银染步骤是1 固定10冰乙酸min。2 清洗双蒸水冲洗凝胶次每次1min。3 染色染色液1g硝酸银.5mL37甲醛1L双蒸水。现配染色30min。4 清洗迅速洗凝胶次。 5 显影30g 碳酸钠1.5mL37甲醛200uL 10mg/L硫代硫酸钠。显影至清晰带纹出现。成功银染的关键因素包括 1 用超纯水比如NANOpure或Milli-Q纯化或者是双蒸水作银染。2 用提供的碳酸钠或者ACS试剂级的碳酸钠。3 在染色后水清洗所用时间的长短很重要用不超过5-10秒的时间清洗胶然后放入显色溶液中一般在水里浸一下就好。 4 甲醛和硫代硫酸钠ul/1ml在使用前及时加入到显色液中。 5 在使用前及时配染色液。银染的方法种类很多目前有文献报道的就有100 多种。但是其准确的染色机制还不是特别的清楚。大致的原理是银离子在碱性pH 环境下被还原成金属银沉淀在蛋白质的表面上而显色。由于银染的灵敏度很高可染出胶上低于1 ng/蛋白质点故广泛的用在2D 凝胶分析上及极低蛋白含量测定的垂直凝胶中。这里介绍的是我们实验室成功运用的银染方法对关键操作及要求做了补充主要是用于垂直凝胶电泳中低丰度蛋白的检测如内源性GST-Pulldown、Co-IP 等实验中相互作用蛋白的研究银染操作规程实验目的检测聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质。实验原理在碱性条件下用甲醛将蛋白带上的硝酸银银离子还原成金属银以使银颗粒沉积在蛋白带上。染色的程度与蛋白中的一些特殊的基团有
关不含或者很少含半胱氨酸残基的蛋白质有时候呈负染。银染的详细机制还不是非常清楚。试剂乙醇、冰醋酸、乙酸钠、硫代硫酸钠、硝酸银、碳酸钠、甘氨酸或EDTA.Na2.2H2O、甲醛实验操作程序固定30min或者更长时间o 100ml 乙醇40 乙醇o 25ml冰醋酸10 冰醋酸o 加水到250ml 致敏30min o 75ml 乙醇30 乙醇o 17g 乙酸钠28.2g 三水乙酸钠o 0.5g硫代硫酸钠o 加水到终体积250ml 水洗3 x
10min 银染20min o 0.625g AgNO3 o 100 ul 37甲醛在使用前加入o 加水到终体积250ml 水洗2 x 1 min 注意把握时间水洗时间长显色速度慢点的颜色偏黄色显色视情况而定o 6.25 g Na2CO3 o 50 ul 37 甲醛在使用前加入o 加水到终体积250ml 终止10min o 3.65g EDTA.Na2.2H2O 或者1g 甘氨酸o 加水到终体积250ml 保存1 冰醋酸4 ℃注意事项1固定时间较长则加一步水洗30min以免胶太脆而破碎。2甲醛在使用前加入。3 最好多配制一份显色液第一次显色到溶液变混浊时换一份显色液显色到点清晰。 4 显色过程很快要注意把握时间避免染色过度。5银染液和显色液需要预冷。 6 所用器皿要很洁净不用手直接接触以免杂蛋白污染7 清洗用水尽量用高纯度去离子水蒸馏水更佳可以减少背景着色。
TCL各机芯软件升级操作流程及注意事项 第一节3DI98S机芯使用USB升级文件需要注意的地方 1、主程序： 命名必须为：V8-MSN98XX-LF1XXXX 如：3D机芯的为：V8-MSN9810-LF1V001 文件路径放在U盘的根目录下，选择功能设置-软件升级-USB升级系统会显示软件升级中，会将升级文件解压，放在U盘的Target文件夹下，然后自动重启，进行升级。 无屏升级方法：在生成了Target文件夹后就可以使用该文件夹进行无屏升级，方法是插上USB后，按住MEMU键上电，这个时候就会检测USB进行无屏升级。 需要注意的是：主程序是先解压，重启了以后才升级，如果当前的待机模式为开机待机的话需要先将机器开起来才能自动升级。 2、MBOOT程序： 命名必须为：MBoot.bin 文件放在U盘的根目录下，进入工厂的Service Menu-USB update-Mboot Update 用右键选择后进行升级，过程与主程序一样，会自动重启，正常开机后才升级。 需要注意的是：只有在发布的V8-MSN9810-LF2V005以后的MBOOT才能使用USB升级。 3、MEMC程序： V8-MSN9810-LF1V048版及其之前版本的主程序配合6m30软件(MEMC程序)通过USB升级时，6m30软件文件必须为命名为：MST.BIN文件放在U盘的根目录下，进入工厂的Service Menu-USB update-MEMC SW Update选择是后进行升级，过程中可能会出现花屏现象，升级完成后自动重启，这个是在重启前已经完成了升级。 针对D42P6100D/3DI98S/CM2的机器目前6M30升级(USB升级)时间大概3到5分钟，升级过程面板按键指示灯闪烁。升级完成后，系统自动重启。 V8-MSN9810-LF1V050版以后的主程序配合6m30软件通过USB升级时，6m30软件(MEMC 程序)文件名需要改为tcl_6m30rs.bin(以前名为MST.BIN)。 4、HDCP KEY程序 命名必须为：HDCP.KEY 文件放在U盘的根目录下，进入工厂的Service Menu-USB update-HDCP SW Update 选择是后进行升级，升级完成后自动重启。
DNA银染 一、银染试剂500ml/瓶(双蒸水稀释) 1、固定液：50ml乙醇 2、前处理液（敏化液）：5ml HNO3 3、染色液：0.5g 硝酸银（避光配制） 4、显色液：无水Na2CO3 12.5g 甲醛200ul 加水至500ml 5、终止液：50ml 冰醋酸 二、银染步骤（摇床设置52rpm左右） 1、准备好放有双蒸水的塑料盒，将电泳后的变性胶放入盒中在摇床上轻摇1min； 2、凝胶固定：倒掉盒中的水，加入100ml左右的固定液，摇床上缓缓摇动10min； 3、洗胶：弃固定液，用双蒸水洗2次，每次30S； 4、凝胶氧化：弃双蒸水，加入100ml左右前处理液氧化6min； 5、洗胶：弃前处理液，用双蒸水洗2次每次10S； 6、凝胶染色：弃双蒸水，加入100ml左右的染色液避光摇20min； 7、洗胶：弃染色液，用双蒸水洗1次10S； 8、凝胶显色：加入100ml显色液摇到看到清晰的条带为止； 9、终止：弃显色液，迅速加入终止液100ml左右，摇2-3min； 10、洗胶：弃终止液，用双蒸水洗2次每次1min。 三、变性聚丙酰胺凝胶的配制（两块、使用1.0BioRad胶板） 1.2%的凝胶可以跑微卫星，和基因组DNA 1、尿素：7.2g 2、30%聚丙酰胺，4.68ml 3、10×TBE，1.5ml (Tris碱108g；硼酸55g；EDTA 40ml 0.5mol/L,Ph=8.0；加水至1L) 4、30%AP，35ul 5、TEMED,4ul 四、下图：左为果蝇正常基因组DNA与损伤后基因组DNA；右为果蝇微卫星电泳 12h Treatment24h Treatment M CT 0 5 10 200 5 10 20 Protein银染 一、银染试剂500ml/瓶(双蒸水稀释) 1、固定液：200ml甲醇，50ml冰醋酸 2、前处理液（敏化液）：150ml 乙醇，34g醋酸钠，1g硫代硫酸钠（使用前加入） 3、染色液：1.25g 硝酸银（避光配制）
倒闸操作的步骤和注意事项 一、倒闸操作制度及有关规定 1、倒闸操作制度 倒闸操作是一项十分复杂、重要的工作。为了防止误操作事故的发生，保证电力系统的安全生产，经济运行，电气运行人员应严格遵守倒闸操作制度及有关方面的规定。 倒闸操作制度主要强调以下几个方面： （1）、操作指令的发受：属于系统调度管辖的设备，由系统 值班调度员发令操作，且一个操作指令只能由一个值班调度员下达，每次下达操作指令，只能给一个操作任务，只有变电所的副值班员以上的当班人员，才能接受调度的操作指令，同时，必须履行一定的发、受令程序。 （2）、倒闸操作票的填写：倒闸操作前，必须根据调度下达的命令票的要求，按安全规程、现场规程和典型操作票，将操作项目按先后顺序填写成倒闸操作票，按调度命令的项目和顺序逐项操作。 （3）、操作的监护：这是防止误操作事故发生的较后关卡，无论是简单操作或复杂操作，正常操作时都必须有合格的监护人进行监护。操作时，监护人应与操作人一起校对设
备名称和编号，并始终认真监视操作人的每一个动作，发现错误，立即纠正。 2、倒闸操作的有关规定 （1）倒闸操作至少有两人进行，一人操作，一人监护。监护人应由比操作人职务高一级的人员担任，一般可由副值班员操作，正值班员监护。较为复杂的操作由正值班员操作，值班长监护。特别复杂的操作，应由值班长操作，站长或技术负责人监护。 （2）、操作中发生疑问时，应立即停止操作，并向值班长或调度员询问清楚，不得擅自更改操作顺序和内容。 （3）操作中一定要按规定，使用合格的安全用具（如验电器、绝缘棒等），操作人员应穿工作服、绝缘鞋（雨天穿绝缘靴），在高压配电装置上操作时，应戴安全帽。 （4）雷雨时禁止进行倒闸操作。 （5）操作时，操作人员一定要集中精力，严禁边操作边闲谈或做与操作无关的事，非参与操作的其它值班人员，应加强监护，密切注视设备运行情况，做好事故预想，必要时提醒操作人员。 （6）、为避免误操作的发生，除紧急情况及事故处理外，交接班时一般不要安排倒闸操作，条件允许时，重要的操作应尽可能安排在负荷低谷时进行，以减少误操作时对电网的影响。
常用的蛋白质染色试剂分为已考马斯亮蓝为代表的有机试剂染色、银染、荧光染色及同位素显色。其中考马斯亮蓝染色法的应用较为广泛，现将其与其他的蛋白质染色方法（主要是银染法）作一比较，帮助大家更好地去选择合适的蛋白质染色方法。 蛋白质的染色常用的有4类：有机试剂染色、银染、荧光染色及同位素显色。其中有机试剂染色以考马斯亮蓝染色法（Coomasie brilliant blue，CBB）为代表，在蛋白质分析中常用，但对低丰度蛋白质的显现较差;银染灵敏度虽高，却常与质谱不兼容;荧光染色以SYPRO试剂为主，蛋白质检测灵敏度高，能兼容质谱，但由于需要配备特殊的检测仪器及试剂的昂贵，未被作为常规方法使用;而同位素显色则存在安全性和操作局限性等问题。因此，筛选简便、节约、检测灵敏度高、质谱兼容的蛋白质着色法是蛋白质组研究所需。由于考马斯亮蓝染色法的广泛运用，近年来就考马斯亮蓝染色法在提高其灵敏性方面研究者们作了许多改进，方法众多，评价不一。 我们在作双向凝胶电泳时，将常用的几种考马斯亮蓝染色法及银染进行了比较，并就其染色影响因素作出分析。 试剂 固相pH梯度干胶条（IPG strip pH3-10NL，IPG strip pH5-8，17cm）、urea、CHAPS、TBP、DTT、Bio-Lyte 3/10 Ampholyte、IAM、SDS、Tris、丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺、甘氨酸、CBB-G250均为BIO-RAD公司产品。硫酸铵及磷酸均购自成都科龙试剂厂。AgNO3为Sigma公司出品。Protein molecular weight marker #SW0431为MBI公司出品。甲醛、Na2S2O3与Na2CO3分别为成都天华科技股份有限公司、重庆北碚化学试剂厂和天津市塘沽鹏达化工厂产品。 仪器 IPGphor等电聚焦仪、proTEANⅡ垂直电泳仪、Power PAC1000电泳仪、加样溶胀槽、GS-800 Calibrated Densitometer扫描仪、PDQuest凝胶图像分析软件均为BIO-RAD公司产品。 细胞总蛋白质的提取 取4份经常规培养的急性早幼粒白血病细胞株（NB4）1×107细胞各重悬于350 μl蛋白质裂解缓冲液中（8mol/L Urea，2g/L CHAPS，2mmol/L TBP，2ml/L Carrier Ampholyte，痕量溴酚兰），置冰浴中超声裂解，静置30分钟，15500×g离心30分钟，取上清，进行蛋白质定量。 单向定量电泳 取蛋白质分子量标准物，第一次按1∶2稀释后，以后按1∶3倍比例逐级稀释，经4级稀释后，取15μl 上样液上样，β-半乳糖苷酶上样量依次分别为1μg、0.24μg、0.062μg、0.0156μg、0.004μg。作12g/L SDS-聚丙烯酰胺凝胶单向电泳，同时电泳4份胶，显色以确定染色灵敏度。 双向电泳 取300μl样品液沿水化盘中槽的边缘自左向右线性加入，将17cm IPG胶条胶面朝下置于槽中，静置45 分钟后覆盖矿物油，在20℃溶胀11～16小时。溶胀后的胶条置于等电聚焦盘中，在Protean IEF Cell中进行等电聚焦，温度设置为20℃，电压模式设置为：快速升压，250 V，0.5小时;500 V，0.5小时;10000
升级操作说明 本文档中的升级包名称和截图示例仅供参考，请登录中兴通讯终端官方网站（）下载对应手机的软件版本升级包程序进行升级操作。 一.信息备份还原和注意事项 注意：在备份过程中请不要移除内存卡，也不要中途取消备份过程，以免造成数据丢失。 1.升级前请使用“一键备份”（工具-->手机助手-->一键备份）功能将手机中的信息 进行备份（手机需插入内存卡并保持足够的剩余存储空间），如下图所示： 2.点击“手动备份”菜单，按照界面提示进行电话本、短信、通话记录的备份。
3.升级完成后使用“还原数据”功能，将已备份的信息完成恢复操作。 二．升级操作步骤和注意事项 注意： （1）升级前请取出SIM卡； （2）请勿修改升级包的文件名和扩展名，保持“”不变； （3）保证电池电量充足，若电池电量不足请先充电。禁止一边充电，一边执行升级操作，避免造成升级失败； （4）升级过程中，请勿在手机上做其他操作。
1.将官网下载的升级包解压缩，提取出“”文件并放置在内存卡根目录下。 2.点击如下路径：工具-->设置-->高级设置-->升级-->存储卡升级-->内存卡如下截图红色方框所示。
3.点击确定和立即更新，手机开始升级。约2分钟后升级完成手机自动重启。
注意： （5）若手机无法开机，可以按照如下操作尝试恢复手机。 1.将官网下载的升级包解压缩，提取出“”文件并放置在内存卡根目录下。 2.在关机状态下，一直长按音量上键再按开机键进入Recovery模式。 3.在recovery模式界面，请按音量键选择“apply update from sdcard”菜单项，并按开关键确定。
银染操作步骤 1. 固定： 电泳结束后，取凝胶放入约100ml固定液中，在摇床上室温摇动20分钟，摇动速度为 60-70rpm。固定40分钟以上甚至过夜可以进一步降低背景。 固定液的配制：依次加入50ml乙醇、10ml乙酸和40ml MilliQ级纯水或双蒸水，混匀后即成100ml固定液，可大量配制室温存放。 2. 30%乙醇洗涤： 弃固定液，加入100ml 30%乙醇，在摇床上室温摇动10分钟，摇动速度为60-70rpm。30%乙醇的配制：70ml MilliQ级纯水或双蒸水中加入30ml乙醇，混匀后即成100ml 30%乙醇。 3. 水洗涤：（洗2次） 弃30%乙醇，加入200ml MilliQ级纯水或双蒸水，在摇床上室温摇动10分钟，摇动速度为60-70rpm。 4. 增敏：（辅染）现配现用 弃水，加入100ml银染增敏液(1X)，在摇床上室温摇动2分钟，摇动速度为60-70rpm。银染增敏液(1X)的配制：99ml MilliQ级纯水或双蒸水中加入1ml银染增敏液(100X)，混匀后即为银染增敏液(1X)。银染增敏液(1X)配制后需在2小时内使用。 银染增敏液(100X)的配制：即2.8%硫代硫酸钠溶液，需用黑袋包裹避光保存。 5. 水洗涤(共2次)： 弃原有溶液，加入200ml MilliQ级纯水或双蒸水，在摇床上室温摇动1分钟，摇动速度为60-70rpm。 弃水，再加入200ml MilliQ级纯水或双蒸水，在摇床上室温摇动1分钟，摇动速度为 60-70rpm。 6. 银染： 弃水，加入100ml银溶液(1X)，在摇床上室温摇动10分钟，摇动速度为60-70rpm。 银溶液(1X)的配制：99ml MilliQ级纯水或双蒸水中加入1ml银溶液(100X)，混匀后即为银溶液(1X)。银溶液(1X)配制后需在2小时内使用，最好是现配现用。 银溶液（100 X）的配制：称取5g硝酸银，加水溶解并稀释至500ml，摇匀即得1%的硝酸银溶液，需用黑袋包裹避光保存。 7. 水洗涤： 弃原有溶液，加入100ml MilliQ级纯水或双蒸水，在摇床上室温摇动1-1.5分钟，摇动速度
核仁组成区嗜银蛋白染色液(AgNOR Stain) 简介: 核仁组成区(NORs)是染色体上的一个编码核糖体RNA(rRNA)的片段，存在于DNA 特异性环上，凸向核仁。硝酸银染色法可确定组织切片上的核仁组成区，可显示与NORs 有关的酸性蛋白。然而，这些银染色NOR 相关蛋白(AgNOR)位点仅代表在每个核仁中的部分核仁组成区，并非全部。在电镜下，核仁组成区为在电子致密区中的境界不清的浅染区域。在石蜡切片上，在核仁中见到的每一个点状反应颗粒有可能代表多个AgNOR 位点，这是因为正常或两性细胞核仁AgNOR 易紧密聚集，所以银染色后，一个点状颗粒实际上是多个AgNOR 的聚集。 核仁组成区嗜银蛋白染色主要特点是操作简便、批量染色的较为经济，AgNOR 位点的数量增加与细胞增殖性增加有关，对于良恶性肿瘤的鉴别具有一定的意义。 组成： 自备材料： 1、10%中性福尔马林固定液 2、显微镜 3、蒸馏水 参考操作(仅供参考)： 1、 切片脱蜡入水，再至蒸馏水。 2、 蒸馏水洗片。 3、 入AgNOR 染色工作液，室温孵育。 4、 蒸馏水洗片。 5、 (可选)甲基绿染色液复染，水洗凉干。 6、 常规脱水，常规透明，非水溶性封片剂封片。 编号 名称 DK0047 2×50ml Storage 试剂(A1): AgNOR 银溶液 25ml 4℃ 避光 试剂(A2): AgNOR 胶溶液 25ml RT 避光 临用前，A1，A2混合，即为AgNOR 染色工作液，即配即用。 试剂(B): 甲基绿染色液 50ml RT 避光 使用说明书 1份
染色结果： AgNOR位点核内黑色点状 背景根据复染液不同而不同 注意事项： 1、组织固定宜采用10%福尔马林或中性福尔马林。 2、本染色液适用于石蜡切片，切片厚度在3～4μ为宜。 3、如需复染，可在步骤4之后用中性红复染，但应注意避免过染。 4、配制好的AgNOR染色工作液易退化，所以最好即配即用，不易久置。 5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期：12个月有效。 相关： 编号名称 DF0111 中性福尔马林固定液(10%) DG0005 糖原PAS染色液 DH0001 改良Lillie-Mayer苏木素染色液 DJ0001 普鲁士蓝染色液(核固红法) PW0053 Western抗体洗脱液(碱性) TO1013 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)
以下是金蝶公司的标准升级教程: KIS升级K/3工具操作手册 升级前准备工作 一、在进行升级工作前，必须检查KIS账套是否符合升级条件，具体升级条件包括： 1、KIS的版本为KIS7.5、KIS7.5SP1、KIS7.5SP 2、KIS7.6； 2、KIS的账套类型为标准版、迷你版、小企业专版、业务版、标准模式+业务模式； 3、KIS账套的期间为自然月份天数或者非自然月份天数的12期或13期； 4、KIS账套（往年账套除外）各模块（出纳模块除外）的当前期间不能有任何数据（否则升级会出现数据错误），出纳模块当前期间不能扎账； 5、KIS账套已经启用模块的期间必须一致； 6、KIS业务模式账套存在业务单据的情况下，没有单价为0的单据； 二、升级前必须对KIS账套进行以下处理： 对准备升级的KIS账套进行数据库检查，查看是否存在数据库表丢失或者其他数据问题（可以使用安装包中的check3000工具进行检查），如果存在数据问题要求必须进行修复数据后（可以自行修复数据或者提交技术支持部协助解决账套数据问题）再进行升级，避免出现升级后数据错误的情况； 三、升级前需要对KIS账套进行以下处理： 1、KIS业务模式账套存在业务单据的情况下，检查部门和业务员是否为空，如果为空建议手工在KIS账套的部门和业务员录入一条记录后再升级； 2、检查KIS业务模式账套是否存在存货资料没有计量单位的情况，如果存在该情况建议在KIS账套指定计量单位再升级，也可以通过升级工具的升级过程中指定内容来处理； 四、特殊操作 目前升级工具对于KIS账套升级出现问题时默认停止继续执行（只对该账套），这样就只能知道该账套只有存在当前问题不能继续升级，不能清楚获取该账套是否还有其他问题造成不能升级，需要重复多次升级才可以全部知道，为此升级工具还提供了一个变通处理。 变通处理方法如下： 在升级工具的存放路径：操作盘:\Program Files\Kingdee\KIStoK3DBUpgrade下查找文件UserProfile.ini，双击打开，查看如果Debug=False，则修改Debug=true即可，保存修改内容。这样修改后在升级工具执行时对所有的KIS账套均不中断升级，会将该账套所有不符合升级的内容在升级前检查报告和升级报告中说明。 注意修改后会出现以下问题： 1、修改后升级工具对于不符合升级的账套也进行升级前检查，但是不能直接在升级前检查中体现该账套不能升级，不过可以在升级前检查报告中查到账套不支持升级的内容（不升级内容的状态＝X）； 2、修改后升级工具对于不符合升级的账套也进行升级处理，但是不能直接在升级界面体现该账套升级是否有效，不过可以在升级报告中查到账套不支持升级的内容（不升级内容的状态＝X），这样代表了账套即使升级了也是不可用的；
ptotocol是这样的，请看哪里不妥： 蛋白银染步骤 步骤溶液时间 固定甲醇100ml 冰醋酸25ml 加双蒸水至250ml 30min 冲洗双蒸水3次 敏化甲醇75ml 戊二醛（25%w/）1.25ml 硫代硫酸钠(5%w/) 10ml 醋酸钠（17g） 加双蒸水至250ml 30min 冲洗双蒸水3次 银反应硝酸银溶液(2.5%w/) 25ml 甲醛(37%w/) 0.1ml 加双蒸水至250ml 20min 冲洗双蒸水2次 显色碳酸钠(6.25g) 甲醛(37%w/) 0.05ml 加双蒸水至250ml 2-5min 终止EDTA-Na22H2O(3.65g) 加双蒸水至250ml 10min 冲洗双蒸水3次 建议使用silia的方法！！ 简单，快！ 本人的银染方法： 1. 固定：100ml MeOH, 24ml H Ac, 56ml 0.04%HCHO, 20ml ddH2O,洗三次，每次>=20分钟； 2. 50％EtOH洗PAGE胶三次，每次20分钟； 3. 预处理：0.02％Na2S2O3 处理一分钟； 4. 水洗：ddH2O漂洗三次，每次20秒； 5. 染色：0.8ml 20％AgNO3+72ml 0.04%HCHO处理PAGE胶20分钟； 6. 水洗：同上； 7. 显色：25ml 12％Na2CO3, 24ml 0.04%HCHO, 1ml 0.02％Na2S2O3, 漂洗10－15分钟； 8. 水洗：同上； 9. 终止：50％MeOH, 12％H Ac,10分钟。 以上步骤从中科院生化所学来，过程和silia 的基本一致，不知道是否有出入，请大家指正。谢谢！！！ 5.2.2.3 银染色 1 银染液1（1000ml）：甲醇50％乙酸12％ 甲醇500ml 冰醋酸120ml
穿脱隔离衣 【操作前准备】 1.护士自身准备：衣帽整洁、整齐；修剪指甲、取下手表；卷袖过肘、洗手。 2.用物准备：隔离衣一件，刷手及泡手准备 3.环境准备：清洁、宽敞 【操作步骤】 步骤要点与说明 穿隔离衣 1.取衣手持衣领取下隔离衣，将隔离衣清洁面 朝向自己，污染面向外，衣领两端向外折，对齐肩峰，露出肩袖内口 2.穿衣袖一手持衣领，另一手伸入一侧袖内， 举起手臂，将衣袖穿好；换手持衣领，依上法穿好另一袖 3.系衣领两手持衣领，由前向后理顺领边，扣 上领口 4.扎袖口扣好袖扣或系上袖带，需要时用橡皮 圈束紧袖口 5.系腰带自一侧衣缝腰带下约5cm处将隔离衣 逐渐向前拉，见到衣边捏住，再依法将另一侧衣边捏住。两手在背后将衣边边缘对齐，向一侧折叠，按住折叠处，将腰带在背后交叉，回到前面打一活结系好 脱隔离衣 1.解腰带解开腰带，在前面打一活结 2.解袖口解开袖口，在肘部将部分衣袖塞入工 作衣袖内 3.消毒双手 4.解领口解开领口 5.脱衣袖一手伸入另一侧袖口内，拉下衣袖过 手（遮住手）再用衣袖遮住的手在外面拉下另一衣袖，两手在袖内使袖子对齐，双臂逐渐退出 6.挂衣钩双手持领，将隔离衣两边对齐，挂在 衣钩上；不再穿的隔离衣，脱下后清洁面向外，卷好投入污物袋中当工作服可能被传染性的分泌物、渗出物污染时需要穿隔离衣 隔离衣的衣领和隔离衣内面视为清洁面 取隔离衣时看清隔离衣是否完好、合适，有无穿过；确定清洁面和污染面 系衣领时污染的袖口不可触及衣领、面部和帽子 后侧边缘须对齐，折叠处不能松散 手不可触及隔离衣的内面 如隔离衣后侧下部边缘有衣扣，则扣上 穿好隔离衣后，双臂保持在腰部以上，视线范围内；不得进入清洁区，避免接触清洁物品 如隔离衣后侧下部边缘有衣扣，则先解开 不可使衣袖外侧塞入袖内 消毒手时不能沾湿隔离衣 注意保持衣领清洁 衣袖不可污染手及手臂 双手不可触及隔离衣外面 如为一次性隔离衣，脱时应使清洁面向外，衣领及衣边卷至中央，弃后消毒双手 【注意事项】 1.隔离衣的长短要合适，须全部遮盖工作服，如有破洞，应补好后再穿 2.隔离衣每日更换，如有潮湿或污染，应立即更换 3.穿脱隔离衣过程中避免污染衣领和清洁面，始终保持衣领清洁 4.穿好隔离以后，双臂保持在腰部以上，视线范围内；不得进入清洁区，避免接触清洁物品 5.消毒手时不能沾湿隔离衣，隔离衣也不可触及其他物品 6.脱下的隔离衣如挂在半污染区，清洁面向外；挂在污染区则污染面向外
蛋白质染色（银染法）标准操作规程（编号：041） 1、目的及适用范围 检测聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质，实验原理是在碱性条件下，用甲醛将蛋白带上的硝酸银（银离子）还原成金属银，以使银颗粒沉积在蛋白带上。染色的程度与蛋白中的一些特殊的基团有关，不含或者很少含半胱氨酸残基的蛋白质有时候呈负染。 2、主要仪器 摇床、避光盒 3、试剂及配制方法 乙醇、冰醋酸、乙酸钠、硫代硫酸钠、硝酸银、碳酸钠、甘氨酸或EDTA.Na2.2H2O、甲醛，去离子水 固定液：100mL乙醇（40%乙醇），25mL冰醋酸（10%冰醋酸）加水到250mL； 致敏液：75mL 乙醇（30%乙醇）17g 乙酸钠，28.2g 三水乙酸钠（34g乙酸钠），0.5g硫代硫酸钠加水到终体积250mL； 银染液：0.625g AgNO3，100 uL37%甲醛（在使用前加入）加水到终体积250mL； 显色液：6.25 g Na2CO3，50 μL 37%甲醛（在使用前加入）加水到终体积250mL； 终止液：3.65g EDTA.Na2.2H2O 或者1g 甘氨酸加水到终体积250mL 保存液：1% 冰醋酸 4、操作步骤 4.1固定：50mL固定液中固定30min或者更长时间 4.2致敏：50mL致敏液中致敏30min 4.3水洗：3 x 10min 4.4银染：50mL银染液中染20min （保持避光） 4.5水洗：2 x 1 min (注意把握时间，水洗时间长显色速度慢，点的颜色偏黄色) 4.6显色：50mL显色液中显色，时间视显色程度而定 4.7终止：50mL终止液中终止10min 4.8保存：1% 冰醋酸，4 ℃ 5、注意事项 88
快速银染试剂盒 产品简介： 快速银染试剂盒(Fast Silver Stain Kit)是一种快速简单、可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白银染的试剂盒。 本试剂盒也可以用于2D凝胶的银染，并且染色后和后续的质谱检测兼容。 本试剂盒只需一小时左右即可观察到蛋白条带，90分钟内可以完成2块凝胶的银染。 对于BSA蛋白，检测灵敏度可以达到0.3ng蛋白。 无需使用有毒的甲醇。 本试剂盒可足够用于25块常规的8×10cm凝胶的银染。 保存条件： 室温保存，一年有效。银溶液(100X)和银染显色加速液(2000X)需避光保存。 注意事项： 由于银染非常灵敏，操作时请注意尽量使用高纯度的水，并确保所使用的器皿非常清洁，最好使用洁净的玻璃器皿。操作时必须戴手套，避免皮肤和凝胶直接接触。 需自备乙醇、乙酸及MilliQ级纯水或双蒸水。 下述使用说明中各种溶液的使用量适用于大小为8×10cm厚度为0.75-1mm的凝胶。对于更大的凝胶，各种溶液的使用量需按凝胶面积的比例放大，对于更厚的凝胶，作用时间需按照厚度的比例适当延长。 本说明书所指的室温为20-25℃，操作温度较低时由于溶液的扩散能力下降，各步骤需适当延长时间。 银染基本显色液(10X)在低温环境下可能会出现沉淀，可在30-37℃水浴中溶解，并充分混匀后使用。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明： 1.固定： 电泳结束后，取凝胶放入约100ml固定液中，在摇床上室温摇动20分钟，摇动速度为60-70rpm。固定40分钟以上甚至过夜可以进一步降低背景。 固定液的配制：依次加入50ml乙醇、10ml乙酸和40ml MilliQ级纯水或双蒸水，混匀后即成100ml固定液。 2.30%乙醇洗涤： 弃固定液，加入100ml 30%乙醇，在摇床上室温摇动10分钟，摇动速度为60-70rpm。 30%乙醇的配制：70ml MilliQ级纯水或双蒸水中加入30ml乙醇，混匀后即成100ml 30%乙醇。 3.水洗涤： 弃30%乙醇，加入200ml MilliQ级纯水或双蒸水，在摇床上室温摇动10分钟，摇动速度为60-70rpm。 4.增敏： 弃水，加入100ml银染增敏液(1X)，在摇床上室温摇动2分钟，摇动速度为60-70rpm。 银染增敏液(1X)的配制：99ml MilliQ级纯水或双蒸水中加入1ml银染增敏液(100X)，混匀后即为银染增敏液(1X)。银染增敏液(1X)配制后需在2小时内使用。 5.水洗涤(共2次)： 弃原有溶液，加入200ml MilliQ级纯水或双蒸水，在摇床上室温摇动1分钟，摇动速度为60-70rpm。
安全监控系统升级改造期间安全注意事项 Company Document number：WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998
安全监控系统升级改造期间安全注意事项 1、施工人员必须经过专业培训,经考核合格领取合格证并持证上岗。 2、安全监控设备投入使用前要在地面经48小时的通电运行,调试合格方可安装。安装后要进行运行前的调试,各项指标合格后方可使用。 3、安全监控设备投入运行的最初 2 日内,要进行第一次调试校正。 4、电网电压必须与甲烷断电仪电源电压相同，电网电压波动不超过±15%。 5、安装分站时,严禁带电作业,严禁带电搬迁或移动电器设备及电缆 , 并严格执行谁停电谁送电制度。 6、井下传输电缆在大巷敷设或检查时 , 如果有车辆行驶 , 敷设或检查人员要选择安全地点躲避, 严禁行车时敷设或检查传输电缆。 7、在轨道下山巷道敷设或检查传输电缆时，首先要和下车场把钩工、上车场司机联系好，明确不准提升后，方准进入巷道内敷设或检查传输电缆 , 严禁行车时工作。 8、安全监测监控升级改造期间，现场工作人员注意事项： （1）安全监控系统中心站值班员应认真监视系统所显示的各种信息，详细记录系统各部分的运行状态,如实填写《中心站运行日志》； （2）对检测数据进行检测分析，当发现井下某一地点的气体浓度及温度异常时，工作人员应密切注意观察气体及温度的变化情况，并进行核实。当甲烷浓度超过％，一氧化碳浓度超过%时，应立即汇报通防工区值班人员、调度、通防等，并做好详细记录（包括时间、地点、显示值、变化情况等）。上述人员接到通知后应立即根据曲线图和实际情况进行认真
银染步骤是1 固定10冰乙酸min。2 清洗双蒸水冲洗凝胶次每次1min。3 染色染色液1g硝酸银.5mL37甲醛1L双蒸水。现配染色30min。4 清洗迅速洗凝胶次。 5 显影30g 碳酸钠1.5mL37甲醛200uL 10mg/L硫代硫酸钠。显影至清晰带纹出现。成功银染的关键因素包括 1 用超纯水比如NANOpure或Milli-Q纯化或者是双蒸水作银染。2 用提供的碳酸钠或者ACS试剂级的碳酸钠。3 在染色后水清洗所用时间的长短很重要用不超过5-10秒的时间清洗胶然后放入显色溶液中一般在水里浸一下就好。 4 甲醛和硫代硫酸钠ul/1ml在使用前及时加入到显色液中。 5 在使用前及时配染色液。银染的方法种类很多目前有文献报道的就有100 多种。但是其准确的染色机制还不是特别的清楚。大致的原理是银离子在碱性pH 环境下被还原成金属银沉淀在蛋白质的表面上而显色。由于银染的灵敏度很高可染出胶上低于1 ng/蛋白质点故广泛的用在2D 凝胶分析上及极低蛋白含量测定的垂直凝胶中。这里介绍的是我们实验室成功运用的银染方法对关键操作及要求做了补充主要是用于垂直凝胶电泳中低丰度蛋白的检测如内源性GST-Pulldown、Co-IP 等实验中相互作用蛋白的研究银染操作规程实验目的检测聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质。实验原理在碱性条件下用甲醛将蛋白带上的硝酸银银离子还原成金属银以使银颗粒沉积在蛋白带上。染色的程度与蛋白中的一些特殊的基团有
关不含或者很少含半胱氨酸残基的蛋白质有时候呈负染。银染的详细机制还不是非常清楚。试剂乙醇、冰醋酸、乙酸钠、硫代硫酸钠、硝酸银、碳酸钠、甘氨酸或EDTA.Na2.2H2O、甲醛实验操作程序固定30min或者更长时间o 100ml 乙醇40 乙醇o 25ml冰醋酸10 冰醋酸o 加水到250ml 致敏30min o 75ml 乙醇30 乙醇o 17g 乙酸钠28.2g 三水乙酸钠o 0.5g硫代硫酸钠o 加水到终体积250ml 水洗3 x 10min 银染20min o 0.625g AgNO3 o 100 ul 37甲醛在使用前加入o 加水到终体积250ml 水洗2 x 1 min 注意把握时间水洗时间长显色速度慢点的颜色偏黄色显色视情况而定o 6.25 g Na2CO3 o 50 ul 37 甲醛在使用前加入o 加水到终体积250ml 终止10min o 3.65g EDTA.Na2.2H2O 或者1g 甘氨酸o 加水到终体积250ml 保存1 冰醋酸4 ℃注意事项1固定时间较长则加一步水洗30min以免胶太脆而破碎。2甲醛在使用前加入。3 最好多配制一份显色液第一次显色到溶液变混浊时换一份显色液显色到点清晰。 4 显色过程很快要注意把握时间避免染色过度。5银染液和显色液需要预冷。 6 所用器皿要很洁净不用手直接接触以免杂蛋白污染7 清洗用水尽量用高纯度去离子水蒸馏水更佳可以减少背景着色。
1、开头话语不宜过长，最好直接切入课题，语言应干脆利落。 2、说课过程中尽量脱稿，注意与评委进行目光交流，脸上表情丰富一些，最好面带微笑。 3、说课语言声音宏亮、口齿清楚、使用普通话，不要重复，停顿、迟疑次数不能较多，注意语言的过渡、承转要顺畅，若能做到言简意赅、抑扬顿挫则更好。 4、教材分析要全面、重点突出，如地位和作用、教学目标、重点、难点等应条理清楚，详略得当。 5、教学过程和教材分析、教法与学法各环节应合理分配时间，把握重点，教学过程应略讲。 6、教法和学法设计要体现“学生为中心”的理念，一定要让学生活动起来。教学环节包括复习旧课、引入新课、师生互动、启发思考、迁移类比、重难解析等。教法和学法的设计立意要高，注重培养学生发散思维等能力。 7、板书设计应线索分明、科学新颖、版面布局合理，字号稍大、工整大方、书写速度不宜太慢。 8、布置作业巩固课堂所学知识，若作业能兼有拓展延伸旧知、引入后续新知等功能则更妙。 1、基本素质不错，教案完整、板书设计合理，语言流畅。
2、切入标题应直接，多余废话不说，大标题应板书在黑板中上。 3、啰嗦语言尽量避免，语言要具有亲和力、喜闻乐见、幽默，能体现“寓教于乐”思想最好。说课过程中表述不能出错，引经据典、广泛联系实际时留心遣词造句的细节，如“建构主义”不能说成“构建主义”；说课中若能随口说出一些饱含哲理、寓意深刻的教育教学经典名句则更能令评委感觉耳目一新。 4、教学目标设定应是“三维目标”。 5、板书设计应简洁、工整、大方，板书书写应和说课同步进行，不要等到最好再进行，不要让评委等待看你写板书。 6、说课小结能起到由厚变薄、提纲挈领、画龙点睛之用。 说课基本步骤 今天我说课的课题，准备从四个方面进行：（宜开门见山、直接切题） 一、说教材 1、教材地位分析（强调承前启后、继往开来、宏观把握，说课时语言分段、清晰、适时停顿） 2、教学目标（必须设定三维目标） 3、教材重点和难点（透彻分析教材得出，重点和难点不宜太多） 二、说教法（教学设计思路，说出教学实践、行为的理论依据）
1.特别重点强调** 1：不能假定正式服务器比测试服务器快。大家要耐心等待。 2：一定要在测试环境认真测试。以确保客户的应用场景都覆盖到了，都验证通过了。 3：建议使用安装盘安装U9，不建议拷贝部署（后患无穷），详细见下面的讲解。 2.升级过程建议 2.1.升级前准备安装 1.安装前仔细阅读安装过程文档。 如果是从2.1上市版之前的版本升级到2.5，则需要重新安装V2.5金盘。 本版本安装过程有所调整，尤其是报表方面（改到安装工具中进行添加安装）。 2.V2.5金盘支持.net4.0，则在服务器上添加.net 3.51角色服务、并且安装正式版本的.net 4.0。 （绝对不可以安装.net 4.5 Beta，否则引起环境问题） 注：.net 3.51是.net 2.0的升级版。 .net 3.51和.net4.0是两个平行版本，需要分别安装。 3.数据库服务器内存最好大于等于数据库.mdf文件的大小。 4.数据库服务器服务器硬盘剩余空间。数据库最好6倍于.mdf文件大小。 4.1、数据文件存放磁盘（包括tempdb存放的磁盘）需要20G左右的空间，如果是老用户，最好预留更大的空间； 4.2、如果经费允许，多配置一些磁盘。将数据库的.mdf,ndf,ldf。以及tempdb内的每个文件分别存放在各自独立的物理磁盘上。扩大I/O能力。 具体配置方法咨询 4.3、从数据安全角度考虑，不推荐使用SSD磁盘。 5.数据库服务器升级过程中，最好保证只用户升级，避免其他应用程序的干扰； 6.补丁服务器，需要存放补丁备份文件，需要预留磁盘空间大于1G的空间。 7.涉及“委外”的业务流程需要都已经走完成。 如果项目上涉及到采购驱动的全程委外业务，则需要处理完相关业务； 8.所有调度任务是否已经完结。 如果升级前存在未执行结束的调度方案，建议执行完成后，再继续升级； 具体咨询祁宏伟qihw@https://www.doczj.com/doc/399716616.html, 9.如果是V2.1之前的版本，需要重新升级加密信息； 10.确认客开程序是不是需要重新进行编译； 2.2.备份数据库 1.将数据库设置为“简单恢复模式”
我们实验室用的银染方法 1.50%甲醇浸泡15分钟（置于摇摆床上，以下省略，本步骤两次，每15分钟更换一次） 2.10%甲醇浸泡10分钟 3.水漂洗3次，每次数秒 4.2 gM DTT溶液浸泡20分钟 5.0.1%硝酸银溶液浸泡20分钟 6.水漂洗3次，每次不超过15秒（每次约150ML） 7.显色液漂洗3次，每次不超过15秒（每次约100ML） 8.显色液浸泡显色至看到目的蛋白带（约200ML） 9.10G柠檬酸定影 显色液:15G无水碳酸钠溶于500ml水，用前加入250 g L福尔马林搅拌均匀 水用双蒸水就可以，纯度越高越好，其他试剂用分析纯，据书上说甲醇用化学纯的比分析纯更灵敏 此方法岀自冷泉港蛋白质技术指南（实际上是其蛋白质技术会议的总结）灵敏度稍低于分子克隆上老方法，但是非常方便，也比其他方法快速，只需要1.5小时，我染岀来的胶非常漂亮，有需要的话可以上传给大家看看 一般来说，高背景是由于杂质产生的，银染的水质很重要，最好要用去离子水或双蒸水，装胶的器皿也一定要洗得很干净。固定、银染之后均需充分的漂洗。 其实银染就是银镜反应，可能是你的样品浓度高，所以白了，浓度更高还会变成一条能反光的带。固定时间不需加长，我有时来不及还减少固定时间，银染关键是器皿和溶液干净，显色前胶一定要漂干净 大板本来效果就差点，浓度越大，条带形状越差，这也很正常，银染薄点的胶效果要好些，因为染的是表面的蛋白 1.取下凝胶，蒸馏水冼胶30秒. 2.0.1% 硝酸银染色10分钟. 3.弃去染色液，蒸馏水洗胶1分钟. 4.显色液显色15秒，换用新的显色液，显清条带为止. 显色液配方：10克氢氧化钠+0.2克碳酸钠+2m甲醛溶液，定溶到500ml. 这个染色方法挺好的，我用过.注意染色时间不能长 材料没什么要求，玻璃会更好一点，但不好搞到，我们是见到什么大小合适就用什么。 液体的量一般是胶体积的5倍，比如13X13X 0.1cm的胶，用一百ml 一定够，80也行
操作步骤和注意事项 （一）正置显微镜 1、安放 右手握住镜臂,左手托住镜座,使镜体保持直立.桌面要清洁、平稳,要选择临窗或光线充足的地方.单筒的一般放在左侧,距离桌边3～4厘米处. 2、清洁 检查显微镜是否有毛病,是否清洁,镜身机械部分可用干净软布擦拭.透镜要用擦镜纸擦拭,如有胶或粘污,可用少量二甲苯清洁之. 3、对光 镜筒升至距载物台1～2厘米处,低倍镜对准通光孔.调节光圈和反光镜,光线强时用平面镜,光线弱时用凹面镜,反光镜要用双手转动. 若使用的为带有光源的显微镜,可省去次步骤,但需要调节光亮度的旋钮. 4、安装标本 将玻片放在载物台上,注意有盖玻片的一面一定朝上.用弹簧夹将玻片固定,转动平台移动器的旋钮,使要观察的材料对准通光孔中央. 5、调焦 调焦时,先旋转粗调焦旋钮慢慢降低镜筒,并从侧面仔细观察,直到物镜贴近玻片标本,然后左眼自目镜观察,左手旋转粗调焦旋钮抬升镜筒,直到看清标本物像时停止,再用细调焦旋钮回调清晰. 操作注意：不应在高倍镜下直接调焦；镜筒下降时,应从侧面观察镜筒和标本间的间距；要了解物距的临界值. 若使用双筒显微镜,如观察者双眼视度有差异,可靠视度调节圈调节.另外双筒可相对平移以适应操作者两眼间距. 6、观察 若使用单筒显微镜,两眼自然张开,左眼观察标本,右眼观察记录及绘图,同时左手调节焦距,使物象清晰并移动标本视野.右手记录、绘图. 镜检时应将标本按一定方向移动视野,直至整个标本观察完毕,以便不漏检,不重复. 光强的调节：一般情况下,染色标本光线宜强,无色或未染色标本光线宜弱；低倍镜观察光线宜弱,高倍镜观察光线宜强.除调节反光镜或光源灯以外,虹彩光圈的调节也十分重要. （1）低倍镜观察 观察任何标本时,都必须先使用低倍镜,因为其视野大,易发现目标和确定要观察的部位. （2）高倍镜观察 从低倍镜转至高倍时,只需略微调动细调焦旋钮,即可使物像清晰. 使用高倍镜时切勿使用粗调焦旋钮,否则易压碎盖玻片并损伤镜头. 转动物镜转换器时,不可用手指直接推转物镜,这样容易使物镜的光轴发生偏斜,转换器螺纹受力不均匀而破坏,最后导致转换器就会报废.
D N A非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染配方及步 骤 YKK standardization office【 YKK5AB- YKK08- YKK2C- YKK18】
DNA非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染配方及步骤 最近需要做DNA非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,需要用银染显示条带,但是找不到具体的配方和步骤,不知和蛋白PAGE电泳银染有什么差别,哪位师兄师姐有配方可否发一份,十分感谢!一、电泳试剂： 1、30％聚丙烯酰胺(29:1) 丙稀酰胺29克，Bis1克，水100ml。 2、10％过硫酸胺 过硫酸胺1克，水10ml。 3、TEMED 4、5xTBE Tris 27克，硼酸克， EDTA(pH 10ml，定容至500ml。 二、银染试剂 1、固定液：100ml无水乙醇，5ml冰醋酸，定容至1000ml。 2、% AgNO3：AgNO3 1克，水500ml。 3、% NaOH：NaOH 克，水500ml。 4、37％甲醛。 三、配胶(6%)： 30％聚丙烯酰胺(29:1) 8ml，5xTBE 8ml，定容至40ml，加10％过硫酸胺 200ul；TEMED 20ul。室温凝固时间>1小时。 四、银染： 1、固定液固定10m。 2、水洗2m x3次。 3、% AgNO3 100ml ＋37％甲醛50ul，混匀，避光染色30～50m。 4、水洗 20秒x2次。
5、% NaOH 100ml，加37％甲醛，混匀，显色3～10m。 6、水洗若干次，终止显色。 电泳时间：150v x 3h，溴酚兰的位置相当于40bp。 银染后胶面积将膨胀10％。 在终止显色过程中，将依惯性继续显色，所以不等显色到位即可进行终止显色。 显色到位后立即拍摄，水浸泡过夜将使背景加深转贴！！！ 聚丙烯酰胺凝胶电泳是分子生物学常用的一种技术。我们实验室应用该项技术进行基因组甲基化的筛选，取得了一定结果。因为全基因组的筛选需要很高的灵敏度，背景干扰降到最低，因此在对凝胶进行染色时，往往采用同位素法或银染法，而且配制的胶往往很大，我们配制的是大约40×35cm的胶，厚。同位素十分灵敏，特异，但是由于其操作的复杂性，许多实验室开展有一定困难。银染法相对简便易行，便于一般的实验室开展。 需要指出的是，应用与筛选基因组的银染往往采用测序胶的染色方法，这样才能保证灵敏性，我们在长期的工作中积累了一些银染的经验，与大家分享。 下面是网上的一个银染方法，我们使用后觉得效果不错，然后以此为基础，介绍一下我们的经验 测序凝胶的银染 染色过程要求凝胶浸在塑料盘中。因而至少使用两个盘子，大小与玻璃板类似。在盘中加入新鲜溶液之前须用高质量的水洗涤盘子。 1. 电泳完毕后用一个塑料片子小心地分开两板，凝胶应该牢固地附着在短玻璃板上。 2. 固定凝胶：将凝胶(连玻璃板)放入塑料盘，用固定/停止溶液浸没,充分振荡20分钟或直至样品中染料完全消失，胶可在固定/停止溶液中保存过夜(不振荡)。保留固定/停止溶液，用于终止显影反应。 3. 洗胶：用超纯水振荡洗胶3次，每次2分钟。从水中取出, 当转移至下一溶液时拿着胶板边沿静止10-20秒，使水流尽。 4. 凝胶染色：把凝胶移至染色溶液充分摇动30分钟。 5. 凝胶显影：