温度和培养基在申克孢子丝菌酵母相转化中的作用研究

Ｓ Ａ， Ｐ Ａ， ａ ｄＢ ． 【 ｏｃｕｉ 】 Ｔ ｍ ｅａ ｒ ｅｋｙｆ ｔｒｈ ｔ ｆ ｃｓｍ ｃｌ ｍ— —ｅｓ ｔ ｎｆｒ ａ ｏ ｆＳｏｏｈ ｘ Ｄ Ｄ ｎ ＨＩ Ｃ ｎｌｓ ｎ ｏ ｅ ｐ ｒ ｕｅｉ ｔ ｅ ｃ ａ ａｅｔ ｙｅｉ ｔ ｙａｔｒ ｓ ｍ ｔ ｎｏ ｐｒｔｒ ｔ ｓｈ ａｏ ｔ ｕ ｏ ａ ｏ ｉ ｉ
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率仅 为 ４ ％。使用 ５ ／ ｇ羊血 Ｂ Ｉ Ｏ５ Ｓ Ｈ 培养基培养 。５ ５ ０ｍｇ ｋ Ｈ 和 ．％Ｇ Ｂ Ｉ ６ ％培养皿上 的菌 株发生 了酵母相转 化 ， 用 Ｂ Ｉ 使 Ｈ 培养基
培养 ．５ ４ ％培养皿上 的菌株发 生了酵母相 转化 ． 而使用 Ｓ Ａ和 Ｐ Ａ培养基 培养 ， 有 ２ ％培养 皿上 的菌株发 生 了酵 母相转 Ｄ Ｄ 只 ０ 化 。３ ７℃时 ，有 ３株 菌在 Ｂ Ｉ５ ／ ｇ羊血 Ｂ Ｉ ５ｍｇ ｋ Ｓ Ｈ 培养 基上 的酵母 细胞 转化 率均 达 到 ９ ％， 株 菌在 Ｈ 、０ｍｇ ｋ Ｈ 和 ／ ｇＧ Ｂ Ｉ ０ １
ｉ ｌ ｅ ｆｅ ｃ ｅｄ ｅｅ ｉｃ ｂ ｔｄ ａ ５ ｏ ｓ ａ ｓｏ ａ ｈ ｍ ｉａ ｗ ｒ ｕ ａ ｔ Ｃ，３ Ｃ，３ Ｃ，３ Ｃ，ａ ｄ ３ ｏｔ ｎ ｅ ２ ５ｏ ６ｏ ７ｏ ｎ ８℃．Ｇ ｏ ｔ ｆＳ ｏｏ ｒ ｃ ｅ ｃ ｉ ｗ ｓｏ ｓｒｅ ｒ ｈ ｏ ｐ ｒ ｈｉ ８ ｈ ｎ ｋｉ ａ ｂ ｅｖｄ ｗ ｔ ｘ
摘
要 ： 目的 】 【 探讨不 同温度 和培养基在 申克孢子 丝菌酵母相 转化 中的作 用 。【 方法 】 ４ 临床分离菌 株分别接 种 将 株
于 Ｓ Ａ、Ｄ Ｂ Ｉ５ ｇ ｋ 羊血 Ｂ 及 ５ｍｇ ｋ Ｓ ＨＩ Ｄ Ｐ Ａ、 Ｈ 、０ｍ ／ ｇ ＨＩ ／ ｇＧ Ｂ ５种培 养基平皿 上 ， 每种培养基 接种 ５个 平皿 ， 分别置 于 ２ ５℃、 ５ ３
ｓｈｎｋｉ Ｍｅ ｏｓ ｈ ｌ ｉ ｓｌ ｅ ｅｅｉｏｕａｅ ｎｐａ ｓｏ ｅ ｉ ａ ｅ ｅｃｖｔ ｎ Ｅ ｃ ｏ ｔ ｗ ｓｉｏｕａ ｄ ｏ ｃ ｅｃ ｉ ．【 ｔ ｄ 】Ｔ ｅｃｉ ｃ ｉ ａ ｓ４ｗ ｒ ｎ ｃｌ ｄｏ ｌｅ ｆ ｄａ ｆ ｒ ａｔ ａｉ ． ａｈｉ ｌ ｅ ａ ｎｃｌｔ ｎ ｈ ｎ ａ ｏｔ ｌ ｔ ｔ ｍ ｔ ｒ ｉ ｏ ｓａ ｅ
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第 ３卷 １
２１年 ００
第Βιβλιοθήκη Baidu 期
７月
中山大学学报（ 医学科学版 ） Ｊ Ｕ Ｎ ＬＯ Ｕ Ａ —Ｅ Ｎ Ｖ Ｒ ＩＹ ＭＥ Ｉ Ａ ＣＥ Ｃ Ｓ Ｏ Ｒ Ａ ＦＳ Ｎ Ｙ Ｔ Ｓ Ｎ Ｕ Ｉ Ｅ ＳＴ （ ＤＣ ＬＳ Ｉ Ｎ Ｅ ）
Ｖ０ ． Ｎｏ４ Ｉ３１ ．
Ｊ１ ２ １ ｕ． ０ ０
温度和培养基在 申克孢子丝菌酵母相转化中的作用研究
张 静 ・，黄怀 球 ¨，薛 汝增 ，张 晓辉 ． 一 ，冯 佩英 ，李美 荣
３ 广东省皮肤性 病防治 中心 ， ． 广东 广州 ５ ０ ０ ） １０ ０ （． １ 中山大学 附属第 三医院皮肤性病科 ， 东 广州 ５ ０ ３ ；２ 中山大学孙逸仙纪念 医院皮肤性病科 ， 东 广州 ５ ０ ２ ； 广 １６ ０ ． 广 １ １０
ａｄｒ ｅ ｏ ｔ ｎ ｏ ａｏ ｅ ｌ ｌｅ． Ｒｓｌ 】 ｔ ８ｏ ，ｈ ａｓｒ ａｏｓ ａ ｓ ｅ ５ ｔｅ ｎ ｅ ｔｉ ｃｎｅｅ ｎ ｔ ｆ ａｓ ｒ ｔｎｗｒ ｃ ｃ ａ ｄ 【ｅｕｓ Ａ ｔ ｔｎｆｍ ｔｎ ｒｅ ｗ ｒ ２％（ ｌｏ ｒ ｎ ｏｖｒｄ ａ ｓ ｆｍ ｉ ｒ ｅａｕｔ ｔ ３ Ｃ ｅ ｒ ｏ ｉ ｔ ｅ ｈ ｏ ｙ ｎ Ｓａ ｔ
［ Ｓ Ｎｒ ｔｅ ｎ （ ｅ ｃ）２ １ ，１４ ：９— ９ ］ Ｊ Ｕ ａｓｎＵ ｉ Ｍ ｄＳｉ，００３ （）４ １４５ — ｖ
收稿 日期 ： ０ ９ ｌ ２ ２ ０ —１一 ９ 基金项 目：广东 省 自然科学基金 （ １ １０ ９ １０ １７ ； ８ ５０ ８０ ０ ０ ８ ） 广东省科技 计划项 目（０ ７ ０ ０ ０ ０ ６ ２０ Ｂ ３７ ４ ０ ）
Ｓ Ａ Ｐ Ａ和 Ｂ Ｉ Ｄ 、Ｄ Ｈ 培养基上 的转化率均 低于 １％。 【 ０ 结论 】 温度 是影响 申克孢子丝 菌酵母相转 化 的关键 因素 ， 培养基 的营养
成分亦是影 响转化 效果的重要 因素 。 关键词 ：申克孢子 丝菌 ；酵母相转 化 ：温度 ；培养基
中图 分 类 号 ： Ｒ ７ ３ 文 献 标 志 码 ：Ａ 文 章 编 号 ： １７ —５ ４ ２ １ ）４０ ９ —５ ６ ２３５ （ ０ ０ ０ —４ １０
１５ 统计 学 分析 ．
以引起皮肤组织的病变 ，还可侵犯内脏器官引起 系统 性 病 变 ， 重 危 害着 人 类 的健 康 ［ 。酵 母 相 严 ］
是 申克孢 子 丝 菌 的致 病 相 ，申克 孢 子 丝菌 在 体 内
Ｃ ｉ ａ ． ｐ ｒ ｎ ｆＤｅ ａｏ ｏ ｎ ｅ ｅ ｅ ｌｇ ，Ｓ ｎ Ｙａ— ｅ ｍｏ ｉ ｓ ｉ ｌ ｕ ｔｓ ｎ Ｕ ｉｅ ｉ ， ｈ ｎ ；２ Ｄｅ ａ ｔ ｍｅ ｔ ｒ ｔｌ ｇ ａ ｄ Ｖ ｎ ｒ ｏｏ ｙ ｕ ｔ ｎ Ｍｅ ｒａ Ｈｏ ｐ ｔ ，Ｓ ｎ Ｙａ －ｅ ｎ ｖ ｒ ｔ ｏ ｍ ｙ ｓ ｌ ａ ｓ ｙ Ｇ ａ ｇ ｈ ｕ ５ ０ ３ ，Ｃ ｉ ａ；３ Ｄ ｐ ｒｍｅ ｔ ｆＤｅｍａｏ ｏ ，Ｇｕ ｎ ｄ ｎ ｅ ｔｒｆｒＳ ｉ ｓ ａ ｅ ａ ｄ Ｓ ＩＣ ｎ ｒ ｌ ｕ ｎ ｚ ｏ ６ ０ １ ｈｎ ． ｅ ａ ｔ ｎ ｒ ｔｌ ｇ ｏ ｙ ａ ｇ ｏ ｇ Ｃ ｎ ｅ ｋ ｎ Ｄｉｅ ｓ ｎ Ｔ ｏ ｔ ， ｏ ｏ
℃、６℃、７ ｃ ３ ３ ３ 。及 ８℃含体积百分数 为 ５ Ｃ ％ Ｏ 的恒温箱 中培养 。观察菌落生长情况并 计算酵母细胞转 化率 。【 结果 】 ３ 在 ８
℃， 平皿转化率为 ２ ％（ ５ 只有 １ 株菌发生 了转化 ） 在 ３ 和 ３ ； ５ ７℃时 ， 平皿 转化率分 别是 ６ ％和 ８ ％； ０ ５ 而在 ３ ６℃时平皿转化
Ｂ ， ５ ／ ｇ ｇ ａ ｌｏ ＨＩ ０ ｍｇ ｋ ｏｔｂｏ ｄ ＢＨＩ和 ５ ｍｇ ｋ Ｂ ； Ｈｏ ｖ ｒ ｔｅ ｔ ｎｆｒ ａｉｎ ｒｔｓｏ ｓｌｔ ｅｅ ｌｓ ｈ ｎ １ ／ ｇ ＧＳ ＨＩ ｗｅ ｅ ， ｈ ｒ ｓｏ ｔ ａｅ ｆ １ｉｏａｅ ｗ ｒ ｅｓ ｔａ ０％ ｏ ａ ｍ ｏ ｕ
室温培养 为菌丝 相 ，在体 内或 ３ ７℃培养 为酵母
相 。申克孢 子丝 菌 感染 可 导致 孢 子丝 菌 病 ， 不仅 可
在所有平皿上 的菌株传代 ３次生长至第 ５ 天 时， 用接种环挑取少量菌落 ， 置于灭菌载玻片上 ， 滴
加 乳 酸酚棉 兰或 酚红染 色后 。 于光 学显 微镜 下观 置 察 菌落 形态 。参照 文献 ［ 算每个 平板 上菌株 的酵 ］ 计 母 细胞 转化率 ， 化率 ＞１％为 酵母相转 化成 功 。 转 ０
Ｇ ａｇｈｕ５ ０ ０ ，Ｃ ｉ ） ｕ ｎｚｏ ０ ０ ｈｎ １ ａ
Ａ ｓ ａｔ Ｏ ｊ ｔｅ ｏｉ ｅ ｉ ｔ ｔ ｆｃ ｏ ｔ ｐｒ ｕ ｎ ｅｉ ｏ ｙｅｕ —— ａｔｒ ｓ ｒａｏ ｆ ｒｈｉ ｂｔ ｃ：【 ｂ ｃｖ】Ｔ ｖｓｇ ｅ ｈ ｅｅｔ ｆｅ ｅ ｔ ｅａｄｍ ｄ ｎｍ ｃｌｍ ｔｙ ｓ ｔ ｎ ｏ ｔｎｏ 却ｏ ｔ ｘ ｒ ｅｉ ｎ ｔａ ｅ ｍ ａ ｒ ａ ｉ ｏ ｅ ａ ｆ ｍ ｉ ｏ ｒ
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ｐ ａｅ ｆＳ ｌ ｔｓ ｏ ＤＡ，Ｐ ＤＡ， Ｂ ，５ ／ ｇ ｇ ａ ｌ ｏ ＨＩ ０ ｍｇ ｋ ｏ ｔｂ ｏ ｄ ＢＨＩ ａ ｄ ５ ｍｇ ｋ ＢＨＩ ａ ｄ ５ ｐ ａｅ ｆｅ ｃ ｄ ａ ｗｅ ｅ ｐ ｅ ａ ｅ ｅ ａ ｓ ｎ ／ ｇ ＧＳ ， ｎ ｌｔ ｓ ｏ ａ ｈ ｍｅ ｉ ｒ ｒ ｐ ｒ ｄ ｂ ｃ ｕ ｅ
作者简介 ：张静 ， 士生 ， 硕 研究方 向为真菌性皮肤 病 ； 通信 作者 ： 黄怀球 ， 副主任 医师 ， ． ａ ： ｈａ ｉ＠ ｅ ｍ ｉｃｍ ｃ Ｅ ｍ ｉ ｈ ｕｉ ｕ ｍ ｄ ａ ． ． ｌ ｑ ｌｏ ｎ
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中山大学学报（ 医学科学版）
第 ３ 卷 １
申克孢 子 丝 菌 属 于 双相 型真 菌 ．在 自然 界 或