孔雀石绿检测卡说明书——组织
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孔雀石绿免疫胶体金快速检测卡使用说明本产品用于快速检测水产品组织样品中的孔雀石绿残留,整个检测过程只需要40分钟左右,适用于各类企业及检测机构,本产品检测限如下表所示
1、检测原理:
孔雀石绿快速检测卡应用了竞争抑制免疫层析的原理,样品中的孔雀石绿在流动的过程中与胶体金标记的
特异性单克隆抗体结合,抑制了抗体和NC膜检测线(T)上孔雀石绿-蛋白偶联物的结合。如果样品中孔雀石
绿含量大于1ppb,检测线(T)不显颜色或者检测线(T)比质控线(C)浅两个色差以上(含两个),结果为阳
性;反之,检测线(T)显红色,结果为阴性。
需自备设备:
均质器;电子天平;称量勺;离心机;氮(空)气吹干仪;微量移液器。
3、样品处理:
组织样(虾要去掉头和壳后彻底清洗干净,鱼要去鳞后洗净)应当避光冷藏保存。
1.取切碎的一定量的组织样本,用均质器均质;
2.称取2g均质于15ml离心管中;
3.用微量移液器加入1.5mlMG提取剂1,然后加入4ml MG提取剂2和1管MG提取剂3于15ml离心管中。
4.剧烈振荡3min后,加入一管MG提取剂4,剧烈振荡1分钟后,室温下4000r/min离心5min;
5.用微量移液器移取3ml上清于15ml离心管中,用微量移液器加入1ml正己烷,上下颠倒6次,室温4000r/min离心1min,
用微量移液器移取离心管刻度1ml到3ml之间的液体(大约2ml)到新的5ml离心管中,再加入MG氧化剂瓶内的下层黄色液体0.1ml,混合均匀1分钟后,65℃加热条件下,用空气吹干;
6.用微量移液器向吹干的离心管中加入300ulMG复溶液,用微量移液器冲洗溶解试管内壁上残留物;静置2分钟;
7.吸取待检样品溶液100微升于金标微孔中,用小滴管吹打完全溶解孔内红色物质,等待反应5分钟。
4、使用步骤:
1. 在进行测试前先完整阅读使用说明书,使用前将试剂板和待检样本溶液恢复至室温(20℃~25℃);
2. 从原包装袋中取出试剂板,水平放置于观察者正面,如下图右侧所示(打开后请立即使用);
3. 吸取待检样品溶液60~80微升于加样孔中(滴管滴3滴),加样后开始计时;
4. 结果应在8~10分钟读取,其他时间判读无效。
5、结果判断
1、阴性(-):测试线(T线)显色比质控线(C线)显色深或一样深,表示样品中待检药物浓度低于检出限或不含待
检药物。
2、阳性(+):测试线(T线)显色比质控线(C线)显色浅,或T线显绿色,表示样品中待检药物浓度大于等于检出限,
T线相比C线越浅,表示样品中待检药物浓度越高。
3、无效:未出现C线,可能是操作不当或试剂板已失效。应再次阅读说明书,并用新的金标条重新测试。
6、注意事项
1. 检测过程必须20℃~25℃的通风条件;
2.检测时请佩戴手套;
3. 切勿食用配备的试剂;
4. 请勿使用过期的试剂板;
5. 若需检测标准品,请用本公司的MG复溶液;
6. 切勿重复使用配备的滴管,以免交叉污染。
【贮存条件】
4℃~30℃避光保存,切勿冷冻。
【有效期】12 个月。