小鼠基因型鉴定
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小鼠基因型鉴定(CXY)
小鼠基因组DNA的提取
1.剪2mm 小鼠尾巴于1.5ml的EP管中,加500μl的“鼠尾裂解液+PK”放在55℃的干浴过夜;
2.取出干浴过夜后的EP管,待冷却至室温后,离心(4℃,13000rpm,5min),将上清移
至新的1.5ml的EP管中;
3.每个EP管加250μl的异丙醇,上下颠倒4~5次,离心(4℃,13000rpm,15min)弃上清,
将离心管倒扣晾干;
4.加200-300μl水在离心管中,于55℃干浴或烘箱中放置1h(或室温放置7h左右);PCR
5.配混合液并分装(12.5μl的体系);
6.PCR程序:预变性95℃3min
变性94℃30s
退火
延伸
充分延伸
电泳