免疫学实验胶体金免疫层析技术

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胶体金免疫层析技术
(colloidal gold immunochromatography assay, GICA)
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胶体金免疫层析技术
20世纪80-90年代在酶联免疫吸附试验、 乳胶凝集试验、单克隆抗体技术、胶体金免疫 技术和新材料技术基础上发展了新型体外诊断 技术——胶体金免疫层析技术(colloidal gold immunochromatography assay, GICA)。
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➢胶体金免疫层析试纸条的构成
样品垫
金标垫

吸收垫
衬板
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胶体金免疫层析试纸条类型:
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➢GICA有三种反应模式:夹心法,间接法,竞争抑制法。 夹心法反应原理
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结果判定:
1、禽流感H9亚型抗原检测试纸卡:两条红线,阳 性;一条红线,阴性;无红线,试纸失效。
2、禽流感抗体检测试纸卡:两条红线,阳性;一 条红线,阴性;无红线,试纸失效。
3、磺胺嘧啶残留检测试纸卡:两条红线,阴性; 一条红线,阳性;无红线,试纸失效。
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疾病的快速诊断及药物残留分析
GICA是一种新型检测方法,具有简单快速、结果 清晰,可通过肉眼判定结果、无需复杂操作技巧和特 殊设备、灵敏度高、无污染、携带方便等优点。 己成 为临床快速诊断领域发展的一个新方向,在发达国家 己得到广泛应用。
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类别
来自百度文库
应用领域
检测的物质
人类医学 各 级 医 院 , 血 传染病(乙肝五项,HIV, SARS等)
站断商中检,CD心系C;统,防家;疫庭边站自检,检口诊;标 白等志)物(AFP、肌钙蛋白、粪便血红蛋
岸;公安系统.
女性妊娠 hCG(早孕)
毒品(吗啡,K粉,摇头丸,冰毒)
农牧业
畜牧兽医站, 商检 传染病(禽流感,链球菌等)
实验材料:
1、禽流感H9亚型抗原检测试纸卡 2、禽流感抗体检测试纸卡 3、磺胺嘧啶残留检测试纸卡 4、禽流感H9亚型病毒阳性对照 5、禽流感H9亚型病毒阴性对照 6、禽流感抗体阳性对照 7、磺胺嘧啶残留阳性对照 8、磺胺嘧啶残留阴性对照
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实验步骤:
1、加被检样品:100 ul/孔,阳性、阴性对照。 2、5min后观察结果。
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➢基础金核 ➢双离子 内层负离子(AuC12-) zeta电位
外层离子层 H+分散在胶体间的溶液中 zeta电位可以使胶体金颗粒之间相互排斥,以维持 胶体金的稳定状态。
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胶体金颗粒对蛋白质有很强的吸附 功能,而不被坏其生物活性,可以与蛋白 质等(葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白)等 非共价结合,形成胶体金标记物。
系统,边检口岸,农 牧类院系和研究所
病毒(烟草花叶病毒、犬细小病毒等)
环境
环保监测部门,研究 有害物质超标 机构
食品安全 食品安全检测中心, 农兽药残留(磺胺类、瘦肉精等),大肠
各监管部门
杆菌,黄曲霉素
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胶体金
胶体金(colloidal gold)也称金溶胶(goldsol),是金盐被 还原成原子金后形成的金颗粒悬液。
B 阳性
C 阴性
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间接法反应原理
B 阳性
C 阴性
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竞争抑制法反应原理
阴性
弱阳性
阳性
检测线颜色强度与SD浓度负相关
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目的:掌握间接试纸卡的检测原理,操 作方法及结果判定方法
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