甘蓝型黄籽油菜高油品系下胚轴再生体系研究_王俊生

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DOI:10.15933/j.cnki.1004-3268.2012.01.032
（）：２０１２，４１１４５４８河南农业科学，－ＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｅｎａｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓｇ
４６
河南农业科学
第４１卷
通过遗传转化导入外源基因在油菜的近年来，抗病虫害、抗除草剂、雄性不育和其他特殊性品质、状改良中发挥越来越重要的作用
［］１２－
／）硫甙含量（低于３的甘蓝型黄籽粒半冬性０μ ｍｏｌｇ油菜品系。１．２试验方法１．２．１无菌苗培养与诱导分化培养将饱满的油菜种子先经７再用０．０％乙醇表面消毒１ｍｉｎ，１％无菌水冲洗３～５遍，然后置０ｍｉｎ，ＨＣｌ～１ｇ２消毒８于固体ＭＳ培养基上进行培养。培养温度２光５ ℃，／，。苗龄４ｄ，光照强度２将无菌苗照１６ｈｄ０００ｌｘ下胚轴切成０按试验设计进．５～１．０ｃｍ长的切段，行预培养和分化培养。每个处理接种４个培养皿，每培养皿放置外植体下胚轴２０个左右。预培养３ｄ后转入分化培养基，培养１而后５ｄ后统计愈伤率，继代培养３周后统计芽再生频率。愈伤率＝带愈伤外植体数／总外植体数 × １００％，芽再生频率＝带芽外植体数／总外植体数 × １００％。待不定芽长至２～３ｃ小心切下转至生根ｍ时，培养基中进行生根培养，生根培养基为ＭＳ＋／０．１ｍＬＮＡＡ＋３％蔗糖＋０．７％琼脂，３周后将植ｇ株进行炼苗移栽。１．２．２试验设计以２个高油双低油菜品系的下胚轴芽再生频率为主要指标，采用正交设计，设置不同组合处理，考察预培养基中２，４ＢＡ质量－Ｄ和６－浓度以及预培养时间对愈伤率，以及分化培养基中ＮＡＡ和６ＢＡ质量浓度组合、ＡＮＯ－ｇ３质量浓度对下胚轴芽再生频率的影响。不同因素水平设计参考
收稿日期：２０１１０６２２－－）；）基金项目：国家自然科学基金项目（河南省基础与前沿技术研究项目（３１０７１８０７１１２３００４１０１２７），，，，，。：作者简介：王俊生（男陕西蒲城人副教授博士主要从事油菜遗传育种研究１９７０Ｅ－ｍａｉｌｗｓ００９９＠１６３．ｃｏｍ－ｊ，谭光轩（男，河南周口人，教授，博士，主要从事植物资源创新与分子育种研究。１９６４＊通讯作者：－）：Ｅ－ｍａｉｌｕａｎｘｕａｎｔａｎｉｎａ．ｃｏｍ＠ｓｇｇ
பைடு நூலகம்
：，）ＡｂｓｔｒａｃｔＩｎｔｈｅｅｘｅｒｉｍｅｎｔｔｈｅｈｏｃｏｔｌｓｏｆｔｗｏｒａｅｓｅｅｄ（ＢｒａｓｓｉｃａｎａｕｓＬ．ｌｉｎｅｓ（ＧＹ１，ｐｙｐｙｐｐ），ＧＹ２ｗｉｔｈｈｉｈｏｉｌｃｏｎｔｅｎｔａｎｄｄｏｕｂｌｅｌｏｗｃｈｏｓｅｎａｓｒｅｓｅａｒｃｈｏｂｅｃｔｓｓｏｍｅｆａｃｔｏｒｓａｆｕａｌｉｔ－ｇｊｑｙｆｅｃｔｉｎｓｈｏｏｔｒｅｅｎｅｒａｔｉｏｎｆｒｅｕｅｎｃｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉａｔｅｄｕｓｉｎｏｒｔｈｏｏｎａｌｄｅｓｉｎｔｏｓｅｔｕｂｅｔｔｅｒｒｅ－ｇｇｑｙｇｇｇｇｐｓｓｔｅｍｏｆｒａｅｓｅｅｄｓｆｏｒｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｆｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆｏｂｔａｉｎｉｎｔｒａｎｓｅｎｉｃｒｅｓｔｏｒｅｒａｎｄｅｎｅｒａｔｉｏｎｙｐｇｇｇｇｂｒｅｅｄｉｎｈｂｒｉｄｓｗｉｔｈｈｉｈｏｉｌｃｏｎｔｅｎｔａｎｄｄｏｕｂｌｅｌｏｗｕａｌｉｔｔｈｒｏｕｈｂｉｏｌｏｉｃａｌｅｎｉｎｅｅｒｉｎ．Ｔｈｅｇｙｇｑｙｇｇｇｇｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ２，４ａｎｄ６ＢＡｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉｕｍａｎｄｃｕｌｔｕｒｅｄａｓｒｅｓｕｌｔｓｒｅｒｅ－Ｄ－－－ｙｐｐ，ａｓｗｅｌｌａｓＮＡＡ６ＢＡｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｍｅｄｉｕｍｗｅｒｅｔｈｅｍａｉｎｆａｃｔｏｒｓ－，ｔｈａｔａｆｆｅｃｔｅｄｓｈｏｏｔｒｅｅｎｅｒａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｔｗｏｌｉｎｅｓｂｕｔＡＮＯｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｓｔｕｄｈａｄｎｏｇｇｙ３ｃｅｆｆｅｃｔ．Ｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｏｆｓｈｏｏｔｒｅｅｎｅｒａｔｉｏｎｆｒｅｕｅｎｃａｍｏｎｔｗｏｌｉｎｅｓｏｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｉｎｉｆｉｃａｎｔｇｑｙｇｇ，ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｗｅｒｅｓｉｎｉｆｉｃａｎｔａｎｄｌｉｎｅ × ｔｒｅａｔｍｅｎｔｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｗａｓａｌｓｏｓｉｎｉｆｉｃａｎｔ．Ｉｔ＇ｓｆｏｕｎｄｔｈａｔ４ｇｇ／ｏｌｄｓｅｅｄｌｉｎｓｏｆｔｗｏｌｉｎｅｓｃｕｌｔｕｒｅｄｉｎｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉｕｍｃｏｎｔａｉｎｉｎ６ＢＡ０．５ｍＬａｎｄｄａｓｒｅ－－－ｇｇｇｙｐ，／，／２４０．５ｍｆｏｒ３ｄｆｏｌｌｏｗｅｄｂｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｍｅｄｉｕｍＮＡＡ０．０５ｍＢＡ２．０－Ｄ－ｇＬｙｇＬ＋６／ｍＬ，ｅｘｈｉｂｉｔｅｄｔｈｅｈｉｈｅｓｔｓｈｏｏｔｒｅｅｎｅｒａｔｉｏｎｒａｔｅｓ４５．２％ａｎｄ４１．７％，ｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎａｓｔａｂｌｅａｎｄｇｇｇｇｒｅｅｎｅｒａｔｉｏｎｓｓｔｅｍｓｗｈｉｃｈｌａｉｄａｆｏｕｎｄａｔｉｏｎｆｏｒｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｔｗｏｌｉｎｅｓ．ｅｆｆｉｃｉｅｎｔｅｎｅｔｉｃｇｙｇ：；；；；ＫｅｗｏｒｄｓＢｒａｓｓｉｃａｎａｕｓＬ．ｙｅｌｌｏｗｓｅｅｄｅｄｒａｅｓｅｅｄｈｉｈｏｉｌｃｏｎｔｅｎｔｈｏｃｏｔｌｒａｔｅｏｆｂｕｄ－ｐｇｙｐｙｐｙ；ｒｅｅｎｅｒａｔｉｏｎｓｓｔｅｍｒｅｅｎｅｒａｔｉｏｎｇｙｇ
甘蓝型黄籽油菜高油品系下胚轴再生体系研究
王俊生，范小芳，谭光轩＊，李成伟
（）周口师范学院植物遗传与分子育种重点实验室，河南周口４６６０００
摘要：为获得甘蓝型油菜高含油量双低恢复系，育成高含油量双低油菜杂交种，以２个不同甘蓝型）黄籽油菜高油双低品系（下胚轴为外植体，采用正交设计，研究了预培养基中２，ＧＹ１、ＧＹ２４－Ｄ和预培养时间、分化培养基中ＮＡＡ和６６ＢＡ质量浓度、ＢＡ质量浓度组合以及ＡＮＯ－－ｇ３质量浓度５种不同因素对其下胚轴芽苗再生的影响。结果表明，除Ａ其他４种因素对２个ＮＯｇ３质量浓度外，油菜品系下胚轴芽苗再生均具有显著或极显著影响。２个油菜品系间和不同处理间的芽苗再生频／率差异均达显著水平，且油菜品系与处理间存在明显互作效应。４ｄ苗龄，在ＭＳ＋６ＢＡ０．５ｍＬ－ｇ／／／在添加ＮＡＡ＋２，４０．５ｍＬ预培养基上预培养３ｄ后，０．０５ｍＬ＋６ＢＡ２．０ｍＬ的分化－Ｄ－ｇｇｇ培养基中芽苗再生频率最高，ＧＹ１和ＧＹ２的下胚轴芽再生频率分别为４５．２％和４１．７％。初步建立了甘蓝型油菜高油品系的下胚轴再生体系，为高含油量油菜遗传转化奠定了基础。关键词：甘蓝型油菜；黄籽油菜；高含油量；下胚轴；芽再生频率；再生体系（）中图分类号：Ｓ５６５．４文献标志码：Ａ文章编号：１００４３２６８２０１２０１００４５０４－－－
＊，，，ＷＡＮＧＪｕｎｓｈｅｎＦＡＮＸｉａｏｆａｎＴＡＮＧｕａｎｘｕａｎＬＩＣｈｅｎｅｉ－－－－ｗｇｇｇｇ
（，，）ＫｅＬａｂｏｒａｔｏｒｏｆＰｌａｎｔＧｅｎｅｔｉｃｓａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｒｅｅｄｉｎＺｈｏｕｋｏｕＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔＺｈｏｕｋｏｕ４６６０００，Ｃｈｉｎａｙｙｇｙ
ＳｔｕｄｉｅｓｏｎＨｏｃｏｔｌＤｅｒｉｖｅｄＳｈｏｏｔＲｅｅｎｅｒａｔｉｏｎＳｓｔｅｍｏｆｙｐｙｇｙ（）ＹｅｌｌｏｗｓｅｅｄｅｄＲａｅｓｅｅｄＢｒａｓｓｉｃａｎａｕｓＬ．ｗｉｔｈＨｉｈＯｉｌＣｏｎｔｅｎｔ－ｐｇｐ

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