1、最小分子量测定法测定蛋白质中某一微量元素的含量 如Mb含Fe为0.335%，则M=55.8/0.335%=16700。这就是最小分子量。其实，真实分子量是最小分子 量的n倍，n指Fe的数目，Mb的n=1，所以 M=16700。ห้องส
.二、a 细胞的破碎⑴机械方法 主要通过机械切力的作用使组织细胞破 坏。常用器械有： ①玻璃匀浆器（用两个磨砂面相互 摩擦，将细胞磨碎） ②高速组织捣碎机（转速可达 10000rpm，具高速转动的锋利的刀片），宜用于动 物内脏组织的破碎 ⑵
楚雄师范学院化学与生命科学系范树国2.聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）3.毛细管电泳楚雄师范学院化学与生命科学系范树国4.等电聚焦电泳等电聚焦电泳法测定蛋白质pI5.SDS-PAGE6.离子交换层析离子交换纤维素： 离子交换交联葡聚糖：兼有分
主要方法介绍4 反相层析 反相层析与疏水层析一样，都是利用蛋白分子的疏水性差异来实现分离纯 化的技术。但是二者有区别，疏水层析的固定相是弱疏水配基，而反相层析 的固定相含有高度非极性基团，且配基的密度要高很多，在疏水层析中用盐 浓度调节蛋白
蛋白质提取、纯化、鉴定的方法（二） 一、层析技术 1.离子交换层析的亲和洗脱这种技术结合了离子交换与亲和层析。如在某一pH时，目的蛋白质带正(负)电荷，用阳(阴)离子交换剂吸附，这一过程去除了很大一部分不吸附的杂蛋自。然后用该目的蛋白质的配
1、最小分子量测定法测定蛋白质中某一微量元素的含量 如Mb含Fe为0.335%，则M=55.8/0.335%=16700。 这就是最小分子量。其实，真实分子量是最小分子 量的n倍，n指Fe的数目，Mb的n=1，所以 M=16700。4、凝胶
1.前处理：因动/植物/细菌而异2.粗分级分离：采用盐析/等电点沉淀/ 有机溶剂分级分离等方法3.细分级分离：采用凝胶过滤、离子交 换层析、吸附层析以及亲和层析等4.结晶是最后步骤五、蛋白质的分离纯化方法（一）根据分子大小不同的纯化方法1、
蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤： （一）材料的预处理及细胞破碎 分离提纯某一种蛋白质时，首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态，不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。常用的破碎组织细胞的方法有： 1
蛋白质的纯化原理 一）根据蛋白质溶解度不同的分离方法 1、蛋白质的盐析 中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响，一般在低盐浓度下随着盐浓度升高，蛋白质的溶解度增加，此称盐溶；当盐浓度继续升高时，蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出，这种现象称盐析
蛋白质提取与纯化技术 选择材料及预处理 以蛋白质和结构与功能为基础，从分子水平上认识生命现象，已经成为现代生物学发展的主要方向，研究蛋白质，首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识，但基本
SDS二、 蛋白质分子大小与形状 SDS与蛋白质结合，改变了蛋白质单体分电（ 泳六 ）聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶子的构象，SDS-蛋白质复合物在水溶液 中的形状是椭圆棒状，不同蛋白
蛋白质纯化与结晶的原理获得蛋白质的晶体结构的第一个瓶颈，就是制备大量纯化的蛋白质(>10 mg)，其浓度通常在10 mg/ml 以上，并以此为基础进行结晶条件的筛选。运用重组基因的技术，将特定基因以选殖(clone)的方式嵌入表现载体(ex
蛋白质的纯化方法蛋白质在外加电场作用下，带电的蛋白质颗的纯粒在电场中移动的速度(v)取决于化电场强度E，所带的净电荷q，蛋方白质的分子量、分子形状以及与介质法的摩擦系数f。几种常用的电泳纸电泳醋酸纤维薄膜电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE 可
蛋白質提取、純化、鑒定の方法（一） 一、硫酸銨沉澱 硫酸銨是用於沉澱蛋白質の最常用の鹽。低濃度硫酸銨使蛋白質の溶解度增大，即所謂の鹽溶(salting in)，但當硫酸銨濃度增加到一定濃度後，蛋白質の溶解度開始減小，即所謂の鹽析(salti
实验十蛋白质的表达、分离纯化和鉴定第一部分蛋白质的表达、分离纯化目的要求（1）了解重组蛋白表达的方法和意义。（2）了解重组蛋白亲和层析分离纯化的方法。实验原理目的基因在宿主细胞中的高效表达及表达的重组蛋白的分离纯化对理论研究和实验应用都具有
蛋白质的提取与纯化 一，蛋白质的提取 大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液，少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中，因些，可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶。 （一）水溶液提取法 稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳
分离纯化蛋白质的方法及原理This manuscript was revised on November 28, 2020分离纯化蛋白质的方法及原理（一）利用分子大小1、透析：原理：利用蛋白质分子不能透过半透膜的性质，使蛋白质和其他小分子物
蛋白质的分子结构包括一级结构 (primary structure) 二级结构 (secondary structure) 三级结构 (tertiary structure) 四级
蛋白质纯化 一．可溶性蛋白的纯化 1. 盐析 硫酸铵沉淀法可用于从大量粗制剂中浓缩和部分纯化蛋白质。用此方法可以将主要的免疫球从样品中分离，是免疫球蛋白分离的常用方法。高浓度的盐离子在蛋白质溶液中可与蛋白质竞争水分子，从而破坏蛋白质表面的水
本章主要Hale Waihona Puke Baidu容氨基酸 肽 蛋白质的结构、重要性质、结构与功能关系和蛋白质的分离纯化巯基乙醇：破坏-S-S-电泳过程蛋白质电泳迁移率取 决于
