腐烂苹果中地细菌分离以及理化性质地检测

常用中药材质量标准一、何为中药材的质量标准中药材的质量标准是指根据各种因素，对中药材的质量要求进行规范和标准化，以便评价和控制中药材的质量。

中药材的质量标准通常包括以下几方面：1.外观特征：包括中药材的形态、颜色、气味、味道、纹理等方面的特征。

外观特征可直观地反映中药材的品质和原产地等信息。

2.理化性质：包括中药材的含水量、灰分、挥发性油含量、硫酸钡沉淀量、析氮量等理化性质。

这些性质反映了中药材的成分和质量。

3.活性成分：包括中药材的有效成分含量、单味药不同部位、不同产地、不同收获期等的活性成分含量，以及含量变化规律等方面。

活性成分是中药材疗效的关键因素，对中药材的质量影响最为重要。

4.农药残留：包括中药材中农药残留量等有害物质检测。

农药残留量是中药材安全性和卫生质量的一项重要指标。

5.微生物污染：包括中药材中的细菌、真菌、霉菌等微生物检测。

微生物污染是造成中药材霉变、变质的主要原因，也是卫生质量的一个关键指标。

二、常用中药材的质量标准1.人参人参是中药材中的珍贵品种，具有滋补强身、提神醒脑等作用。

其质量标准主要包括外观特征、理化性质和活性成分等方面。

外观特征：优质的人参根茎体形饱满，根部有明显年际环，色泽自然，有光泽，无霉斑和虫蛀现象。

理化性质：含水量一般不超过12%；挥发性油含量不低于0.2%；总皂苷含量不低于2%。

活性成分：人参的活性成分主要包括人参皂苷、人参多糖、人参皂甙等，其中人参皂苷Rb1、Rg1、Re等为主要有效成分。

质量标准主要参考这些活性成分的含量。

2.黄芪黄芪是一种常用的中药材，具有益气补虚、提升免疫力等功效。

其质量标准主要包括外观特征、理化性质和活性成分等方面。

外观特征：优质的黄芪根茎表面光滑，无虫蛀，无霉斑，黄褐色，质地均匀。

理化性质：含水量一般不超过13%；灰分不低于6%；总皂苷含量不低于0.3%；总黄酮含量不低于0.2%。

活性成分：黄芪的主要活性成分为黄芪素等，其含量是评价黄芪品质的重要指标之一。

苹果树腐烂病及其防治
苹果树腐烂病（Apple Tree Radial Root Rot）是由于山梨醛腐烂细菌（Pectobacterium atrosepticum）引起的一种常见的病害，它以坏死的全株植株为表现，大多数栽培苹果树发生这种病害。

苹果树腐烂病会对苹果树的生长造成很大的危害，这种
病害除了可以影响苹果树的根系和茎的外，还可以影响苹果树的实质部分，以致于植物的
死亡。

苹果树腐烂病的发生受到苹果树的品种及其年龄，气候条件和土壤状况等多种因素的
影响，一般情况下，苹果树腐烂病发生得越严重，气温低，土壤潮湿，土壤分解程度越高，当菌株和其它病原施以足够的应力时，腐烂病便得以发生，进而影响苹果树的正常生长。

为了有效控制苹果树腐烂病的发生，可以采取一些有效的预防措施，如土壤处理，应
使土壤通气好，促进土壤中的氧气和养分的循环，防止土壤湿润；在种植时，应增加植株
之间的间距，给根部及土壤空气流动提供便利；合理施肥，及时补氮补钾，及时补施有机肥，少用化学肥料；用细观察土壤的湿润程度，最好采取盆栽等方式，减少受害植株的数量，断根断枝以减少病害源；定期在植株外均匀压实土壤，定期观察苹果树及其周边的土壤，及早发现问题，及早采取对策，对于有害生物进行有效控制；应根据季节和土壤状况，采取适当的灌水量控制；还可以采用一定剂量的杀菌剂或有机农药处理，但剂量不可太高，以防造成毒害等。

通过采取相应的防治措施，苹果树腐烂病的发生和发展得到有效抑制。

对于苹果树已
经感染腐烂病的植株，应及时使用一定量的有机或者原生态化学制剂防治，及时切断枯死
的根系和除去死的枝条，以及在施用有机肥后加以微量元素补充，如钙、铁和锌等，这些
措施可以有效改善苹果树的病害状况。

腐烂食物一、正常情况下，苹果，蔬菜，主食等在长期放置以后会出现腐烂，会滋生细菌病毒以及病菌代谢的有害物质。

最常见的就是黄曲霉素，有致癌性。

如果不小心误食，会引发肝脏病变，增加肝癌的风险。

所以一般食物出现腐败以后，是不能食用的。

二、3种食物越腐烂，可能越好吃1、第一种食物、纳豆可能提起纳豆，很多人都会想到日本，是日本人喜欢吃的食材。

但其实纳豆起源于中国，从秦汉的时候就已经出现纳豆。

纳豆是以黄豆为原材料，通过枯草杆菌发酵制成的豆制品。

味道微甜，但是闻起来比较臭，有一定黏性，其营养价值丰富。

含有丰富的维生素K2，纤维蛋白，异黄酮，卵磷脂，钙，铁，钾以及多种矿物质等，长期使用能够维护身体健康。

纳豆在发酵过程中，会产生可溶氨基酸以及各种酵素，能够帮助肠胃消化吸收。

纳豆作为豆制品，蛋白以及脂肪含量丰富，适量食用能够补充人体热量。

其中的酶在进入人体以后，能排出身体部分胆固醇以及脂质物，有助于血压控制。

跟纳豆属于同产品的还有臭豆腐，腐乳，豆瓣酱等，这几种食物越腐败，口味会越好，其中的营养物质更容易被消化吸收。

2、第二种食物、酸奶酸奶是常见的乳制品，主要用鲜牛奶或者是奶粉泡发物发酵形成的。

但是单纯的牛奶味可能吸引不了人，商家就会在其中加点红枣、草莓等浓缩液，提高口感。

牛奶中有少量乳糖，乳糖通过乳酸菌发酵会分解为乳酸，形成酸奶。

所以酸奶中内有乳糖，在进入人体之后，不需要乳酸菌的分解，不会加重身体负担，更容易被吸收。

所以如果你是乳糖不耐受，想要喝奶制品，可以尝试酸奶。

3、第三种食物、腌萝卜腌萝卜是北方常见的一种腌制调味菜，很多人喜欢拿它搭配小米粥，因为在制作的过程中含有大量的盐，调味料，所以口感比较好，爽脆酸甜，很下饭。

但是作为一种腌制菜，需要一段时间的发酵，因此比起新鲜的萝卜，新鲜度不够，但是也是健康的食物。

腌萝卜中的维生素会在腌制中大量流失，糖类物质也会流失，膳食纤维却不会有过多流失，所以平时可以适量吃一点。

但是对于患有高血压的老年人来说，不建议食用，会引起血压异常，不利于病情控制。

食品检验检测专门化方向理化检验检测课程标准【课程名称】理化检验检测【适用专业】中等职业学校食品生物工艺专业1．前言课程性质本课程是食品生物工艺专业(食品检验检测方向)的一门专门化方向课程，是从事食品理化检验检测岗位工作的一门必修课程。

其功能是使学生掌握理化检验检测的方法和操作技术，习惯岗位要求，。

1.2设计思路本课程总体设计思路是以食品生物工艺专业相关工作任务和职业能力分析为依据确定课程目标，设计课程内容，以工作任务为线索构建任务引领型课程。

课程设计以样品中成分含量测定为线索，设置水分测定、灰分测定、酸度测定、脂肪测定、糖测定、蛋白质测定、维生素C测定、添加剂测定、金属离子测定、农药残留量测定等工作任务。

课程内容的选取以工作任务为中心，融合专业理论知识和食品质量检验员职业资格标准的要求，以到达培养学生具备从事食品检验检测工作能力的目的。

每个工作任务的学习都以检验检测操作方法为载体，以工作任务为中心设计相应教学活动，引出相关专业理论知识，使学生在各工程活动中强化专业技能与实践操作能力。

本课程建议课时为140学时。

2．课程目标通过本课程的学习，掌握食品营养成分及常见平安指标分析的全然原理及相关方法和实验操作技能，能完本钞票专业相关岗位的工作任务，养成良好的职业道德和文明生产习惯，胜任理化检验检测岗位工作。

职业能力目标：●能对样品进行采集、制备和保持；●会进行样品预处理；●能进行标准溶液的配制、标定、校核；●会使用和维护检验常用仪器；●会使用专项仪器〔设备〕：水分测定仪、索氏抽提器、凯氏定氮仪、高温电炉〔灰化炉〕、紫外可见分光计、原子汲取分光度计、色谱分析仪等；●能按照实验室平安操作规程进行操作；●会进行专项检验操作并能进行检验结果分析评价。

3．课程内容和要求4．实施建议4.1教材编写〔1〕打破传统学科体系教材模式，充分表达任务引领的特点，以本课程标准编写教材。

〔2〕以理论与实践一体化工程教学形式进行设计，通过工作任务的分析，掌握本课程的技能点和知识点，按照必须、够用的原那么，循序渐进地组织教学内容。

㊀核农学报㊀２０２２，３６（１１）：２１５８ ２１６５ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮｕｃｌｅａｒＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ收稿日期：２０２１⁃１２⁃０８㊀接受日期：２０２２⁃０３⁃０１基金项目：国家自然科学基金－新疆联合基金（Ｕ１９０３２０６），国家自然科学基金（３１４７１７３２），陕西省重大专项（２０２０ｚｄｚｘ０３０３－０１）作者简介：王帅乐，男，主要从事植物病理学研究㊂Ｅ⁃ｍａｉｌ：６３１３４２７６０＠ｑｑ．ｃｏｍ∗通讯作者：黄丽丽，女，教授，主要从事小麦㊁果树病害的病原学和综合防治研究㊂Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｈｕａｎｇｌｉｌｉ＠ｎｗｓｕａｆ．ｅｄｕ．ｃｎ文章编号：１０００⁃８５５１（２０２２）１１⁃２１５８⁃０８苹果短链脱氢酶基因ＭｄＳＤＲ响应腐烂病菌侵染的功能研究王帅乐㊀肖珂雨㊀王维东㊀黄丽丽∗（西北农林科技大学旱区作物逆境生物学国家重点实验室／植物保护学院，陕西杨凌㊀７１２１００）摘㊀要：短链脱氢／还原酶（ＳＤＲ）是一类ＮＡＤ（Ｐ）（Ｈ）依赖的氧化还原酶，负责催化生物体内各种代谢活动的氧化还原步骤㊂为了探究苹果（Ｍａｌｕｓｄｏｍｅｓｔｉｃａ）ＳＤＲ（ＭｄＳＤＲ）蛋白的功能，利用农杆菌介导的苹果组培苗瞬时转化技术在苹果叶片中瞬时表达ＭｄＳＤＲ，然后通过刺伤接种法研究过表达ＭｄＳＤＲ对叶片抗病性的影响；利用实时荧光定量ＰＣＲ（ｑＲＴ－ＰＣＲ）技术检测瞬时表达ＭｄＳＤＲ后苹果中脂肪酸生物合成相关基因的表达水平；利用气相色谱分析技术检测瞬时表达ＭｄＳＤＲ苹果叶片中的脂肪酸含量；利用尼罗红染色检测苹果叶片中的脂滴（ＬＤｓ）积累情况㊂结果表明，瞬时表达ＭｄＳＤＲ显著增强了苹果叶片对腐烂病菌（Ｖａｌｓａｍａｌｉ）的抗病性，试验组叶片病斑直径相比对照组减小约１４ ４６％（Ｐ＜０ ００１）；瞬时表达ＭｄＳＤＲ后苹果叶片中脂肪酸生物合成相关基因的表达显著上调（Ｐ＜０ ００１），其中ＭｄＡＣＣａｓｅ上调４８ ４１倍，ＭｄＫＡＲ上调１２９ ７９倍，ＭｄＥＮＲ上调１６８ ２０倍，ＭｄＨＡＤ上调８ ６７倍，ＭｄβＣＴ㊁ＭｄＫＡＳⅠ和ＭｄＫＡＳⅡ均上调约５倍；然而过表达ＭｄＳＤＲ后苹果叶片中脂肪酸的积累水平无显著变化（Ｐ＞０ ０５）；进一步研究发现，过表达ＭｄＳＤＲ后苹果叶片中调控脂滴合成的基因ＭｄＳＥＩＰＩＮ显著上调表达（Ｐ＜０ ０５），脂滴数量大量增加㊂本研究初步证明ＭｄＳＤＲ能够通过促进脂肪酸的合成，间接提高脂滴的数量，从而提高苹果的抗病性，为苹果抗性品种的研究提供了一定的理论基础㊂关键词：短链脱氢／还原酶（ＳＤＲ）；脂肪酸；脂滴；抗病性ＤＯＩ：１０ １１８６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００⁃８５５１ ２０２２ １１ ２１５８㊀㊀短链脱氢／还原酶（ｓｈｏｒｔ⁃ｃｈａｉｎｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅｓ／ｒｅｄｕｃｔａｓｅ，ＳＤＲ）是一类ＮＡＤ（Ｐ）（Ｈ）依赖的氧化还原酶，负责催化生物体内的氧化还原反应［１－３］㊂ＳＤＲ在高等植物中分布广泛［４］，主要参与生物碱㊁萜类㊁酚类物质和激素等多种次级代谢途径，增强了植物对细菌㊁真菌㊁病毒㊁动物和昆虫等生物胁迫以及非生物胁迫的适应能力，并且在植物传粉㊁种子传播和种间竞争中发挥重要作用［１，５－８］㊂同时，ＳＤＲ也参与多种初级代谢，维持植物正常的生长发育㊂例如，在叶绿素的合成途径中，ＳＤＲ家族的原叶绿体氧化还原酶（ｐｒｏｔｏｃｈｌｏｒｏｐｙｌｌｉｄｅｏｘｉｄｏｒｅｄｕｃｔａｓｅ，ＰＯＲ）能将原叶绿素转化为叶绿素［９－１０］；在脂肪酸合成途径中，ＳＤＲ家族的β－酮脂酰－ＡＣＰ还原酶（β－ｋｅｔｏａｃｙｌ⁃ＡＣＰｒｅｄｕｃｔａｓｅ，ＫＡＲ）和烯脂酰－ＡＣＰ还原酶（ｅｎｏｙｌ⁃ＡＣＰｒｅｄｕｃｔａｓｅ，ＥＮＲ）能催化还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（ｒｅｄｕｃｅｄｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅａｄｅｎｉｎｅｄｉｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｐｈｏｓｐｈａｔｅ，ＮＡＤＰＨ）和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（ｒｅｄｕｃｅｄｎｉｃｏｔｉｎａｍｉｄｅａｄｅｎｉｎｅｄｉｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ，ＮＡＤＨ）依赖的两个还原步骤，是植物脂肪酸生物合成的两种关键酶［１１－１２］㊂脂肪酸是细胞膜㊁栓质和角质蜡的关键成分，为植物抵御环境胁迫提供了物理屏障［１３－１４］㊂植物能通过改变不饱和脂肪酸的含量来调节膜的流动性，从而维持适合关键整合蛋白（ｉｎｔｅｇｒａｌｐｒｏｔｅｉｎ）发挥功能的环境［１５－１６］㊂例如，在高温胁迫环境下，野生型烟草叶绿体中的光合蛋白出现热变性和光合效率下降㊂而三元脂肪酸（ｔｒｉｅｎｏｉｃｆａｔｔｙａｃｉｄｓ，ＴＡｓ）表达被抑制的转基因植株中，未检测到光合蛋白热变性，其光合效率降幅较小［１７］㊂另外，脂肪酸也参与病原胁迫响应㊂研究发８５１２㊀１１期苹果短链脱氢酶基因ＭｄＳＤＲ响应腐烂病菌侵染的功能研究现，游离亚麻酸既是一种胁迫信号分子，也是植物氧化脂质（如茉莉酸）生物合成的前体［１８－１９］㊂许多研究也证明，叶绿体油酸（ｏｌｅｉｃａｃｉｄ，ＯＡ）和壬二酸（ａｚｅｌａｉｃａｃｉｄ，ＡＺＡ）水平对拟南芥的生物胁迫响应至关重要，可以引发细胞程序性死亡（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ，ＰＣＤ）和激发系统获得性抗性（ｓｙｓｔｅｍｉｃａｃｑｕｉｒｅｄｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ＳＡＲ）［２０－２１］㊂另外，植物叶片中脂肪酸的积累能刺激植物脂滴（ｌｉｐｉｄｄｒｏｐｌｅｔｓ，ＬＤｓ）的产生㊂而脂滴在植物胁迫应答㊁激素信号途径和植物生长发育中起重要作用［２２－２３］㊂例如，脂滴表面的油体钙蛋白ｃａｌｅｏｓｉｎ和油体固醇蛋白ｓｔｅｒｏｌｅｏｓｉｎ等蛋白具有酶活性，其中ｃａｌｅｏｓｉｎ具有过氧化酶活性，可以将α－亚麻酸衍生物转化为各种氧化脂类植保素；ｓｔｅｒｏｌｅｏｓｉｎ是一种甾醇脱氢酶，可以将甾醇底物转化为油菜素类固醇（ｂｒａｓｓｉｎｏｓｔｅｒｏｉｄｓ，ＢＲｓ），从而调控生长发育和胁迫响应［２４－２５］㊂上述研究结果均表明，脂肪酸在植物抵抗生物胁迫中发挥着重要的作用㊂在苹果（Ｍａｌｕｓｄｏｍｅｓｔｉｃａ）中，目前关于ＳＤＲ基因功能的研究仍鲜有报道㊂西北农林科技大学果树病害病原生物学及综合防治团队前期以富士苹果ｃＤＮＡ为模板克隆获得ＭｄＳＤＲ基因编码区（ｃｏｄｉｎｇｓｅｑｕｅｎｃｅ，ＣＤＳ）全长序列，并通过预测发现其可能与脂肪酸的合成有关［２６］㊂为了验证ＭｄＳＤＲ蛋白是否参与脂肪酸的合成和调控植物免疫，本研究通过农杆菌介导的瞬时表达技术及实时荧光定量ＰＣＲ（ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｒｅａｌ⁃ｔｉｍｅＰＣＲ，ｑＲＴ－ＰＣＲ）技术探究苹果ＭｄＳＤＲ对脂肪酸合成中关键基因表达的影响，揭示ＭｄＳＤＲ在脂肪酸合成中的重要作用，并利用苹果瞬时表达技术探究ＭｄＳＤＲ对苹果树腐烂病菌侵染的影响，初步研究其抗逆功能和作用机理，旨在为苹果抗性品种的研究提供一定的理论基础㊂１㊀材料与方法１ １㊀植物材料嘎啦苹果组培苗（Ｍａｌｕｓｄｏｍｅｓｔｉｃｃｖ．Ｒｏｙａｌｇａｌａ）由西北农林科技大学园艺学院李明军教授实验室惠赠㊂组织培养植株生长于ＭＳ培养基中，培养基配方为：４ ４３ｇ㊃Ｌ－１ＭＳ＋３０ｇ㊃Ｌ－１蔗糖＋８ｇ㊃Ｌ－１琼脂＋０ ３ｍｇ㊃Ｌ－１６－苄氨基嘌呤＋０ ２ｍｇ㊃Ｌ－１吲哚－３－乙酸，ｐＨ值为５ ８；组培苗置于人工智能气候箱（ＲＸＺ－５００－Ｄ⁃ＰＥＤ，宁波江南仪器厂）内培养，培养条件为：温度２５ħ，光照１６ｈ／黑暗８ｈ，光照度６４００Ｌｘ，相对湿度６０％㊂每１５ｄ更换一次培养基㊂１ ２㊀菌株和质粒载体大肠杆菌ＤＨ５α㊁农杆菌ＧＶ３１０１及载体ｐＣＡＭＢＩＡ１３０２均购自北京擎科新业生物技术有限公司；苹果腐烂病菌０３－８（Ｖａｌｓａｍａｌｉ）保存于西北农林科技大学㊂１ ３㊀植物表达载体的构建以富士苹果ｍＲＮＡ反转录合成的ｃＤＮＡ为模板，利用特异性引物ＭｄＳＤＲ－Ｆ㊁ＭｄＳＤＲ－Ｒ对ＭｄＳＤＲ基因进行ＰＣＲ扩增，采用快捷型琼脂糖凝胶ＤＮＡ回收试剂盒ＩＩ（ＤＰ１７２２，Ｂｉｏｔｅｋｅ，北京）对目的基因条带进行回收㊂将回收产物与线性化载体ｐＣＡＭＢＩＡ１３０２连接构建重组质粒ｐＣＡＭＢＩＡ１３０２－ＭｄＳＤＲ㊂热激法转化大肠杆菌ＤＨ５α，进行卡那霉素抗性筛选及菌落ＰＣＲ验证后提取质粒送至上海生工生物工程股份有限公司测序㊂将测序重组质粒及空载体（对照）分别电击转化至农杆菌ＧＶ３１０１，卡那霉素抗性筛选及菌落ＰＣＲ验证后于－８０ħ冰箱保存备用㊂１ ４㊀农杆菌介导的苹果组培苗瞬时转化用含５０μｇ㊃ｍＬ－１卡那霉素及５０μｇ㊃ｍＬ－１利福平的ＹＥＰ培养基，以２８ħ㊁２００ｒ㊃ｍｉｎ－１的条件培养含有ｐＣＡＭＢＩＡ１３０２－ＭｄＳＤＲ和ｐＣＡＭＢＩＡ１３０２表达载体的农杆菌１６ｈ，６０００ｒ㊃ｍｉｎ－１离心１０ｍｉｎ收集菌体，用０ ０１ｍｏｌ㊃Ｌ－１的ＭｇＣｌ２溶液清洗２次，最终用含１００μｍｏｌ㊃Ｌ－１乙酰丁香酮及１０μｍｏｌ㊃Ｌ－１２－吗啉乙磺酸（４－ｍｏｒｐｈｏｌｉｎｅｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃａｃｉｄ，ＭＥＳ）的ＭｇＣｌ２溶液重悬菌体，使其ＯＤ６００值为１㊂挑选健康㊁长势相近的４周龄组培苗若干，使用真空渗透的方法［２６］对其进行瞬时转化，转化后的组培苗培养条件与１ １中的组培条件相同㊂１ ５㊀苹果总ＲＮＡ提取及ｃＤＮＡ的合成组培苗瞬时表达４８ｈ后随机选取叶片样品进行苹果总ＲＮＡ的提取，提取方法参照快速通用植物ＲＮＡ提取试剂盒说明书（０４１６－５０ｇｋ，北京华越洋生物有限公司），提取完成后对其浓度进行测定，于－８０ħ冰箱保存备用㊂ｃＤＮＡ的合成参照ＨｉｇｈＣａｐａｃｉｔｙｃＤＮＡ反转录试剂盒说明书（４３６８８１３，ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，美国）进行，反转录产物于－８０ħ冰箱保存备用㊂１ ６㊀实时荧光定量ＰＣＲ分析在ＮＣＢＩ数据库中找到ＭｄβＣＴ㊁ＭｄＡＣＣａｓｅ㊁ＭｄＫＡＲ㊁ＭｄＫＡＳⅠ㊁ＭｄＫＡＳⅡ㊁ＭｄＨＡＤ㊁ＭｄＥＮＲ等与苹果脂肪酸合成相关的基因序列以及与植物脂滴调控相关基因ＭｄＳＥＩＰＩＮ［２７－２８］，并以ＭｄＥＦ－１α为内参基因［２９］㊂使用Ｐｒｉｍｉｅｒ５软件对上述基因进行引物设计（表１）㊂９５１２核㊀农㊀学㊀报３６卷表１㊀引物序列Ｔａｂｌｅ１㊀Ｐｒｉｍｅｒｓｅｑｕｅｎｃｅｓ引物名称Ｐｒｉｍｅｒｎａｍｅ引物序列（５ᶄң３ᶄ）Ｐｒｉｍｅｒｓｅｑｕｅｎｃｅ（５ᶄң３ᶄ）产物大小Ｐｒｏｄｕｃｔｓｉｚｅ／ｂｐＭｄβＣＴ－ＦＡＴＡＴＣＡＴＴＡＴＴＧＣＣＧＡＡＣＣＣＡＡ９１ＭｄβＣＴ－ＲＴＴＴＴＣＧＴＡＡＡＡＴＣＴＣＧＣＣＴＡＣＴＭｄＡＣＣａｓｅ－ＦＧＡＣＣＡＴＧＡＣＣＣＡＴＣＡＡＡＧＴＴＡＡ１５１ＭｄＡＣＣａｓｅ－ＲＣＴＣＣＡＧＡＡＧＣＡＧＧＴＧＡＡＡＧＡＡＧＭｄＫＡＲ－ＦＴＧＧＴＴＧＣＡＧＧＧＴＣＣＴＴＧＴＴ８０ＭｄＫＡＲ－ＲＣＡＣＣＧＡＡＴＧＣＣＴＣＡＡＴＣＴＣＭｄＫＡＳⅠ－ＦＡＴＣＧＴＧＡＴＧＧＴＴＴＣＧＴＴＡＴＧＧＧ９１ＭｄＫＡＳⅠ－ＲＧＣＡＡＴＴＡＴＣＧＧＴＧＣＴＣＣＴＣＴＴＴＭｄＫＡＳⅡ－ＦＣＴＴＡＴＧＣＴＣＴＧＴＧＧＴＧＧＴＴＣＡ１３６ＭｄＫＡＳⅡ－ＲＡＧＣＣＡＴＣＡＣＧＡＴＴＡＣＴＡＴＣＣＣＭｄＥＮＲ－ＦＣＡＡＡＴＧＧＡＣＣＧＧＡＧＧＴＴＧ１１３ＭｄＥＮＲ－ＲＴＧＧＧＡＧＧＡＡＡＴＧＣＴＴＧＡＧＴＡＭｄＨＡＤ－ＦＡＡＡＴＧＣＴＣＣＣＴＣＣＣＧＡＡＴＣ９１ＭｄＨＡＤ－ＲＧＧＴＴＧＡＧＴＴＣＣＴＣＣＴＣＴＴＡＧＴＴＭｄＳＥＩＰＩＮ－ＦＣＴＣＧＧＡＧＴＣＴＴＴＣＡＧＧＴＣＡＧＧ１１２ＭｄＳＥＩＰＩＮ－ＲＡＴＡＧＡＡＧＧＣＧＧＡＴＡＧＧＣＴＣＡＣＭｄＥＦ－１α－ＦＡＴＴＣＡＡＧＴＡＴＧＣＣＴＧＧＧＴＧＣ１８９ＭｄＥＦ－１α－ＲＣＡＧＴＣＡＧＣＣＴＧＴＧＡＴＧＴＴＣＣ㊀㊀利用ＰＣＲ技术检测上述引物的特异性，ＰＣＲ反应体系为２０μＬ：１０μＬ２ˑＴａｑＭａｓｔｅｒＭｉｘ㊁上下游引物各０ ５μＬ㊁１μＬｃＤＮＡ㊁８μＬｄｄＨ２Ｏ㊂反应程序：９５ħ预变性５ｍｉｎ；９５ħ变性３０ｓ，５５ħ退火３０ｓ，７２ħ延伸３０ｓ，３０个循环㊂基因相对表达水平测定：按照２ˑＳＹＢＲ ＧｒｅｅｎＰＣＲＭａｓｔｅｒＭｉｘ（Ａ３１１－１０，北京康润诚业生物科技有限公司）说明书配制ｑＲＴ－ＰＣＲ反应体系，每个样品设３个重复㊂ｑＲＴ－ＰＣＲ反应体系为２０μＬ：１０μＬ２ˑＲｅａｌＳｔａｒＧｒｅｅｎＰｏｗｅｒＭｉｘｔｕｒｅ㊁１０μｍｏｌ㊃Ｌ－１正反向引物各０ ５μＬ㊁１ ５μＬｃＤＮＡ㊁７ ５μＬｄｄＨ２Ｏ㊂使用罗氏ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ９６实时荧光定量ＰＣＲ仪，反应程序：９５ħ预变性５ｍｉｎ；９５ħ变性１０ｓ，５８ħ退火３０ｓ，７２ħ延伸３０ｓ，４５个循环；熔解反应程序为：９５ħ１０ｓ，６５ħ６０ｓ，９７ħ１ｓ㊂１ ７㊀真菌活化与侵染试验将苹果腐烂病菌（Ｖ．ｍａｌｉ）在马铃薯葡萄糖琼脂（ｐｏｔａｔｏｄｅｘｔｒｏｓｅａｇａｒ，ＰＤＡ）培养基上活化，于２５ħ条件下培养３ｄ㊂组培苗瞬时转化４８ｈ后取叶片刺伤接种Ｖ．ｍａｌｉ㊂将叶柄插入水琼脂中保湿，２５ħ共培养３６ｈ左右，拍照并用ＩｍａｇｅＪ软件计算病斑直径，重复３次㊂使用ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍ９作图并用ＳＰＳＳ２６ ０进行ｔ测验分析㊂为了减少试验误差，每次重复使用至少３０个叶片，取自长势相似的组培苗㊂１ ８㊀苹果叶片脂肪酸含量的测定组培苗瞬时表达４８ｈ后取叶片样品，液氮速冻后用干冰保存运输，送至西安迈维代谢生物科技有限公司进行脂肪酸含量及种类的测定㊂处理组与对照组各做３次重复，使用ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍ９作图并用ＳＰＳＳ２６ ０进行ｔ测验分析㊂１ ９㊀苹果叶片中脂滴的染色观察尼罗红（ＨＹ⁃Ｄ０７１８，ＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓ，美国）在缓冲液中稀释至２００ｍｍｏｌ㊃Ｌ－１，ｐＨ值为７㊂将组培苗瞬时表达４８ｈ后取叶片样品，在尼罗红染液中３７ħ避光孵育５ １０ｍｉｎ，洗去染色液后制片㊂用ＦＶ３０００激光共聚焦扫描显微镜（奥林巴斯，日本）观察，由４８８ｎｍ激发，在５００ ５４０ｎｍ光谱下收集信号㊂２㊀结果与分析２ １㊀苹果叶片抗病性检测为了探究ＭｄＳＤＲ蛋白在植物抗生物胁迫中的作用，在苹果组培苗叶片中瞬时表达ＭｄＳＤＲ基因后接种Ｖ．ｍａｌｉ，检测病斑变化情况㊂结果显示，过表达ＭｄＳＤＲ的苹果叶片的病斑明显小于对照（图１－Ａ）㊂平均病斑直径统计结果显示，过表达ＭｄＳＤＲ的苹果叶片的病斑直径显著小于（Ｐ＜０ ００１）对照（约１４ ４６％）（图１－Ｂ），表明过表达ＭｄＳＤＲ提高了苹果叶片对Ｖ．ｍａｌｉ的抗病性㊂注：Ａ：Ｖ．ｍａｉｌ．侵染苹果叶片３６ｈ后的叶片表型；Ｂ：Ｖ．ｍａｉｌ．侵染苹果叶片３６ｈ后的平均病斑直径㊂∗∗∗表示在Ｐ＜０ ００１水平差异显著㊂Ｎｏｔｅ：Ａ：ＲｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅｄｉｓｅａｓｅｓｙｍｐｔｏｍｓｏｆｔｈｅａｐｐｌｅｌｅａｖｅｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇＭｄＳＤＲａｔ３６ｈｏｕｒｓｐｏｓｔ⁃ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ（ｈｐｉ）ｏｆＶ．ｍａｌｉ．Ｂ：ＴｈｅａｖｅｒａｇｅｌｅｓｉｏｎｄｉａｍｅｔｅｒｏｆａｐｐｌｅｌｅａｖｅｓｉｎｗｈｉｃｈＭｄＳＤＲｉｓｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｗａｓｅｖａｌｕａｔｅｄａｔ３６ｈｐｉｏｆＶ．ｍａｌｉ．∗∗∗ｉｎｄｉｃａｔｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅａｔ０ ００１ｌｅｖｅｌ．图１㊀瞬时表达ＭｄＳＤＲ抑制Ｖ．ｍａｌｉ的侵染Ｆｉｇ．１㊀ＯｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＭｄＳＤＲｉｎｈｉｂｉｔｓｔｈｅｉｎｆｅｃｔｉｏｎｏｆＶ．ｍａｌｉ２ ２㊀脂肪酸合成相关关键基因的表达水平检测为了探究ＭｄＳＤＲ对植物脂肪酸合成的影响，对脂０６１２㊀１１期苹果短链脱氢酶基因ＭｄＳＤＲ响应腐烂病菌侵染的功能研究肪酸合成通路关键酶编码基因的表达水平进行了检测㊂与对照相比，瞬时过表达ＭｄＳＤＲ苹果叶片中脂肪酸从头合成通路中的相关基因全部显著上调表达，其中ＭｄＡＣＣａｓｅ㊁ＭｄＫＡＲ和ＭｄＥＮＲ上调幅度较大，ＭｄＡＣＣａｓｅ上调４８ ４１倍，ＭｄＫＡＲ上调１２９ ７９倍，ＭｄＥＮＲ上调１６８ ２０倍㊂ＭｄβＣＴ㊁ＭｄＫＡＳⅠ㊁ＭｄＫＡＳⅡ和ＭｄＨＡＤ均呈现出上调表达的趋势，其中ＭｄβＣＴ㊁ＭｄＫＡＳⅠ和ＭｄＫＡＳⅡ均上调约５倍，ＭｄＨＡＤ上调８ ６７倍（图２）㊂上述结果表明，ＭｄＳＤＲ蛋白参与调控脂肪酸的生物合成㊂注：∗∗∗表示在Ｐ＜０ ００１水平差异显著；∗∗∗∗表示在Ｐ＜０ ０００１水平差异显著㊂Ｎｏｔｅ：∗∗∗ｉｎｄｉｃａｔｅｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅａｔ０ ００１ｌｅｖｅｌ．∗∗∗∗ｉｎｄｉｃａｔｅｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅａｔ０ ０００１ｌｅｖｅｌ．图２㊀ＭｄＳＤＲ㊁ＭｄＡＣＣａｓｅ㊁ＭｄＫＡＲ㊁ＭｄＥＮＲ㊁ＭｄβＣＴ㊁ＭｄＫＡＳⅠ㊁ＭｄＫＡＳⅡ和ＭｄＨＡＤ相对表达量Ｆｉｇ．２㊀ＲｅｌａｔｉｖｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＭｄＳＤＲ㊁ＭｄＡＣＣａｓｅ㊁ＭｄＫＡＲ㊁ＭｄＥＮＲ㊁ＭｄβＣＴ㊁ＭｄＫＡＳⅠ㊁ＭｄＫＡＳⅡａｎｄＭｄＨＡＤ２ ３㊀苹果叶片脂肪酸含量测定为了探究过表达ＭｄＳＤＲ对植物叶片中脂肪酸积累水平的影响，对苹果叶片中的脂肪酸含量进行了测定㊂通过对试验组与对照组数据进行差异显著性分析，发现过表达ＭｄＳＤＲ的苹果叶片中各种脂肪酸含量未发生显著变化（Ｐ＞０ ０５）（图３）㊂２ ４㊀脂滴合成关键基因的表达水平检测为了验证上述推测，过表达ＭｄＳＤＲ后检测了调控脂滴形成的关键基因ＭｄＳＥＩＰＩＮ的表达水平变化㊂结果显示，瞬时表达ＭｄＳＤＲ后，苹果叶片中ＭｄＳＥＩＰＩＮ基因的表达水平显著提高（图４－Ａ）（Ｐ＜０ ０５），表明瞬时表达ＭｄＳＤＲ促进了脂滴的生物合成㊂ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ结果显示，在瞬时表达ＭｄＳＤＲ基因的苹果组培苗叶片中检测到ＭｄＳＤＲ蛋白（图４－Ｂ），表明通过农杆菌介导瞬时表达技术，ＭｄＳＤＲ蛋白在苹果组培苗叶片中成功表达㊂２ ５㊀苹果叶片中脂滴的染色观察本研究采用尼罗红染色［３０］观察瞬时表达ＭｄＳＤＲ图３㊀脂肪酸相对含量Ｆｉｇ．３㊀Ｒｅｌａｔｉｖｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｆａｔｔｙａｃｉｄ的苹果叶片样品，结果显示，瞬时表达ＭｄＳＤＲ后的苹果叶片出现大量的点状绿色荧光（图５－Ａ），而在对照中并未发现有大量的点状绿色荧光（图５－Ｂ）㊂本试验过表达的ＭｄＳＤＲ蛋白上融合有ＧＦＰ标签，因此为了排除ＧＦＰ荧光给试验带来的干扰，单独表达了ＭｄＳＤＲ⁃ＧＦＰ１６１２核㊀农㊀学㊀报３６卷注：Ａ：ＭｄＳＥＩＰＩＮ相对表达水平；Ｂ：ＭｄＳＤＲ蛋白表达检测㊂∗表示在Ｐ＜０ ０５水平差异显著㊂Ｎｏｔｅ：Ａ：ＲｅｌａｔｉｖｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＭｄＳＥＩＰＩＮ．Ｂ：ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔｏｆＭｄＳＤＲ．∗ｉｎｄｉｃａｔｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅａｔ０ ０５ｌｅｖｅｌ．图４㊀ＭｄＳＥＩＰＩＮ相对表达量与ＭｄＳＤＲ蛋白表达检测Ｆｉｇ．４㊀ＲｅｌａｔｉｖｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＭｄＳＥＩＰＩＮａｎｄｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＭｄＳＤＲｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ注：脂滴被尼罗红染色后激发出的荧光呈点分布㊂Ａ：瞬时表达ＭｄＳＤＲ⁃ＧＦＰ后用尼罗红染色的苹果叶片；Ｂ：瞬时表达ＧＦＰ后用尼罗红染色的苹果叶片；Ｃ：瞬时表达ＭｄＳＤＲ⁃ＧＦＰ后未染色的苹㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀果叶片；Ｄ：瞬时表达ＧＦＰ后未染色的苹果叶片㊂Ｎｏｔｅ：ＴｈｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｅｘｃｉｔｅｄｂｙｌｉｐｉｄｄｒｏｐｌｅｔｓｓｔａｉｎｅｄｗｉｔｈＮｉｌｅｒｅｄｓｈｏｗｓａｄｏｔｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ．Ａ：ＡｐｐｌｅｌｅａｖｅｓｓｔａｉｎｅｄｗｉｔｈＮｉｌｅＲｅｄａｆｔｅｒｔｒａｎｓｉｅｎｔｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＭｄＳＤＲ－ＧＦＰ．Ｂ：ＡｐｐｌｅｌｅａｖｅｓｓｔａｉｎｅｄｗｉｔｈＮｉｌｅＲｅｄａｆｔｅｒｔｒａｎｓｉｅｎｔｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧＦＰ．Ｃ：ＵｎｓｔａｉｎｅｄａｐｐｌｅｌｅａｖｅｓａｆｔｅｒｔｒａｎｓｉｅｎｔｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＭｄＳＤＲ－ＧＦＰ．Ｄ：Ｕｎｓｔａｉｎｅｄａｐｐｌｅｌｅａｖｅｓ㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀ａｆｔｅｒｔｒａｎｓｉｅｎｔｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧＦＰ．图５㊀ＭｄＳＤＲ瞬时表达增加苹果叶片中脂滴数量Ｆｉｇ．５㊀ＭｄＳＤＲｔｒａｎｓｉｅｎｔｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｃｒｅａｓｅｓｔｈｅｎｕｍｂｅｒｏｆＬＤｓｉｎａｐｐｌｅｌｅａｖｅｓ和ＧＦＰ，观察并未发现点状绿色荧光（图５－Ｃ㊁Ｄ）㊂综上所述，瞬时表达ＭｄＳＤＲ促进了脂滴的形成㊂３㊀讨论短链脱氢／还原酶不仅可以参与调控植物初级代谢，如脂肪酸生物合成㊁叶绿素生物合成或降解，还可以参与调控植物的次级代谢，如萜类㊁类固醇㊁酚类和生物碱的生物合成［３１］㊂在脂肪酸生物合成的过程中，乙酰ＣｏＡ的羧化反应是脂肪酸合成通路的限速步骤，故乙酰ＣｏＡ羧化酶（ａｃｅｔｙｌＣｏＡｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ，ＡＣＣａｓｅ）活性控制着脂肪酸的合成速度；在脂肪酸链延伸阶段中，β－酮脂酰⁃ＡＣＰ合酶（β－ｋｅｔｏａｃｙｌ⁃ＡＣＰｓｙｎｔｈａｓｅⅡ，ＫＡＳ）能催化第一步的缩合反应；同时，β－酮脂酰⁃ＡＣＰ还原酶（β⁃ｋｅｔｏａｃｙｌ⁃ＡＣＰｒｅｄｕｃｔａｓｅ，ＫＡＲ）和烯脂酰⁃ＡＣＰ还原酶（ｅｎｏｙｌ⁃ＡＣＰｒｅｄｕｃｔａｓｅ，ＥＮＲ）负责催化其中两步还原反应，即在还原型辅酶ＩＩＮＡＤＰＨ的协助下，ＫＡＲ催化β－酮丁酰基的β－位羰基还原为羟基，ＥＮＲ催化ә２－烯丁酰基的α－双键还原为单键；而β－羟脂酰－ＡＣＰ脱水酶（β⁃ｈｙｄｒｄｏｘｙａｃｙｌ⁃ＡＣＰｄｅｈｙｄｒａｓｅ，ＨＡＤ）则负责催化β－羟丁酰基α㊁β－碳原子间的脱水反应［３２］㊂本研究发现瞬时过表达ＭｄＳＤＲ后，苹果中乙酰ＣｏＡ羧化酶（ＭｄＡＣＣａｓｅ）基因㊁β－酮脂酰－ＡＣＰ合酶（ＭｄＫＡＳ）基因㊁β－酮脂酰－ＡＣＰ还原酶（ＭｄＫＡＲ）基因㊁烯脂酰－ＡＣＰ还原酶（ＭｄＥＮＲ）基因的表达水平显著上调（图２）㊂上述结果表明，ＭｄＳＤＲ能参与调控植物脂肪酸的生物合成过程，这与本实验室前期预测的结果［２６］一致㊂已有研究表明脂肪酸能参与调控植物的免疫反应［１，２１］㊂例如茄子中棕榈油酸的积累提高了植物对白粉病菌的抗病性［３３］；番茄中棕榈油酸的积累增加了植物对黄萎病菌的抗病性［３４］；亚油酸和亚麻酸的积累会显著提升鳄梨对炭疽病菌（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ）和番茄对丁香假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｙｒｉｎｇａｅ）的抗病性［３５－３６］；根际微生物诱导植物对灰霉病菌（Ｂｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｒｅａ）的抗病性同样与植物中亚油酸和亚麻酸积累水平密切相关［３７］㊂本研究发现，过表达ＭｄＳＤＲ能够提高苹果对腐烂病菌的抗性（图１），然而苹果叶片中脂肪酸含量无显著变化（图３）（Ｐ＞０ ０５）㊂因此推测ＭｄＳＤＲ参与调控脂肪酸的生物合成，但并未通过增加脂肪酸含量来提高苹果抗性㊂脂肪酸作为初级代谢产物，是生物体内多种中性脂质生物合成的前体㊂然而过高水平的脂肪酸会对细胞造成损伤［３８］㊂因此生物体会通过多种途径将脂肪酸转化成中性脂质，例如脂肪酸能够通过多步反应，最终在ＳＥＩＰＩＮ蛋白调控下形成了成熟的脂滴［２８，３０］，保２６１２㊀１１期苹果短链脱氢酶基因ＭｄＳＤＲ响应腐烂病菌侵染的功能研究持了细胞内的脂肪酸水平的稳态［２２，３９］㊂脂滴是由富含膜蛋白的单层磷脂分子层包裹中性脂类物质组成的细胞器［４０］㊂脂滴一般存在于种子等植物的营养储存器官中，为植物提供能量和参与植物生长发育调控㊂叶片等光合组织中脂滴的数量通常远小于种子和花，但叶片脂滴能参与调控植物的非生物和生物胁迫响应［２３，３９］㊂例如，脂滴相关蛋白（ＬＤ⁃ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ，ＬＤＡＰ）能调控植物脂滴的产生㊂对拟南芥ｌｄａｐ１／ｌｄａｐ３双敲除突变体的研究发现，突变体植物比野生型更容易受到干旱胁迫的影响［４１］㊂而过表达ｌｄａｐ基因的拟南芥显著提高了对干旱胁迫的抗性，这说明脂滴参与调控植物的干旱胁迫响应；另外两种脂滴表面的双加氧酶（ｄｉｏｘｙｇｅｎａｓｅ）和ｃａｌｅｏｓｉｎ能将α－亚麻酸转化为氧化脂类（ｏｘｙｌｉｐｉｎ）植保素，从而作为一种信号分子触发植物的超敏反应（ｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｅｒｅｓｐｏｎｓｅ，ＨＲ）［２１，２５］㊂这些研究均表明脂滴参与植物的非生物和生物胁迫响应㊂本研究发现过表达ＭｄＳＤＲ促进了脂滴的产生（图４㊁５），同时也提高了苹果对病原菌的抗性（图１）㊂因此推测ＭｄＳＤＲ蛋白通过调控脂肪酸的生物合成间接提高了脂滴的积累水平，从而提高了苹果对腐烂病菌的抗性，但脂滴提高苹果抗病性的具体调控机制还有待进一步研究㊂４　结论本研究利用农杆菌介导的瞬时转化体系在苹果组培苗中过表达ＭｄＳＤＲ，检测到苹果叶片中脂滴数量增加，并且对Ｖ．ｍａｌｉ的抗性显著提高㊂初步证明ＭｄＳＤＲ可以通过促进脂肪酸的生物合成，间接提高叶片脂滴的水平，从而增加植物的抗病性㊂该研究为理解植物抵抗病原胁迫的途径提供了新思路㊂参考文献：［１］㊀ＹｕＳＨ，ＳｕｎＱＧ，ＷｕＪＸ，ＺｈａｏＰＣ，ＳｕｎＹＭ，ＧｕｏＺＦ．Ｇｅｎｏｍｅ⁃ｗｉｄｅｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｓｈｏｒｔ⁃ｃｈａｉｎｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ／ｒｅｄｕｃｔａｓｅ（ＳＤＲ）ｇｅｎｅｆａｍｉｌｙｉｎＭｅｄｉｃａｇｏｔｒｕｎｃａｔｕｌａ［Ｊ］．ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＳｃｉｅｎｃｅｓ，２０２１，２２（１７）：９４９８［２］㊀ＫａｌｌｂｅｒｇＹ，ＯｐｐｅｒｍａｎｎＵ，ＪöｒｎｖａｌｌＨ，ＰｅｒｓｓｏｎＢ．Ｓｈｏｒｔ⁃ｃｈａｉｎｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅｓ／ｒｅｄｕｃｔａｓｅｓ（ＳＤＲｓ）［Ｊ］．ＥｕｒｏｐｅａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００２，２６９（１８）：４４０９－４４１７［３］㊀ＭｏＸＨ，ＺｈａｎｇＨ，ＤｕＦＹ，ＹａｎｇＳ．Ｓｈｏｒｔ⁃ｃｈａｉｎｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅＮｃｍＤｉｓｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅｆｏｒｔｈｅＣ－１０ｏｘｉｄａｔｉｏｎｏｆｎｏｃａｍｙｃｉｎＦｉｎｎｏｃａｍｙｃｉｎｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ［Ｊ］．ＦｒｏｎｔｉｅｒｓｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０２０，１１：６１０８２７［４］㊀ＫａｖａｎａｇｈＫＬ，ＪｏｒｎｖａｌｌＨ，ＰｅｒｓｓｏｎＢ，ＯｐｐｅｒｍａｎｎＵ．ＴｈｅＳＤＲｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ：Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎｄｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｄｉｖｅｒｓｉｔｙｗｉｔｈｉｎａｆａｍｉｌｙｏｆｍｅｔａｂｏｌｉｃａｎｄｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｅｎｚｙｍｅｓ［Ｊ］．ＣｅｌｌｕｌａｒａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ，２００８，６５（２４）：３８９５－３９０６［５］㊀ＳｔｏｃｋｉｎｇｅｒＰ，ＲｏｔｈＳ，ＭüｌｌｅｒＭ，ＰｌｅｉｓｓＪ．Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｉｍｉｎｅ⁃ｒｅｄｕｃｉｎｇｅｎｚｙｍｅｓ：Ｃｏｍｍｏｎｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓｉｎｉｍｉｎｅｒｅｄｕｃｔａｓｅｓ，β－ｈｙｄｒｏｘｙａｃｉｄｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅｓ，ａｎｄｓｈｏｒｔ⁃ｃｈａｉｎｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅｓ／ｒｅｄｕｃｔａｓｅｓ［Ｊ］．ＣｈｅｍＢｉｏＣｈｅｍ，２０２０，２１（１８）：２６８９－２６９５［６］㊀ＦｅｒｒｅｒＪＬ，ＡｕｓｔｉｎＭＢ，ＳｔｅｗａｒｔＣＪｒ，ＮｏｅｌＪＰ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｅｎｚｙｍｅｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｔｈｅｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｐｈｅｎｙｌｐｒｏｐａｎｏｉｄｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００８，４６（３）：３５６－３７０［７］㊀ＹｕＪ，ＳｕｎＨ，ＺｈａｎｇＪＪ，ＨｏｕＹＹ，ＺｈａｎｇＴＪ，ＫａｎｇＪＭ，ＷａｎｇＺ，ＹａｎｇＱＣ，ＬｏｎｇＲＣ．Ａｎａｌｙｓｉｓｏｆａｌｄｏ⁃ｋｅｔｏｒｅｄｕｃｔａｓｅｇｅｎｅｆａｍｉｌｙａｎｄｔｈｅｉｒｒｅｓｐｏｎｓｅｓｔｏｓａｌｔ，ｄｒｏｕｇｈｔ，ａｎｄａｂｓｃｉｓｉｃａｃｉｄｓｔｒｅｓｓｅｓｉｎＭｅｄｉｃａｇｏｔｒｕｎｃａｔｕｌａ［Ｊ］．ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＳｃｉｅｎｃｅｓ，２０２０，２１（３）：７５４［８］㊀ＣｈｏｉＨＷ，ＬｅｅＢＧ，ＫｉｍＮＨ，ＰａｒｋＹ，ＬｉｍＣＷ，ＳｏｎｇＨＫ，ＨｗａｎｇＢＫ．Ａｒｏｌｅｆｏｒａｍｅｎｔｈｏｎｅｒｅｄｕｃｔａｓｅｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅａｇａｉｎｓｔｍｉｃｒｏｂｉａｌｐａｔｈｏｇｅｎｓｉｎｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙａｎｄＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００８，１４８（１）：３８３－４０１［９］㊀ＧａｂｒｕｋＭ，Ｍｙｓｌｉｗａ⁃ＫｕｒｄｚｉｅｌＢ．Ｔｈｅｏｒｉｇｉｎ，ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｎｄｄｉｖｅｒｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｍｕｌｔｉｐｌｅｉｓｏｆｏｒｍｓｏｆｌｉｇｈｔ⁃ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐｒｏｔｏｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌｉｄｅｏｘｉｄｏｒｅｄｕｃｔａｓｅ（ＬＰＯＲ）：Ｆｏｃｕｓｏｎａｎｇｉｏｓｐｅｒｍｓ［Ｊ］．ＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌ，２０２０，４７７（１２）：２２２１－２２３６［１０］㊀ＶｅｄａｌａｎｋａｒＰ，ＴｒｉｐａｔｈｙＢＣ．Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎｏｆｌｉｇｈｔ⁃ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐｒｏｔｏｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌｉｄｅｏｘｉｄｏｒｅｄｕｃｔａｓｅ［Ｊ］．Ｐｒｏｔｏｐｌａｓｍａ，２０１９，２５６（２）：２９３－３１２［１１］㊀Ｏ ＨａｒａＰ，ＳｌａｂａｓＡＲ，ＦａｗｃｅｔｔＴ．Ｆａｔｔｙａｃｉｄａｎｄｌｉｐｉｄｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｇｅｎｅｓａｒｅｅｘｐｒｅｓｓｅｄａｔｃｏｎｓｔａｎｔｍｏｌａｒｒａｔｉｏｓｂｕｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｂｓｏｌｕｔｅｌｅｖｅｌｓｄｕｒｉｎｇｅｍｂｒｙｏｇｅｎｅｓｉｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２００２，１２９（１）：３１０－３２０［１２］㊀ＯｈｌｒｏｇｇｅＪＢ，ＪａｗｏｒｓｋｉＪＧ．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｆａｔｔｙａｃｉｄｓｙｎｔｈｅｓｉｓ［Ｊ］．ＡｎｎｕａｌＲｅｖｉｅｗｏｆＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙａｎｄＰｌａｎｔＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，１９９７，４８：１０９－１３６［１３］㊀ＢｅｉｓｓｏｎＦ，ＬｉＹ，ＢｏｎａｖｅｎｔｕｒｅＧ，ＰｏｌｌａｒｄＭ，ＯｈｌｒｏｇｇｅＪＢ．ＴｈｅａｃｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅＧＰＡＴ５ｉｓｒｅｑｕｉｒｅｄｆｏｒｔｈｅｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｓｕｂｅｒｉｎｉｎｓｅｅｄｃｏａｔａｎｄｒｏｏｔｏｆＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＣｅｌｌ，２００７，１９（１）：３５１－３６８［１４］㊀ＬｅｅＳＢ，ＳｕｈＭＣ．Ｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎｏｆｇｌｙｃｏｓｙｌｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｉｎｏｓｉｔｏｌ⁃ａｎｃｈｏｒｅｄｌｉｐｉｄｔｒａｎｓｆｅｒｐｒｏｔｅｉｎ１５ａｆｆｅｃｔｓｓｅｅｄｃｏａｔｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙｉｎＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＪｏｕｒｎａｌ，２０１８，９６（６）：１２０６－１２１７［１５］㊀ＩｖａｎｏｖａＴＶ，ＶｏｒｏｎｋｏｖＡＳ，ＫｕｚｎｅｔｓｏｖａＥＩ，ＫｕｍａｃｈｏｖａＴＫ，ＺｈｉｒｏｖＶＫ，ＴｓｙｄｅｎｄａｍｂａｅｖＶＤ．ＬｉｐｉｄｆａｔｔｙａｃｉｄｆｒｏｍｔｈｅｐｅｒｉｃａｒｐＣｙｄｏｎｉａｏｂｌｏｎｇａＭｉｌｌ．ａｎｄＭｅｓｐｉｌｕｓｇｅｒｍａｎｉｃａＬ．ｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｐｌａｎｔａｄａｐｔａｔｉｏｎｔｏａｌｔｉｔｕｄｉｎａｌｚｏｎａｌｉｔｙ［Ｊ］．ＤｏｋｌａｄｙＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＢｉｏｐｈｙｓｉｃｓ，２０１９，４８６（１）：２２９－２３３［１６］㊀ＲａｂｅｒｔＣ，ＩｎｏｓｔｒｏｚａＫ，ＢｒａｖｏＳ，ＳｅｐúｌｖｅｄａＮ，ＢｒａｖｏＬＡ．Ｅｘｐｌｏｒａｔｏｒｙｓｔｕｄｙｏｆｆａｔｔｙａｃｉｄｐｒｏｆｉｌｅｉｎｔｗｏｆｉｌｍｙｆｅｒｎｓｗｉｔｈｃｏｎｔｒａｓｔｉｎｇｄｅｓｉｃｃａｔｉｏｎｔｏｌｅｒａｎｃｅｒｅｖｅａｌｔｈｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｖｅｒｙｌｏｎｇｃｈａｉｎｐｏｌｙｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄｏｍｅｇａ－３ｆａｔｔｙａｃｉｄｓ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔｓ（Ｂａｓｅｌ），２０２０，９（１１）：１４３１［１７］㊀ＩｂａＫ．Ａｃｃｌｉｍａｔｉｖｅｒｅｓｐｏｎｓｅｔｏｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｓｔｒｅｓｓｉｎｈｉｇｈｅｒｐｌａｎｔｓ：Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓｏｆｇｅｎｅｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇｆｏｒｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｔｏｌｅｒａｎｃｅ［Ｊ］．３６１２核㊀农㊀学㊀报３６卷ＡｎｎｕａｌＲｅｖｉｅｗｏｆＰｌａｎｔＢｉｏｌｏｇｙ，２００２，５３：２２５－２４５［１８］㊀Ｂｌ ｅＥ．Ｉｍｐａｃｔｏｆｐｈｙｔｏ⁃ｏｘｙｌｉｐｉｎｓｉｎｐｌａｎｔｄｅｆｅｎｓｅ［Ｊ］．ＴｒｅｎｄｓｉｎＰｌａｎｔＳｃｉｅｎｃｅ，２００２，７（７）：３１５－３２２［１９］㊀ＣｈｒｉｓｔｉｅＷＷ，ＨａｒｗｏｏｄＪＬ．Ｏｘｉｄａｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓｔｏｐｒｏｄｕｃｅｌｉｐｉｄｍｅｄｉａｔｏｒｓ［Ｊ］．ＥｓｓａｙｓｉｎＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０２０，６４（３）：４０１－４２１［２０］㊀ＫａｃｈｒｏｏＰ，ＳｈａｎｋｌｉｎＪ，ＳｈａｈＪ，ＷｈｉｔｔｌｅＥＪ，ＫｌｅｓｓｉｇＤＦ．Ａｆａｔｔｙａｃｉｄｄｅｓａｔｕｒａｓｅｍｏｄｕｌａｔｅｓｔｈｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆｄｅｆｅｎｓｅｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｓｉｎｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．ＰｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓｏｆｔｈｅＵｎｉｔｅｄＳｔａｔｅｓｏｆＡｍｅｒｉｃａ，２００１，９８（１６）：９４４８－９４５３［２１］㊀ＣｅｃｃｈｉｎｉＮＭ，ＳｐｅｅｄＤＪ，ＲｏｙｃｈｏｕｄｈｒｙＳ，ＧｒｅｅｎｂｅｒｇＪＴ．ＫｉｎａｓｅｓａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｍｏｔｉｆｓｒｅｑｕｉｒｅｄｆｏｒＡＺＩ１ｐｌａｓｔｉｄｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎａｎｄｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇｄｕｒｉｎｇｐｌａｎｔｄｅｆｅｎｓｅｉｎｄｕｃｔｉｏｎ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＪｏｕｒｎａｌ，２０２１，１０５（６）：１６１５－１６２９［２２］㊀ＨｕａｎｇＡＨＣ．Ｐｌａｎｔｌｉｐｉｄｄｒｏｐｌｅｔｓａｎｄｔｈｅｉｒａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｐｏｔｅｎｔｉａｌｆｏｒｒａｐｉｄａｄｖａｎｃｅｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２０１８，１７６（３）：１８９４－１９１８［２３］㊀ＰｙｃＭ，ＣａｉＹＱ，ＧｒｅｅｒＭＳ，ＹｕｒｃｈｅｎｋｏＯ，ＣｈａｐｍａｎＫＤ，ＤｙｅｒＪＭ，ＭｕｌｌｅｎＲＴ．Ｔｕｒｎｉｎｇｏｖｅｒａｎｅｗｌｅａｆｉｎｌｉｐｉｄｄｒｏｐｌｅｔｂｉｏｌｏｇｙ［Ｊ］．ＴｒｅｎｄｓｉｎＰｌａｎｔＳｃｉｅｎｃｅ，２０１７，２２（７）：５９６－６０９［２４］㊀ＬｉａｎｇＴ，ＳｈｉＣ，ＰｅｎｇＹ，ＴａｎＨＪ，ＸｉｎＰＹ，ＹａｎｇＹ，ＷａｎｇＦ，ＬｉＸ，ＣｈｕＪＦ，ＨｕａｎｇＪＲ，ＹｉｎＹＲ，ＬｉｕＨＴ．Ｂｒａｓｓｉｎｏｓｔｅｒｏｉｄ⁃ａｃｔｉｖａｔｅｄＢＲＩ１－ＥＭＳ⁃ＳＵＰＰＲＥＳＳＯＲ１ｉｎｈｉｂｉｔｓｆｌａｖｏｎｏｉｄｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄｃｏｏｒｄｉｎａｔｅｓｇｒｏｗｔｈａｎｄＵＶ⁃Ｂｓｔｒｅｓｓｒｅｓｐｏｎｓｅｓｉｎｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＣｅｌｌ，２０２０，３２（１０）：３２２４－３２３９［２５］㊀ＳｈｉｍａｄａＴＬ，Ｈａｒａ⁃ＮｉｓｈｉｍｕｒａＩ．Ｌｅａｆｏｉｌｂｏｄｉｅｓａｒｅｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｆａｃｔｏｒｉｅｓｐｒｏｄｕｃｉｎｇａｎｔｉｆｕｎｇａｌｏｘｙｌｉｐｉｎｓ［Ｊ］．ＣｕｒｒｅｎｔＴｏｐｉｃｓｉｎＰｌａｎｔＢｉｏｌｏｇｙ，２０１５，２５：１４５－１５０［２６］㊀龚婉，吕路琼，王维东，黄丽丽．富士苹果ＳＤＲｓ家族基因ＭｄＳＤＲ的克隆及序列分析［Ｊ］．分子植物育种，２０２０，１８（１４）：４５９７－４６０４［２７］㊀ＷａｎｇＷＤ，ＮｉｅＪＪ，ＬｖＬＱ，ＧｏｎｇＷ，ＷａｎｇＳＬ，ＹａｎｇＭＭ，ＸｕＬＳ，ＬｉＭＪ，ＤｕＨＸ，ＨｕａｎｇＬＬ．ＡＶａｌｓａｍａｌｉｅｆｆｅｃｔｏｒｐｒｏｔｅｉｎ１ｔａｒｇｅｔｓａｐｐｌｅ（Ｍａｌｕｓｄｏｍｅｓｔｉｃａ）ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ⁃ｒｅｌａｔｅｄ１０ｐｒｏｔｅｉｎｔｏｐｒｏｍｏｔｅｖｉｒｕｌｅｎｃｅ［Ｊ］．ＦｒｏｎｔｉｅｒｓｉｎＰｌａｎｔＳｃｉｅｎｃｅ，２０２１，１２：７４１３４２［２８］㊀ＧｒｅｅｒＭＳ，ＣａｉＹ，ＧｉｄｄａＳＫ，ＥｓｎａｙＮ，ＫｒｅｔｚｓｃｈｍａｒＦＫ，ＳｅａｙＤ，ＭｃＣｌｉｎｃｈｉｅＥ，ＩｓｃｈｅｂｅｃｋＴ，ＭｕｌｌｅｎＲＴ，ＤｙｅｒＪＭ，ＣｈａｐｍａｎＫＤ．ＳＥＩＰＩＮｉｓｏｆｏｒｍｓｉｎｔｅｒａｃｔｗｉｔｈｔｈｅｍｅｍｂｒａｎｅ⁃ｔｅｔｈｅｒｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎＶＡＰ２７－１ｆｏｒｌｉｐｉｄｄｒｏｐｌｅｔｆｏｒｍａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＣｅｌｌ，２０２０，３２（９）：２９３２－２９５０［２９］㊀ＹｉｎＺＹ，ＫｅＸＷ，ＫａｎｇＺＳ，ＨｕａｎｇＬＬ．ＡｐｐｌｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｒｅｓｐｏｎｓｅｓａｇａｉｎｓｔＶａｌｓａｍａｌｉｒｅｖｅａｌｅｄｂｙｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｉｃｓａｎａｌｙｓｅｓ［Ｊ］．ＰｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｌａｎｔＰａｔｈｏｌｏｇｙ，２０１６，９３：８５－９２［３０］㊀ＣａｉＹ，ＧｏｏｄｍａｎＪＭ，ＰｙｃＭ，ＭｕｌｌｅｎＲＴ，ＤｙｅｒＪＭ，ＣｈａｐｍａｎＫＤ．ＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓＳＥＩＰＩＮｐｒｏｔｅｉｎｓｍｏｄｕｌａｔｅｔｒｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎａｎｄｉｎｆｌｕｅｎｃｅｌｉｐｉｄｄｒｏｐｌｅｔｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＣｅｌｌ，２０１５，２７（９）：２６１６－２６３６［３１］㊀ＴｏｎｆａｃｋＬＢ，ＭｏｕｍｍｏｕＨ，Ｌａｔｃｈ Ａ，ＹｏｕｍｂｉＥ，ＢｅｎｉｃｈｏｕＭ，ＰｅｃｈＪＣ，ＶａｎＤｅｒＲｅｓｔＢ．ＴｈｅｐｌａｎｔＳＤＲｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ：Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔｉｎｐｒｉｍａｒｙａｎｄｓｅｃｏｎｄａｒｙｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ［Ｊ］．ＣｕｒｒｅｎｔＴｏｐｉｃｓｉｎＰｌａｎｔＢｉｏｌｏｇｙ，２０１１，１２：４１－５３［３２］㊀郭蔼光．基础生物化学第２版［Ｍ］．北京：高等教育出版社，２００９［３３］㊀ＷａｎｇＣ，ＣｈｉｎＣＫ，ＣｈｅｎＡ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｔｈｅｙｅａｓｔｄｅｌｔａ－９ｄｅｓａｔｕｒａｓｅｇｅｎｅｉｎｔｏｍａｔｏｅｎｈａｎｃｅｓｉｔｓｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｔｏｐｏｗｄｅｒｙｍｉｌｄｅｗ［Ｊ］．ＰｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｌａｎｔＰａｔｈｏｌｏｇｙ，１９９８，５２（６）：３７１－３８３［３４］㊀ＸｉｎｇＪＳ，ＣｈｉｎＣＫ．ＭｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｆａｔｔｙａｃｉｄｓｉｎｅｇｇｐｌａｎｔａｆｆｅｃｔｓｉｔｓｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｔｏＶｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍｄａｈｌｉａｅ［Ｊ］．ＰｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｌａｎｔＰａｔｈｏｌｏｇｙ，２０００，５６（５）：２１７－２２５［３５］㊀ＭａｄｉＬ，ＷａｎｇＸＪ，ＫｏｂｉｌｅｒＡ，ＬｉｃｈｔｅｒＡ，ＰｒｕｓｋｙＤ．Ｓｔｒｅｓｓｏｎａｖｏｃａｄｏｆｒｕｉｔｓｒｅｇｕｌａｔｅｓә９－ｓｔｅａｒｏｙｌＡＣＰｄｅｓａｔｕｒａｓｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ｆａｔｔｙａｃｉｄｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ，ａｎｔｉｆｕｎｇａｌｄｉｅｎｅｌｅｖｅｌａｎｄｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｔｏＣｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓａｔｔａｃｋ［Ｊ］．ＰｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｌａｎｔＰａｔｈｏｌｏｇｙ，２００３，６２（５）：２７７－２８３［３６］㊀ＹａｅｎｏＴ，ＭａｔｓｕｄａＯ，ＩｂａＫ．Ｒｏｌｅｏｆｃｈｌｏｒｏｐｌａｓｔｔｒｉｅｎｏｉｃｆａｔｔｙａｃｉｄｓｉｎｐｌａｎｔｄｉｓｅａｓｅｄｅｆｅｎｓｅｒｅｓｐｏｎｓｅｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＪｏｕｒｎａｌ，２００４，４０（６）：９３１－９４１［３７］㊀ＯｎｇｅｎａＭ，ＤｕｂｙＦ，ＲｏｓｓｉｇｎｏｌＦ，ＦａｕｃｏｎｎｉｅｒＭＬ，ＤｏｍｍｅｓＪ，ＴｈｏｎａｒｔＰ．ＳｔｉｍｕｌａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅｐａｔｈｗａｙｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｓｙｓｔｅｍｉｃｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｉｎｄｕｃｅｄｉｎｂｅａｎｂｙａｎｏｎｐａｔｈｏｇｅｎｉｃＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｔｒａｉｎ［Ｊ］．ＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｌａｎｔ⁃ＭｉｃｒｏｂｅＩｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ，２００４，１７（９）：１００９－１０１８［３８］㊀ＫｕｎｚＨＨ，ＳｃｈａｒｎｅｗｓｋｉＭ，ＦｅｕｓｓｎｅｒＫ，ＦｅｕｓｓｎｅｒＩ，ＦｌｕｇｇｅＵＩ，ＦｕｌｄａＭ，ＧｉｅｒｔｈＭ．ＴｈｅＡＢＣｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒＰＸＡ１ａｎｄｐｅｒｏｘｉｓｏｍａｌｂｅｔａ⁃ｏｘｉｄａｔｉｏｎａｒｅｖｉｔａｌｆｏｒｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｉｎｍａｔｕｒｅｌｅａｖｅｓｏｆＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｄｕｒｉｎｇｅｘｔｅｎｄｅｄｄａｒｋｎｅｓｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＣｅｌｌ，２００９，２１（９）：２７３３－２７４９［３９］㊀ＩｓｃｈｅｂｅｃｋＴ，ＫｒａｗｃｚｙｋＨＥ，ＭｕｌｌｅｎＲＴ，ＤｙｅｒＪＭ，ＣｈａｐｍａｎＫＤ．Ｌｉｐｉｄｄｒｏｐｌｅｔｓｉｎｐｌａｎｔｓａｎｄａｌｇａｅ：Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ，ｆｏｒｍａｔｉｏｎ，ｔｕｒｎｏｖｅｒａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎ［Ｊ］．ＳｅｍｉｎａｒｓｉｎＣｅｌｌａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌＢｉｏｌｏｇｙ，２０２０，１０８：８２－９３［４０］㊀ＯｎａｌＧ，ＫｕｔｌｕＯ，ＧｏｚｕａｃｉｋＤ，ＤｏｋｍｅｃｉＥｍｒｅＳ．Ｌｉｐｉｄｄｒｏｐｌｅｔｓｉｎｈｅａｌｔｈａｎｄｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．ＬｉｐｉｄｓｉｎＨｅａｌｔｈａｎｄＤｉｓｅａｓｅ，２０１７，１６（１）：１２８［４１］㊀ＧｉｄｄａＳＫ，ＰａｒｋＳ，ＰｙｃＭ，ＹｕｒｃｈｅｎｋｏＯ，ＣａｉＹ，ＷｕＰ，ＡｎｄｒｅｗｓＤＷ，ＣｈａｐｍａｎＫＤ，ＤｙｅｒＪＭ，ＭｕｌｌｅｎＲＴ．Ｌｉｐｉｄｄｒｏｐｌｅｔ⁃ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｓ（ＬＤＡＰｓ）ａｒｅｒｅｑｕｉｒｅｄｆｏｒｔｈｅｄｙｎａｍｉｃｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｎｅｕｔｒａｌｌｉｐｉｄｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔａｔｉｏｎｉｎｐｌａｎｔｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２０１６，１７０（４）：２０５２－２０７１４６１２ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮｕｃｌｅａｒＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ５６１２２０２２，３６（１１）：２１５８ ２１６５ＦｕｎｃｔｉｏｎＥｘｐｌｏｒａｔｉｏｎｏｆＡｐｐｌｅＳｈｏｒｔ⁃ＣｈａｉｎＤｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅｓ／ＲｅｄｕｃｔａｓｅｉｎＲｅｓｐｏｎｓｅｔｏＶａｌｓａｍａｌｉＷＡＮＧＳｈｕａｉｌｅ㊀ＸＩＡＯＫｅｙｕ㊀ＷＡＮＧＷｅｉｄｏｎｇ㊀ＨＵＡＮＧＬｉｌｉ∗（ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＣｒｏｐＳｔｒｅｓｓＢｉｏｌｏｇｙｆｏｒＡｒｉｄＡｒｅａｓ／ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，ＮｏｒｔｈｗｅｓｔＡ＆ＦＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ，Ｓｈａａｎｘｉ㊀７１２１００）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｓｈｏｒｔｃｈａｉｎｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅｓ／ｒｅｄｕｃｔａｓｅ（ＳＤＲ）ｉｓａｋｉｎｄｏｆＮＡＤ（Ｐ）（Ｈ）－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｏｘｉｄｏｒｅｄｕｃｔａｓｅ，ｗｈｉｃｈｉｓｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅｆｏｒｃａｔａｌｙｚｉｎｇｔｈｅｒｅｄｏｘｓｔｅｐｓｏｆｖａｒｉｏｕｓｍｅｔａｂｏｌｉｃａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｉｎｏｒｇａｎｉｓｍｓ．ＩｎｏｒｄｅｒｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆＭｄＳＤＲ，ｔｈｅＭｄＳＤＲｇｅｎｅｓｗｅｒｅｔｒａｎｓｉｅｎｔｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎＭａｌｕｓｄｏｍｅｓｔｉｃａｃｖ．Ｆｕｊｉｂｙａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ，ａｎｄｔｈｅｎｔｈｅｄｉｓｅａｓｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｗａｓｓｔｕｄｉｅｄｂｙｐｒｉｃｋｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ．ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｏｆｆａｔｔｙａｃｉｄｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓｒｅｌａｔｅｄｇｅｎｅｓｉｎａｐｐｌｅｌｅａｖｅｓｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇＭｄＳＤＲｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｗｉｔｈｒｅａｌ⁃ｔｉｍｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＰＣＲ（ｑＲＴ－ＰＣＲ）．ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｆａｔｔｙａｃｉｄｓｉｎａｐｐｌｅｌｅａｖｅｓｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇＭｄＳＤＲｗｅｒｅａｎａｌｙｓｅｄｂｙＧａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＧＣ）ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．ＴｈｅｌｉｐｉｄｄｒｏｐｌｅｔｓｉｎａｐｐｌｅｌｅａｖｅｓｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇＭｄＳＤＲｗｅｒｅｓｔａｉｎｅｄｂｙｎｉｌｅｒｅｄ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅａｐｐｌｅｌｅａｖｅｓｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇＭｄＳＤＲｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｅｎｈａｎｃｅｄｔｈｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｔｏＶａｌｓａｍａｌｉ．Ｔｈｅｌｅｓｉｏｎｄｉａｍｅｔｅｒｏｆｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｇｒｏｕｐｄｅｃｒｅａｓｅｄｂｙａｂｏｕｔ１４ 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理化检测在食品安全中的作用1. 引言1.1 理化检测在食品安全中的作用在食品安全中，理化检测起着至关重要的作用。

理化检测是指通过对食品的物理性质和化学成分进行分析和检测，以确保食品的安全性和质量。

理化检测可以帮助我们检测食品中是否含有有害物质，如重金属、农药残留、激素等，从而保障消费者的健康。

同时，理化检测还可以帮助食品生产者监测生产过程中的各项指标，确保食品生产符合卫生标准和法规要求。

通过理化检测，我们可以及时发现食品安全隐患，避免食品安全事件的发生，保障广大消费者的权益。

因此，理化检测在食品安全中扮演着不可或缺的角色，对于维护社会公共卫生和促进食品行业健康发展具有重要意义。

2. 正文2.1 食品安全的重要性食品安全是社会经济发展和人民群众生命安全的重要保障，是国家安全和社会稳定的重要组成部分。

食品是人们日常生活中必需的生活物资，而食品安全问题关乎人们的身体健康和生命安全。

不安全的食品会直接危害人们的健康，甚至导致严重的食物中毒或传染病。

食品安全问题关系到国家的社会稳定和经济发展，一旦发生大规模食品安全事故，不仅会造成人民群众的身体健康受损，还会引发社会不稳定和经济损失。

保障食品安全至关重要。

只有在食品安全的基础上，人们才能享受到健康的生活，社会才能享受到和谐稳定的发展。

而理化检测在食品安全中起着至关重要的作用，通过对食品中的理化指标进行检测和分析，可以及时发现食品安全隐患，为监管部门和生产企业提供科学依据，保障人民群众的饮食安全。

加强对食品安全的监管和理化检测工作，提高食品安全监管水平和能力，对于保障人民群众的健康和社会的稳定具有重要的意义。

部分内容到此结束。

2.2 理化检测的定义理化检测是通过对食品的物理性质和化学性质进行分析和检测，从而判断食品是否安全、合格的一种手段。

这种检测方法主要依靠现代化学分析技朧，通过测定食品中的各种化学成分、微量元素、添加剂、重金属等物质的含量和比例，来判断食品的质量和安全性。

拮抗放线菌ZZ-9菌株发酵液的抑菌谱及稳定性测定范万泽;薛应钰;张树武;徐秉良【摘要】为探究拮抗放线菌ZZ-9(Streptomyces rochei)菌株发酵液的抑菌谱,并明确传代培养、温度、光照、pH及紫外线等理化因素对发酵液稳定性的影响.以15种植物病原真菌为供试菌,采用菌丝生长速率法测定发酵液的抑菌谱,并以苹果树腐烂病菌(Cytospora sp.)为指示菌,测定不同条件下发酵液的稳定性.抑菌谱结果表明:ZZ-9菌株发酵液对供试的15种病原真菌均具有不同程度的抑制作用,其中对苹果树腐烂病菌和立枯丝核菌抑制效果最好,生长抑制率可达96％以上,且效果持久;而对苹果轮纹病菌、蚕豆褐斑病菌、月季叶霉病菌等抑制效果较差,抑制率在27％以下.稳定性试验结果表明:菌株传接6代时,活性稳定,从第7代开始菌株活性下降显著;发酵液耐高温,对强酸强碱处理、可见光及紫外线照射均有较好的稳定性;且在4℃及室温(20～25℃)下可贮藏至少30 d而保持其抑菌活性几乎不变.因此,拮抗放线菌ZZ-9菌株次生代谢产物具有较广谱的抑菌活性和较强的稳定性,具有开发成微生物农药的潜力.%To study bacteriostatic spectrum of fermentation broth from actinomycetes strain ZZ-9 identified as Streptomyces rochei,and to verify the effect of it on stability of fermentation broth under biochemical and physical factors such as subculture,temperature,illumination,pH and ultraviolet conditions.As the tested phytopathogen,method of growth rate was used to determine antimicrobial spectrum of fermentation broth with 15 kinds of plant pathogenic fungus.With Cytospora sp.as indicator phytopathogen,the stability of fermentation broth under different conditions was measured.The bacteriostatic spectrum results showed that the fermentation broth of ZZ-9 strain had inhibitory effects at differentdegres on 15 kinds of pathogenic fungus.With growth inhibition rate of more than 96％ and the lasting effect,the fermentation broth of ZZ-9 strain had the best effect on Cytospora sp.and Rhizoctonia solani,and it had worse effect on Botryosphaeria piricola,Cladosporium cladosporioidesv and Ascochyta fabae,the inhibition rate was under 27 ％.The stability test showed that the activity of strain was stable until the 6th generation,it decreased significantly from the 7th generation,and the fermentation broth had high temperature resistance,good stability under strong acid and alkali,visible light and ultraviolet irradiation treatments.Moreover,the fermentation broth could be stored for at least 30 days at 4 ℃ and room temperature (20-25 ℃),the activity remained nearlyunchanged.Therefore,the secondary metabolites of antagonistic actinomycetes ZZ-9 strain had broad-spectrum antibacterial activity and strong stability,and the potential could be developed into the microbial pesticide.【期刊名称】《西北农业学报》【年(卷),期】2017(026)003【总页数】8页(P463-470)【关键词】拮抗放线菌;发酵液;抑菌谱;稳定性【作者】范万泽;薛应钰;张树武;徐秉良【作者单位】甘肃农业大学植物保护学院/甘肃省农作物病虫害生物防治工程实验室,兰州730070;甘肃农业大学植物保护学院/甘肃省农作物病虫害生物防治工程实验室,兰州730070;甘肃农业大学植物保护学院/甘肃省农作物病虫害生物防治工程实验室,兰州730070;甘肃农业大学植物保护学院/甘肃省农作物病虫害生物防治工程实验室,兰州730070【正文语种】中文【中图分类】S482.2+92中国是世界上农药和化肥污染最严重的国家之一，化学农药的滥用不仅对生态环境、人类健康产生影响，而且易造成病虫害抗性等问题。

落叶果树 2022,54(3):39-43Deciduous Fruits·综合评议·DOI : 10.13855/ki.lygs.2022.03.010苹果及其制品中展青霉素研究进展王利平1,2,王丽霞3,刘保友2,4,张悦丽5,张伟2∗(1.烟台市福山区农业技术推广中心,山东烟台264000;2.山东省烟台市农业科学研究院,山东烟台265500;3.烟台市科技馆,山东烟台264001;4.烟台大学生命科学学院,山东烟台264005;5.山东省农业科学院植物保护研究所,山东济南250100)摘 要:展青霉素是一种有毒的真菌代谢产物,普遍存在于腐烂的蔬菜、水果中,是对人类危害最大的真菌毒素之一。

综述了苹果及其制品中展青霉素的研究进展,介绍了展青霉素产生菌、理化性质与毒性、污染现状、降解及检测方法等,为苹果及其制品中展青霉素的研究及防控提供参考。

关键词:苹果;苹果制品;展青霉素中图分类号: S661.1 文献标识码: A 文章编号: 1002-2910(2022)03-0039-05Research progress on patulin in apple and its productsWANG Liping 1,2,WANG Lixia 3,LIU Baoyou 2,4,ZHANG Yueli 5,ZHANG Wei 2∗(1.Fushan Centre of Agricultural Technique Promotion ,Yantai ,Shandong 264000,China ;boratoryof Quality &Safety Risk Assessment for Fruit (Yantai ),Yantai ,Shandong 265500,China ;3.Yantai Science and Technology Museum ,Yantai ,Shandong 264001,China ;4.College of Life Sciences ,Yantai University ,Yantai ,Shandong 264005,China ;5.Plant Protection Institute ,Shandong Academy of Agricultural Sciences ,Jinan ,Shandong 250100,China )Abstract :Patulin is a kind of toxic secondary metabolite produced by fungi which widely exists in rotten vegetables and fruits,and is one of the most harmful mycotoxins to human beings.In this paper,the research progress of patulin in apple and its products was reviewed.The producing fungi,physicochemical properties and toxicity,pollution status,degradation and detection methods were introduced to providing reference for the research and control of patulin in apple and its products. Key words :apple;apple products;patulin收稿日期:2021-04-19基金项目:国家农产品质量安全风险评估重大专项(GJFP2018013);食用农产品中病虫害残余物和病原微生物摸底排查与关键控制点评估(GJFP2017013);山东省现代农业产业技术体系果品产业创新团队(SDAIT -06);山东省自然科学基金重点项目(ZR2020KC026);烟台市科技计划项目(2021NYNC015);作物生物学国家重点实验室开放课题(2020KF11)。

耐热菌—食品工业的新挑战由一组亲酸、耐热的孢子类的细菌（这些细菌还可以产生强烈的异味并污染产品）导致的腐坏已经开始在全球范围内出现。

考虑到这些细菌在工艺过程中很难被彻底杀死，这种腐坏会大大的增加生产商的成本。

本文将讨论该世界舞台的发现过程、特性及潜在的破坏性。

该菌的首次被发现要归功于Uchino和Doi。

1967年，他们撰文提到在日本的温泉内发现了一种亲氧嗜酸、孢子类的微生物。

他们分离出这种细菌，并归类为Bacillus Coagulans。

之所以这样归类，是由于在研究过程中发现这些细菌更接近于B coagulans，而不是其他的嗜热菌，比如B stearothermophilus。

Darland和Brock于1971年发现事实上这些微生物和B coagulans有很大不同。

通过一系列更严密的试验，尤其是DNA成分的鉴定，终于发现这是一种新的细菌：Bacillus Acidocaldarius，亲氧的孢子形成菌，在酸性的高温环境下存活。

在这些细菌的细胞膜内，De Rosa等人于1971年发现了一些独特的脂肪酸：w-alicyclic 酸。

这些酸在亲氧的孢子形成菌中是非常罕见的。

1981年，Hippchen等人从花园泥土中Bacillus Acidocaldarius，发现这些细菌也可以在非热的中性环境中增殖。

他们同样进行了B coagulans中w-alicyclic酸的存在性试验，结果没有发现其存在。

这样，由于w-alicyclic 酸在Bacillus Acidocaldarius中存在而在B coagulans中不存在，同样证明这两种菌是不同的。

1983年，Poralla和Konig在赖酸、孢子形式的耐热菌中发现了w-cycloheptane，而不是其原始分离物中发现的w-cyclohexane。

很快，另外一组这种独特的细菌也被发现了。

1987年，Deinhard等人在不同组的分离物中进行了大量的分类试验，发现了两个新的种类：Bacillus acidoterrestris和Bacdillus cycloheptanicus。

苹果树腐烂病致灾机理及其防控关键技术研发与应用苹果树腐烂病致灾机理及其防控关键技术研发与应用1. 引言苹果是世界上最受欢迎的水果之一，然而，苹果树腐烂病却是一种严重威胁苹果产量和质量的病害。

本文将从苹果树腐烂病的致病机理和防控技术两个方面展开讨论，旨在帮助读者全面了解苹果树腐烂病，并掌握关键的防控技术。

2. 苹果树腐烂病的致病机理苹果树腐烂病是由微生物引起的，主要包括霉菌、细菌和真菌等。

这些微生物侵入苹果树后，通过不同的途径破坏树木组织，引起腐烂。

其中，霉菌是引起腐烂的主要病原。

霉菌侵入苹果树后，通过分泌毒素和分解木质素等途径，破坏细胞结构，使苹果树失去抗病能力，加速腐烂过程。

真菌和细菌也会在苹果树上形成并蔓延，加重腐烂程度。

3. 苹果树腐烂病的防控关键技术（1）良种选育：选择对苹果树腐烂病抗性强的苹果品种进行培育和推广。

（2）栽培管理：加强苹果树的栽培管理，保持树体健康，及时修剪病部枝条，清除病斑果实。

（3）生物防治：利用天敌昆虫或微生物对抗苹果树腐烂病的病原微生物。

（4）化学防治：使用合适的化学药剂喷洒苹果树，控制腐烂病的发生和发展。

（5）环境调控：合理调控苹果树生长环境，如适宜的温湿度、通风条件等，减少腐烂病的发生。

4. 苹果树腐烂病的综合防治综合防治苹果树腐烂病，需要结合以上多种技术手段，建立科学、有效的防治体系。

在实际防治中，需要注意以下几点：（1）全面监测：定期对苹果树进行病虫害监测，及时发现并控制腐烂病的发生。

（2）综合利用：综合运用生物防治、化学防治和环境调控等手段，提高防治效果。

（3）科学施药：选择合适的化学药剂，科学施药，注意药剂的使用剂量和方法，减少对环境的影响。

5. 个人观点和理解对于苹果树腐烂病的防控，我认为综合防治是非常重要的。

单一防治手段可能无法完全控制病害的蔓延，而综合利用各种手段，则能够提高防治效果，减少对环境的影响。

选择抗病性强的品种进行栽培和加强栽培管理也是非常关键的。

苏教版初中生物实验教案
实验目的：
1. 观察苹果在不同条件下的变化。

2. 探究苹果腐烂的原因。

实验材料：
1. 新鲜苹果
2. 小刀
3. 切板
4. 盐水
5. 盐
6. 清水
实验步骤：
1. 将苹果切成均匀大小的小块。

2. 将苹果块分成三组，分别放在三个容器中。

3. 将一组苹果块放在盐水中浸泡，另一组苹果块放在盐水中加入盐浸泡，最后一组苹果块放在清水中浸泡。

4. 每天观察并记录苹果的变化，包括颜色、气味以及触感等方面。

5. 持续观察苹果变化的过程，直至苹果出现腐烂的迹象。

实验结果：
1. 受盐水浸泡的苹果块腐烂较慢，且颜色保持相对鲜艳。

2. 受盐水含盐浸泡的苹果块腐烂更慢，颜色更保持鲜艳。

3. 放在清水中浸泡的苹果块较快腐烂，颜色较快变深。

实验结论：
盐水和盐对于延缓苹果腐烂具有一定的影响，其中含盐的盐水对于保持苹果的新鲜程度具有更好的效果。

苹果腐烂的原因可能与微生物的生长和氧化反应有关。

拓展实验：
1. 观察不同种类水果在不同条件下的腐烂情况。

2. 探究不同食品保存方法对食品新鲜度的影响。

3. 研究不同细菌或真菌对水果腐烂的影响。

注意事项：
1. 实验过程中要注意卫生，避免食品受到污染。

2. 小心使用刀具，避免发生意外伤害。

3. 实验结束后做好实验器材的清洁工作。

互动平台2020年第2期见的集合体”这一概念。

这些深入探究的过程，一次次地引起学生思维的撞击，让学生在课堂上产生真实的体验，产生师生共情。

3开放的总结升华课堂教学好的教育应是来源于生活、服务于生活的。

生物学科教育重在培养学生的科学素养。

不仅要让学生理解科学概念，更要将这些科学概念和知识运用于社会活动、生产实践和个人决策中。

为了贯穿这一理念,大部分教师在课堂结尾都采用了与生活实际相结合来升华主题教学。

例如,让学生从细菌和真菌的角度关注健康生活，养成良好的习惯;抑或是从细菌和真菌的利弊两方面引导学生分析事物都具有两面性，应辩证地看待事物。

这些主题设计在培养学生的社会责任感等方面有着重要的作用。

“苹果为什么会烂掉一细菌、真菌的介绍”教学设计分析广东省深圳市南山实验教育集团南海中学(518054)赵丹摘要以单元主题教学“苹果为什么会烂掉”的教学设计为例，分析了如何基于学生的体验来渗透生物学学科核心素养的问题。

教师在教学中要设置贴近学生生活的真实情境，引导学生关注生活中的生命现象，让学生从直观体验上观察现象,设计和实施探究实验，培养学生分析和解决问题的科学思维，从而解决生活中的问题。

关键词体验式教学；学科核心素养;探究式学习本节课例对应的课程内容是人教版《生物学•八年级•上册》第5单元第4章“细菌和真菌”的内容。

围绕“苹果为什么会烂掉”这一主题，以引领学生寻找苹果烂掉的原因为主线,主要学习了细菌和真菌生活繁殖需要的一般条件、培养细菌和真菌的方法，以及如何区别细菌和真菌菌落等学科内容。

教师创设了生活中常见的情境,通过实验观察烂苹果和好苹果的区别，让学生直观体验“腐烂”这一现象，感知细菌和真菌在自然界的存在，并重点关注学生对苹果腐烂现象产生的原因进行开放式讨论，引起学生间的思维碰撞,形成科学思维和科学能力。

现分析笔者教学设计的思路。

1基于学生的生活体验，创设真实的生活情境赵占良老师认为:“情境创设要尽量真实,是在现实生活中真实存在的，并能作为问题解决型的学习任务的真实情境。

植物腐烂实验报告模板实验目的本实验旨在研究植物腐烂的过程，了解腐烂的原因和机制。

实验材料- 10个新鲜的苹果- 少量的泥土和营养土- 10个装有苹果的密封罐- 密封袋- 实验记录表格实验步骤1. 将10个苹果洗净并晾干。

2. 准备好10个密封罐，将泥土和营养土均匀地铺在罐底，然后将一个苹果放入每个密封罐中。

3. 将每个密封罐都用密封袋密封好，确保罐内环境封闭。

4. 将密封罐放置在室温下，最好放置在通风良好的地方。

5. 每天观察密封罐中苹果的腐烂情况，并记录在实验记录表格中。

6. 实验持续一周后，将罐中腐烂的苹果清理掉，其他苹果继续观察。

实验结果与分析通过实验观察，我们记录了每天密封罐中苹果的腐烂情况。

根据实验数据，我们可以得出以下结论：1. 在实验开始的第一天，苹果表面没有明显腐烂现象。

2. 在第二天，苹果表面开始出现细小的黑斑。

3. 第三天，黑斑扩散范围逐渐增大，苹果表面出现凹陷。

4. 第四天到第五天，苹果开始出现软烂的现象，表面开始渗出液体。

5. 第五天以后，苹果表面完全腐烂，变得软腐，散发出难闻的气味。

通过分析实验结果，我们可以得出植物腐烂的原因和机制：1. 植物腐烂主要是由于细菌和真菌的作用。

这些微生物在植物表面生长繁殖，并分解植物组织，产生酶和酸等物质，导致植物腐烂。

2. 植物腐烂还与环境因素有关。

高温、湿度和氧气充裕的条件会加速植物腐烂的过程。

实验结论通过本次实验，我们深入了解了植物腐烂的过程、原因和机制。

植物腐烂是细菌和真菌等微生物的分解作用以及环境因素的共同作用结果。

植物腐烂是自然界中重要的生物降解过程，也提醒我们在储存和运输水果蔬菜等植物性食品时要注意防止腐烂和保持其新鲜。

实验改进和展望在今后的实验中，我们可以进一步探究不同温度、湿度条件下植物腐烂速度的变化，以及微生物种类和分解产物的分析，从而更全面地了解植物腐烂的过程。

此外，还可以与其他因素如光照等进行结合研究，以获取更多关于植物腐烂的数据和理解。

理化检测在食品安全中的作用1. 引言1.1 理化检测在食品安全中的重要性在食品安全领域，理化检测是至关重要的一环。

通过理化检测的手段，可以对食品中的有害物质、营养成分、添加剂等进行全面的检测和分析，保证食品的质量和安全。

食品中的化学成分和物理性质对于人体的健康有着直接的影响，而通过理化检测可以准确地了解食品的成分和性质，为食品安全提供有力的依据。

理化检测在食品安全中的重要性体现在以下几个方面：能够及时发现食品中的有害物质，如农药残留、重金属等，避免消费者食用受到危害；能够准确判定食品中的营养成分含量，为消费者提供健康饮食的参考依据；理化检测还能够对食品生产加工过程中的卫生状况进行监测，确保食品从生产到消费的全过程都符合安全标准。

理化检测在食品安全中发挥着不可替代的作用，是保障消费者权益和维护社会公共卫生的重要手段。

在食品安全日益受到重视的今天，加强理化检测工作，确保食品安全已成为当前的当务之急。

2. 正文2.1 理化检测的方法和技术：理化检测是通过对食品样品进行物理性质和化学成分的分析，来评估食品安全状况的一种重要方法。

在食品安全领域，理化检测的方法和技术主要包括以下几种：1. 光谱技术：包括红外光谱、拉曼光谱、紫外光谱等，可以通过样品的吸收、散射、发射等特性来分析食品中的成分和结构。

2. 色谱技术：包括气相色谱、液相色谱等，可以分离和检测食品中的物质，如添加剂、残留农药等。

3. 质谱技术：包括质子质谱、质量光谱等，可以高灵敏度地检测食品中微量级的物质，如重金属、毒素等。

4. 电化学分析：包括电化学传感器、电子舌等，可以实时监测食品中的离子、氧化还原物质等。

5. 核磁共振技术：利用不同核素的自旋产生信号来分析食品中的结构和成分。

除了以上几种常用的方法和技术外，随着科技的不断发展，还有越来越多的新型理化检测方法被应用于食品安全领域，为确保食品安全提供了有力支持。

【内容到这里结束，总字数已达2000字】。

初中生物实验教案汇编
实验目的：通过观察苹果的腐烂过程，了解生物分解、腐烂的原因以及微生物的作用。

实验材料：
1. 新鲜苹果
2. 封闭式密封袋（塑料袋）
3. 实验记录表
4. 放大镜
实验步骤：
1. 将苹果放入密封袋中，用封口将袋子密封。

2. 在实验记录表上记录下实验开始的日期和时间。

3. 每天用放大镜观察苹果腐烂的情况，记录下颜色变化、气味变化等观察结果。

4. 每隔一天打开密封袋，闻一下苹果的气味，并用手触摸苹果表面，记录下触摸感受。

5. 持续观察苹果的腐烂情况，直到苹果完全腐烂。

实验结果：
1. 在观察过程中，记录苹果的颜色、气味、触摸感受等变化。

2. 在苹果完全腐烂后，总结出苹果腐烂的原因以及微生物在腐烂过程中所起的作用。

实验注意事项：
1. 实验过程中要注意卫生，避免直接接触到腐烂的苹果。

2. 实验后要及时清理实验用具，并正确处理实验废物。

3. 若实验过程中发现异常情况，应立即停止实验并向老师报告。

拓展实验：
1. 将苹果放在不同环境条件下进行腐烂观察，比如高温环境、低温环境、阳光直射环境等。

2. 探究不同微生物对苹果腐烂速度的影响，可以在苹果表面涂抹不同种类的微生物培养物
进行观察。

通过这个实验，同学们可以更深入地了解生物分解和微生物在自然界中的重要作用，增强对生物学知识的理解和探究能力。

愿大家都能在实验中收获知识的乐趣！。

标题：水果腐烂指数公式及其应用引言：水果腐烂是指在一定条件下，水果因细菌、真菌等微生物的作用而失去食用价值。

为了准确评估水果的新鲜程度和储存寿命，科学家们通过研究建立了水果腐烂指数公式。

本文将详细介绍水果腐烂指数公式的构建过程和应用领域。

一、水果腐烂指数的定义水果腐烂指数是一个定量评估水果腐烂程度的指标，通常采用数值表示。

该指数可以帮助人们判断水果的新鲜程度，以及预测其储存寿命。

水果腐烂指数的构建需要考虑多个因素，如氧气浓度、温度、湿度、微生物活性等。

二、水果腐烂指数公式的构建1. 水果腐烂指数公式的基本框架水果腐烂指数公式的构建基于多个参数的综合考虑，常见的参数包括水果表面颜色变化、质地变化、气味变化等。

一个常用的水果腐烂指数公式的基本框架如下：腐烂指数 = w1 ×表面颜色变化 + w2 ×质地变化 + w3 ×气味变化其中，w1、w2、w3是权重系数，用于调节各项指标对腐烂指数的贡献程度。

2. 各项指标的评估方法（1）表面颜色变化评估：通过对水果表面颜色的变化进行定量分析，可以评估水果的腐烂程度。

常见的评估方法包括使用图像处理技术，比较水果表面颜色的差异程度，并将其转化为数值。

（2）质地变化评估：水果的质地变化与其腐烂程度密切相关。

一种常见的评估方法是使用力学测试仪测量水果的硬度变化。

将硬度数据转化为数值，用于评估水果的质地变化程度。

（3）气味变化评估：水果腐烂时，会释放出特殊的气味。

通过对水果气味的变化进行感官评估或使用电子鼻等设备进行检测，可以将水果的气味变化转化为数值。

3. 权重系数的确定权重系数的确定需要根据实际情况进行统计和分析。

可以通过大量的实验数据和专家经验，采用多元回归等方法来确定各项指标的权重系数。

不同水果种类和不同储存条件下的水果腐烂指数可能存在差异，因此需要针对具体情况进行调整。

三、水果腐烂指数公式的应用1. 新鲜度评估：水果腐烂指数可以帮助消费者快速判断水果的新鲜程度，选择更好的水果。