常见缓冲液的配方

最全常用缓冲液配方及缓冲范围缓冲液是一种能够维持溶液pH值相对稳定的溶液。

它可以减少酸碱反应的影响，使物质在酸碱环境中保持稳定。

在生命科学实验室和工业生产中，常用的缓冲液有许多种。

下面是最常用的一些缓冲液配方及其缓冲范围。

1. Phosphate缓冲液：Phosphate缓冲液通常由磷酸二氢盐和磷酸氢二盐组成。

它的pH范围为2.1-7.4，在生物化学和细胞生物学实验中得到广泛应用。

配方1：-0.1M磷酸二氢盐，pH2.0-2.8-0.2M磷酸氢二盐，pH5.8-7.4配方2：-0.1M磷酸二氢盐，pH2.1-3.1-0.2M磷酸氢二盐，pH5.6-7.42. Tris缓冲液：Tris缓冲液由三羟甲基氨基甲烷（Tris）和其酸盐组成。

它的pH范围为7-9，在分子生物学和生化实验中广泛使用。

配方：- 1 M Tris HCl，pH 7.4-9.0- 1 M Tris base，pH 7.0-9.23.MES缓冲液：MES缓冲液是一种针对中性pH值（5.5-6.7）的缓冲液，常用于细胞生物学和酶活性实验。

配方：-0.1MMES，pH5.5-6.74.HEPES缓冲液：HEPES缓冲液是一种适用于细胞培养和酶活性实验的缓冲液，其pH 范围为6.8-8.2配方：-0.1MHEPES，pH6.8-8.25.CAPS缓冲液：CAPS缓冲液是一种适用于生化实验的缓冲液，其pH范围为9.7-11.1配方：-0.1MCAPS，pH9.7-11.1这些是最常用的缓冲液配方及其缓冲范围，可以根据实验的需要选择合适的缓冲液。

需要注意的是，在配制缓冲液时应使用高纯度的化学品，并根据实验要求精确控制缓冲液的pH值。

此外，在实验过程中应注意缓冲液的保存和稳定性，以确保实验结果的准确性。

常用缓冲液及培养基配方缓冲液和培养基是生物学实验中常用的重要试剂，它们的配方的选择对实验结果有着重要的影响。

下面将介绍几种常用的缓冲液和培养基的配方及其用途。

一、缓冲液配方1.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液常被用于细胞培养和生物化学实验中，它的使用范围很广。

常用的磷酸盐缓冲液有PBS（磷酸盐缓冲盐水），配方如下：-NaCl8g-KCl0.2g-Na2HPO41.42g-KH2PO40.24g将以上物质溶解在1L的去离子水中，pH值调到7.4，即可得到1×PBS缓冲液。

2. Tris缓冲液Tris缓冲液在分子生物学实验中常被用作DNA和RNA电泳的产物混合液。

常用的Tris缓冲液有Tris-HCl缓冲液和Tris-acetate缓冲液。

以下是Tris-HCl缓冲液的配方：- Tris 12.1 g-HCl(10M,pH7.6)10mL将Tris和HCl分别溶解在800 mL去离子水中，然后添加水调至1 L，pH值调节到目标值即可。

Tris-acetate缓冲液的配方与Tris-HCl相似，只是在Tris-HCl的基础上添加乙酸。

3. Glycine缓冲液Glycine缓冲液常被用于电泳实验中，用于电泳缓冲液和电泳媒介液的制备。

以下是Glycine缓冲液的配方：- Glycine 3 g- Tris 4.8 g-SDS0.207g-EDTA0.37g将以上物质溶解在1 L的去离子水中，pH值调至8.3，即可得到1×Glycine缓冲液。

1.LB培养基LB培养基是最常用的细菌培养基之一，用于培养大肠杆菌等革兰氏阴性菌。

以下是LB培养基的配方：- Tryptone 10 g- Yeast extract 5 g-NaCl10g将以上物质溶解在1L的去离子水中，加热至溶解，然后进行高压灭菌即可得到LB培养基。

2.M9培养基M9培养基是一种缺乏氮、氨基酸和碳的最小培养基，常被用于重组DNA的传输。

53种常见缓冲液配制方法乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)取5 mol/L醋酸溶液15.0 ml，加乙醇60 ml和水20 ml，用10 mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000 ml，即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)取三羟甲基氨基甲烷12.14 g，加水800 ml，搅拌溶解，并稀释至1000 ml，用6 mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0，即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)取氯化钙0.294 g，加0.2 mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40 ml使溶解，用1 mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100 ml，即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)取三羟甲基氨基甲烷6.06 g，加盐酸赖氨酸3.65 g、氯化钠5.8 g、乙二胺四醋酸二钠0.37 g，再加水溶解使成1000 ml，调节pH值至9.0，即得。

乌洛托品缓冲液取乌洛托品75 g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2 ml，再用水稀释至250 ml，即得。

巴比妥缓冲液(pH7.4)取巴比妥钠4.42 g，加水使溶解并稀释至400 ml，用2 mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过，即得。

巴比妥缓冲液(pH8.6)取巴比妥5.52 g与巴比妥钠30.9 g，加水使溶解成2000 ml，即得。

巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)取巴比妥钠5.05 g，加氯化钠3.7 g及水适量使溶解，另取明胶0.5 g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。

然后用0.2 mol/L盐酸溶液调节pH 值至7.8，再用水稀释至500 ml，即得。

甲酸钠缓冲液(pH3.3)取2 mol/L甲酸溶液25 ml，加酚酞指示液1滴，用2 mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2 mol/L甲酸溶液75 ml，用水稀释至200 ml，调节pH值至3.25～3.30，即得。

邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)取邻苯二甲酸氢钾10 g，加水900 ml，搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6，加水稀释至1000 ml，混匀，即得。

实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液配方有很多种，下面将介绍一些常用的试剂和缓冲液的配方：一、试剂的配方1. Tris缓冲液：- 3 M Tris-Cl，pH 7.4（准备方法：将121.1 g Tris粉末溶解在800 mL去离子水中，使用HCl调节pH值至7.4，并将溶液体积加至1 L）2.NaCl溶液：-5MNaCl（准备方法：将287.7gNaCl溶解在800mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）3.验血试剂：-4%NaOH溶液（准备方法：将40gNaOH溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）-5%CuSO4溶液（准备方法：将50gCuSO4溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）-2%K4[Fe(CN)6]溶液（准备方法：将20gK4[Fe(CN)6]溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）4.PBS缓冲液（磷酸盐缓冲液）：-10×PBS缓冲液（准备方法：将80gNaCl，2gKCl，11.5gNa2HPO4，2gKH2PO4溶解在800mL去离子水中，并将溶液体积加至1L。

pH值可以调节至7.4左右）5. Tris-EDTA缓冲液（TE缓冲液）：- 10 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，pH 8.0（准备方法：将12.1 gTris溶解在800 mL去离子水中，然后加入0.37 g EDTA，使用HCl调节pH值至8.0，并将溶液体积加至1 L）二、缓冲液的配方1. Tris-HCl缓冲液：- 50 mM Tris-HCl，100 mM NaCl，1% Triton X-100，pH 7.4（准备方法：将6.05 g Tris，5.8 g NaCl，0.1 g Triton X-100溶解在800mL去离子水中，使用HCl调节pH值至7.4，并将溶液体积加至1 L）2. Tris-Borate缓冲液（TBE缓冲液）：- 89 mM Tris，89 mM boric acid，2 mM EDTA，pH 8.3（准备方法：将10.81 g Tris，5.49 g boric acid，3.72 g EDTA溶解在800 mL去离子水中，使用NaOH或HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）3. Tris-Glycine缓冲液：- 25 mM Tris，192 mM glycine，0.1% SDS，pH 8.3（准备方法：将3.03 g Tris，14.35 g glycine溶解在800 mL去离子水中，使用HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）4. Tris-Acetate缓冲液（TAE缓冲液）：- 40 mM Tris，20 mM acetic acid，1 mM EDTA，pH 8.3（准备方法：将4.84 g Tris，1.86 g acetic acid，0.37 g EDTA溶解在800 mL去离子水中，使用NaOH或HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）5. Phosphate缓冲液：- 100 mM sodium phosphate，pH 7.0（准备方法：根据目标pH值使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调节溶液pH至7.0，并将溶液体积加至1 L）以上只是一些常用的试剂和缓冲液的配方，并不是全部。

常用缓冲液的配制方法1.甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05M）X ml 0.2M甘氨酸 +Y ml 0.2M盐酸再加水稀释至200mlpH X/ml Y/ml pH X/ml Y/ml2.2 50 44.03.0 50 11.42.4 50 32.43.2 50 8.22.6 50 24.23.4 50 6.42.8 50 16.83.6 50 5.0甘氨酸分子量＝75.07 0.2M甘氨酸溶液含15.01g/L2.邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05M）X ml 0.2M邻苯二甲酸氢钾+Y ml 0.2M盐酸再加水稀释至200mlpH X Y pH X Y2.2 5 4.6703.2 5 1.4702.4 53.960 3.4 5 0.9902.6 53.295 3.6 5 0.5972.8 5 2.6423.8 5 0.2633.0 5 2.032邻苯二甲酸氢钾分子量＝2.4.23 0.2M邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L3.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液pH 0.2M Na2HPO4/ml 0.1M柠檬酸/ml pH 0.2M Na2HPO4/ml 0.1M柠檬酸/ml2.2 0.40 19.6 5.2 10.72 9.282.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.852.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.402.83.17 16.83 5.8 12.09 7.913.04.11 15.896.0 12.637.373.24.94 15.066.2 13.22 6.783.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.153.6 6.44 13.56 6.6 14.555.453.8 7.10 12.90 6.8 15.454.554.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.534.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.614.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.834.6 9.35 10.65 7.6 18.73 1.274.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.855.0 10.30 9.70 8.0 19.45 0.55Na2HPO4分子量＝141.98 0.2M溶液含28.40g/LNa2HPO4·2H2O分子量＝178.05 0.2M溶液含35.61g/LC6H8O7·H2O分子量＝210.14 0.1M溶液含21.01g/L4.柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液pH 钠离子浓度/M 柠檬酸C6H8O7·H2O/g 氢氧化钠NaOH/g 浓盐酸HCl/ml 终体积/L2.2 0.20 210 84 160 103.1 0.20 210 83 116 103.3 0.20 210 83 106 104.3 0.20 210 83 45 105.3 0.35 245 144 68 105.8 0.45 285 186 105 106.5 0.38 266 156 126 10使用时可以每升中加入1g酚，若最后pH有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。

常用缓冲液的配制方法1.甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05M）X ml 0.2M甘氨酸+Y ml 0.2M盐酸再加水稀释至200mlpH X/ml Y/ml pH X/ml Y/ml2.2 50 44.03.0 50 11.42.4 50 32.43.2 50 8.22.6 50 24.23.4 50 6.42.8 50 16.83.6 50 5.0甘氨酸分子量＝75.07 0.2M甘氨酸溶液含15.01g/L2.邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05M）X ml 0.2M邻苯二甲酸氢钾+Y ml 0.2M盐酸再加水稀释至200mlpH X Y pH X Y2.2 5 4.6703.2 5 1.4702.4 53.960 3.4 5 0.9902.6 53.295 3.6 5 0.5972.8 5 2.6423.8 5 0.2633.0 5 2.032邻苯二甲酸氢钾分子量＝2.4.23 0.2M邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85g/L3.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液pH 0.2M Na2HPO4/ml 0.1M柠檬酸/ml pH 0.2M Na2HPO4/ml 0.1M柠檬酸/ml 2.2 0.40 19.6 5.2 10.72 9.282.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.852.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.402.83.17 16.83 5.8 12.09 7.913.04.11 15.896.0 12.637.373.24.94 15.066.2 13.22 6.783.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.153.6 6.44 13.56 6.6 14.555.453.8 7.10 12.90 6.8 15.454.554.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.534.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.614.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.834.6 9.35 10.65 7.6 18.73 1.274.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.855.0 10.30 9.70 8.0 19.45 0.55Na2HPO4分子量＝141.98 0.2M溶液含28.40g/LNa2HPO4·2H2O分子量＝178.05 0.2M溶液含35.61g/LC6H8O7·H2O分子量＝210.14 0.1M溶液含21.01g/L4.柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液pH 钠离子浓度/M 柠檬酸C6H8O7·H2O/g 氢氧化钠NaOH/g 浓盐酸HCl/ml 终体积/L2.2 0.20 210 84 160 103.1 0.20 210 83 116 103.3 0.20 210 83 106 104.3 0.20 210 83 45 105.3 0.35 245 144 68 105.8 0.45 285 186 105 106.5 0.38 266 156 126 10使用时可以每升中加入1g酚，若最后pH有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。

常见缓冲液的配制附溶液配制方法：pH7.2 0.01mol/L PBSKH2PO40.38gNa2HPO4 1.02g(或Na2HPO4·12H2O2.58g) NaCl8.0g蒸馏水加至1000mLpH7.4 PBS/TNaCl8.0gKH2PO40.2gNa2HPO4·12H2O(或Na2HPO4·7H2O) 2.89g（或2.16g）KCl0.2g吐温200.5mL蒸馏水加至1000mLpH9.6碳酸盐缓冲液Na2CO3 1.59gNaHCO3 2.93g蒸馏水加至1000mL0.075mol/L氯化钾低渗液氯化钾0.559g，蒸馏水100ml甲醇冰醋酸（3:1）固定液甲醇3份冰醋（乙）酸1份姬姆萨染液Giemsa原液1ml1/15mol/L磷酸缓冲液（pH6.8或7.4）10ml2.3% 柠檬酸钠溶液柠檬酸钠（Na C H O ·2H O）2.3g蒸馏水100ml明胶显影液明胶粉0.2g三蒸水10ml甲酸0.1ml1% 醋酸冰醋（乙）酸1ml蒸馏水99mlH"o"33342-若丹明123染液H"o"33342（Hoechst 33342）0.25μg 若丹明123（Rhodamine 123）1.0μg PBS 1mlDPH贮备液DPH（1.6-Dipnenyl-1,3, 5hexatriene, 4.65mg）四氢呋喃10mlDPH工作液(2×10-6mol/L)DPH贮备液0.1mlPBS 100mlFDA贮备液二醋酸脂荧光素(Fluorescein diacetate,FDA) 5.0mg丙酮1mlFDA工作液FDA贮备液0.1mlPBS 100mlM-缓冲液（pH7.2）咪唑50mmol/L 3.404g氯化钾50mmol/L 3.7g氯化镁（MgCl ·6H O）0.5mol/L 101.65mgEGTA(乙二醇双（a-氨基乙基）醚四乙酸) 1mmol/L 380.35mg EDTA(乙二胺四乙酸) 0.1mmol/L 29.22mg疏基乙醇1mmol 0.07ml4mol/L甘油292ml蒸馏水加至1000ml1% TritonX-100液Triton X-100（聚乙二醇辛基苯基醚）1mlM-缓冲液99ml3% 戊二醛液戊二醛25% 3mlPBS 液（pH7.2）97ml0.2% 考马斯亮蓝R250染液考马斯亮蓝R250（Coomassie brilliant blue R250）0.2g 甲醇46.5ml冰醋（乙）酸7ml蒸馏水46.5ml生理盐水(0.85%氯化钠)氯化钠8.5g三蒸水1000ml0.25mol/L蔗糖水溶液（含0.003mol/L氯华钙）蔗糖85.5g无水氯华钙0.33g蒸馏水1000ml0.17mol/L氯化铵液氯化铵4.574g蒸馏水500ml0.17mol/L硝酸钠液硝酸钠7.224g 蒸馏水500ml0.12mol/L硫酸钠液硫酸钠（Na SO ·H O）19.333g蒸馏水500ml0.12mol/L草酸铵液草酸铵（（NH ）C o ·H O）8.527g蒸馏水500ml0.17mol/L醋酸铵液醋酸铵6.552g蒸馏水500ml0.32mol/L葡萄糖液葡萄糖28.83g蒸馏水500ml0.32mol/L甘油液甘油（C H (OH) ·1.26g/ml) 11.7ml蒸馏水500ml0.32mol/L乙醇液无水乙醇9.33ml蒸馏水500ml0.32mol/L丙醇液正丙醇（比重0.803）11.976ml蒸馏水500ml化学名：2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid 中文名：羟乙基哌嗪乙硫磺酸分子式：C8H18N2O4SHEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力。

各种缓冲液配制方法缓冲液是一种用于调节溶液的pH值的溶液，常用于实验室中的生物化学和分子生物学实验中。

根据所需的pH范围和实验目的，可以使用不同的缓冲液配制方法。

以下是一些常见的缓冲液配制方法：1.磷酸盐缓冲液（PBS）磷酸盐缓冲液是一种常见的生物学实验中使用的缓冲液。

它的制备方法如下：-取一个容器，加入8克氯化钠（NaCl），0.2克磷酸二氢钠（NaH2PO4），和1.44克磷酸氢二钠（Na2HPO4）。

-加入适量的去离子水，搅拌溶解。

-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。

-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。

2. Tris缓冲液Tris缓冲液适用于pH 7-9范围内的实验。

制备方法如下：- 取一个容器，加入121.14克Tris（羟甲基氨基甲烷）。

-加入适量的去离子水，搅拌溶解。

-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。

-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。

3.醋酸盐缓冲液醋酸盐缓冲液适用于pH3-5范围内的实验。

制备方法如下：-取一个容器，加入20毫升醋酸钠三水合物（NaC2H3O2·3H2O）。

-加入6毫升醋酸。

-加入适量的去离子水，搅拌溶解。

-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。

-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。

4.磷酸缓冲液磷酸缓冲液适用于pH2-8范围内的实验。

制备方法如下：-取一个容器，加入0.126克磷酸二氢钾（KH2PO4）。

-加入0.680克磷酸二氢钠（Na2HPO4）。

-加入适量的去离子水，搅拌溶解。

-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。

-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。

5.碳酸氢盐缓冲液（HEPES缓冲液）HEPES缓冲液适用于pH6-8范围内的实验。

-取一个容器，加入10克HEPES。

-加入适量的去离子水，搅拌溶解。

-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。

-用去离子水补足体积至1升，并用1升体积瓶准确稀释至1升。

实验常用试剂缓冲液的配制方法实验室中经常使用各种试剂和缓冲液进行实验。

下面我将介绍一些常用试剂和缓冲液的配制方法。

1.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液一般有三种类型的配方：PBS（磷酸盐缓冲盐溶液）、PBST（含Tween-20的磷酸盐缓冲盐溶液）和TBS（三氯甲烷缓冲盐溶液）。

配制PBS缓冲液：-加入适量的8.0g/L氯化钠和0.2g/L磷酸氢二钠到1L去离子水中。

-调整pH值至7.4，采用10M氢氧化钠（NaOH）或者盐酸（HCl）。

-用去离子水稀释至1xPBS。

配制PBST缓冲液：-配制1xPBS。

- 加入0.1%（v/v）Tween-20。

-混合均匀。

配制TBS缓冲液：-加入2.42g/L三氯甲烷到1L去离子水中。

-加入20g/L三甲基氯化胺到溶液中。

-调整pH值至8.0，采用盐酸（HCl）。

-用去离子水稀释至1xTBS。

2.毛细管电泳缓冲液毛细管电泳缓冲液的配制方法取决于电泳类型，一般包括凝胶和毛细管电泳。

配制凝胶电泳缓冲液：-加入8g/L琼脂糖和0.4g/L硼酸到1L去离子水中。

-用热板搅拌器加热，搅拌至溶解。

-冷却至室温后，调整pH值至8.3，采用盐酸（HCl）或氢氧化钠（NaOH）。

-用去离子水稀释至所需浓度。

配制毛细管电泳缓冲液：-加入10mM氢氧化钠（NaOH）和1mM二硼酸氢钠到500mL去离子水中。

-调整pH值至9.2，采用盐酸（HCl）。

-加入1mM十二烷基硫酸钠。

-用去离子水稀释至所需浓度。

3.蛋白质含量测定蛋白质含量测定一般采用BCA法、Lowry法或Bradford法。

BCA法配制试剂：-在15mL玻璃试管中加入BCA试剂（提取液A）。

-加入0.1M硫酸（提取液B）。

-混合提取液A和提取液B，即得到试剂。

Lowry法配制试剂：-加入白蛋白标准品和Na2CO3/NaOH缓冲液（A液）到250mL锥形瓶中。

-混合硫酸/磷酸/酒精试剂（B液）。

-将A液倒入B液中混合，待用。

Bradford法配制试剂：-加入试剂A到450mL去离子水中。

几种溶液的配制方法1、PBS:取ZLI-9061 PBS溶于1000ml的蒸馏水中，混匀，测pH 值应在7.2~7.4之间，若偏离此范围，请用0.1N的HCL 或NaOH调整。

2、TBS：2.1 Tris缓冲液配方：（0.5 M pH7.6）Tris（三羟甲基氨基甲烷）60.57g1N HCL 约420ml双蒸水加至1000mlTris缓冲液配制方法：先以少量双蒸水（300~500ml）溶解Tris，加入HCl后，用HCl（1N）或NaOH（1N）将pH调至7.6，最后双蒸水加至1000ml。

此液为储备液，4℃冰箱中保存。

2.2 TBS配方：Tris-HCI缓冲液（0.5M pH7.6）100mlNaCI 8.5~9g (0.15mol/L)双蒸水加至1000mlTBS配制方法：先以少量双蒸水溶解NaCl，再加入Tris-HCl 缓冲液，最后加双蒸水至1000ml，充分摇匀。

3、枸橼酸盐缓冲液（Citrat e buffer）：3.1 储存液：A. 0.1M枸橼酸溶液：称取21.01g枸橼酸（C6H8O7·H20）溶于1000ml蒸馏水中。

B. 0.1M枸橼酸钠溶液：称取29.41g枸橼酸钠（C6H5Na3O7·2H20）溶于1000ml蒸馏水中。

3.2 工作液：取9ml A液和41ml B液加入450ml蒸馏水中，溶液pH值应为6.0±0.14、胰酶（Trypsin）：4.1 ZLI-9011胰蛋白酶消化液：常用浓度为0.125%，即使用前将一滴试剂1胰酶溶液和三滴试剂2胰酶稀释液均匀混合（1:3稀释），则可直接滴加使用。

胰酶的最终浓度可以根据使用者的要求进行调整，浓度范围可以从0.05%（1:10稀释）至0.25%（1:1稀释）。

4.2 ZLI-9010胰蛋白酶：取0.05g或0.1g胰蛋白酶加入到100ml 0.05%或0.1% pH7.8的无水氯化钙水溶液中，溶解即可。

各种缓冲液的配制方法
缓冲液是指在化学实验或生物学实验中，为了稳定反应介质，保持反应环境不变，在
浓度比较小的溶液中加入一定量的弱酸、弱碱、盐类或其他缓冲剂来维持溶液的酸碱度，
以达到保持反应的稳定性和准确性的目的。

因此，缓冲液在各类实验技术中都发挥着非常
重要的作用。

以下是各种缓冲液的配制方法。

一、PBS缓冲液（磷酸盐缓冲盐水）
1、配制PBS缓冲液，准备好以下试剂：
10×PBS缓冲液：NaCl 80 g，KCl 2 g，Na2HPO4 14.4 g，KH2PO4 2.4 g。

用蒸馏水调节至1 L。

2、按照以下比例制备：
0.5×PBS缓冲液：10×PBS 50 mL，蒸馏水450 mL，混合搅拌均匀即可。

二、TE缓冲液
Tris-HCl pH8.0 10 mM，EDTA pH8.0 1 mM。

Tris-HCl pH7.4，Tris-HCl pH8.0，Tris-Cl pH8.0，Tris-HCl pH8.3，Tris-HCl pH8.5，Tris-HCl pH8.8，Tris-HCl pH9.5
Tris-HCl pH8.5：Tris 7.4 g，NaCl 8.8 g，HCl 2 mL，蒸馏水至1 L。

MES 20 mM，NaOH 0.5 M，NaCl 100 mM。

七、HEPES缓冲液
HEPES 1 M，NaOH。

HEPES缓冲液：HEPES 1 M约5 mL，NaOH 2 M溶液若干，蒸馏水至100 mL。

常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）邻苯二甲酸氢钾分子量= 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液24Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。

C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液① 使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH 值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。

5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L ）6872柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量294.12，0.1mol/L 溶液为29.41克/升。

6．乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L ）Na 2Ac·3H 2O 分子量 = 136.09，0.2 mol/L 溶液为27.22克/升。

7．磷酸盐缓冲液242Na 2HPO 4·12H 2O 分子量 = 358.22，0.2 mol/L 溶液为71.64克/升。

Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 156.03，0.2 mol/L 溶液为31.21克/升。

（2）磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液（1/15 mol/L ）242KH 2PO 4分子量 = 136.09，1/15M 溶液为9.078克/升。

8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M ）9．巴比妥钠-盐酸缓冲液（18℃）10．Tris–盐酸缓冲液（0.05M ，25℃）50毫升0.1M 三羟甲基氨基甲烷（Tris ）溶液与X 毫升0.1N 盐酸混匀后，加水稀释至100三羟甲基氨基甲烷（Tris ）HOCH2 CH2OH CHOCH2 NH2分子量=121.14;0. 1M 溶液为12.114克/升。

各种缓冲液配方范文缓冲液是一种在化学、生物学和其他实验室应用中常用的溶液，用于稳定试剂的pH值，以保持实验条件的稳定性。

下面列举了几种常见的缓冲液配方。

1. Tris缓冲液Tris缓冲液是一种非常常见的缓冲液，常用于酶反应和核酸电泳。

它的配方如下：- 200 mM Tris-相应量的盐酸（pH值调节）2.PBS缓冲液PBS缓冲液是一种用于细胞培养和免疫试剂的常用缓冲液。

它的配方参考如下：-137mMNaCl-2.7mMKCl-10mMNa2HPO4-2mMKH2PO4-(pH值调节)3.HEPES缓冲液HEPES缓冲液是一种用于细胞培养和生化实验的常用缓冲液。

它的配方如下：-25mMHEPES-115mMNaCl-5mMKCl-1mMMgCl2-1mMCaCl2-(pH值调节)4.MES缓冲液MES缓冲液是一种用于生化实验和电泳的常用缓冲液。

它的配方如下：-50mMMES- 50 mM Tris-1mMEDTA-相应量的盐酸（pH值调节）5.ACES缓冲液ACES缓冲液是一种用于生化实验和细胞培养的常用缓冲液。

它的配方如下：-10mMACES- 5 mM Tris-10mMCaCl2-(pH值调节)6.TE缓冲液TE缓冲液是一种用于DNA和RNA实验的常用缓冲液。

它的配方如下：- 10 mM Tris-1mMEDTA-(pH值调节)以上列举的是一些常见的缓冲液配方，具体的配方和浓度可能会因实验目的和样品类型而有所不同。

在制备缓冲液时，应该按照实验要求仔细调节pH值，并使用高质量的试剂和纯水来制备缓冲液。

此外，一些缓冲液可能需要在特定的温度下保存或使用，因此在实验之前要对缓冲液的相关要求进行仔细了解和准备。

一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。

分装成小份贮存于-20℃。

10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。

10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。

不要涡旋混合。

加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。

1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。

或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。

8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。

1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。

3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。

0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。

或称取186.1g的Na2EDTA•2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。

1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH （6.8-8.2），然后用水定容至100ml。

1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。

最全常用缓冲液配方及缓冲范围缓冲液是一种能够帮助控制溶液酸碱性的化学物质，它可以通过接受或释放氢离子来防止溶液的pH值发生剧烈变化。

缓冲液在许多科学实验、生物学研究、工业生产以及医药领域中都有广泛应用。

常用的缓冲液配方包括以下几种：1.乙二胺四乙酸（EDTA）缓冲液：EDTA缓冲液是一种用来稳定金属离子浓度、防止金属离子的沉淀和垢痕形成的缓冲液。

其配方如下：-0.1MEDTA（乙二胺四乙酸）溶液10mL- 0.2 M Tris-HCl缓冲液（pH 8.0） 90 mL-蒸馏水900mL2.乙醇胺缓冲液：乙醇胺缓冲液通常用于DNA或RNA的电泳和杂交实验中。

其配方如下：-1M乙醇胺9mL-0.5MEDTA1mL-蒸馏水90mL将乙醇胺缓冲液通过添加适量的盐酸来调节pH值至所需的范围。

3.乙二醇缓冲液：乙二醇缓冲液常用于蛋白质的纯化和储存过程中。

其配方如下：-0.2M乙二醇10mL- 0.1 M Tris-HCl 缓冲液（pH 7.0） 90 mL按需添加其他添加剂如蛋白酶抑制剂或抗菌剂。

4.磷酸盐缓冲液：磷酸盐缓冲液是一种常用的生物学缓冲液，适用于酶反应、DNA/RNA杂交等实验。

常用的三种pH值的配方如下：-pH5.8：0.05MNa2HPO4溶液和0.05MNaH2PO4溶液的体积比为1:4-pH7.0：0.1MNa2HPO4溶液和0.1MNaH2PO4溶液的体积比为1:9-pH8.0：0.2MNa2HPO4溶液和0.2MNaH2PO4溶液的体积比为1:95.PBS缓冲液：PBS缓冲液是一种常用的生物学缓冲液，适用于细胞培养、免疫染色、蛋白质浸泡实验等。

其配方如下：-8gNaCl-0.2gKCl-1.44gNa2HPO4-0.24gKH2PO4-蒸馏水1L将以上成分溶解在蒸馏水中，调节pH至7.4这些缓冲液可以满足大多数实验和应用的需求，每种缓冲液的最佳使用范围可能略有不同。

在实验前应该仔细阅读相关文献，了解所使用缓冲液的特点和最适宜的pH范围。

常用缓冲溶液的配制缓冲溶液是一种可以稳定溶液pH值的溶液，广泛应用于化学、生物学、药学等领域。

在实验研究和工业生产中，常用的缓冲溶液有磷酸盐缓冲溶液、醋酸缓冲溶液、碳酸氢盐缓冲溶液等。

本文将介绍这几种常用缓冲溶液的配制方法和相关注意事项。

一、磷酸盐缓冲溶液的配制磷酸盐缓冲溶液可通过调节磷酸二氢盐和磷酸氢二盐的比例来控制溶液的pH值。

以下是磷酸盐缓冲溶液的配制方法：1. 磷酸盐缓冲液的配方：- 磷酸二氢盐（KH2PO4）：用量根据所需pH值确定。

- 磷酸氢二盐（Na2HPO4）：用量根据所需pH值确定。

- 蒸馏水：适量。

2. 步骤：- 根据所需pH值选择合适的磷酸二氢盐和磷酸氢二盐的比例。

- 将磷酸二氢盐和磷酸氢二盐称量并溶解在适量的蒸馏水中。

- 将溶液pH值调整至所需值，可以使用pH计进行准确调节。

二、醋酸缓冲溶液的配制醋酸缓冲溶液是一种酸性缓冲溶液，可以维持酸性环境下的稳定pH值。

以下是醋酸缓冲溶液的配制方法：1. 醋酸缓冲液的配方：- 醋酸（CH3COOH）：用量根据所需pH值确定。

- 乙酸钠（CH3COONa）：用量根据所需pH值确定。

- 蒸馏水：适量。

2. 步骤：- 根据所需pH值选择合适的醋酸和乙酸钠的比例。

- 将醋酸和乙酸钠称量并溶解在适量的蒸馏水中。

- 将溶液pH值调整至所需值，可以使用pH计进行准确调节。

三、碳酸氢盐缓冲溶液的配制碳酸氢盐缓冲溶液可用于调节中性或弱碱性环境下的溶液pH值。

以下是碳酸氢盐缓冲溶液的配制方法：1. 碳酸氢盐缓冲液的配方：- 碳酸氢钠（NaHCO3）：用量根据所需pH值确定。

- 碳酸钠（Na2CO3）：用量根据所需pH值确定。

- 蒸馏水：适量。

2. 步骤：- 根据所需pH值选择合适的碳酸氢钠和碳酸钠的比例。

- 将碳酸氢钠和碳酸钠称量并溶解在适量的蒸馏水中。

- 将溶液pH值调整至所需值，可以使用pH计进行准确调节。

注意事项：1. 在配制缓冲溶液过程中，应严格按照所需pH值确定各种缓冲盐的比例。

53种常见缓冲液配制方法（总结）
第一类：氢氧化物缓冲液
1、氢氧化硫酸缓冲液：添加一定量的硫酸钾到相当量的硝酸钾中，按需可加入一定量的氢氧化钠，并使氢离子浓度保持在 0.05~0.10mol / L，即可得到pH为2.5~3.0的硫酸缓冲液，其综合离子强度约为 0.150 mol/L。

2、硝酸缓冲液：将一定量的硝酸钾溶解于水中，并在此基础上添加一定量的氢氧化钠，使氢离子浓度保持在 0.1~0.2mol / L，即可得到pH 约为4.7的硝酸缓冲液，其综合离子约为 0.10~0.15 mol/L。

3、三甲基磺酰胺缓冲液：将一定量的三甲基磺酰胺溶解于水中，并在此基础上添加一定量的氢氧化钠，使得氢离子浓度保持在
0.05~0.10mol / L，即可得到pH为7.2~7.5的三甲基磺酰胺缓冲液，其综合离子约为 0.10 mol/L。

第二类：基态缓冲液
1、乙醇缓冲液：将一定量的乙醇溶解于水中，并在此基础上添加一定量的氢氧化钠，使得氢离子浓度保持在 0.1~0.2mol / L，即可得到pH 约为6.3的乙醇缓冲液，其综合离子约为 0.10~0.15 mol/L。

2、氢氟酸缓冲液：将一定量的氢氟酸溶解于水中，并在此基础上添加一定量的氢氧化钠，使得氢离子浓度保持在 0.05~0.08mol / L，即可得到pH约为2.2的氢氟酸缓冲液，其综合离子约为 0.06~0.10 mol/L。

实验室常用缓冲液配置方案1)1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：1 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

值。

4. 将溶液定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2)10×TE Buffer (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度：100 mM Tris-HCl, 10 mM EDTA配制量：1 L配制方法：2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。

3. 将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。

4. 室温保存。

3)1.5 M Tris-HCl (pH8.8)组份浓度：1.5 M Tris-HCl配制量：1 L配制方法：1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。

4. 将溶液定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

4)3 M 醋酸钠(pH5.2)组份浓度：3M 醋酸钠配制量：100ml配制方法：1.称量40.8g NaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中，加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至5.23.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压灭菌后，室温保存。

5)PBS Buffer组份浓度：137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4配制量：1 L配制方法：2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

标准缓冲液的配制及常用数据一、标准缓冲液pH值与温度对照表温度℃四草酸氢钾0.05M邻苯二甲酸氢钾0.05M混合磷酸盐0.025M硼砂0.01M5 1.67 4.00 6.95 9.3910 1.67 4.00 6.02 9.3315 1.67 4.00 6.90 9.2820 1.68 4.00 6.88 9.2325 1.68 4.00 6.86 9.1830 1.68 4.01 6.85 9.1435 1.69 4.02 6.84 9.11二、常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升pH X Y pH X Y2.0 2.4 2.6 2.8 5050505044.032.424.216.83.03.23.43.65050505011.48.26.45.0甘氨酸分子量= 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。

2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾+ 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升pH(20℃) X Y pH(20℃) X Y2.2 2.4 2.62.83.0 555554.0703.9603.2952.6422.0223.23.43.63.855551.4700.9900.5970.263邻苯二甲酸氢钾分子量= 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液pH 0.2mol/LNa2HPO4（毫升）0.1mol/L柠檬酸（毫升）pH 0.2mol/LNa2HPO4（毫升）0.1mol/L柠檬酸（毫升）2.2 2.4 2.62.83.0 3.2 3.4 3.63.84.0 4.2 4.4 4.64.85.0 0.401.242.183.174.114.945.706.447.107.718.288.829.359.8610.3010.6018.7617.8216.8315.8915.0614.3013.5612.9012.2911.7211.1810.6510.149.705.25.45.65.86.06.26.46.66.87.07.27.47.67.88.010.7211.1511.6012.0912.6313.2213.8514.5515.4516.4717.3918.1718.7319.1519.459.288.858.407.917.376.786.155.454.553.532.611.831.270.850.55Na2HPO4分子量= 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。