营养琼脂培养基使用说明

第1部分：化学品及企业标识1.1 产品中文名称：营养琼脂1.2 产品英文名称：Nutrient Agar1.3 产品编号：CM107/CM107-011.4 企业名称：北京路桥技术股份有限公司1.5 推荐用途和限制用途：生化研究/分析第2部分：危险性概述2.1 紧急情况概述：吸入后，立即呼吸新鲜空气；接触皮肤后，立即用清水冲洗或淋浴：眼睛接触后，用清水冲洗；食入：清水漱口；如感不适，请立即就医。

2.2 GHS分类：非危险物质或混合物。

2.3 物理和化学危险：目前未掌握物理或化学危险性信息。

2.4 健康危害：目前未掌握物理或化学危险性信息。

2.5 环境危害：目前未掌握物理或化学危险性信息。

2.6 其他危害：无数据资料。

第3部分：成分/组成信息3.1 混合物：化学品成分参考培养基标签成分。

3.2 有化学害物质：无第4部分：急救措施4.1 必要的急救措施：吸入：立即移至新鲜空气处。

如不适就医。

皮肤接触：立即用清水冲洗。

眼睛接触：立即提起眼睑用大量流动清水冲洗。

如不适就医。

食入：清水漱口，如有不适请就医。

4.2 主要症状和影响，急性和迟发效应：据我们所知，此化学，物理和毒性性质尚未经完整的研究。

4.3 及时的医疗处理和所需的特殊处理的说明和指示：无数据资料第5部分：消防措施5.1 灭火方法和灭火剂：用水、耐醇泡沫、干粉或二氧化碳灭火器灭火5.2 危险特性：不助燃5.3 有害燃烧产物：碳氧化物，硫氧化物，磷的氧化物，氯化氢气体，碘化氢，氧化钾，钠的氧化物，氧化镁等5.4 消防员防护装备建议：戴上自给式呼吸器灭火第6部分：泄露应急处理6.1 个人防护：穿戴实验服，手套和口罩，避免吸入粉尘6.2 环境保护措施：在确保安全的前提下，防止进一步泄露或溢出。

6.3 清洁/收集措施：干燥扫除，存放进适当闭口容器中待处理，清洗污染区域，而后酒精消毒。

第7部分：操作处置与储存7.1 安全操作注意事项：防止粉尘和气溶胶生成，有粉尘时，应提供通风设备。

营养琼脂培养基使用说明022020 营养琼脂(普通肉汤琼脂培养基)用途：用于细菌总数测定、保存菌种及纯培养，也可用于消毒效果测定(GB/T4789.28-2003 中4.7 ，GB/T4789.2-2003，GB15979-2002和GB15981-1995，ISO标准)。

原理：蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。

配方(每升)：蛋白胨10g牛肉膏粉3g氯化钠5g琼脂15g最终pH 7.3±0.2使用方法：1、称取本培养基33g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，备用。

2、(食品)以无菌操作称取检样25克(或25mL)，放入含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中(瓶内预置适当数量的玻璃珠)，充分振摇，即为1：10的均匀稀释液。

依次做1：100，1：1000……稀释液。

3、根据对样品污染情况的估计，选择2—3个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做2个平皿。

4、稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL，并转动平皿使混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。

待琼脂凝固后，倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。

5、观察结果。

6、菌落计数方法：做平板菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏，在计下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。

7、菌落计数的报告：选取菌落数在30—300之间的平板作为菌落总数测定标准。

一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2以代表全皿菌落数。

实验一培养基的制备与灭菌实验步骤：（一）伊红美蓝培养基（EMB，用成品，分离大肠杆菌用）每组1瓶，250 ml三角瓶×200 ml培养基。

按成品说明称量、放入搪瓷杯，加水，加热完全溶化，倒入三角瓶，塞棉花塞，牛皮纸封口，包扎，作标记（培养基名称、批次组别、日期，下同），灭菌。

（二）营养琼脂培养基（即牛肉膏蛋白胨培养基，用成品，分离芽孢杆菌用）每组1瓶，250 ml三角瓶×200 ml培养基，方法同上，灭菌。

（三）PDA培养基（即马铃薯蔗糖培养基，分离酵母菌、根霉用）每组1瓶，250 ml三角瓶×200 ml培养基。

培养基配方：马铃薯20%、蔗糖（白砂糖）2%、琼脂 2%，加水至所需体积，pH自然。

配制方法：马铃薯去皮，称量，切成小方块，放入搪瓷杯，加水适量，煮沸20 min，取汁液，补水至所需体积，加入蔗糖（白砂糖），加热溶化，最后加入琼脂（琼脂要预先单独用水浸泡，然后挤干再加入），加热至琼脂完全溶化，分装三角瓶，塞棉花塞，牛皮纸封口，包扎，灭菌。

培养基统一高压蒸汽灭菌（121℃25 min）。

（四）无菌平皿准备（下次实验倒平板用）每组10套，报纸包扎，高压蒸汽灭菌（121℃25 min）后，置干燥箱80℃烘干1 h。

（五）枯草样预处理及预培养（下次实验分离芽孢杆菌用）枯草样预处理：每组1瓶。

100 ml三角瓶＋自来水约50 ml，加5%可溶性淀粉，溶解。

枯草若干，剪短，浸入三角瓶水中，牛皮纸封口，包扎，置水浴中煮沸10 min，然后置培养箱30℃预培养3～7 d。

（六）葡萄样（或其它水果）酵母菌预培养（下次实验分离酵母菌用）每组1瓶。

葡萄（或其它水果）适量，捏碎，皮渣与汁液一起放入250 ml 三角瓶（装量1/2～2/3），封口，置培养箱25℃预培养3～7 d，观察自然发酵过程。

实验二微生物的分离与纯化实验步骤：（一）污水中大肠杆菌的分离（稀释倒平板法）1）用三角瓶取污水样适量。

常用培养基配方汇总1. 营养琼脂培养基 (Nutrient Agar)- 夏洛特奥康纳 (Charlote A. O'Connor) 配方:-蛋白胨:5克-麦芽提取物:3克-胰蛋白酶胨:1.5克-硫酸镁:0.2克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。

2. 肉蔗糖琼脂培养基 (Tryptic Soy Agar, TSA)- 条件反射琼脂 (孟德尔和赛尼·特鲁斯 ('Sneath and Tres') 配方):-牛肉蛋白胨:17克-大豆酪蛋白胨:3克-肉汤提取物:5克-葡萄糖:2.5克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。

3. MAC琼脂培养基 (MacConkey Agar)- 麦康奈 (MacConkey) 配方:-紫胆杆菌胨:17克-葡萄糖:1.5克-硫酸盐:1.5克-中性红:0.03克-石蕊:0.3克-氯化钠:5克-地膜:10克-pH值调整到7.1-7.5-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。

4. LB琼脂培养基 (Luria-Bertani Agar)- 古斯塔夫·诺维斯 ('Gustaf Novis') 配方:-研磨大豆饼粉:10克-酵母提取物:5克-部分脱脂酪蛋白:5克-氯化钠:1克-地膜:15克-pH值调整到7.2-7.4-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。

5. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 (Potato Dextrose Agar, PDA)- 林登麦卡蒂 ('Lindenmuth and McCarty') 配方:-马铃薯提取物:4克-葡萄糖:20克-地膜:15克-pH值调整到5.6-5.8-用1L水来溶解以上成分，加热煮沸后冷却并灭菌。

这些是一些常用的培养基配方，适用于细菌和真菌的培养。

1．营养肉汤成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，蒸馏水1000mL，pH7.4。

制法：按上述成分混合，溶解后校正pH，121℃高压灭菌15min。

2．营养琼脂培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，琼脂17g，蒸馏水1000mL，pH7.2。

制法：将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH，加入琼脂，分装于烧瓶内，121℃，15min高压灭菌备用。

3．MRS培养基成分：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉5g，K2HPO4 2g，柠檬酸二铵2g，乙酸钠5g，葡萄（琼脂15~20g），蒸馏水1000mL。

糖20g，吐温80 1mL，MgSO4 .7H2O 0.58g，MnSO4 4H2O 0.25g，制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.2~6.4，分装于三角瓶中，121℃,灭菌15min。

4．脱脂乳培养基成分：牛奶，蒸馏水。

制法：将适量的牛奶加热煮沸20~30min，过夜冷却，脂肪即可上浮。

除去上层乳脂即得脱脂乳。

将脱脂乳盛在试管及三角瓶中，封口后置于灭菌锅中在108℃条件下蒸汽灭菌10~15min，即得脱脂乳培养基。

5．培养基A成分：蛋白胨10.0g，酵母提取物1.0g，葡萄糖10.0g，NaCL5.0g，琼脂15.0g，水1000mL。

制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至7.0~7.2，分装于三角瓶中，121℃，灭菌15min。

6．PTYG培养基成分：胰胨Tryptone（Oxoid）5g，大豆蛋白胨5g，酵母粉（Oxoid）10g，葡萄糖10g，吐温80 0 1mL，琼脂15~20g，L-半胱氨酸盐酸盐0.05g，盐溶液4mL。

制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.8~7.0，分装于三角瓶中，115℃灭菌30min。

盐溶液制备：无水氯化钙0.2g，K2HPO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，MgSO4 。

7H2O 0.48g，NaCO310g，NaCL 2g，蒸馏水1000mL，溶解后备用。

营养琼脂（普通琼脂）成份：牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏汤）100毫升琼脂（视天气，琼脂质量而定）制法：将上物加热溶解，补足水，调ph至7．6，过滤分装121℃，高压灭菌15分钟。

用途：作普通琼脂平皿。

血琼脂平板（BA）制法：取营养琼脂（PH7．6），加热使其溶解待冷至45-50℃，以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀，立即倾注于平板或分装试管，制成斜面备用。

用途：1．一般棉拭子均接种此培养基。

2．尿液，脓液3．分离细菌标本用。

基础培养基（肉膏汤BB）成份：蛋白胨10克牛肉膏5克氯化钠5克水1000毫升制法：将以上各物称好，加水煮沸溶解，用1NNOH校正PH至7．6，过滤分瓶，121℃高压灭菌，20分钟备用。

用途：1 作耐药试验，增菌用分装小管。

2 作普通琼脂斜面。

血液培养基（大管肉汤培养基）成份：1 新鲜牛肉浸液1000毫升2 PABA（对氨基苯甲酸［相当于10mg/毫升］）1g% 1毫升3 MgSO4 [相当于0．493/100毫升] 49．3% 1毫升4 枸椽酸钠0．3g制法：1 将1号，4号混合液，2号，3号液分装高压灭菌。

2 取灭菌1，4号混合液用无菌法加入PABA，MgSO4，再分管，行无菌试验三天方可使用。

用途：作血，骨髓培养用。

肠道杆菌培养基（伊红美兰琼脂）成份：蛋白胨10克乳糖10克氯化钠5克琼脂25（22）克水1000毫升2%伊红溶液20毫升0．5%美兰溶液20毫升制法：将蛋白胨，氯化钠琼脂称好，加水1000毫升使溶解，校正PH7．4过滤，补足失水，加入2%伊红溶液20毫升，0．5%美兰溶液20毫升，（115℃高压20分钟），冷却至50℃左右倾注平板，凝固后存冰箱备用。

（高压以后方可再加乳糖）用途：用作分离沙门氏，志贺氏菌属，也作菌群调查。

罗文斯坦培养基成份：磷酸二氢钾2．4克硫酸镁0．24克枸椽酸钠0．6克天门冬素3．6克纯甘油（丙三醇）12毫升水600毫升马铃薯粉30克鸡蛋1000毫升（约3公斤）2%孔雀绿水溶液20毫升制法：1 除鸡蛋外（还有孔雀绿）。

常用培养基的配制常用培养基的配制〔一〕营养琼脂培养基【用途】供细菌总数测定、保存菌种、细菌纯化、一般细菌培养、血琼脂培养基根底之用。

【成分】牛肉膏 3gNaCl 5g 蛋白胨 10g 琼脂 20g±0.2℃ 30min高压灭菌备用。

〔二〕蛋白胨水培养基【用途】供细菌培养、吲哚试验之用。

【成分】蛋白胨 10g氯化钠 5g℃ 20min高压灭菌备用。

〔三〕半固体培养基【用途】供观察细菌动力、菌种保存、H抗原位相变异试验等。

【成分】蛋白胨 10g氯化钠 5g 琼脂 2.5～3g【pH值】7.6℃ 20min高压灭菌备用。

〔四〕营养肉汤培养基【用途】供一般细菌培养、转种、复苏、增菌等，也可用于消毒效果的测定。

【成分】蛋白胨 10g氯化钠 5g牛肉粉〔牛肉浸汁〕 3g±℃ 20min 高压灭菌备用。

〔五〕葡萄糖蛋白胨水培养基【用途】供甲基红试验及V-P试验之用。

【成分】蛋白胨 5g葡萄糖 5g K2HPO4 (K2HPO4·3H2O) 5g (0.65g)【pH值】7.0～7.2【制法】将上述成分溶于1000ml蒸馏水中，过滤，分装试管，每管2～3ml，经112.6 ℃ 20min高压灭菌备用。

〔六〕伊红美蓝培养基〔EMB培养基〕【用途】弱选择性培养基,用于别离肠道致病菌,特别是大肠杆菌。

【成分】蛋白胨 10g乳糖 10g 伊红 0.4g美兰 0.065g 琼脂 14g K2HPO4 2g±0.4℃ 15min高压灭菌，待冷却至60℃左右倾注灭菌平皿备用。

〔七〕S-S琼脂培养基【用途】供沙门氏菌、志贺氏菌的选择性别离培养之用。

【成分】蛋白胨 5g 乳糖 10g 牛肉粉 5g三号胆盐 3.5g 琼脂 17g 柠檬酸钠 8.5g 柠檬酸铁 1g 硫代硫酸钠 8.5g 中性红 0.025g 煌绿 0.00033g±0.1【制法】上述成分称取60g加蒸馏水1000ml，加热煮沸至完全溶解，待冷却至60℃左右倾注灭菌平皿备用。

营养琼脂对照培养基营养琼脂对照培养基产品说明：本品是一种最基本的非选择性培养基，含有氮源、碳源和微量无机盐适合一般细菌的生长繁殖。

因含有动、植物两种蛋白质，苛养菌也可利用其中的营养进行增殖。

营养琼脂对照培养基用途：细菌计数培养基适用性试验或检验营养琼脂对照培养基注意事项：1.检查平板内是否干裂或染菌，如长菌请勿使用；2.请在洁净的环境下操作，避免杂菌干扰；3.在冰箱储存很久的培养基容易出现一些冷凝水，请在洁净的环境下将水倒出，然后在培养箱放置10-30Min，待其表面干燥后再接种；或在使用前，提前一到两周放置室温即可；4.弃物处理：使用后应高压灭菌或焚烧后按一般垃圾处理，也可按专业技术人员指示方法处理。

保存：避光保存，放于阴凉干燥处。

营养琼脂对照培养基其他相关对照培养基：硫乙醇酸盐流体对照培养基改良马丁对照培养基营养琼脂对照培养基营养肉汤对照培养基玫瑰红钠琼脂对照培养基胆盐乳糖对照培养基甘露醇氯化钠琼脂对照培养基沙氏葡萄糖肉汤对照培养基麦康凯琼脂对照培养基沙门、志贺菌属琼脂对照培养基4-甲基伞形酮葡萄苷酸（MUG)对照培养基沙氏葡萄糖琼脂对照培养基念珠菌显色对照培养基绿脓菌素测定用对照培养基基础梭菌增菌对照培养基哥伦比亚琼脂对照培养基溴化十六烷基三甲铵琼脂对照培养基基础四硫磺酸钠亮绿对照培养基基础乳糖发酵对照培养基酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂（YPD）对照培养基胰酪大豆胨琼脂对照培养基胰酪大豆胨肉汤对照培养基R2A琼脂对照培养基三糖铁琼脂对照培养基麦康凯液体对照培养基紫红胆盐葡萄糖琼脂对照培养基肠道菌增菌液体对照培养基木糖赖氨酸脱氧胆酸盐对照培养基。

培养基的配制实验报告实验名称：培养基的配制实验报告实验目的：掌握微生物培养基的配制方法及影响因素，加深对微生物生长和培养的认识。

实验原理：微生物的生长和培养需要用到适宜的培养基。

培养基的成分和配制方法不同会对微生物生长和培养产生影响。

本实验选用普通营养琼脂培养基为例，以掌握培养基制备的基本方法和技术操作。

实验材料：普通营养琼脂培养基粉末、培养基配制器具（烧杯、量筒、过滤器、移液器等）、革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌。

实验步骤：1. 称取所需的琼脂粉末，按照要求的比例加入适量的蒸馏水中，溶解均匀。

2. 用不锈钢网过滤琼脂溶液，去除颗粒和杂质，减小后续培养的干扰。

3. 将琼脂溶液分装至烧杯中，加热至溶解，然后用自由落滴法测定琼脂的pH值。

4. 加入所需的营养成分，如碳源、氮源、矿物质等，调节培养基的成分。

同时，根据需求在培养基中加入相应抗生素或生长因子。

5. 将培养基配制至预定体积，混合均匀后用带滤芯的移液器过滤。

6. 将培养基分装至耐热培养皿中，约1/3满，放入高压灭菌锅中高压灭杀15-20分钟。

7. 取出被高压灭菌的培养皿，放置至室温下自然冷却或以水冷却。

8. 在无菌条件下将预先生长的细菌转移到已灭菌的琼脂培养基中，然后在适宜的环境下进行培养观察。

实验结果和分析：本实验制备的普通营养琼脂培养基满足生长条件，多种菌种都能够成功生长。

制备过程中，各个步骤都需要精确、细致地操作，如琼脂的过滤、配制和自由落滴pH值的测定、高压灭菌等。

这些步骤的误差可能会导致培养基的成分产生变化，进而影响培养效果。

结论：微生物的培养需要适宜的培养基，不同生物和实验需求需要不同的配方和配制方法。

掌握基础的培养基配制技术，能够快速、精准地制备适宜的培养基。

这对于微生物研究和应用有着重要的意义。

实训三营养琼脂培养基的制备目的要求熟悉培养基制备的基本程序，学会制备常用的培养基。

仪器及材料高压蒸汽灭菌器、电炉、天平、量筒、试管、培养皿、营养琼脂粉等。

方法与步骤1．配料营养琼脂粉 38g 用天平称量蒸馏水 1000ml 用量筒量取称量好后将两种材料放入搪瓷缸中。

2．溶化用电炉加热煮沸2-3min使其完全溶解，注意用玻璃棒不断搅拌，防止烤焦和沸出。

3．测定及校矫pH ……省略4．过滤……省略5．分装分装于试管或培养皿中，不需无菌操作。

试管：1/3试管，分装后加试管塞；培养皿：厚度3-4mm。

（培养皿开盖，一字摆开，直接倒入）6．灭菌 121.3℃ 20min。

试管：成捆放入，试管塞用纸或纱布包扎固定；培养皿：正放，以组为单位摞在灭菌器中。

7．冷却、凝固试管：灭菌后解捆，单支摆成斜面；不要拔下试管塞。

培养皿：灭菌后一字摆开，凝固成平板。

凝固前保持静置状态；不能开盖。

8．无菌检验，备用（1）无菌检验：抽样，置恒温箱中（培养皿需倒置）37℃培养18-24h，无任何生长物即为合格。

（2）保存：冰箱冷藏，4℃，倒置。

补充：血液琼脂培养基将灭菌的营养琼脂冷至45～50℃,无菌操作加入5%～10%的无菌血液(或脱纤血)，然后倾注灭菌平皿或分装试管制成斜面。

供营养要求较高的细菌分离培养，亦可供溶血性的观察和保存菌种用。

高压蒸气灭菌器的使用1．加水：加到外筒中，与支架相平或略低于支架。

2．放入待灭菌的物品：放入内筒中。

耐热、耐高压；不要过于拥挤，物品间留有空隙；盖或塞要固定。

3．封盖：对称固定，拧紧；检查密封胶圈是否放好；导气管插入管槽。

4．通电灭菌：明确温度、压力和时间；阀门操作：安全阀始终关闭，放气阀一开始打开，待冷空气排净后关闭；计时：从达到预定温度后开始计时；温度控制：≥121.3。

在121.3和123之间徘徊。

5．取出物品的条件：压力为零或指针回到原点。

6．保养：将水倒出。

江门大诚医疗器械有限公司
标准操作规程文件编号版本号
标题：营养琼脂培养基配制使用操作规程页码1/1
目的：建立营养琼脂培养基配制使用操作规程。

范围：本操作规程适用于营养琼脂培养基的配制使用。

职责：质检室质检员负责本操作规程的执行，质保室质监员负责本操作规程的监督检查。

内容：：
1．仪器与试剂：
1.1 JY2002电子天平、85_2数显恒温磁力搅拌器、LDZX-50FA立式压力蒸汽灭菌器、电冰箱、250ml三角瓶、500ml量筒、线绳、培养皿。

1.2. 纯化水、营养琼脂、75%酒精。

2.操作方法
2.1. 使用JY2002电子天平称取营养琼脂8克，于250ml三角瓶内，加入250ml纯化水，加热溶解，充分搅拌均匀后，包好扎紧瓶口。

2.2. 置LDZX-50FA立式压力蒸汽灭菌器内，于121℃高压灭菌15分钟，取出放置至室温后，放入冰箱，备用（冰箱温度控制在1－4℃）。

2.3. 使用时从冰箱取出，放置室温后，置85_2数显恒温磁力搅拌器中加热，使融，全部融化后取出，放置约45℃时使用。

2.4. 使用时，用75%乙醇擦瓶子外围，打开包扎外壳，左手拿培养皿，右手拿三角瓶，慢慢倾倒至培养皿中，每皿注入约15ml完毕后，立即包好瓶口，用线绳扎好，留下次使用。

（此瓶培养基只允许使用两次，且每次首先倾注一个空白平皿作为对照培养）。

3.参考文件：85_2数显恒温磁力搅拌器操作规程
LDZX-50FA立式压力蒸汽灭菌器操作规程
JY2002电子天平校准规程。

北京博康健基因科技有限公司培养基管理标准操作规程一、目的：本规程规范了微生物实验室培养基的申购、配制、培养基质量控制、储存、使用、废弃处理等。

二、范围：本规程适用于微生物实验室检验用的所有培养基。

三、责任：QC部质检员对本规程实施负责。

四、内容：1．操作依据：《中国药典》2010年版二部五、正文1.培养基（Media）是指人工配制的生物营养物质，即用人工方法将多种物质按各种微生物生长繁殖的需要配成的一种混合营养物。

通常指干粉培养基（Dehydrated Medium）和配制好的琼脂（Agar）、肉汤（Broths）、稀释液（Diluents）等等。

2.程序2.1.购买2.1.1.质量控制部提出采购计划，并填写《采购计划》，注明培养基名称、数量、质量要求、生产厂家等，由相关人员审核，交采购部采购。

2.1.2.培养基买回后，由使用部门填写领料单，由物流部发出。

2.1.3.领回后的干粉培养基，开瓶后应贴上《开启标签》，注明开口日期、有效期至、开口人、贮存条件，并且不得把原标签覆盖。

使用时填写《干粉培养基使用记录》。

2.1.4.检验人员必须依据培养基生产厂家的操作说明进行配制，并填写《培养基配制使用记录》，配制记录上注明所用培养基的批号；盛装配制好的培养基的容器外应贴《培养基标签》，标签应注明：名称、批号、配制人、配制日期、有效期至等信息。

批号定义为：同一批灭菌的培养基为一批，批号编号方式为年XX，月XX，日XX，流水号XX，例如：2010-05-01配制的培养基第一批灭菌的培养基批号为：10050101。

2.1.5.配制好的培养基应在一定时间内，按说明书规定时间进行灭菌，避免微生物滋生。

2.1.6.必要时，灭菌后的培养基在配制后必须进行pH值的测定以确保符合药典及生产厂家的规定。

2.2.培养基质量控制2.2.1.为了保证微生物检验的质量，在使用前，每批配制好的培养基在灭菌后用于供试品检验之前都应进行培养基质量控制检查。

品种名称：改良马丁琼脂培养基的使用
品种编号：021041
(Fungi Agar)
改良马丁琼脂培养基用途：
改良马丁琼脂培养基(真菌营养琼脂培养基)用于真菌培养及药品和生物制品无菌检查用。

(《中华人民共和国药典》2010年版) 改良马丁琼脂培养基原理：
胨提供碳源和氮源;酵母浸出粉提供B族维生素;葡萄糖提供能源;磷酸氢二钾为缓冲剂;硫酸镁提供必须的微量元素;琼脂是培养基的凝固剂。

配方(每升)：
胨 5.0g
酵母浸出粉 2.0g
葡萄糖 20.0g
磷酸氢二钾 1.0g
硫酸镁 0.5g
琼脂 14.0g
最终pH 6.4±0.2
使用方法：
1、称取改良马丁琼脂培养基(真菌营养琼脂培养基)42.5g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装试管，摆成斜面，115℃灭菌30min。

2、将菌株接种至斜面培养基上，置于23～28℃按规定时间进行培养3d。

3、观察结果。

质量控制：
本品倾注平皿，质控菌株接种后于23～28℃培养3d，结果如下：
贮存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。

贮存期三年。

规格：250g
参考文献：
1. 《中华人民共和国药典》2010年版，附录XI H 无菌检查;附录XI J 微生物限度检查。

1.目的
规范制备营养琼脂培养基平皿的操作程序。

2.范围
营养琼脂培养基平皿的制备
3.职责
操作人员负责本规程的实施，部门负责人经理监督执行
4.内容
4.2相关设备
电子天平、手提式压力蒸汽灭菌器
4.3制备过程：
4.3.1制备过程在室温下操作；
4.3.2按理论制备1000ml与实际制备溶液体积的比值计算实际制备溶液中各试剂需要量；
4.3.3称量营养琼脂培养基备用；
4.3.4用刻度量筒量取约90%终体积的纯化水加到能装下终容积的容器中；
4.3.5摇荡并加热使其充分溶解并混合均匀；
4.3.6移此溶液到刻度量筒，加纯化水到终容积；
4.3.7将配制好的营养琼脂培养基后置于高压锅中121℃高压灭菌15分钟；
4.3.8待灭菌好的培养基温度降到45~60℃时，将培养基无菌分装到无菌平皿（ 90mm）
中，按15ml /个进行分装。

4.3.9容器标签，贴标签标识：名称、批号、制备日期、制备人，储存条件。

4.3.10按SOP进行清场和清洁。

4.42-8℃保存有效期2周。

4.5及时填写制备记录，对制备过程进行评价，若有异常情况应说明
4.6将培养基置于30~35℃恒温箱中进行预培养48小时，预培养结果为阴性方可使用。

5.记录
《培养基平皿制备记录》FSD-QR-036。

营养琼脂培养基制备标准操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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营养琼脂培养基的制备准备营养琼脂培养基，这可是个让人兴奋的实验！想象一下，像个化学小达人一样，拿着一堆材料，准备好让微生物们“聚会”。

咱们得找出琼脂，这可是咱们的“明星”，没它可不行。

琼脂从海藻提取出来的，真是个绿色环保的小家伙，听上去就很不错吧？说实话，这种东西在实验室里简直是无处不在，给微生物一个温暖的家，真是太贴心了。

咱们需要一些培养基，这就是给微生物提供营养的“快餐”，让它们长得又快又好。

常用的配方里，咱们得加入水、氯化钠、蛋白胨，偶尔还可以加点葡萄糖，嘿嘿，想象一下微生物们吃到这顿“丰盛大餐”的样子，嘴巴都合不拢了。

然后把这些材料放进锅里，加水煮开，注意别让锅里的水跑光了哦，毕竟咱们可不想看见“干锅”这种悲惨的景象。

把混合物搅拌均匀，像在做汤一样，生怕有一块“干疙瘩”，那就惨了。

当混合物完全溶解后，得把它放凉，温度适中就行。

太热了，琼脂可受不了，太凉了又不成。

接下来就是装瓶了，准备几个小玻璃瓶，把混合好的营养琼脂倒进去。

记得在倒的时候要小心，别洒得到处都是，清理起来可麻烦了。

装好后，咱们得把瓶子放进高压锅里灭菌，给微生物们一个“无菌”的环境，别让那些“不速之客”来捣乱。

高压锅就像个勇士，能把那些细菌“打得稀巴烂”，让我们的琼脂更加安全。

一旦高压锅工作完成，瓶子也凉透了，这时就可以开始培育咱们的小微生物们了。

可以把一些样本，比如土壤、食物或者水，涂抹在琼脂表面。

想象一下，咱们的微生物就像小朋友一样，兴高采烈地在“游乐场”里玩耍，生机勃勃。

放进温暖的培养箱，耐心等待，心里简直乐开了花。

几天后，打开培养箱，那一片片的小菌落就像星星一样闪闪发光，真的让人想大喊一声“太棒了”！这整个过程就像在做一道美味的料理，从准备食材到上菜，真的充满了期待。

做实验就是这么有趣，让人不自觉地爱上这门科学。

别忘了记录观察结果，数据可是咱们成功的“金钥匙”，它会告诉我们微生物们在琼脂上的表现如何。

为了微生物们的未来，加油吧！。