我们观察到培养皿上出现了不同形态的微生物。
我们使用显微镜观察并记录下微生物的形态特征和数量。
四、实验结果与分析经过一段时间的培养,我们观察到不同环境中的微生物分布情况如下:1. 土壤样品:在土壤样品中,我们观察到了大量的细菌和真菌。
这是因为土壤中含有丰富的有机物和水分,为微生物提供了良好的生存条件。
细菌和真菌在土壤中起到了分解有机物和促进养分循环的重要作用。
2. 水体样品:在水体样品中,我们观察到了较少的微生物。
这是因为水体中的微生物受到了水流的冲刷和光照的影响,生存条件较为恶劣。
但是,我们仍然观察到了一些耐盐菌和水生真菌,它们适应了水体环境的高盐浓度和低氧条件。
3. 空气样品:在空气样品中,我们观察到了微生物的数量非常有限。
这是因为空气中的微生物很容易被风吹散,而且空气中的营养物质也相对较少。
但是,我们仍然观察到了一些空气中的细菌和病毒,它们可能通过空气传播途径进行传播。
五、实验结论通过本次实验,我们得出了以下结论:1. 微生物在不同环境中的分布情况存在差异,土壤中的微生物数量最多,水体中次之,空气中最少。
微生物实验微生物实验细菌形态观察细菌分布消毒灭菌细菌形态观察一、实验目的1.掌握光学显微镜〔油镜〕的使用及日常维护2.掌握细菌的三种形态3.掌握临床常见细菌的形态及染色4.掌握细菌的特殊构造5.了解支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体及真菌的构造特点二、实验原理1. 普通光学显微镜〔油镜〕的使用1. 在标本欲检部位滴一滴香柏油,然后转换油镜头2. 从侧面观察并慢慢转动粗调节器,使油镜头浸没在油滴,当油镜头几乎接触玻片时停顿转动,以免碰撞玻片,用双眼观察目镜,同时调节细调节器,直至细菌清晰3. 根据需要调节显微镜亮度2. 普通光学显微镜的维护1.移动显微镜时,用右手持镜壁,左手托镜座,平端于胸前2.油镜用毕后,要立即用擦镜纸擦去香柏油;再用滴有二甲苯的擦镜纸擦油镜头;最后,用干净擦镜纸将镜头上的二甲苯擦去,以免损伤油镜头3.镜头擦净后,降低接物镜并将其转成八字形,罩好镜罩放入柜4.做好使用记录3.微生物知识1.细菌按形态分类:球菌:球形〔包括双球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌、链球菌等〕杆菌:杆状〔包括单杆菌、双杆菌、链杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌等〕螺旋菌:螺旋状〔包括螺旋菌、弧菌等〕2.细菌的根本构造细胞壁、细胞膜、细胞质、核质、核蛋白体3.细菌的特殊构造荚膜:如肺炎双球菌鞭毛:又分单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌。
如:变形杆菌为周毛菌菌毛芽胞:如破伤风梭菌、炭疽芽胞杆菌、肉毒梭菌4.微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称,包括原核类、真核类和非细胞类。
原核类:细菌、放线菌、蓝藻、衣原体、支原体、立克次氏体真核类:真菌、原生动物、显微藻类非细胞类:病毒、亚病毒5.真菌单细胞:圆形、芽生孢子。
如:酵母菌多细胞:菌丝及孢子、孢子出芽。
如:霉菌6.白假私酵母菌〔白念〕生物学性状:G+单细胞真菌、芽生孢子、类酵母型菌落厚膜孢子、假菌丝有助于鉴定致病性:皮肤粘膜——鹅口疮、脏感染、S感染微生物学检查:直接涂片、染色后镜检——菌体、芽生孢子、假菌丝7.新型隐球菌生物学性状:圆形酵母型菌、外周有厚荚膜〔比菌体大1-3倍〕致病性:吸入后侵犯皮肤、粘膜等——慢性炎症和脓肿;侵袭S——亚急性或慢性脑膜炎微生物学检查:脑脊液离心后取沉淀、痰和脓标本直接检查;墨汁负染见出芽菌体外围有宽厚荚膜为阳性三、实验材料记号笔:1支;大镊子:1支;火柴:1盒;蜡笔:1支;试管架:1个;酒精灯:1个;接种环:1支;Olympus显微镜:1台;显微镜使用记录本:1个四、实验容1. 观察细菌三种形态1〕球菌链球菌、葡萄球菌、肺炎双球菌〔子弹形〕、脑膜炎双球菌〔蚕豆形〕、四联菌2〕杆菌破伤风杆菌、白喉杆菌〔异染颗粒〕、绿脓杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌3〕螺形菌弧菌——霍乱弧菌;螺菌;螺杆菌——幽门螺杆菌;弯曲菌2. 观察细菌的特殊构造芽胞、鞭毛、荚膜、异染颗粒、钩端螺旋体、幽门螺杆菌3. 绘图葡萄球菌(staphyloccocus);肺炎双球菌(pneumo coccus);脑膜炎球菌(meningococcus);破伤风杆菌〔Clostridium Tantenus〕;霍乱弧菌〔vibrio cholera);芽胞(spore);鞭毛〔flagellum);荚膜(capsule);钩端螺旋体(leptospira)五、实验结果绘8幅细菌镜下列图,已交。
实验报告微生物的分布实验报告:微生物的分布摘要:本实验旨在研究不同环境条件下微生物的分布情况。
通过采集不同样品并进行培养和观察,我们发现微生物在不同环境中的分布存在显著差异。
这项研究对于深入了解微生物的生态学和环境适应性具有重要意义。
引言:微生物是地球上最古老、最丰富的生物种类之一,它们在自然界中广泛分布,对环境和生物圈的平衡起着重要作用。
然而,由于微生物的微小和隐蔽性,其分布情况一直以来都是科学家们关注的焦点之一。
通过研究微生物在不同环境中的分布情况,可以更好地理解微生物的生态学特征和适应性。
材料与方法:1. 采集不同环境的样品,包括土壤、水体和空气等。
2. 将样品分别进行稀释处理,然后接种在不同培养基上。
3. 对培养基进行恒温培养,并观察不同环境下微生物的生长情况。
4. 通过显微镜观察和统计不同环境中微生物的种类和数量。
结果:经过实验观察和统计分析,我们发现不同环境条件下微生物的分布存在明显差异。
在土壤样品中,细菌和真菌的数量较高,而水体样品中则以藻类和原生动物为主。
空气中微生物的数量较少,但种类较为多样。
此外,我们还发现不同培养基对微生物的生长有一定影响,一些微生物对培养基的适应性较强,而另一些则相反。
讨论:本实验结果表明,微生物的分布受到环境因素的影响较大。
不同环境条件下的微生物群落结构存在显著差异,这与微生物的生态适应性和环境选择性密切相关。
此外,不同培养基的选择也会影响微生物的生长和分布情况,这为进一步研究微生物的生态学特征提供了重要线索。
结论:通过本实验的研究,我们对微生物在不同环境中的分布情况有了更深入的了解。
微生物的分布受到环境因素和培养基的影响,这为进一步探讨微生物的生态学特征和适应性提供了重要参考。
未来,我们将继续深入研究微生物的分布规律,以期更好地理解微生物在自然界中的生存和演化。
微生物细胞形态及菌落特征观察实验报告马子午生命科学学院食品科学与工程专业 14101班 02号1.引言1.1实验目的学习细菌的一般接种方法;了解放线菌、蓝细菌、酵母菌、霉菌的菌落特征;学习并掌握如何观察细菌的形态特征,掌握常用霉菌制片方法。
1.2实验原理放线菌的菌落会产生大量的基内菌丝和气生菌丝,并进一步分化产生孢子丝和孢子,表面呈粉状、颗粒状或絮状;部分蓝细菌可以形成孢子,由成串细胞连成丝状的蓝细菌,在细胞断裂时形成片段,这个片段由异形胞、营养细胞以及极节组成;酵母菌无性繁殖有芽殖、裂殖和产生掷孢子,有性繁殖可以形成子囊和子囊孢子,当酵母菌繁殖旺盛时,母细胞出芽产生的子细胞没有脱离母细胞的时候,子细胞又开始繁殖,这样许多细胞连在一起,形成藕节状的假菌丝;霉菌有青霉和曲霉,青霉的菌落形态特征呈扫帚状,曲霉的形态特征为菊花状的头和足细胞。
霉菌的有些结构在制片过程中容易被破坏,影响观察,采用载玻片培养法。
简单易行,并且还可以在同一标本上观察到微生物发育的不同阶段的形态。
[1]2.材料与方法2.1材料与试剂曲霉(Aspergillus spp.),青霉(Penicillium spp.),放线菌,蓝细菌,啤酒酵母菌(Sac.cerevisiae),复红染液,美蓝染液,棉蓝染液,酸性酒精。
2.2仪器与设备显微镜,酒精灯,盖玻片,载玻片,镊子,接种环。
2.3方法与步骤2.3.1放线菌的形态观察(插片法)准备玻片:取一块干净的载玻片烘干,放于桌面。
接种与观察:用镊子从含放线菌菌种的培养基中取一块盖玻片,再用镊子在盖玻片上取菌种置于载玻片中央位置,直接镜检。
2.3.2蓝细菌形态观察准备玻片:取一块干净的载玻片烘干,放于桌面。
接种:在载玻片中央滴一滴无菌水,取少量含有蓝细菌寄生的藻类于无菌水中,用镊子的头端慢慢敲碎至无菌水开始呈至绿色,盖上盖玻片。
镜检:直接镜检。
2.3.3啤酒酵母子囊孢子形态观察准备玻片:取一块干净的载玻片烘干,放于桌面。
微生物形态观察实验报告微生物形态观察实验报告引言:微生物是一类微小的生物体,包括细菌、真菌和病毒等。
微生物广泛存在于自然界中的各个环境中,对人类的生活和健康具有重要的影响。
为了更好地了解微生物的形态和特征,我们进行了一系列的实验观察。
本报告将详细介绍实验的目的、方法和结果,并对所观察到的微生物形态进行分析和讨论。
实验目的:1. 了解微生物的形态特征;2. 掌握常见微生物的观察方法;3. 分析不同微生物的形态差异。
实验方法:1. 根据实验要求,选择不同的微生物样本,包括细菌和真菌等;2. 准备好显微镜、载玻片和染色剂等实验器材;3. 采用湿涂片法或染色法制备微生物标本;4. 利用显微镜对标本进行观察和拍照。
实验结果:1. 细菌形态观察:在实验中,我们选择了大肠杆菌和链球菌两种常见的细菌进行观察。
通过显微镜观察,我们发现大肠杆菌呈现为短杆状,而链球菌则呈现为圆球状。
这种形态差异可能与它们的细胞结构和功能有关。
2. 真菌形态观察:在实验中,我们选择了酵母菌和霉菌两种常见的真菌进行观察。
通过显微镜观察,我们发现酵母菌呈现为单个的圆球状细胞,而霉菌则呈现为多个长丝状细胞的聚集体。
这种形态差异可能与它们的生长方式和繁殖方式有关。
3. 其他微生物形态观察:在实验中,我们还观察了其他一些微生物的形态特征。
例如,病毒是一种非细胞结构的微生物,通过电子显微镜观察,我们发现病毒呈现为非常小的颗粒状结构。
此外,我们还观察了一些微生物的胞内结构,如细菌的细胞壁和真菌的菌丝等。
讨论与分析:微生物的形态特征与其生物学特性密切相关。
细菌的形态多样,有的呈球状、杆状、螺旋状等,这种多样性可能与细菌的生存环境和功能有关。
真菌的形态也多样,有的呈球状、长丝状、菌丝状等,这种多样性可能与真菌的生长方式和繁殖方式有关。
病毒的形态非常简单,只有核酸和蛋白质组成的颗粒,这种简单性可能与病毒的寄生性质有关。
通过本次实验,我们对微生物的形态特征有了更深入的了解。
一、实验目的1. 掌握显微镜的使用方法,学会油镜的使用技巧。
2. 了解并掌握微生物的基本形态特征,包括细菌、放线菌、酵母菌和霉菌。
3. 培养无菌操作技能,提高实验操作的规范性和准确性。
二、实验原理微生物是构成生命的基本单位,其形态和结构是微生物学研究的重要内容。
通过显微镜观察微生物的形态,可以了解其生物学特性,为微生物的分类、鉴定和实验研究提供依据。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的纯培养物。
2. 仪器:光学显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、酒精灯、无菌水、无菌棉签、培养皿、试管等。
四、实验步骤1. 涂片(1)将接种环在酒精灯上灼烧,待其冷却后,蘸取适量纯培养物。
(2)将接种环在载玻片上轻轻涂成薄层。
(3)在涂片上滴加适量无菌水,用无菌棉签轻轻涂抹,使菌体均匀分布。
2. 干燥将涂片放在室温下自然干燥。
3. 染色(1)将干燥后的涂片放入乳酸石炭酸棉蓝染色液中,染色5-10分钟。
(2)用蒸馏水冲洗涂片,去除多余的染色液。
4. 观察(1)将涂片放在显微镜载物台上,先用低倍镜观察,找到菌体后,用高倍镜观察。
(2)观察细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的形态、大小、颜色等特征。
5. 记录将观察到的微生物形态特征记录在实验报告中。
五、实验结果与分析1. 细菌细菌是单细胞生物,基本形态有球形、杆形和螺旋形。
在显微镜下,观察到细菌的形态和大小,为杆状,大小约为0.5-1.0μm。
2. 放线菌放线菌是丝状真菌,由菌丝构成。
在显微镜下,观察到放线菌的菌丝呈细长状,直径约为2-5μm,菌丝间有横隔。
3. 酵母菌酵母菌是单细胞真菌,个体形态多为卵圆形、圆柱形。
在显微镜下,观察到酵母菌的个体大小约为5-10μm,细胞壁较薄,细胞质透明。
4. 霉菌霉菌是丝状真菌,由菌丝构成。
在显微镜下,观察到霉菌的菌丝呈粗细不一的丝状,直径约为5-20μm,菌丝间有横隔。
六、实验结论通过本次实验,我们掌握了显微镜的使用方法,观察了细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的形态特征,了解了微生物的基本生物学特性。
一、实验目的1. 了解微生物在自然界中的分布特点。
2. 掌握微生物分离与纯化的基本方法。
3. 熟悉不同微生物在不同环境中的生长情况。
二、实验原理微生物是一类微小生物,广泛分布于自然界中。
它们可以在各种环境中生存,如土壤、水体、空气、人体等。
微生物的分布与生存受到多种因素的影响,如温度、湿度、pH值、营养物质等。
本实验通过观察不同环境中的微生物分布情况,了解微生物的生长特点,并学习微生物的分离与纯化方法。
三、实验材料与仪器1. 材料:土壤、水体、空气样品、牛肉膏蛋白胨培养基、普通琼脂平板、无菌棉拭子、无菌剪刀、无菌镊子、无菌移液管、酒精灯、培养箱等。
2. 仪器:显微镜、高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、无菌操作台等。
四、实验方法1. 微生物分布观察a. 土壤样品:取一定量土壤,加入适量无菌水,搅拌均匀,静置片刻,取上清液作为土壤微生物样品。
b. 水体样品:取一定量水体,加入适量无菌水,搅拌均匀,静置片刻,取上清液作为水体微生物样品。
c. 空气样品:用无菌棉拭子轻轻擦拭实验室内空气,将棉拭子放入装有适量无菌水的试管中,震荡混匀,取上清液作为空气微生物样品。
2. 微生物分离与纯化a. 将土壤样品、水体样品、空气样品分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基上,在适宜温度下培养。
b. 观察培养基上菌落的生长情况,挑取单菌落,转接至新的牛肉膏蛋白胨培养基上,重复以上步骤,直至获得纯化菌落。
五、实验结果与分析1. 微生物分布观察a. 土壤样品:在牛肉膏蛋白胨培养基上观察到多种菌落,如细菌、放线菌、真菌等。
b. 水体样品:在牛肉膏蛋白胨培养基上观察到多种菌落,如细菌、放线菌、真菌等。
c. 空气样品:在牛肉膏蛋白胨培养基上观察到多种菌落,如细菌、放线菌、真菌等。
2. 微生物分离与纯化a. 从土壤样品中分离得到一株细菌,经鉴定为枯草芽孢杆菌。
b. 从水体样品中分离得到一株细菌,经鉴定为大肠杆菌。
c. 从空气样品中分离得到一株放线菌,经鉴定为链霉菌。
一、实验名称微灭菌实验二、实验目的1. 掌握微生物培养的基本原理和操作技术。
2. 熟悉微生物培养基的制备和灭菌方法。
3. 了解微生物纯化技术,学会使用平板划线法和稀释涂布平板法进行微生物的分离纯化。
三、实验原理微生物培养是微生物学实验的重要基础,其目的是使微生物在人工控制的条件下生长繁殖,以便于研究微生物的生理、生化特性。
微生物培养基的制备和灭菌是保证微生物纯培养的关键步骤。
本实验通过制备和灭菌微生物培养基,使微生物能够在无菌条件下生长。
四、实验材料1. 菌种:金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)2. 培养基:牛肉膏蛋白胨培养基、LB培养基3. 试剂:无菌水、无菌盐水、无菌蒸馏水、无菌甘油、无菌酚红指示剂、无菌琼脂4. 仪器:高压蒸汽灭菌器、电子天平、无菌操作台、无菌培养皿、无菌移液管、无菌接种环、酒精灯、镊子、剪刀、试管、试管架、水浴锅等五、实验步骤1. 培养基制备(1)牛肉膏蛋白胨培养基:称取牛肉膏10g、蛋白胨10g、NaCl 5g、琼脂15g,加入1000ml无菌水,加热溶解,调节pH值至7.0-7.2,分装于试管中,每管15ml,封口后进行高压蒸汽灭菌(121℃,20min)。
(2)LB培养基:称取酵母提取物5g、NaCl 10g、蛋白胨10g,加入1000ml无菌水,加热溶解,调节pH值至7.0-7.2,分装于试管中,每管15ml,封口后进行高压蒸汽灭菌(121℃,20min)。
2. 培养基灭菌将制备好的培养基放入高压蒸汽灭菌器中,设定121℃,灭菌20min。
灭菌后,待培养基冷却至50℃以下,加入适量酚红指示剂,观察培养基颜色变化,确保灭菌效果。
3. 微生物纯化(1)平板划线法:取一无菌培养皿,倒入少量LB培养基,待凝固后,用无菌接种环挑取金黄色葡萄球菌菌液,在平板上划线,置于37℃恒温培养箱中培养24h。
(2)稀释涂布平板法:取一无菌培养皿,倒入少量LB培养基,待凝固后,用无菌移液管取金黄色葡萄球菌菌液,进行一系列稀释,取适量稀释液涂布于平板上,置于37℃恒温培养箱中培养24h。
⾷品微⽣物实验报告霉菌的培养与形态学观察实验⼀真菌培养基的配制与灭菌实验⽬的:(1)了解培养基的配置原理和⽅法,掌握分离培养微⽣物的有关准备⼯作。
(2)掌握⾼压灭菌⽅法及原理实验原理:(1)培养基的制备原理:1. 培养基是供微⽣物⽣长、繁殖、代谢的混合养料。
2. 从营养⾓度分析:营养:碳源、氮源、能源、⽣长素、⽔分和⽆机盐等;适宜的酸碱度(pH值)和⼀定缓冲能⼒;⼀定的氧化还原电位;合适的渗透压。
琼脂是从⽯花菜等海藻中提取的胶体物质,是应⽤最⼴的凝固剂。
加琼脂制成的培养基在98~100℃下融化,于45℃以下凝固,不容易被微⽣物污染。
但多次反复融化,其凝固性降低。
(2)湿热灭菌原理-⾼压蒸汽灭菌在密闭的蒸锅内,其中的蒸汽不能外溢,压⼒不断上升,使⽔的沸点不断提⾼,从⽽锅内温度也随之增加。
在0.1MPa的压⼒下,锅内温度达121℃。
在此蒸汽温度下,可以很快杀死各种细菌及其⾼度耐热的芽孢。
实验材料与⽅法配制培养基所需器材实验设备:⾼压蒸汽灭菌器。
实验器材:500ml三⾓烧瓶、蓝盖瓶、5ml刻度吸管、培养基、天平、砝码、称量纸、药勺、500ml、100ml量筒、⽜⽪纸、硫酸纸、橡⽪筋、铁丝筐、平⽫、剪⼑等。
培养基等集中放讲台前⾼压桶内,送到洗刷室统⼀⾼压灭菌条件及注意事项⾼压灭菌条件:121.3℃,15min 。
含糖培养基113 ℃,15min 。
倒平板电炉加热灭菌好的培养基打开平⽫包装倒平板(10块)注意事项:空⽓环境⽆菌(应在酒精灯⽕焰周围⽆菌区)。
a.在酒精灯⽕焰处,倾斜打开瓶⼝。
b.瓶⼝要过⽕焰。
c.左⼿掀开平⽫⼩⼝。
d.倾注满⽫底再多⼀点,约10ml(7cm直径平⽫)。
e.推放⼀边要轻缓,不能晃起琼脂挂壁,易在培养过程中污染杂菌。
f.完全凝固再翻转平板放塑料筐内,4℃备⽤。
分析与讨论(1)如何证明培养基灭菌是否彻底?把灭菌后的培养基按灭菌锅内的不同位置,每处抽取数管(瓶),标上记号,置25℃~30℃培养⼀周左右进⾏检查。
微生物实验微生物实验细菌形态观察细菌分布消毒灭菌细菌形态观察一、实验目的1.掌握光学显微镜(油镜)的使用及日常维护2.掌握细菌的三种形态3.掌握临床常见细菌的形态及染色4.掌握细菌的特殊结构5.了解支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体及真菌的结构特点二、实验原理1. 普通光学显微镜(油镜)的使用1. 在标本欲检部位滴一滴香柏油,然后转换油镜头2. 从侧面观察并慢慢转动粗调节器,使油镜头浸没在油滴内,当油镜头几乎接触玻片时停止转动,以免碰撞玻片,用双眼观察目镜,同时调节细调节器,直至细菌清晰3. 根据需要调节显微镜亮度2. 普通光学显微镜的维护1.移动显微镜时,用右手持镜壁,左手托镜座,平端于胸前2.油镜用毕后,要立即用擦镜纸擦去香柏油;再用滴有二甲苯的擦镜纸擦油镜头;最后,用干净擦镜纸将镜头上的二甲苯擦去,以免损伤油镜头3.镜头擦净后,降低接物镜并将其转成八字形,罩好镜罩放入柜内4.做好使用记录3.微生物知识1.细菌按形态分类:球菌:球形(包括双球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌、链球菌等)杆菌:杆状(包括单杆菌、双杆菌、链杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌等)螺旋菌:螺旋状(包括螺旋菌、弧菌等)2.细菌的基本结构细胞壁、细胞膜、细胞质、核质、核蛋白体3.细菌的特殊结构荚膜:如肺炎双球菌鞭毛:又分单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌。
如:变形杆菌为周毛菌菌毛芽胞:如破伤风梭菌、炭疽芽胞杆菌、肉毒梭菌4.微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称,包括原核类、真核类和非细胞类。
原核类:细菌、放线菌、蓝藻、衣原体、支原体、立克次氏体真核类:真菌、原生动物、显微藻类非细胞类:病毒、亚病毒5.真菌单细胞:圆形、芽生孢子。
如:酵母菌多细胞:菌丝及孢子、孢子出芽。
如:霉菌6.白假私酵母菌(白念)生物学性状:G+单细胞真菌、芽生孢子、类酵母型菌落厚膜孢子、假菌丝有助于鉴定致病性:皮肤粘膜——鹅口疮、内脏感染、CNS感染微生物学检查:直接涂片、染色后镜检——菌体、芽生孢子、假菌丝7.新型隐球菌生物学性状:圆形酵母型菌、外周有厚荚膜(比菌体大1-3倍)致病性:吸入后侵犯皮肤、粘膜等——慢性炎症和脓肿;侵袭CNS——亚急性或慢性脑膜炎微生物学检查:脑脊液离心后取沉淀、痰和脓标本直接检查;墨汁负染见出芽菌体外围有宽厚荚膜为阳性三、实验材料记号笔:1支;大镊子:1支;火柴:1盒;蜡笔:1支;试管架:1个;酒精灯:1个;接种环:1支;Olympus显微镜:1台;显微镜使用记录本:1个四、实验内容1. 观察细菌三种形态1)球菌链球菌、葡萄球菌、肺炎双球菌(子弹形)、脑膜炎双球菌(蚕豆形)、四联菌2)杆菌破伤风杆菌、白喉杆菌(异染颗粒)、绿脓杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌3)螺形菌弧菌——霍乱弧菌;螺菌;螺杆菌——幽门螺杆菌;弯曲菌2. 观察细菌的特殊结构芽胞、鞭毛、荚膜、异染颗粒、钩端螺旋体、幽门螺杆菌3. 绘图葡萄球菌(staphyloccocus);肺炎双球菌(pneumo coccus);脑膜炎球菌(meningococcus);破伤风杆菌(Clostridium Tantenus);霍乱弧菌(vibrio cholera);芽胞(spore);鞭毛(flagellum);荚膜(capsule);钩端螺旋体(leptospira)五、实验结果绘8幅细菌镜下图,已交。
六、思考与讨论1.显微镜高倍镜使用时看不清楚的常见原因(1)未滴加镜油(2)镜头不干净(3)标本放置反了,所以达不到对焦平面(4)制片问题:标本太厚、染色误差等细菌分布一、实验目的1. 掌握固体培养基的制备2. 掌握机体常见部位及环境中的细菌采样、培养、及初步鉴定3. 掌握革兰氏染色方法及结果判定二、实验原理1. 培养基:1.细菌生长所需营养物质:水、碳源、氮源、无机物和生长因子2.培养基分类:(1)根据营养物质:营养培养基、选择培养基、鉴别培养基(2)根据物理性质:液体培养基、固体培养基和半固体培养基3.细菌在培养基中的生长状况:表面生长、均匀浑浊生长、沉淀生长2. 革兰氏染色:革兰阳性细菌细胞壁的肽聚糖(peptidoglycan)层较厚,经乙醇处理后使之发生脱水作用而使孔径缩小,通道弯曲,结晶紫与碘的复合物保留在细胞内而不被脱色;而革兰阴性细菌的肽聚糖层很薄,脂肪含量高,经乙醇处理后孔径仍可使结晶紫与碘的复合物通过,因而将染料洗去而被脱色。
三、实验材料咽拭子、羊血培养皿:1套/人;大号普通培养皿:1块/2人;载玻片:1片/人;A、B菌:6套/桌;NS:1份/人;滤纸:1张/人;消毒液:4套/桌;三角瓶、电天平、营养琼脂、称药纸、称药勺、量筒:1套/桌四、实验内容1. 培养基制备1)按产品要求称取营养琼脂2)每实验桌制备200ml3)高压蒸汽灭菌后,在洁净工作台内倒平皿4)所制备的普通平皿用于空气培养2. 机体不同部位的细菌采样、培养1)咽部正常菌群的采样、培养咽拭子擦拭咽部,平行划线法接种于羊血平皿。
2)手指消毒前后细菌的采样培养未消毒手指平行划线法接种于普通平皿;同一手指碘酒、酒精消毒后平行划线法接种于普通平皿。
3. 环境中细菌采样培养1)空气培养将培养皿打开暴露于空气中,20分钟后盖好平皿盖儿2)流通纸币(或硬币)的细菌采样培养将硬币正反面分别在培养基上充分接触3)采样结束后,将培养皿底部朝上放入铁丝筐,统一置培养箱:37℃18-24小时4. A、B、C菌鉴定(革兰氏染色法)1). 细菌涂片制备程序:(1)取一干净玻片,火焰上方缓缓通过三次去油(2)蜡笔画线将玻片分割为A、B、C三区域(3)接种环取生理盐水分别滴入A、B两区域各一滴(4)分别取少许A、B 、C菌,与生理盐水充分混匀成菌液,风干后形成菌膜(5)固定(火焰上方缓缓通过三次)(6)革兰氏染色(7)滤纸吸干水分,油镜观察2). 革兰氏染色:(1)细菌涂片、火焰固定(2)结晶紫初染1min(3)卢戈氏碘液媒染1min(4)95%乙醇脱色30-40s(5)沙黄复染1min五、实验结果A:G+,球菌,推测为金黄色葡萄球菌;B:G-,短杆菌,推测为大肠杆菌;六、思考与讨论1.影响革兰氏染色的因素:(1)细菌本身因素:菌龄:如果菌龄太大,可能出现假阴性(2)操作因素涂片:取菌应适量,涂片要均匀,如果某个部分菌层太厚,可能在脱色时达不到,会导致局部假阳性固定:固定温度太高或时间太长都会导致细菌结构破坏而出现假阴性;但是固定不够,细菌会在水洗时被冲掉初染:初染时间虽然说是1分钟,但是可以适当延长,时间太短会出现假阴性;染色滴加不均匀可能出现半阴半阳媒染:和初染一样脱色:脱色时间不能过长,基本上用酒精滴过之后马上水冲就可以了,否则容易出现假阴性复染:复染时间需足够长,否则可能会染不上消毒灭菌一、实验目的1. 了解实验室常用消毒灭菌方法及其原理2. 掌握实验中所用仪器的使用方法3. 掌握机体常见部位及环境中的细菌培养物的初步鉴定4. 强化革兰氏染色技能二、实验原理1.口咽部及皮肤正常菌群鼻咽部及扁桃体:葡萄球菌、类白喉杆菌、肺链、溶血及非溶血性链球菌、奈瑟菌等口腔:链球菌多见、放线菌、螺旋体、G-杆菌等皮肤:表皮葡萄球菌、丙酸杆菌、类白喉杆菌、铜绿假单胞菌2.溶血类型α溶血:现象:草绿色溶血环常见菌种:机会致病菌(甲链、肺链)原理:细菌产生过氧化氢将血红蛋白氧化成深绿色的高铁血红蛋白β溶血:现象:透明溶血环常见菌种:致病菌(乙链)原理:细菌释放溶血素使红细胞破裂,血红蛋白释放三、实验材料咽拭子培养物:1套/人;空气、纸币、手指消毒前后培养物:1套/2;载玻片:1片/人;NS:1支/人;滤纸:1张/人四、实验内容1. 常用消毒灭菌方法:(示教讲解)1).热力灭菌:(1)干热灭菌法:焚化、烧灼、干烤(160 ℃,2小时)(2)湿热灭菌法:煮沸(2%Na2CO3,105 ℃);高压蒸汽灭菌(,20分钟,121℃,临床运用最广的灭菌方法)2). 紫外线(Ultraviolet radiation):波长265nm-266nm(DNA吸收光谱)杀菌能力最强。
紫外光穿透力差,一般只用于不耐热物品表面的消毒。
3). 过滤(filtration)用物理阻流的方法除去液体或空气中的细菌,用于不耐热物质的灭菌(血清、毒素、抗生素等)滤菌器:薄膜滤菌器、玻璃滤菌器、石棉滤菌器、素陶瓷滤菌器4). 低温保存菌种(冷冻真空干燥法)6).实验室常用化学消毒剂:70-75%乙醇洁净台消毒:来苏水擦拭防腐剂:三氯甲烷、硫柳汞、叠氮钠2.细菌分布结果鉴定1)观察菌落2)取部分菌落的细菌进行革兰氏染色并观察五、实验结果1. 咽部正常菌群的采样、培养结果:在羊血培养皿上出现四种菌落:(1)数目多,划线沿线都有;针尖大小;无色、光滑、湿润、透明、圆形。
周围出现草绿色溶血环,发生了不完全溶血即α溶血。
(2)数目较多,划线沿线都有;较小;乳白色、光滑、湿润、半透明、圆形。
(3)少,只出现在四个点;中型;乳黄色、光滑、半湿润、不透明、形状不规则。
在此种菌落下方的培养基出现了透明溶血环,发生了完全溶血即β溶血。
(4)1个菌落;较大;乳白色、光滑、湿润、半透明、圆形。
粘稠。
取(1)、(2)、(3)进行革兰氏染色,结果如下;(1)G+,链球菌,根据不完全溶血推断,为甲型链球菌。
(2)G-,球菌,细胞个体小,形状像金黄色葡萄球菌,但是染色为阴性。
(3)G-,球菌。
2. 手指消毒前后细菌的采样培养结果:1)消毒前:仅出现2个菌落,较小;乳白色、光滑、湿润、有光泽、圆形。
革兰氏染色结果:G-,杆菌2)消毒后:无菌落出现。
3. 硬币正反面的细菌采样培养结果:1)正面三种菌落:(1)13个菌落;较小;乳白色、光滑、湿润、有光泽、圆形。
和手指消毒前的菌落一样。
(2)1个菌落;较大;白色、光滑、湿润、近似圆形。
(3)5个菌落;较大;中央乳黄色边缘颜色变浅、光滑、湿润、中间凸、不规则、边缘光滑取其中(2)、(3)进行革兰氏染色,结果如下:(2)G-,杆菌。
和手指消毒前的细菌一样(3)G-,链杆菌。
形态较大,形状像炭疽芽胞杆菌,但是没有芽孢且染色为阴性。
2)反面两种菌落:(1)2个;较大,乳白色、光滑、湿润、有光泽、圆形。
(2)多个,沿硬币边缘线连成一片;针尖大小、无色、光滑、湿润、透明。
4. 空气培养结果平皿敞开在实验室的窗台上放置了约20分钟,当时阳光照在上面:平皿出现了五种菌落:(1)11个;中等大小;白色、光滑、湿润、半透明、圆形(2)2个;较大;周围白色,中间有一个透明圈,光滑、湿润、中间凹的圆饼状(3)1个;较大;周围黄色,中间有一个透明的圆形区域,半湿润、没有光泽(4)1个;较大;边缘橘黄色,中央偏白、明显凸起、干燥、形状不规则(5)1个;较大;边缘透明,中央乳黄色,光滑、湿润、半透明、圆形取其中(3)、(4)进行革兰氏染色,结果如下:(3)G-,杆菌。