Agilent1100高效液相色谱仪操作规程
操作说明：
1.开机前准备：
1.1仪器设备：Agilent 1200LC
● G1322A (在线脱气机)。
● G1311A (四元泵)。
● G1329A（标准型自动进样器）。
● G1316A（柱温箱）。
● G1315A（DAD检测器）。
●色谱柱
1.2溶剂准备：
●有机相必须是色谱级纯。
●水相必须是二次蒸馏水或用二级蒸馏水配置的缓冲盐溶液、
酸碱溶液。
●流动相使用前必须过0.45μm的微孔滤膜。有机相和水相微孔滤膜的选择参考下表。
2.基本操作步骤:
(一)、开机：
1、打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server程序（部分安装程序不需要运行Bootp）。
2、打开 1200 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击“仪器1 联机”图标，化学工作站自动与1200LC通讯，进入的工作站画面如下所示。
4、从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 点击“视图”
菜单中的“仪器实际值”，“在线光谱”，“化学工作站状态”，“系统视图”,“样品视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、打开冲洗阀。
7、点击“泵”图标，点击“设置泵…”选项，进入泵编辑画面。
8 、设流速：5ml/min，点击“确定”。
9、点击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中“启动”，点击“确定”，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。
10、点击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中“关闭”，点击“确定”关泵，关闭冲洗阀。
11、点击“泵”图标，点击“设置泵…选项”，设流速：例如1.0ml/min。
12、点击泵下面的瓶图标，如下图所示（以单元泵为例），输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积，点击“确定”。
13、点击“泵”图标，点击“泵辅助设定…”，设定“最流速梯度”，“最小冲程”，“压缩因子”，“主通道”。
（二）、数据采集方法编辑：
1、开始编辑完整方法：
●从“方法”菜单中选择“编辑完整方法…”项，如下图所示选中除“数据分析”外的三项，点击“确定”，进入下一画面。
2、方法信息：
●在“方法注释”中加入方法的信息（如：测试方法）。
●点击“确定”，进入下一画面。
3、泵参数设定：（以四元泵为例）
●在“流速”处输入流量,如1ml/min，在“溶剂 B”处输入
80.0,(A=100-B-C-D) ,也可“插入”一行“时间表” ,编辑梯度。在“压力限”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。
●点击“确定”，进入下一画面。
4、自动进样器参数设定:（以标准G1329A为例）
●选择合适的进样方式, 如图所示，进样体积 5.0ul ,洗瓶位置为6号。
“标准进样”----只能输入进样体积，此方式无洗针功能。
“洗针进样”----可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针。
“使用进样器程序”---可以点击“编辑”按钮进行进样程序编辑。
●“最优化”有“无”，“重叠进样周期”和“预取进样瓶”，可以根据实际情况选择。
●点击进“确定”，进入下一画面。
5、柱温箱参数设定:
●在“温度”下面的空白方框内输入所需温度,如：40度。并选中它,点击“更多>>”键,如图所示,选中“与左侧相同”，使柱温箱的温度左右一致。
●点击“确定”，进入下一画面。
6、检测器参数设定:
6.1、VWD检测器
●在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 在“峰宽 (响应时间)”下方点击下拉式箭头,选择合适的响应时间, 如>0.1min(2s)。
●在“时间表”中可以“插入”一行，输入随时间切换的波长，如1min，波长=300nm。点击“确定”，进入下一画面。
6.2、DWD检测器
7、在“运行时选项表”中选中“数据采集”，点击“确定”。
8、点击“方法”菜单，选中“方法另存为…”，输入一方法名，如“测试”，点击“确定”。
9、从菜单“视图”中选中“在线信号”,选中“信号窗口1”,然后点击“改变…”钮,将所要绘图的信号移到右边的框中,点击“确定”。(如同时检测二个信号,则重复此操作,选中“信号窗口2”。
单击“改变”键，即可弹出右侧的
“编辑信号图谱”窗口，进而选择
所需的谱图信号。
10、点击“确定” ,从“仪器”菜单选择“系统开启”。
（三）、序列的设置
1、从“序列”菜单中，打开“序列表…”，光标至于“行1”，单击“剪切”，去除“行1”，再单击“插入/批量输入向导”。
2、设置“操作”为“追加”，“开始位置”为“1”，“插入行数”为所
需的样品数，如“3”，“方法名称”为“测试”，“样品名称”为“排毒清脂片”，“进样次数”为“3”，“样品类型”为“样品”或“标准物质”“质控物质”，点击“确定”：
3、光标至于“行3”、单击“追加一行”，设置冲洗仪器和色谱柱的样品和方法，“方法名称”选择已经设置好的“水醇洗柱”。
4、单击“确定”，完成序列设置。
5、从“序列”菜单中，打开“序列参数”选项，如下图所示，输入操作者名称，如“安装工程师”；在“数据文件”中选择“手动”或“前缀/计数器”，单击“确定”，完成设置。
