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浅部真菌

第22章主要致病性真菌

第一节浅部真菌

浅部真菌主要为皮肤丝状菌（Dermatophytes），侵犯皮肤、毛发、指甲等角化组织引起癣症，又称癣菌(Ringworm)，分为三属，共37个种在沙保氏培养基孵育1～3周，可生成丝状型菌落，产生各种孢子和菌丝。根据菌落形态与色泽，菌丝的构造与形态，大分生孢子的形态和小分生孢子的有无及排列形式等，可作为鉴别种属的重要依据（见表20-2、图20-1）。

表1 癣菌的种类及侵犯部位

表2 癣菌的培养特征

癣菌主要由孢子散播传染，常由于接触患癣的人或动物（狗、猫、牛、马等）及染菌物体而感染。在临床上同一种癣症可由数种不同癣菌引起，而同一种癣菌因侵害部位不同，又可引起不同的癣症。（见表20-3）

表20-3 癣菌与癣病的关系

我国头癣的病原菌：农村主要是许兰氏毛癣菌、断发毛癣菌等；城市为堇色毛癣菌，铁锈色癣菌等。手足癣、体癣股癣及甲癣的病原菌以红色毛癣菌最常见，其次为石膏样小孢子菌、絮状表皮癣菌等。

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真菌感染是怎么引起的呢

真菌感染是怎么引起的呢真菌感染这种情况在我们的生活中是很常见的，特别是在脚底以及皮肤上，真菌感染的现象最为明显，希望患者可以及时的治疗它。一般真菌感染是因为我们没有注意个人的卫生或者皮肤破裂，导致真菌的感染等情况。我们都知道皮肤上存在的真菌以及细菌是比较多的，皮肤破裂就很容易滋生真菌。真菌感染性疾病根据真菌侵犯人体的部位分为4类：浅表真菌病、皮肤真菌病、皮下组织真菌病和系统性真菌病;前二者合称为浅部真菌病，后二者又称为深部真菌病。 (一)浅表真菌病：感染仅仅局限于皮肤角质层的最外层，极少甚至完全没有组织反应，感染毛发时也只累及毛发表面，很少损伤毛发。主要包括：花斑癣、掌黑癣和毛结节菌病。 (二)皮肤真菌病：感染累及皮肤角质层和皮肤附属器，如毛发、甲板等，能广泛破坏这些组织的结构并伴有不同程度的宿主免疫反应;这类真菌感染中最常见的是皮肤癣菌病，其他真菌引起的感染还包括皮肤念珠菌病等。皮肤癣菌病根据不同的发病部位可以分为足癣(俗称“脚气”)、手癣、体癣、股癣、甲癣以及头癣等各类癣病;在世界范围内广泛发生，是最常见的真菌性疾

病，发病率高。 (三)皮下真菌病：感染皮肤、皮下组织，包括肌肉和结缔组织，一般不会经血液流向重要脏器播散;但有些感染可以由病灶向周围组织缓慢扩散蔓延，如足菌肿等;也有些则沿淋巴管扩散，如孢子丝菌病、着色芽生菌病。免疫受损患者的皮下真菌具有潜在的播散全身的危险。 (四)系统性真菌病：除侵犯皮肤和皮下组织外，还累及组织和器官，甚至引起播散性感染，又称为侵袭性真菌感染。近年来，随着高效广谱抗生素、免疫抑制剂、抗恶性肿瘤药物的广泛应用，器官移植、导管技术以及外科其他介入性治疗的深入开展，特别是AIDS的出现，条件致病性真菌引起的系统性真菌病日益增多，新的致病菌不断出现，病情也日趋严重。主要包括念珠菌病、曲霉病、隐球菌病、接合菌病和马内菲青霉病等。相信大家看完这篇文章介绍的内容后，你们应该都知道真菌感染是怎么产生的吧，它对于我们身体健康的伤害。一般系统性的真菌病有支原体疾病以及衣原体疾病，也有手藓等疾病，希望你们可以根据它的发病原因去治疗它。

6--真菌性皮肤病

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真菌性皮肤病第一节概述一、定义：真菌性皮肤病亦可称皮肤真菌病，是指由医学真菌所引起的人类皮肤、粘膜及皮肤附属器的一大类感染性疾病，是皮肤科的常见病、多发病。二、真菌的特点：具有真正细胞核，产生孢子，以寄生或腐生等方式吸收养料，仅少数类群为单细胞，多有分支或不分支的丝状体，能进行有性生殖和（或）无性生殖、具有甲壳质的微纤维或纤维素（或其他葡聚糖）或两者兼有的细胞壁的有机体。三、真菌的种类：发现近20万种真菌，其中仅有极少数真菌具有相当毒力，能侵袭人体。多数真菌平时无害，只有当宿主免疫受损时它们才具有侵袭性，甚至危及患者生命。真菌按其形态可分为两大类，即酵母菌和丝状真菌，后者分为皮肤癣菌和非皮肤癣菌的霉菌。四、真菌病的分类：共有五种表现形式：侵袭性感染、机会性感染、真菌性变态反应、真菌中毒及真菌致癌；若按感染部位来分，则可分为浅部真菌病、皮下组织真菌病和系统性真菌病三大类。 1.浅部真菌病:是指限于表皮、皮肤附属器和粘膜的真菌感染，主要致病微生物为皮肤癣菌和念珠菌，大多表现轻微，容易诊断，疗效良好； 2.深部真菌病:则指那些累及真皮及以下、脏、血液和系统性真菌感染，主要致病微生物为念珠菌、曲霉、隐球菌及毛霉等，大多为机会性感染，患者多有较严重的基础疾患或免疫抑制，如不能早期诊断和及时有效治疗可危及生命。第二节浅部真菌病头癣一、定义：是一种累及头皮毛囊的皮肤癣菌病，通常可导致炎症性或非炎症性脱发，主要发生在青春期前儿童。二、致病微生物和发病机制头癣患者的毛发在显微镜下有三种主要类型，即发外型、发型和黄癣，反映真菌侵入毛干的模式，但不论哪一种模式，其临床均基本表现为脱发和鳞屑并常伴炎症反应。三、临床表现头癣的临床表现呈多样性,头癣的临床表现可分为黄癣、黑癣、白癣和脓癣4种类型。 ◆黄癣或称黄癣菌病，主要发生在儿童，其典型皮损为黄癣痂和黄癣发，前者是黄癣菌孢子在侵入头皮部位的脓疱大量繁殖，形成圆形碟状的黄痂所致，其中央微凹，界限明显，2～5mm直径或更大，中央有一根头发穿过，可融合成片，甚至可覆盖整个头皮，可嗅及一种难闻的鼠臭味。黄癣菌的溶组织作用可破坏毛囊，故黄癣愈后常遗留萎缩性瘢痕，导致永久性脱发。 ◆黑癣可见于儿童及成人。皮损初起以丘疹为主，渐向周围蔓延，形成钱币大小的环状皮损，中央有愈合倾向，可见少许鳞屑。随着病程进展，毛发渐失去光泽、弯曲以至折断，在毛囊口形成以断发为标志的所谓“黑点”，镜检可见充满全长病发的发型关节孢子，但也有病发高位折断的情形，即在出头皮2～4mm或更长处折断，片状分布类似白癣，但无菌鞘。 ◆白癣：早期表现为环状体癣样皮损，边缘隆起，为病菌侵入部位形成的丘疹或水疱／脓疱向周围等距离扩散所致，以后演变为以鳞屑为主的斑片，无明显边缘隆起；斑头发大部或全部距头皮2～4mm处折断，外围绕以灰白色菌鞘；镜检见成堆密集发外小孢子；有时原发斑疹的周边有小的“子斑”，系菌鞘脱落播散传染所致。 ◆脓癣：主要由一些亲动物性或亲土性皮肤癣菌引起，机制为患者对真菌抗原产生迟发性

真菌学实验报告

真菌学实验报告一.实验目的： 1.1了解真菌形态的基本特征。 1.2掌握丝状真菌制片方法。 1.3掌握内生真菌的分离方法 1.4掌握真菌的鉴定方法。二.前言：真菌广泛分布于地球表面,从高山、湖泊到田野、森林，从海洋、高空到赤道、两极，到处都有真菌。真菌虽然不在空气中生长繁殖，但它的孢子却成群的漂浮在天空，只要稍微注意你会发现人类原来生活在真菌的汪洋大海中。当今世界，生物技术已迈入世界经济的支柱产业，真菌学在生物技术的大潮中得到了长足的发展。真菌是原始的真核生物，具有广泛的多样性，真菌生长我繁殖迅速，在很短的时间内就可以得到比动物和植物多得多的后代，能够直接、快速地进行遗传性状分离的

分析。因此，真菌可以作为研究基础生物学过程中的一个重要工具，真菌基因的多样性以及真菌分子生物学的发展，为生物技术产业提供了一个广阔的天地。植物的生长环境直接影响内生真菌的生物多样性，植物物种的年代越久远，其生物内生真菌的多样性越丰富：抗病原性能越强的植物，其所含的内生真菌具有抗菌活性的可能行就越大；其所含的内生真菌有可能产生与植物相同或相似的抗菌无知或产生抗菌活性物质可能参与了药用植物的抗菌过程，本实验通过植物病原真菌和G+、G-细菌的抑制实验发现茎，根，花，种子或果实内生真菌的代谢产物具有不同程度的抑菌能力，并且对G+、G-有普片遍的抑菌作用。研究和开发内生真菌的寻找新的抗菌活性物质具有广泛的应用前景。三.材料与方法： 3.1.1材料：在校园内采集银杏、喜树、桂花树样品包括叶、茎、根、花、种子或果实。 3.1.2.药品与试剂：葡萄糖、蛋白胨、KH2P04·3H2O、MgSO4·7H2O，马铃薯、琼脂。孟加拉红，青霉素，链霉素，甲基蓝，蛋白胨，酵母膏，蔗糖，磷酸盐，葡萄糖，琼脂条，无菌水等。消毒剂：75%的乙醇，0.1%升汞（HgCl2），次氯酸钠溶液（含活性氯10%），30%双氧水。双

常见的真菌性疾病

常见的真菌性疾病真菌性疾病是由真菌引起的感染性疾病。真菌是广泛存在于自然界的一类真核细胞生物，具有真正的细胞核和细胞器，不含叶绿素，以寄生和腐生方式吸取营养，能进行有性和无性繁殖。真菌的基本形态是单细胞个体（孢子）和多细胞丝状体（菌丝）。估计全世界已记载的真菌有10万种以上，其中绝多数对人类无害，只有少数真菌（约200余种）与人类疾病有关。真菌最适宜的生长条件为温度22℃～36℃，湿度95%～100%，pH5～6.5。真菌不耐热，100℃时大部分真菌在短时间内死亡，但低温条件下可长期存活；紫外线和X射线均不能杀死真菌，甲醛、石炭酸、碘酊和过氧乙酸等化学消毒剂均能迅速杀灭真菌。按照菌落形态，真菌可分为酵母菌（yeast）和霉菌（mold）两大类，前者菌落呈乳酪样，由孢子和芽生孢子组成，后者菌落呈毛样，由菌丝组成，故又称为丝状真菌。有的致病真菌在自然界或25℃培养时呈菌丝形态，而在组织中或在37℃培养时则呈酵母形态，称为双相真菌。根据真菌入侵组织深浅的不同，临床上把引起感染的真菌分为浅部真菌和深部真菌。浅部真菌浅部真菌主要指皮肤癣菌（dermatophyton），包括毛癣菌属（Trichophyton）、小孢子菌属（Microsporum）和表皮癣菌属（Epidermophyton），其共同特点是亲角质蛋白，侵犯人和动物的皮肤、毛发、甲板，引起的感染统称为皮肤癣菌病（dermatophytosis），简称癣（tinea）。目前浅部真菌病仍按发病部位命名（如头癣、体癣、股癣、手癣和足癣等），少数按皮损形态的传统命名，如叠瓦癣、花斑癣。皮肤癣菌病为接触传染，不洁的卫生习惯、多汗浸渍、共用拖鞋、毛巾、梳子及接触患癣的动物是皮肤癣菌传播的主要途径。深部真菌深部真菌病一般按致病菌命名（如着色芽生菌病、念珠菌病等）。多数深部真菌系条件致病，多侵犯免疫力低下者，近年来随着广谱抗生素、糖皮质激素、免疫抑制剂、抗肿瘤药物的使用增多，器官移植、各种导管和插管技术的开展以及艾滋病患者的增多，条件致病菌的感染机会也不断增加，同时还发现了许多新的致病菌种。头癣头癣是头皮和头发的浅部真菌感染，根据病原菌和临床表现的不同可分为黄癣、白癣和黑点癣三种。发病原因头癣是真菌感染头皮和头发所引起的疾病。患了头癣，头皮上会出现很多灰白鳞屑或大片的黄痂，还可引起头发折断或脱落。严重者头发参差不齐甚至所剩无几，即人们所说的“癞痢头”。头癣的发生主要是通过接触头癣患者或有病的动物而被传染的，从自然界中感染来的极罕见。正常人与患头癣者经常密切接触，特别是儿童在一起玩耍，头碰头的接触，很容易被传染。还有与有病的动物接触后患病，这都属于直接传染。如果使用头癣患者用过的帽子、头巾、枕头、梳子或理发推子、剪刀等也可被传染，这叫做间接传染。可见头癣是很容易传染的。过去头癣在我国流行很广，医院里常可看到头癣患者。但是，真菌感染后不一定都引起头癣，这与机体对真菌的抵抗力密切相关。大多数成人对真菌抵抗力较强，而儿童较弱，所以头癣多见于儿童。

真菌的培养及形态观察

题目：真菌的培养及形态观察动物科学1204班聂孝明 20121546 指导教师：邹玲摘要：了解酵母菌和霉菌的菌落特征及在培养基中的生长表现，还有真菌的分离培养方法和载片培养，学习真菌水浸片的制备及形态观察。本实验通过真菌的固体培养，酵母菌水浸片旳制备观察及划线分离培养的方法进行形态观察。在固体培养基上，观察到A菌落成绿色比较光滑、有分生孢子、菌丝有横隔为青霉。D菌落有大量直立菌丝并且顶部发黑、有孢子囊、菌丝无横隔为根霉。B菌落大而光滑、显微镜下菌体较大、有假菌丝并且出芽生殖的为酵母菌。关键词：酵母菌霉菌形态观察分离培养引言：真菌在自然界中分布广、数量大、种类多。酵母菌是单细胞微生物，细胞核和细胞质有明显的分化，个体直径比细菌大10倍左右，多为圆形或卵圆形，无性繁殖为出芽生殖，可以形成假菌丝，有性繁殖是通过结合产生子囊孢子。用美蓝染色液制成水浸片可以观察期外形和区分细菌的死活。霉菌的营养体是分支的丝状体，较大，分为基内菌丝和气生菌丝，不同的霉菌的繁殖菌丝可以形成不同的孢子，细胞易收缩变形，孢子容易分散。利用培养在玻璃纸上的霉菌作为观察材料，可以得到清晰，完整，保持自然状态的霉菌形态。 1材料与方法 1.1材料 1.1.1菌种：酵母菌，青霉，根霉的斜面培养菌种 1.1.2试剂：沙堡培养基、美蓝染色液、70%酒精、无菌水等 1.1.3其他：解剖针、玻片、盖玻片、接种环、显微镜等 1.2方法 1.2..1真菌的划线分离培养培养基：将沙堡琼脂培养基融化后，冷却至45摄氏度，注入无菌平皿中，每皿15~20ml，做成平板备用。接种：取待分离的材料少许，投入无菌水试管中，振荡，使分离菌悬浮于水中，将接种环火焰灭菌后冷却，取上述悬液，进行平板划线分离。培养与观察：划线完毕后，置于28摄氏度温箱培养2~5天，待形成子实器官后，取单个菌落部分，制片镜检。若只有一种菌，既得纯培养物。如有杂菌可取培养物少许制成悬液，用作划线分离，有时反复多次可获得纯种。也可在放大镜下观察，用无菌镊子夹取一段分离的真菌菌丝，在平板上分离培养，即可得到真菌的纯培养物。 1.2.2真菌在固体培养基上的生长表现：酵母菌在固体培养基上菌落呈油脂状或蜡质状，表面光滑、湿润、粘稠，有的表面呈现粉粒状，粗糙或褶皱，菌落边缘整齐、缺损或带丝状。菌落颜色有乳白色、黄色、红色等。将不同的霉菌在固体培养基上培养2~5d，可见霉菌有绒毛状、絮状、绳索状等。大小依霉菌种类而异，很多霉菌的孢子和菌丝能产生色素，致使菌落表面、背面甚至培养基呈现不同的颜色，如黄色、绿色、黑色、橙色等。 1.2.3真菌的形态观察 1.2.3.1酵母菌水浸片的制备：将美蓝染色液或蒸馏水滴于干净的载玻片中央，用接种环以无菌及操作取培养48h的酵母菌少许，均匀涂于液滴中，染色2~3min后加盖玻片。注意切勿产生气泡，然后低倍镜和高倍镜观察其细胞形态、芽殖方式，注意酵母菌的形态、大小和芽体，同时可以根据是否染上颜色来区别死活细胞。 1.2.3.2挑取真菌孢子接入盛有灭菌水的试管中，震荡试管制成孢子悬液，用灭菌滴管吸取

2017陕西执业药师继续教育试题-浅部真菌的诊断和药物治疗

2017试题-浅部真菌病的诊断与药物治疗（必考-1.5学分）本套试题必考，1.5学分 1.真菌的基本形态包括：（ D ） 1.A: 孢子 B: 星状体 C: 硬壳小体 D:菌丝 2.下列哪种表现是黄癣的最典型临床表现？( C ) A: 母子斑 B: 点状疤痕 C: 黄癣痂 D:炎症反应轻 3.下列哪个选项是脓癣的常见病原菌？( D ) A: 念珠菌 B: 马拉色菌 C: 曲霉 D:亲动物性皮肤癣菌 4.下列哪种药物属于咪唑类抗真菌药物？( A )

A: 克霉唑 B: 灰黄霉素 C: 奈替芬 D:制霉菌素 5.下列哪种药物即可口服又可外用治疗浅部真菌病？( B ) A: 克霉唑 B: 特比萘芬 C: 奈替芬 D:布替萘芬 6.下列哪几种药物属于丙烯胺类抗真菌药？( B ) A: 克霉唑 B: 特比萘芬 C: 奈替芬 D:布替萘芬 7.下列哪种药物属于三唑类抗真菌药物？( C ) A: 克霉唑 B: 灰黄霉素 C:伊曲康唑 D:制霉菌素

8.下列哪两种药物是临床常用口服治疗甲真菌病的药物？(C) A: 克霉唑 B: 灰黄霉素 C:伊曲康唑 D特比萘芬 9.下列哪种药物不是口服治疗浅部真菌病的常用药物？( A ) A: 两性霉素 B: 氟康唑 C: 伊曲康唑 D:特比萘芬 10.下列哪种药物口服极少吸收？( B ) A: 氟康唑 B: 制霉菌素 C: 伊曲康唑 D:特比萘芬 11.下列哪种表述是正确的？( D ) A: 伊曲康唑抗菌谱比特比萘芬窄 B: 口服制霉菌素吸收良好

C: 口服特比萘芬治疗花斑糠疹疗效好 D: 灰黄霉素可用于治疗头癣 12.下列哪种口服药物可用于治疗花斑糠疹( C ) A: 灰黄霉素 B: 制霉菌素 C: 伊曲康唑 D:特比萘芬 13.下列哪种药物属于吗啉类抗真菌药？( C ) A: 灰黄霉素 B: 制霉菌素 C: 阿莫罗芬 D:特比萘芬 14.下列哪种药物属于硫脲类抗真菌药？( A ) A: 利拉萘酯 B: 制霉菌素 C: 阿莫罗芬 D:特比萘芬 15.一名10岁患有甲真菌病的儿童，如患甲真菌病，真菌培养

真菌感染的分类及症状

真菌感染的分类及症状真菌感染性疾病根据真菌侵犯人体的部位分为4类：浅表真菌病、皮肤真菌病、皮下组织真菌病和系统性真菌病;前二者合称为浅部真菌病，后二者又称为深部真菌病。浅部真菌(癣菌)仅侵犯皮肤、毛发和指(趾)甲，而深部真菌能侵犯人体皮肤、黏膜、深部组织和内脏，甚至引起全身播散性感染。深部真菌感染肠道即表现为真菌性肠炎，可独立存在如婴儿念珠菌肠炎，或为全身性真菌感染的表现之一，如艾滋病并发播散性组织胞浆菌病。 1.浅表真菌病感染仅仅局限于皮肤角质层的最外层，极少甚至完全没有组织反应，感染毛发时也只累及毛发表面，很少损伤毛发。主要包括：花斑癣、掌黑癣和毛结节菌病。 2.皮肤真菌病感染累及皮肤角质层和皮肤附属器，如毛发、甲板等，能广泛破坏这些组织的结构并伴有不同程度的宿主免疫反应;这类真菌感染中最常见的是皮肤癣菌病，其他真菌引起的感染还包括皮肤念珠菌病等。皮肤癣菌病根据不同的发病部位可以分为足癣(俗称“脚气”)、手癣、体癣、股癣、甲癣以及头癣等各类癣病;在世界范围内广泛发生，是最常见的真菌性疾病，发病率高。 3.皮下真菌病感染皮肤、皮下组织，包括肌肉和结缔组织，一般不会经血液流向重要脏器播散;但有些感染可以由病灶向周围组织缓慢扩散蔓延，如足菌肿等;也有些则沿淋巴管扩散，如孢子丝菌病、着色芽生菌病。免疫受损患者的皮下真菌具有潜在的播散全身的危险。 4.系统性真菌病除侵犯皮肤和皮下组织外，还累及组织和器官，甚至引起播散性感染，又称为侵袭性真菌感染。近年来，随着高效广谱抗生素、免疫抑制剂、抗恶性肿瘤药物的广泛应用，器官移植、导管技术以及外科其他介入性治疗的深入开展，特别是AIDS的出现，条件致病性真菌引起的系统性真菌病日益增多，新的致病菌不断出现，病情也日趋严重。主要包括念珠菌病、曲霉病、隐球菌病、接合菌病和马内菲青霉病等。后二者为深部真菌病，其感染危害最大，也是院内感染类型之一，其临床症状体征无特异性，缺乏有效诊断工具，病程进展快，预后差，预防性治疗和经验性治疗的应用越来越普遍。原文链接：https://www.doczj.com/doc/5d7627898.html,/tixuan/2014/0807/189807.html

真菌形态的几种观察方法

真菌形态的几种观察方法.txt39人生旅程并不是一帆风顺的，逆境失意会经常伴随着我们，但人性的光辉往往在不如意中才显示出来，希望是激励我们前进的巨大的无形的动力。40奉献是爱心，勇于付出，你一定会收到意外之外的馈赠。真菌形态的几种观察方法真菌作为一种实验材料，在微生物实验室中的应用是相当普遍的，正确的培养观察方法，能够如实地反映其本质特征。下面介绍实验室中真菌形态的几种观察方法。 1．载片培养法载片培养方法是实验室观察真菌形态的基本方法。此法的基本步骤是：在无菌条件下，用无菌吸管吸取融化的培养真菌的固体培养基，快速地滴一滴于无菌的载玻片上，待其冷却以后，用接种环沾取少许孢子或者挑取一点菌丝段于凝固的培养基上，上面放上无菌的盖玻片。然后，将此片子放入干净的培养皿中，培养皿底部放入潮湿的吸水滤纸，或者将培养皿底放入一些水，中间用玻璃棒隆起，将做好的培养片子搭放在上面，合适温度下培养。将培养好的片子取出，用小镊子轻轻地取下上面的盖玻片，把盖玻片转放于另一干净的载玻片上，待自然干燥后，两边用透明胶固定，用棉蓝染色液染色。载片培养法还可以这样进行：将厚度约0.5mm的平板培养基用小刀切成大小0.5cm2的小块，挑取一小块培养基放于干净的载玻片上，同样的方法接种、培养观察。还可以用刀片将培养好的载玻片上的多余培养基割去，自然干燥后，用大一点的盖玻片盖上菌丝，用同样方法两边固定，染色观察，这种方法特别适用于产生无性孢子的真菌的形态观察。该方法要注意以下几点：滴的培养基不能太多，接种物不能太多，防止污染。 2．插片培养法插片培养法是实验室观察真菌形态的另一种基本方法。这种方法的基本步骤是：将菌丝块接种于固体平板的中间。假如是以孢子接种，则将孢子稀释液涂布于固体平板上，然后，用小镊子夹起一块无菌的盖玻片，以45度角的角度斜插入培养基中，不要插入培养基太深，让菌丝爬上盖玻片；培养好了以后，再用小镊子将盖玻片取出，自然干燥以后，将盖玻片转移到一干净的载玻片上，用同样的方法两边固定，染色观察。该方法要注意：插片的角度要掌握好，不能太直或太平；当两面都有菌丝时，擦去背对中心的那面的菌丝，以避免干扰。 3．粘片法粘片法是用透明胶粘贴菌丝或者孢子进行观察的方法。用剪刀剪取一小段透明胶，用小镊子夹住一个角，轻轻地粘一些菌丝或者孢子，然后将其放入一干净的载玻片上，在载玻片上滴一滴染色液，可以染色观察。此法要注意：粘贴时，不要用力粘的太多；粘上菌丝或者孢子的透明胶放入载玻片上，不要移动，要一次放好。 4．平板观察法平板观察法是在平板上直接观察真菌的方法。对菌丝生长得比较稀疏的真菌和观察基内菌丝。此法比较直接真实地反映菌丝的形态特征，观察时将平板的上盖拿开，倒置于显微镜的载物台上。这种方法可以消除由于培养体变干或者放在菌丝表面的盖玻片等可能出现的影响。此

土黄洗剂抑制皮肤浅部真菌的试验研究

土黄洗剂抑制皮肤浅部真菌的试验研究【摘要】目的试验研究土黄洗剂对临床分离真菌菌株的抑制和杀灭作用。验证自拟中药方土黄洗剂治疗皮肤浅部真菌病的药效。方法采用药基混合法和琼脂扩散法对 3 种常见致病真菌进行土黄洗剂体外抗菌活性、最低抑菌浓度测定。结果土黄洗剂对临床分离常见致病菌红色毛癣菌、须癣毛癣菌、白色念珠菌均具有抑制作用，最低抑菌浓度分别为12.5mg/ml，25 mg/ml，25 mg/ml。结论土黄洗剂对常见皮肤浅部真菌有抑制和杀灭作用。本研究为临床应用纯中药制剂治疗皮肤浅部真菌病提供了科学依据,证实了土黄洗剂科学性及可行性。【关键词】土黄洗剂；真菌菌株；抑菌试验；中药推广浅部真菌病［1］指是皮肤科最常见的感染性疾病之一，它主要是以皮肤癣菌、马拉色菌以及念珠菌等病原菌为主，侵袭人体局部皮肤的真菌感染，如甲板、毛发或粘膜等处。该病占所有皮肤病发病率的25%左右。目前临床上使用抗真菌药物治疗该病，但是无论是从药物的高效性、广谱性、低毒副作用以及耐药性等方面均无令人满意的疗效。因此，从抗真菌中草药中提取有效的抗真菌活性成分，以达到更安全、抗菌谱更广的临床疗效成为了学者重点研究的一个方向。土黄洗剂是笔者根据中医药理论及其抗真菌作用自拟组成的方剂,，并经过临床应用取得了较好疗效。在此基础上,进一步进行抑菌试验，观察土黄洗剂对临床常见红色毛癣菌、须癣毛癣菌及白色念珠菌的抑制和杀灭作用。现报道如下。材料与方法 1．药物：土黄洗剂（由安丘人民医院药房提供）成分含土荆皮25g、黄柏25g、黄精 25g、空心草25g、苦参20g、百部20g、蛇床子20g、蒺藜20g和冰片20g。上述药材均为市售饮片, 符合中国药典的标准。将上述中药材用清水清洗干净并切碎，筛除杂质后加入清水1000ml并浸泡约90min，然后文火煎煮30分钟，将煎液保存在干净容器内，相同方法在煎煮依次，将两次的煎液合并，通过低温缓慢加热使煎液蒸发浓缩至每毫升含生药1g。将最终的药汤放置于4℃冰箱内冷藏保存。 2．菌株：红色毛癣菌1株、须癣毛癣菌1株、白色念珠菌1株。以上为潍坊医学院微生物教研室保存菌种。 3．仪器和试剂：沙氏琼脂培养基(SDA)：蛋白胨10g，葡萄糖40g，琼脂15g，蒸馏水1000ml，将上述所有物品混合后加入氯霉素200mg，在121℃高压条件下灭菌 15min，室温下冷却后，4℃冰箱冷藏保存备用。主要设备：恒温箱、试管、高压消毒锅、冰箱、天平、超净工作台等。 4．方法与步骤：红色毛癣菌、须癣毛癣菌，2种4株接种于沙氏琼脂培养基，在26℃ 温度下培养2周，白念珠菌3株接种于 SDA培养基，在37℃温度下培养 48h，挑取单克隆菌落继续培养，依据菌落形态及产红特征、尿素酶试验和毛发穿孔试验，并依据培养的镜下结构特征进行鉴定［2］。根据倍比稀释法，将分别制得的药物浓度为200mg/ml、100mg/ml、50mg/ml、25mg/ml、12.5mg/ml、6.25mg/ml、3.13mg/ml、1.51mg/ml的药物培养基，注入试管，分别接种待测试菌种，标记为1～8号，9号试管为阳性对照（生长对照），10号试管为阴性对照（空白对照）。同一个菌种每种浓度接种3管，将已接种红色毛癣菌、须癣毛癣菌置于25℃恒温箱2周，将已经接种3株白念珠菌菌悬液的含药培养基放置于37℃温箱中，观察其孵育 24～ 48h后真菌的生长情况。在培养结束后，通过肉眼在自然光线下进行判断。对于实验结果的判定需要的前提是：生长对照管得菌落生长情况良好，空白对照管得培养基清晰。然后将每管菌落生长情况与对照组进行对比，以最低药物浓度无培养物生长的药基管为MIC终点［3］，该药物浓度即为该味药该提取成分对该种菌的MIC值。 5．杀菌试验（MBC的测定）:红色毛癣菌、须癣毛癣菌、白念珠菌 3种7株受试菌的杀菌试验：将制备好的沙氏液基3ml于121℃、0.15MPa条件下进行15min灭菌，并在无菌条

皮肤真菌感染的药物治疗与常用药物介绍

皮肤真菌感染的药物治疗及常用药物介绍皮肤真菌感染可分为浅部及深部二大类。浅部真菌病主要包括皮肤癣菌病如手癣、足癣、体癣、股癣、甲癣及头癣等，还有念珠菌病和花斑糠疹等，临床很常见。深部真菌病主要是皮下真菌病如孢子丝菌病、着色芽生菌病等，较为少见。绝大多数限局性浅表的真菌感染都可使用外用抗真菌制剂治疗。这类外用药物较多，常用的有咪唑类药物如咪康唑、联苯苄唑、益康唑、酮康唑和克霉唑等。丙烯胺类药物如特比萘芬、萘替芬等，还有吗啉类阿莫罗芬和环吡酮胺等。水酸、苯甲酸、十一烯酸、冰醋酸等兼有角质溶解和抑真菌作用，也常用于治疗。剂型有乳膏、软膏、散剂、凝胶剂、溶液剂等(关于制型的选择)。为了防止复发，治疗在感染症状消失后需再维持1～2周。为了减轻炎症反应，抗真菌外用制剂可与糖皮质激素配合成复合制剂，如益康唑曲安奈德软膏，复方酮康唑软膏等，由于并用的是中效至强效激素，因此此类复方制剂不能用于皮肤薄嫩处，更不能长期使用，以免产生皮肤萎缩等不良反应。对于顽固、泛发或有免疫功能缺陷的病例，可选用系统抗真菌药物治疗。如伊曲康唑一日100mg，连续15日，或100～200mg/次，一日2次，连续7天。也可用特比萘芬250mg/日，1～2周。头癣及其药物治疗头癣(tinea capitis)是由皮肤癣菌感染头皮及毛发所致的疾病。根据致病菌种类和宿主反应性不同可分为黄癣、白癣、黑点癣以及脓癣。头癣应采取综合治疗，即口服药物，外用药物以及剃发消毒联合应用。各项措施需配合进行，不可偏废，以免造成治疗失败。口服药物灰黄霉素为首选药，儿童一日15～20mg/kg口服，成人0.6～0.8g/日，分３次口服，连续服药3～4周。若对灰黄霉素过敏或治疗失败的病例，可采用伊曲康唑、特比萘芬或氟康唑口服。伊曲康唑成人一日100～200 mg，儿童一日3～5 mg/kg，，餐后立即服用，疗程4～6周。特比萘芬成人一日250mg，儿童体重小于20kg者，一日62.5mg，体重20～40kg，一日125mg，疗程4～6周。脓癣治疗除服抗真菌药物外，急性期可短期口服小剂量糖皮质激素，如有细菌感染需加用抗菌药，注意切忌切开引流。服药结束后进行真菌镜检，如病发真菌镜检仍阳性，需延长疗程。以后每10～14天复查１次，连续３次阴性后方可认为治愈。外用5%～10%硫磺软膏或其他抗真菌外用制剂，搽遍整个头皮，一日2次，连续2 个月。甲真菌病及其药物治疗

抗浅部真菌感染药

抗浅部真菌感染药 1.特比萘芬乳膏【适应症】用于治疗手癣、足癣、体癣、股癣、花斑癣及皮肤念珠菌病等。【不良反应】偶见皮肤刺激如烧灼感，或过敏反应如皮疹、瘙痒等。【禁忌症】对特比萘芬或乳剂中任何型剂过敏者禁用。【用法用量】外用，一日2次，涂患处，并轻揉片刻。疗程1～2周。【贮藏方法】在阴凉处，密封保存。【注意事项】1 孕妇及哺乳期妇女慎用。2 避免接触眼睛和其他黏膜（如口、鼻等）。3 用药部位如有烧灼感、红肿等情况应停药，并将局部药物洗净，必要时向医师咨询。4 本品涂敷后不必包扎。5 不得用于皮肤破溃处。 2.咪康唑乳膏【适应症】用于体癣、股癣、手癣、足癣、花斑癣以及真菌性甲沟炎和念珠性外阴阴道炎,对外耳炎、细菌性皮肤感染也有效。【用法用量】外用,涂搽于洗净的患处,一日早晚各1次;花斑癣,一日1次,症状消失后应继续用药7天,以防复发。【不良反应】偶见过敏、水疱、烧灼感、充血、瘙痒或其他皮肤刺激症状。

【禁忌症】对本品过敏者禁用。【注意事项】1.对本品过敏者禁用;2.避免接触眼睛;3.涂布部位如有灼烧感、瘙痒、红肿等,应停止用药,洗净.必要时向医师咨询; 3.酮康唑乳膏【适应症】用于手癣、足癣、体癣、股癣、花斑癣及皮肤念珠菌病。【用法用量】局部外用，取本品适量涂于患处。一日2～3次。为减少复发，体癣、股癣、花斑癣及皮肤念珠菌病，应连续使用2～4周，手足癣应连续使用4～6周。【不良反应】1.常见红斑、灼热、瘙痒、刺痛或其他刺激症状，毛囊炎，皮肤萎缩变薄，毛细血管扩张等。【禁忌症】对本品中任何活性成份或赋形剂及其他咪唑类药物过敏者禁用。【注意事项】1.避免接触眼睛和其他黏膜(如口、鼻等)。2.用药部位如有烧灼感、红肿等情况应停药，并将局部药物洗净，必要时向医师咨询。3.不得用于皮肤破溃处。4.不宜大面积使用。5.股癣患者，勿穿紧贴内裤或化纤内裤，在外用乳膏剂时可散布撒布剂(如痱子粉)。4.克霉唑乳膏【适应症】用于体癣、股癣、手癣、足癣、花斑癣、头癣、以及念珠菌性甲沟炎和念珠菌性外阴阴道炎。【用法用量】1.皮肤感染：涂于洗净患处，一日2～3次 2.

真菌的生物学形态特征

真菌的生物学形态特征与细菌相比，真菌的大小、形态、结构和化学组成均有很大的差异。真菌比细菌大几倍至几十倍，可以用普通光学显微镜观察。真菌的细胞是典型的真核细胞，真菌细胞具有细胞壁、细胞膜、细胞核、细胞器及细胞质。真菌细胞壁主要化学成分为几丁质(chitin)和1，3-葡聚糖，而细菌细胞壁主要化学成分为肽聚糖。真菌按形态可分为单细胞和多细胞两类。单细胞真菌主要为酵母菌(yeast)和酵母样菌(veast-1ike)，菌体呈圆形或卵圆形，其形成的菌落为酵母型或类酵母型，临床常见的有念珠菌属和新生隐球菌。多细胞真菌由菌丝和孢子组成，菌丝伸长分支，交织成团形成菌丝体(mycelium)，并长有各种孢子，这类真菌称为丝状菌(filamentous fungus)，俗称霉菌(mold)。其形成的菌落为丝状型。对人致病的有皮肤癣菌等。有些真菌可因营养、温度、氧气等环境条件的改变，而两种形态发生互变，称为二相性(dimorphic)。真菌的菌落形态、颜色变化及真菌不同生长时期的镜下特征是正确鉴定真菌的重要依据。 (一)真嚣的镜下形态多细胞真菌的菌丝和孢子随真菌种类不同而形态不同，是鉴别真菌的重要依据。 1.菌丝菌丝是由孢子出芽形成的。孢子在环境适宜的条件下长出芽管，逐渐延长呈丝状即菌丝(hyphae)。当菌丝不断生长、分支并交织成团时，被称为菌丝体(mycelium)。孽警粤结构不同可分为有隔菌丝和无隔菌丝。有隔菌丝(septate hyphae)是由横隔将管状尊构的菌丝分隔成一连串多细胞样的丝状体，如曲霉、青霉和毛癣菌等大多数丝状真菌的菌丝属于此类：无隔菌丝(nonseptate hyphae)无隔膜，整条菌丝为单个细胞，细胞质内有多个细胞核，根霉和毛霉的菌丝属于此类。菌丝在人工培养基中生长，按其着生情况可分为营乔丽丝(vegetative hyphae)和气生菌丝(aerial hyphae)。菌丝向下生长，深入培养基内获取营养的菌丝称为营养菌丝：而从培养基表面长出向空中伸展的菌丝称为气生菌丝。部分气生菌丝发育到一定阶段可衍化为具有繁殖能力的繁殖菌丝(reproductive hyphae)。菌缝可有多种形态，如螺旋状、球拍状、结节状、鹿角状、梳状和关节状等，它们有助于真菌的鉴别。 2.孢子孢子是真菌的繁殖结构，分为有性孢子和无性孢子两类。有性孢子是由同一里体璧不同菌体上的两个细胞融台经减数分裂形成。无性孢子由菌丝上的细菌直接分化或出芽形成，是病原性真菌传播和延续后代的主要方式。真菌孢子抵抗力不强，加热60～70℃短时间即死亡。真菌孢子与细菌芽胞不同，其区别见表22-1。

实验二真菌形态观察(一).

实验二、真菌形态观察（一） 1目的：认识真菌营养体及变态，认识真菌无性和有性孢子类型。掌握鞭毛菌亚门和接合菌亚门的主要形态特征。掌握临时玻片的制作方法和绘图技术。 2原理：真菌营养生长阶段的结构称为营养体，当营养生长进行到一定时期，就开始转入繁殖阶段，形成繁殖体，即子实体。营养体主要为菌丝体，主要变态有吸器、假根、菌核、子座以及根状索菌等。繁殖体主要包括无性孢子和有性孢子。通常制作临时玻片来观察病原物在植物上着生的情况以及病原物的形态特征。 3材料用具番茄晚疫病菌装片，辣椒疫霉病菌装片，黑根霉装片，酵母菌悬浮液等培养真菌，植物病害组织。挑针，刀片，木块，酒精灯，火柴，载玻片，盖玻片，纱布，乳酚油，二甲苯，显微镜，吸水纸，擦镜纸。投影仪，多媒体课件等。 4内容与方法（自己写，包括主要内容即可） 4.1 临时玻片 4．1 .1浮载剂制作临时玻片都要使用浮载剂，浮载剂的作用是防止材料干燥和集中光线，以利于显微镜下观察。浮载剂的种类很多，最常用的是水和乳酚油，其次是甘油、甘油明胶，希尔浮载剂等。 (1水：水浮载剂一般使用蒸馏水，应用最为方便。对细菌、真菌孢子等无不利影响。观察细菌、线虫活动，真菌孢子萌发都必须用水作浮载剂。测量真菌菌丝直径和真菌孢子大小时也以水作浮载剂为

好。但是用水作浮载剂制片时较易形成气泡，制成的玻片也易干燥而不能保存。 (2乳酚油：乳酚油长期以来一直是真菌学和植物病理学工作者习惯使用的浮载剂。乳酚油的组成如下：苯酚结晶(加热熔化20ml，乳酸 20ml，甘油40ml、水20ml。各成分混合后成为油状粘稠液体，具杀死和固定病原物的作用，可使干瘪的真菌孢子膨胀复原，还可使病组织变得略为透明。如在乳酚油中加入0．05--0．1％的染料制成棉蓝乳酚油，藏红乳酚油等，还能使菌丝或孢子略微着色，更便于观察。用乳粉油制作的玻片可长期保持湿润不会干燥，它的缺点中，很难精确测量病原物的大小。另外，乳酚油能与许多封固剂起作用，盖玻片也易滑动，不易封固。 4．1.2 临时玻片的制作临时玻片制作方法很多，如涂，撕、粘，挑和切片等，可根据病原物的类型选择使用。 (1涂抹法，细菌和酵母菌的培养物常用涂抹法制片。将细菌或酵母菌的悬浮液均匀地涂在洁净的载玻片上，在酒精灯火焰上烘干，固定，再加盖玻片封固。加盖玻片前还可进行染色处理，使菌体或鞭毛着色而易于观察。 (2撕取法，用小金属镊子仔细撕下病部表皮或表皮毛制成临时玻片。此法可以观察着生在寄主或基物表面的菌丝和孢子，寄主表皮细胞内的真菌菌丝、吸器和休眠孢子囊堆，以及病毒病的内含体等。试以小麦白粉病叶，烟草花叶病病叶，蚕豆花叶病叶，受禾谷多粘茵为害的小麦病根等为材料，用撕取法制作临时玻片，观察病原物的形态。 (3粘贴法：将塑料胶带纸剪成边长5mm左右的小块，使胶面朝下贴在病部，轻按一下后揭下制成玻片。粘贴法用于菌丝或子实体着生于病组织或基物衷面的材料制片，特别适用于观察分生袍子在分生抱子梗上的着生情况。 (4挑取法，采用挑取法可以直接用挑针从病组织或基物(如培养基

真菌观察方法

真菌形态的几种观察方法 1．载片培养法载片培养方法是实验室观察真菌形态的基本方法。此法的基本步骤是：在无菌条件下，用无菌吸管吸取融化的培养真菌的固体培养基，快速地滴一滴于无菌的载玻片上，待其冷却以后，用接种环沾取少许孢子或者挑取一点菌丝段于凝固的培养基上，上面放上无菌的盖玻片。然后，将此片子放入干净的培养皿中，培养皿底部放入潮湿的吸水滤纸，或者将培养皿底放入一些水，中间用玻璃棒隆起，将做好的培养片子搭放在上面，合适温度下培养。将培养好的片子取出，用小镊子轻轻地取下上面的盖玻片，把盖玻片转放于另一干净的载玻片上，待自然干燥后，两边用透明胶固定，用棉蓝染色液染色。载片培养法还可以这样进行：将厚度约0.5mm的平板培养基用小刀切成大小0.5cm2的小块，挑取一小块培养基放于干净的载玻片上，同样的方法接种、培养观察。还可以用刀片将培养好的载玻片上的多余培养基割去，自然干燥后，用大一点的盖玻片盖上菌丝，用同样方法两边固定，染色观察，这种方法特别适用于产生无性孢子的真菌的形态观察。该方法要注意以下几点：滴的培养基不能太多，接种物不能太多，防止污染。 2．插片培养法插片培养法是实验室观察真菌形态的另一种基本方法。这种方法的基本步骤是：将菌丝块接种于固体平板的中间。假如是以孢子接种，则将孢子稀释液涂布于固体平板上，然后，用小镊子夹起一块无菌的盖玻片，以45度角的角度斜插入培养基中，不要插入培养基太深，让菌丝爬上盖玻片；培养好了以后，再用小镊子将盖玻片取出，自然干燥以后，将盖玻片转移到一干净的载玻片上，用同样的方法两边固定，染色观察。该方法要注意：插片的角度要掌握好，不能太直或太平；当两面都有菌丝时，擦去背对中心的那面的菌丝，以避免干扰。3．粘片法粘片法是用透明胶粘贴菌丝或者孢子进行观察的方法。用剪刀剪取一小段透明胶，用小镊子夹住一个角，轻轻地粘一些菌丝或者孢子，然后将其放入一干净的载玻片上，在载玻片上滴一滴染色液，可以染色观察。此法要注意：粘贴时，不要用力粘的太多；粘上菌丝或者孢子的透明胶放入载玻片上，不要移动，要一次放好。 4．平板观察法平板观察法是在平板上直接观察真菌的方法。对菌丝生长得比较稀疏的真菌和观察基内菌丝。此法比较直接真实地反映菌丝的形态特征，观察时将平板的上盖拿开，倒置于显微镜的载物台上。这种方法可以消除由于培养体变干或者放在菌丝表面的盖玻片等可能出现的影响。此方法要注意不要倒太多的培养基，直径10cm的平皿倒10ml的培养基就可以了。5．玻璃纸观察法玻璃纸观察法是一种观察真菌生长特性的一种特殊方法。这种方法一般用于下列情况：研究菌丝生长的促进和阻碍作用，将无菌的玻璃纸放入刚倒好的平板中，用L型玻璃棒将玻璃纸表面铺平，然后用小刀将玻璃纸和培养基一起切成从中心向外辐射的2～4个区域。将菌丝块接入平板中心，此时用小针头的注射器滴一滴抑制或促进生长的营养液（例如不同浓度的CuSO4或者2，4-二硝基苯）于玻璃纸下面的各个区域中，培养一定时间待菌丝生长到滴加液部位时，切下玻璃纸和培养基小块于载玻片上，观察菌丝的生长情况。此法要注意以下几点：玻璃纸一定要铺平，不能使其中间打折；用小刀切块时，要使各个区域间分开，避免不同浓度的抑制剂或营养剂的相互干扰；平板不能倒得太厚，观察时要找一带分支的菌丝尖端，定时（5min）观察。 6．真菌的染色液真菌的菌丝一般是无色的，因此，在观察其形态时，要用染色液进行染色观察，一般的染色液如结晶紫染色液不适合用来进行真菌染色观察。在这些染色液中，真菌菌丝容易集结

真菌染色

最近在看关于真菌的染色方面的资料，现在总结一下发出来，大家共同学习一下。一、背景介绍真菌属于真核生物，没有质体，营养方式为吸收，无吞噬作用。细胞壁含有甲壳质和β-葡聚糖。可引起人类，动物的疾病，称为真菌病，还可引起植物的疾病、人类过敏性疾病和真菌毒素中毒症。真菌侵犯人体常继发于其他疾患，如恶性肿瘤、糖尿病等慢性消耗性疾病；大剤量X线照射；免疫抑制剂等导致免疫功能和抵抗力低下；大量应用肾上腺皮质激素的病人，其炎症反应多受抑制，也容易感染真菌；另外器官移植、导管插管、放疗等应用引起局部组织损伤，为真菌的入侵提供了条件．近年来由于免疫缺陷病毒感染者的不断出现，使原来不致病的真菌转为致病真菌。因此，真菌感染已经成为一个日益严峻的问题。真菌分为浅部真菌和深部真菌。浅部真菌：主要侵犯机体皮肤，寄生和腐生于表皮，毛发和甲板的角质组织中，引起浅部真菌病，简称癣病。临床最多见的浅部真菌病有：体癣、股癣、手癣和足癣。深部真菌：指侵犯表皮以外组织和器官的病原菌和条件致病真菌.；按生物学性状的不同又分为：酵母型、酵母样型、丝状菌型、双相型。深部真菌常见的有：念珠菌，隐球菌，组织胞浆菌,马尔尼菲青霉菌，曲霉，毛霉菌,孢子菌丝等。真菌的形态分单细胞和多细胞两种类型，单细胞真菌呈圆形或卵圆性，常见于酵母菌和酵母样菌；多细胞真菌多呈丝状，分枝交织成团，也称为丝状菌，即一般通称为霉菌。由菌丝和孢子构成。孢子是真菌的生殖结构，分为有性孢子和无性孢子。在适宜条件下，菌丝是由孢子生出芽管，逐渐延长呈丝状，生物学上把真菌的每一根细丝叫做菌丝。二、常用检查方法 1、直接镜检：直接镜检的方法方便经济，可采用不染色的湿片如KOH涂片或乳酸酚棉蓝涂片。对浅表和皮下真菌感染最有帮助，一般在有菌部位发现大量真菌菌丝即可作出诊断，可在几分钟内完成，并且观察到的真菌形态可以提供有价值的临床信息。但是缺点在于阳性率较低，隐形结果也不能排除诊断。 2、真菌的染色方法： ①革兰染色：所有真菌真菌、放线菌均为革兰染色阳性，被染成蓝黑色。适用于酵母菌、孢子丝菌、组织胞浆菌及诺卡菌放线菌的感染。 ②吉姆萨染色可用于骨髓涂片和其他标本中荚膜组织胞浆菌和马内菲青霉的检测。用吉姆萨染色必须要有指控涂片。 ③PAS法：用高碘酸氧化真菌菌壁的多糖游离出醛基，后者与无色品红结合生成新的品红色复合物而被显色。操作方法： (1)切片脱蜡至水。 (2)0.5%高碘酸氧化5-8分钟。 (3)流水冲洗2分钟，再用蒸馏水洗。 (4)入无色品红液于暗处并加盖作用10-20分钟。 (5)0.5%偏重亚硫酸钠液滴洗2次，每次约1分钟。 (6)流水冲洗5分钟。

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