分子生物学技术

现代分子生物学技术

目录荧光共振能量ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ换技术目录一、酵母双杂交技术的基本原理目录二、酵母双杂交系统的应用（一）分析已知蛋白之间的相互作用 （二）对蛋白质功能域的分析 （三）分析未

分子生物学主要研究内容1. 核酸的分子生物学。核酸的分子生物学研究核酸的结构及其功能。由于核酸的主要作用是携带和传递遗传信息，因此分子遗传学是其主要组成部分。由于50年代以来的迅速发展，该领域已形成了比较完整的理论体系和研究技术，是目前分子

（1）DNA芯片可以通过杂交来检测样品中的核酸，也可以 利用双链DNA与蛋白质的相互作用来检测蛋白质。（2）蛋白质芯片利用蛋白质间的相互作用如抗原-抗体反 应或受体-配体之间的特异

转基因植物） 3.6 微阵列分析**基因表达系统1、大肠杆菌表达系统 2、芽孢杆菌表达系统 3、乳酸菌基因表达系统 4、链霉菌基因表达系统 5、酵母菌表达系统 6、丝状真菌表达系统

1.3.3 核酸分子杂交复性（退火）：在一定条件 下变性的两条单链重新结合 为双链的过程杂交：来源不同的两条单链 结合为双链分子的过程。核酸探针：指序列或功能特 性已知的标记分子，

析及限制性长度多态性分析（RELP）等。 Northern印迹杂交:由Southerm印杂交法演变而来，其被测样品是 RNA。经甲醛或聚乙二醛变性及电泳分离后，转移到固相支持物上，

分子生物学技术近年来，心血管疾病的发病率和死亡率急剧增加，已成为危害我国人民群众生命和健康的重大疾病。人们逐渐认识到,包括心血管疾病在内的许多疾病的生理、病理机制的本质问题是相关基因的表达及其调控。随着研究的深入, 心血管疾病的研究已深入到

目录其他：斑点印迹 (dot blotting)原位杂交 (in situ hybridization)DNA点阵 (DNA array)DNA芯片技术 (DNA chip)目录三

激光捕获显微切割Laser capture microdissection (LCM) technology是在不破坏组织结构，保存要捕获的细胞和其周围组织形态完整的前提下，直接从冰冻或石蜡包埋组织切片中获取目标细胞，通常用于从组织中精确地

操作步骤（1）转染后24-48 h 可收获细胞，加入适量细胞裂解缓冲液 （含蛋白酶抑制剂），冰上裂解30min, 细胞裂解液于4°C， 最 大转速离心30 min后取上清； （2）

基因分子生物学基因的概念 基因的结构 基因的复制 基因的表达 基因的重组 基因的突变结 构 生 物 学基因工程 细胞工程 酶工程 发酵工程 蛋白质工程2.4 分子生物学发展的三大支

位素标记的PCR条带。PCR的基本原理基本要素• 引物 • dNTP • 耐热DNA聚合酶 • 模板DNA扩增步骤• 变性（denaturation）：90～98℃； • 退火（a

6． 利用DNA与蛋白质的相互作用进行核酸研究.a.凝胶滞缓 实验(Gel retardation assay)， 又称DNA迁 移率变化试 验(DNA mobility shif

:分子生物学研究技术文库文库，代表了生物体某一器官或组织中所有的或绝大部分的遗传信息。其构建过程总共有个步骤（项技术）：、总的提取；、的纯化；、的合成；、文库构建；、基因文库筛选。详细：、总的提取：目前常用的提取方法是异硫氰酸胍苯酚提取法（

大肠杆菌β 半乳糖酶基因 (lacZ)的启动 子及其编码 α -肽链的DNA 序列EcoRI SacI KpnI SmaI BamHI XbaI SalI PstI SphI Hi

变；重组PCR；未知序列PCR扩增；基因组序列的比较研 究；临床医学和法医学中的应用。• （4）实时定量PCR(real time quantitative PCR)技术 • 利用

分子生物学发展的 三大支撑学科之三 (1936年 James Sumner) Enzymatic nature of crystalline （晶体） Protein Bioche

分子生物学研究方法和技术湖南省农业生物技术研究中心 詹 庆 才电话：84691351 Email:zhanqc@hotmail.com本人基本情况• 1984年获湖南农学院农学学士