Hans Journal of Biomedicine 生物医学, 2015, 5, 32-41 Published Online July 2015 in Hans. /journal/hjbm /10.12677/hjbm.2015.5
基因组编辑技术历史1993年前ZFN就已开始出现，迄今已发展了20多年才有今天的成就； 2009年底出现的TALEN似乎一夜之间呈现出取代ZFN的架势； 2012年底CRISPR/Cas已显现出取代TALEN的巨大潜力，在2013年成为现实
基因编辑技术最新进展 人体内已命名的基因共有25000多条，目前已知一部分基因（3000）的突变会引起各类疾病。对于此类疾病的治疗，最本质的手段是通过一些方法将突变后的遗传物质矫正回原来的状态。这类方法被称为遗传疗法（genetic the
2. TALEN 基因组编辑技术2009 年，研究者在植物病原体黄单胞菌(Xanthomonas) 中发现一种转录激活子样效应因子，它的蛋白核酸结 合域的氨基酸序列与其靶位点的核酸序列有较恒定的 对应关系。随后，TALE特异识别 DNA 序
基因编辑的优势• 与传统的以同源重组和胚胎干细胞技术为基础的基因打靶技术相比，基因编辑新技术保留了可定点修饰的 特点，可应用到更多的物种上，效率更高，构建时间 更短，成本更低。基因编辑的不足• 基因编辑是一项新技术， 还存在构建复杂和价格的
前景1. 目前 CRISPR-Cas9 系统中仍有一系列有待解决与发展的问题，例如如何 突破 PAM 序列的限制、如何建立对 Cas9 特异性(脱靶效应)的全面评价体系、 如何构建不同物种中可通用的 Cas9 与 sgRNA 导入与表达系统
成复合体, 指导 Cas9 核酸内切酶识别特定靶标位点,在 PAM 序列上游处切割 DNA 造成双链 DNA 断裂, 并启动 DNA 损伤修复机制. 从不同菌种中分离的CRISPR/Cas 系统, 其 CrRNA(或者是人工构建的sgRNA
近年来，农作物转基因技术得到了快速发展，将基因编辑技术应用在农作物育种上，能得到多个新的生物品种，尤其在玉米、大豆、棉花等农作物上有着较好应用。转基因技术的应用，一定程度推动了农业领域发展，但是还存在一定安全问题，要想充分利用作物转基因技术
三、基因编辑技术的分类• 第一代人工核酸内切酶：锌指核酸内切酶（zinc finger endonuclease, ZFN )，锌指是一类能够结合DNA的蛋白质，人类细胞的转录因子中大 约有一半含有锌指结构，ZFN是将锌指蛋白与核酸内切酶F
1 基本介绍 基因编辑技术指能够让人类对目标基因进行“编辑”，实现对特定DNA片段的敲除、加入等。 而CRISPR/Cas9技术自问世以来，就有着其它基因编辑技术无可比拟的优势，技术不断改进后，更被认为能够在活细胞中最有效、最便捷地“编辑”
基因编辑技术最新进展 ? 人体内已命名的基因共有25000多条，目前已知一部分基因（3000）的突变会引起各类疾病。对于此类疾病的治疗，最本质的手段是通过一些方法将突变后的遗传物质矫正回原来的状态。这类方法被称为遗传疗法（genetic t
4. 改造和培育新品种传统的改造动植物品种的转基因技术是将外源 DNA 片段插入受体的基因组中，改造基因功能，使其表达优良的性状，获得人类需要的品种。基因编辑技术则可以进行定点修饰，达到高效定向。Shukla 等对玉米进行肌醇磷酸激酶 1(
1.CRISPR/Cas系统概述1.2CRISPR系统获得：CRISPR/Cas系统是很多细菌和大部分古细菌的天然免疫系 统，通过对入侵的病毒和核酸进行特异性的识别，利用Cas蛋白 进行切割，从而达到对自身的免疫。2.CRISPR/Cas系
靶向基因技术• 经典方法 ：– 自杀质粒，同源重组 – 几率低(~1 HR event per 106 cells），难！• 饱含希望与失望的技术：– ZFN，被Sigma公司垄断• 新的里程碑：– TALENTALEN技术基于TALEN
能发挥切割效应，所以只有一对相邻的TALEN才能对DNA进行切 割，能够大大降低脱靶的概率。11三、TALEN• TALEN技术前景 • TALEN技术跟ZFN技术工作原理相似，但是有着明显的优势： • 1、TALEN结合DNA的方式更便于
第四节 重组DNA技术常用载体一、定义是指能携带目的基因进入宿主细胞进行扩增和表达的 一类DNA分子。分类： 克隆载体：用于在宿主细胞中克隆和扩增外源DNA片段。 表达载体：用于在
• 与传统的以同源重组和胚胎干细胞技术为基础的基因打靶技术相比，基因编辑新技术保留了可定点修饰的特点，可应用到更多的物种上，效率更高，构建时间更短，成本更低。基因编辑的不足• 基因
基因编辑的研究背景LOGO目前，获得突变体的常见方法是利用T- DNA 或转座子构建大规模的随机插入突变体库， 但是构建覆盖全基因组的饱和突变体库需要的工作量大且耗费的时间长。而通过定点突变 的方法使目的基因完全失活，是一种最直接有效的研究
基因编辑的优势与传统的以同源重组和胚胎干细胞(embryonic stem cell，ES)技术为基础的基 因打靶技术相比，基因编辑新技术保留了可定点修饰的特点，可应用到更多的物
