ICS3000离子色谱操作规程
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离子色谱操作规程
一、开机
1、打开钢瓶气源开关,分压表调到0.2-0.3(建议不关闭钢瓶气源);
2、调节减压阀到3-6Psi左右;
3、依次打开SP泵、EG淋洗液自动发生器、DC色谱单元、AS自动进样器和VWD紫外检测器的电源开关。
4、如仪器长时间不使用或更换淋洗液后,要先打开平衡泵头上的PRIME阀排气。
5、打开电脑,待右下角变色龙服务器图标变灰色后,双击桌面的变色龙,打开控制面板。
二、平衡、运行样品
6、开泵,根据连接的柱子设定泵流速(氨基酸0.22;糖PA10 1;糖PA200 0.4;阴离子1或1.2;氢氧化钾浓度30mM;阳离子CS18:0.25);设定柱箱温度(30度);
电导检测器:根据具体的试验条件,在控制面板DC页面选定抑制器类型和电流;在CD页面设定并开启检测器温度。
电化学检测器:在ED页面打开池子电压,选择CVMODE为INTAMP并选定波形(WAVEFORM)。
7、系统平衡
8、编辑运行样品表(SEQUENCE)
9、系统平衡好后,停止采集基线,启动样品表(依次点击BATCH、START),选择要运行的样品表。
10、做完样后双击打开第一个标准,点击QNT-EDITER,进行数据处理。
三、关机
11、关机前的工作
阴离子:如果样品很复杂,先用高浓度氢氧化钠(50-60mM氢氧化钠)清洗系统15-20分钟,然后在调到30mM正常浓度清洗30分钟;阳离子:用正常淋洗液条件(5mM)冲洗系统20分钟;
糖PA10:使用200mM氢氧化钠冲洗系统15分钟,然后再换成18mM 清洗15-20分钟;
氨基酸:最好在结束样品后走一空白梯度或进针水走一75分钟的梯度;
糖PA200:用100mM氢氧化钠/50mM醋酸钠走20分钟
12、关机
阴阳离子:将抑制器电流关掉,然后将泵逐步降为0;
氨基酸、糖:将电化学检测池电压关掉,然后将泵逐步降为0。
接着,断开AS、DC、EG、DP、VWD的连接。关闭各设备的电源。建议不要关掉氮气。
四、注意事项
1、每周更换两次泵里的泵头密封清洗液(100%水),高度在MIN 和MAX之间;
2、更换淋洗液后要打开PRIME阀排气泡,排完气后不要将阀拧的过紧;
3、自动进样器和淋洗液A瓶的水要每周更换一次,以防止水中长菌污染系统;更换完自动进样器的水后要排注射器的气泡。
4、不使用的柱子的封存方法
用正常的淋洗液条件冲洗系统1个小时,然后将柱子卸下用死堵头封死。
阴离子:30mM氢氧化钠
阳离子:5mM甲烷磺酸
氨基酸:水/250mM氢氧化钠/醋酸钠 36/24/40
糖PA10:18mM氢氧化钠
糖PA200:水/250mM氢氧化钠/醋酸钠 40/40/20
6、紫外检测器:做完试验后就将氘灯关掉,延长氘灯的使用寿命;做完试验后要用纯水将监测池中的盐冲洗干净(此时不连柱子),然后用红色管套将监测池进出口封住。
7、电导:做完后如果要更换其它检测器,需将抑制器卸下,在抑制器右边的ELUENT OUT和GENEER IN口注入5毫升水后用死堵头密封。在下次使用前在两个流路分别注入5毫升水后活化20分钟后使用;在电导检测器的进口用注射器注入5毫升左右的水,冲洗检测池,以防止长时间不用盐结晶堵住电导检测池,然后用死堵头封死。
8、电化学检测器:使用完后,要用纯水彻底冲洗安培池,将盐洗净。然后封死进口。如果长时间不用,一种方法是2天用水冲洗安培池30分钟;或者分别将参比电极拆下来放入3M氯化钾中,同时将金电极卸下用水冲洗金电极表面后放入干净的塑料袋中,将DUMMY电极安
上。再下次操作时要将参比电极的表面用水洗干净在安装上,以防止由于表面的盐造成密封不严漏液。
电化学检测器的操作都要使用一次性手套(手套上不能带粉)
9、氢氧化钠要使用进口50%的,醋酸钠要使用戴安公司的
10、长时间不用要用水冲洗安培池,并将参比电极卸下来浸泡到KCl 中。
11、样品不要过载;样品要过滤