后荧光显微镜观察。 11. 观察结果 肺癌细胞胞质中绿色或红色荧光所在区域即为actin的存在部位，在100倍油镜下可以观察到tubulin呈绿色或红色丝网状均匀分布于胞质中。5为了保证免疫荧光细胞化学染色的准确性，排除非特异性染色导致的假

石蜡切片免疫组化及免疫荧光染色方法 1、组织得采集、固定与保存: 采取组织后, 方法一:4％多聚甲醛(4％ＰＦＡ)4︒Ｃ固定1小时(根据组织大小与致密程度调整固定时间)或过夜 方法二:采用boｕｉn’s固定ＲT 2h(6—8dｔeｓis)o

8四、免疫学方面该领域应用较多的为间接荧光抗体法，如抗肾上腺皮质抗体、抗肝细胞膜抗原自身抗体、抗胰岛细胞抗体，抗骨骼肌抗体、抗平滑肌抗体、抗线粒体抗体、 抗胃壁细胞抗体、抗肾小球基底膜抗体，抗组蛋白抗体，抗DNA抗体、抗核抗 体等。用该组织

免疫荧光细胞化学染色方法 一、标本制作 可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片，经适当固定或不固定，作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 （一）直接法 1．染色切片经固定后，滴加经稀释至染色效价如1：8或1：16的荧光抗体（如兔抗人

免疫荧光技术（检测抗核抗体（ANA）的实验方案） 荧光免疫技术是以荧光物质标记的特异性抗体或抗原作为标准试剂，用于相应抗原或抗体的分析鉴定和定量测定。荧光免疫技术包括荧光抗体染色技术和荧光免疫测定两大类。荧光抗体染色技术是用荧光抗体对细胞、

免疫荧光技术的实验方法及其分类 一、免疫标记法及其分类 1.荧光免疫法 原理是应用一对单克隆抗体的夹心法。底物用磷酸-4-甲基伞形酮，检测产物发出的荧光，荧光强度与Mb浓度呈正比，可在8min 内得出结果。结果以Mb每小时释放的速率表示(△

荧光免疫染色和DAPI染色实验 1．实验原理 免疫染色的实验原理类似于Western Blotting，两者都是运用抗体的特异性识别作用来显示目的蛋白，但是由于免疫染色需要在原位进行，而且蛋白没有经过富集，因此其实验难度较高。 实验的基本原

对于石蜡切片： 1、烤片：60℃ 60分钟 2、脱蜡：二甲苯中Ⅰ脱蜡15分钟→二甲苯Ⅱ脱蜡15分钟→无水乙醇Ⅰ5分钟→无水乙醇Ⅱ5分钟→90%乙醇Ⅰ5分钟→90%乙醇Ⅱ5分钟→70％乙醇5分钟 →蒸馏水5分钟→蒸馏水5分钟。 3、抗原修复：

共聚焦显微镜简介及免疫荧光染色在线下载,格式:ppt,文档页数:20

没有及时固定引起抗原的扩散 立即固定组织;尝试用交联性固定剂替换有机(醇类)固定剂 固定不充分 过度固定 抗原修复无效 不兼容的二抗和一抗 漏用试剂或未按正确的顺序 加入试剂二，高背景可能的原因 一抗或二抗的浓度过高相应的措施预实验摸索最

精选ppt3【实验准备】1、材料 体外培养的人肺癌细胞的飞片。2、试剂 0.01MPBS溶液（pH7.4）：NaCl 8.0g，KCl 0.2g，NaH2PO4 1.15g，KH2PO4 0.2g，蒸馏水定容至1000mL；抗体稀释液（含B

免疫荧光技术操作步骤直接免疫荧光法测抗原基本原理将荧光素标记在相应的抗体上，直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高，非特异性荧光染色少，相对使用标记抗体用量偏大。试剂与仪器磷酸盐缓冲盐水（PBS）：0.01mol/L，pH7.4荧光

免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合来显示目的蛋白，主要包括蛋白和一抗结合，其次是带有荧光基团的二抗识别并结合一抗，荧光显微镜下即可观察到荧光，下文主要列举了三种细胞免疫荧光染色的实验步骤。 zo-1的免疫荧光，步骤如下：

PI孵育10min，室温， 避光DPBS+0.3%PVP,洗3 遍，5min/遍，避光封片，拍照谢谢 !生物技术专题之------免疫荧光染色技术（一）定义 （二）物理基础（操作流程1、定义将抗体(或抗原)在不影响其免疫学特性 的条件下 ,

多甲藻叶绿素蛋白 （PerCP） PerCP是在甲藻和薄甲藻的光学合成器中发现的，是一种蛋白复合物，分子量约 为35kD，最大激发波长的峰值在490nm附近，当被488nm氩离子激

石蜡切片免疫组化及免疫荧光染色方法1、组织的采集、固定和保存：采取组织后，方法一：4%多聚甲醛（4%PFA）4 C 固定 1 小时（根据组织大小和致密程度调整固定时间）或过夜方法二：采用bouin ' s 固定RT2h（6-8d tesis

免疫荧光（Immunofluorescence, IF）实验方法 免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。它是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团，再用这种荧光抗体（或抗原）作为探针检查

对于石蜡切片： 1、烤片：60℃ 60分钟 2、脱蜡：二甲苯中Ⅰ脱蜡15分钟→二甲苯Ⅱ脱蜡15分钟→无水乙醇Ⅰ5分钟→无水乙醇Ⅱ5分钟→90%乙醇Ⅰ5分钟→90%乙醇Ⅱ5分钟→70％乙醇5分钟→蒸馏水5分钟→蒸馏水5分钟。 3、抗原修复：高

不通透的染色方法:封闭液:3%BSA 用PBS 配制不加吐温-20,一抗,二抗用封闭液配制.1.4% PFA（多聚甲醛）室温固定15min。2.1xPBS 洗三次，每次5min。3.3%BSA（不加吐温-20）封闭1hr。4.一抗4度过夜5

免疫荧光技术常见问题汇总1、问：用免疫荧光方法做组织切片和培养细胞内的蛋白，两者操作过程有哪些不同？参考见解：只是固定方法不同。细胞固定用甲醇，切片固定用多聚甲醛，而染色方法是一样的。2、问：近期要做免疫荧光双标，不知哪位有免疫荧光双标技术