病理切片的结果分析方法
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病理切片的结果分析方法
HE染色:又称苏木素-伊红染色法,其中苏木素是Hematoxylin,简称H,伊红是Eosin,简称E,这是是普通光学显微镜观察与鉴别细胞凋亡与细胞坏死的一种染色方法。这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。经过HE染色,细胞核被苏木素染成蓝紫色,细胞质被伊红染色呈粉红色。
检验原理:
* 苏木素是碱性染料,蓝紫色,可以使细胞核等着色。被苏木素着色的结构本身为酸性,具有嗜碱性(Basophilic)。
* 伊红是酸性染料,粉红色。可以将大多数细胞的细胞质染成红色。被伊红着色的结构本身为碱性,具有嗜酸性(Acidophilic)。
* 不易被苏木素和伊红着色的结构具有嗜中性(Neutrophilic)。
结果:细胞核呈蓝色,细胞质,肌纤维,胶原纤维和红细胞呈不同程度的红色。钙盐和细菌可呈蓝色或紫蓝色。
Masson三色染色:主要用于胶原纤维和肌纤维的鉴别染色。Masson染色是最为常用的结缔组织染色法,此法多用于观察病变组织中纤维结缔组织的增生和分布,纤维性肿瘤与肌源性肿瘤的鉴别。对酒精性肝硬化/坏死后性肝硬化及各型肝炎导致的小叶汇管区纤维组织增生程度的差别具有重要价值。
Masson染色在肾穿刺活检中可以用于判别在肾小球毛细血管网的系膜氏和上皮下是否存在嗜复红蛋白的沉积,对于肾脏疾病的病理诊断有重要意义。
检验原理:
利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用完成染色,与阴离子染料分子大小和组织的渗透性有关。根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色,便可把不同组织成份显示出来
结果:细胞核呈黑色,肌纤维呈红色,胶原纤维呈亮绿色。
抗酸染色法: acid-fast?staining?method??1882年由埃利希(F.Ehrlich)首创并经F.齐尔(
Ziehl)改进而创造出的细菌染色法。其中最具代表性的为对结核菌的齐尔-尼尔森(Ziehl-
Neelsen)染色法和齐尔-加贝特(Ziehl-Gabbet)染色法。用石炭酸复红染色后,用盐酸乙醇分色,再用美蓝进行对比染色,即不再脱色而呈现石炭酸复红的红色。
检验原理:
分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质,包围在肽聚糖的外面,所以分枝杆菌一般不易着色,要经过加热和延长染色时间来促使其着色。但分枝杆菌中的分枝菌酸与染料结合后,就很难被酸性脱色剂脱色,故名抗酸染色。
齐-尼氏抗酸染色法是在加热条件下使分枝菌酸与石炭酸复红牢固结合成复合物,用盐酸酒精处理也不脱色。当再加碱性美兰复染后,分枝杆菌仍然为红色,而其他细菌及背景中的物质为蓝色。
结果:抗酸杆菌鲜红色,背景蓝色
结核肉芽肿的病理形态:
(人)朗罕氏细胞(Langhans Cells):在肉芽肿组织中的上皮状巨噬细胞有时会几个混合在一起,成为有数个细胞核的巨大细胞。常见于慢性炎症如肺结核。
(人)结核性肉芽肿是一种良性病变,又称结核结节,是在细胞免疫基础上形成的。由类上皮细胞,Langhans 多核巨细胞加上外周积聚的淋巴细胞和少量反应性纤维母细胞构成,变态反应强时结核结节内可出现干酪样坏死。
(人)
类上皮样细胞:为梭形或多边形,常以胞浆突起相互联络,核圆形或卵圆形,淡染泡状,含有1~2个小核
仁,略类似上皮细胞。此细胞来源于血液单核细胞或组织巨噬细胞。
肉芽肿内的朗罕氏巨噬细胞:肉芽肿内的巨细胞是由上皮样细胞融合而来,细胞数目可达几十个,甚至几百个。其功能也与上皮样细胞相似,尚可见于不易消化的较大异物周围,组织中角化上皮和尿酸盐周围。若细胞核排列于细胞的周边称为Langhans型巨细胞。此种细胞还可见于由吞噬了结核分枝杆菌的巨噬细胞形成的上皮样细胞相互融合或一个细胞核分裂胞质不分裂乃形成朗罕斯巨细胞。朗罕斯巨细胞为一种多核巨细胞,直径可达300微米,胞质丰富。其胞质突起常和上皮样细胞的胞质突起相连接,核与上皮样细胞核相似。核的数目由十几个到几十个不等,有超过百个者。核排列在胞质周围呈花环状、马蹄形或密集于胞体的一端。
淋巴细胞以小的居多,核呈深染,胞质在核周一薄层,呈蔚蓝色淡染。还有一个就是核上有一个小er xian ,不很明显
基本上成熟的单核细胞和成熟的小淋巴细胞还是很容易区别的。小淋巴细胞和红细胞差不多大,比单核小很多;细胞核几乎占满细胞,胞质很少,而单核细胞胞质较多。单核和大淋巴区别稍困难些。淋巴细胞(大或小)是圆的,核也是圆的,胞质几无颗粒,染色质集块;单核胞体不规则,核也不规则,胞质有细小颗粒,染色质网状。具体见下:单核细胞胞体直径12-20μm,胞体圆形或不规则形,可见伪足。胞质量丰富,蓝色或灰蓝色,半透明状,可见许多细小而分布均匀的嗜苯胺蓝颗粒,部分胞质中可见空泡。核形不规则,可呈肾形、马蹄形、分叶状,常伴有切迹、凹陷、扭曲、折叠。核染色质为网状或条索状。无核仁。成熟淋巴细胞分大小两型。大淋巴细胞胞体直径12~15μm,圆形。胞质量较多,淡蓝色,无颗粒或可见少量嗜苯胺蓝颗粒。胞核类圆形,可有切迹。核染色质浓集,有时见核仁残迹;小淋巴细胞胞体直径6~10μm,圆形、椭圆形或轻度不规则形。胞质量很少,淡蓝色,通常无颗粒。胞核圆形,可有切迹和凹陷。核染色质成块状,染紫红色。无核仁。
成纤维细胞(fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,细胞呈梭形或扁的星状,具有突起。根据不同的功能活动状态,将细胞分为成纤维细胞和纤维细胞二型:成纤维细胞乃是功能活动旺盛的细胞,细胞和细胞核较大,轮廓清楚,核仁大而明显,细胞质弱嗜碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动;纤维细胞(fibrocyte)功能活动不活跃,细胞轮廓不明显,核小着色深,核仁不明显,细胞质少。此二型细胞可互相转化。
干酪样坏死:结核病变,分为干酪为主型和增生为主型。
干酪为主型一般比较好辨认,彻底的大片坏死是典型的干酪坏死,遗憾的是,实际临床工作中,有许多的已经证明是结核的病变干酪坏死并不典型。干酪坏死也不是结核病变独有,如非典型分支杆菌感染病变、淋巴结Crohn病和Wegerner肉芽肿等,都可以出现干酪样坏死。需要具体病变具体分析。
增生为主型病变干酪坏死可以很少,甚至不容易辨认,而以类上皮细胞增生为主。则需要与许多的肉芽肿性病变鉴别。