常用染色液配方
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实验室常用染色液和试剂配方染色液和试剂在实验室中被广泛使用,用于各种科学研究和实验。
它们可以用来染色细胞、分析化合物和反应产物、诊断疾病等。
下面是一些常用的染色液和试剂配方。
1. Hematoxylin-Eosin染色液:Hematoxylin-Eosin(HE)染色液是一种经典的组织染色方法,常用于病理学研究和诊断。
配方如下:- Hematoxylin染色液:将5 g hematoxylin溶解在100 mL乙醇中,加入2 mL盐酸和900 mL蒸馏水,最后调节pH值为5-6-酸性酒红染液:将0.5g酸性酒红溶解在100mL乙醇中。
- Eosin染色液:将0.5 g eosin溶解在100 mL乙醇中。
2. Giemsa染色液:Giemsa染色液用于染色细胞,特别是白细胞,常用于血液学和微生物学研究。
配方如下:- Giemsa染色液:将4 g Giemsa粉末溶解在1 L蒸馏水中。
可以加入2 mL甲醇增强染色效果。
3.厌氧培养试剂:用于厌氧条件下培养微生物的试剂。
配方如下:- Thioglycollate培养基:将11.5 g thioglycollate溶解在1 L蒸馏水中,加热至溶解。
- Dithiothreitol(DTT)溶液:将1 g DTT溶解在100 mL蒸馏水中,用10 mL离心管分装,-20℃保存。
4. Bradford试剂:用于蛋白质的浓度测定,常用于生物化学和分子生物学实验。
配方如下:- Coomassie Brilliant Blue G-250:将100 mg染料溶解在50 mL浓硫酸中,加热至溶解。
再用1 L蒸馏水稀释至30%浓度。
5. Gill's胶片显影试剂:用于胶片的显影,常用于分子生物学实验。
配方如下:-显影溶液A:将1.5g氯化钴和1g柠檬酸溶解在200mL蒸馏水中,用0.1MNaOH调节pH值至6.4-6.8-显影溶液B:将3g溴化钾和1g柠檬酸溶解在200mL蒸馏水中,用0.1MNaOH调节pH值至6.4-6.86.RIPA裂解缓冲液:用于细胞或组织的裂解,提取蛋白质或RNA,常用于生物化学和分子生物学实验。
常用染色液的配制1.染料饱和酒精溶液的配制配制染色液常先将染料配成可长期保存的饱和酒精溶液,用时再予以稀释配制。
配制饱和酒精溶液,应先用少量95%酒精先在研钵中徐徐研磨,使染料充分溶解,再按其溶解度加于95%酒精之中,贮存于棕色瓶中即可。
附表1 几种常用染料在95%酒精中的溶解度(26℃)染料名称美蓝结晶紫龙胆紫碱性复红沙黄溶100mL95%酒精中的重量(g) 1.4813.8710.003.203.412.常用染色液的配制(1)碱性美蓝(亦称骆氏美蓝)染色液:取美蓝饱和酒精溶液30ml,加入0.01%氢氧化钾水溶液l00mL,混合即成。
此染色液在密闭条件下可保存多年。
若将其在瓶中贮至半满,松塞棉塞,每日拔塞摇振数分钟,并不时加水补充失去的水分,约1年后可获得多色性,成为多色美蓝染色液。
(2)草酸铵结晶紫(亦称赫克结晶紫)染色液:取结晶紫饱和酒精溶液2mL,加蒸馏水18mL稀释10倍,再加入1%草酸铵水溶液80mL,混合过滤即成。
(3)革兰氏碘溶液:将碘化钾2g置乳钵中,加蒸馏水约5mL。
再加入碘片1g,予以研磨,并徐徐加水,至完全溶解后,注入瓶中,被加蒸馏水至全量为300mL即成。
此液可保存半年以上,当产生沉淀或褪色后即不能再用。
(4)沙黄水溶液:沙黄也称番红花红。
将沙黄饱和酒精溶液以蒸馏水稀释10倍即成。
此液保存期以不超过4个月为宜。
(5)石炭酸复红染色液:取3%复红酒精溶液10mL,加入5%石炭酸水溶液90mL混和过滤即成。
(6)稀释石炭酸复红染色液:将石炭酸复红染色液以蒸馏水稀释10倍即成。
(7)3%盐酸酒精(亦称含酸酒精):加浓盐酸3mL于95%酒精97mL中即成。
(8)瑞士染色色液:取瑞氏染料0.1g置乳钵中,徐徐加入甲醇,研磨以促其溶解。
将溶液倾入有色中性玻瓶中,并数次以甲醇洗涤乳钵,亦倾入瓶内,最后使全量为60mL即可。
将此瓶置暗处过夜,次日滤过即成。
此染色液须置于暗处,其保存期约为数月。
实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾 2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red)2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
常用染色液配方范文
染色液是一种常见的化学染料,用于染色纺织品、皮革、木材等材料。
下面是一些常用的染色液配方,供参考:
1.酸性染色液配方:
-甲醛:5%(染色前处理)
-醋酸:2%(酸洗、pH调节)
-染料:1-3%(根据颜色需求)
-辅料:盐酸、硫酸、硫酸铵等(根据具体工艺条件)
2.碱性染色液配方:
-乙醇胺:5-10%(碱性调节)
-染料:1-3%(根据颜色需求)
-辅料:碱性添加剂(根据具体工艺条件)
3.偶氮染料染色液配方:
-偶氮染料:0.5-2%(根据颜色需求)
-萃取剂:1-5%(用于溶解染料)
-辅料:乙醇、盐酸、润湿剂等(根据具体工艺条件)
4.基于金属盐的染色液配方:
-金属盐:如铜盐、铁盐、铅盐等
-酸洗剂:如盐酸、硝酸等
-辅料:酸性调节剂、沉淀剂等(根据具体工艺条件)
5.响应性染料染色液配方:
-响应性染料:根据所使用的响应性染料种类和需求量决定
-辅料:如还原剂、氧化剂等(根据具体工艺条件)
注意事项:
-在配制染色液时,选择合适的溶剂和添加剂,确保染料能够均匀分
散在溶液中,达到较好的染色效果。
-不同类型的染料有不同的适应pH范围,因此在选择配方时需要考虑
染料的酸碱性。
-染色液的具体配方需根据不同的染色物料和工艺要求进行调整。
这些仅是一些常见的染色液配方,实际应用中还需要根据具体的染料、染色物料和工艺要求进行调整和优化。
最佳的染色液配方应该结合实验室
试验和生产实际,以确保染色效果的质量和稳定性。
常用染色剂的配方常用染色剂的配方(一)天然染料1、苏木精(Hematoxylin)苏木精是从南美的苏木(Haematoxylon campechianum)干枝中用乙醚浸制出来的一种色素,是最常用的染料之一。
苏木精不能直接染色,必须暴露在通气的地方,使他变成氧化苏木精(又叫苏木素)后才能使用,这叫做“成熟”。
苏木精的“成熟”过程需时较长,配置后时间愈久,染色力愈强。
被染材料必须经金属盐作媒剂作用后才有着色力。
所以在配制苏木精染剂时都要用媒染剂。
常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和铁明矾等。
苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体,易溶于酒精,微溶于水和甘油,是染细胞核的优良材料,他能把细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色。
分化时组织所染的颜色因处理的情况而异,用酸性溶液(如盐酸—酒精)分化后呈红色,水洗后仍恢复青蓝色,用碱性溶液(如氨水)分化后呈蓝色,水洗后呈蓝黑色。
2、洋红(Carmine)洋红又叫胭脂红或卡红。
一种热带产的雌性胭脂虫干燥后,磨成粉末,提取出胭脂红,再用明矾处理,除去其中杂质,就制成洋红。
单纯的洋红不能染色,要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。
常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸,碱性溶液有氨水、硼砂等。
洋红使细胞核的优良染料,染色的标本不易褪色。
用作切片或组织块染都适宜,尤其适宜于小型材料的整体染色。
用洋红配成的溶液染色后能保持几年。
洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。
3、靛蓝洋红(Indigo carmine)是由木蓝(Indigofera)提出的靛蓝(Indigo)加上亚硫酸钠而成。
为蓝色酸性染料,作为细胞质的染色剂。
常与苦味酸合成苦味酸靛蓝洋红(picro-indigo-carmine),呈绿色,可与碱性品红作对比染色。
4、地衣红(Orcein)是由地衣(Lecanora parella)中取得的染料,可在酸性或碱性溶液中染色。
植物细胞学中应用较多,尤其对于某些植物的染色体染色,效果比醋酸洋红更好。
常用染色剂的配方染色剂是一种常用的化学品,被广泛应用于织物、纸张、食品、化妆品等行业。
以下是几种常用染色剂的配方。
一、天然染料的配方1.蓝靛天然蓝靛是一种蓝色染料,其配方通常为:-鲜蓝靛叶子500克-冷水6升-无氯盐80克将鲜蓝靛叶子和冷水混合,搅拌均匀后静置24小时。
然后将混合物滤过,保留液体部分。
最后将盛有无氯盐的水加入,即可制得蓝靛染料。
2.茜草红茜草红是一种红色染料,其配方通常为:-干茜草根300克-水2升将干茜草根和水一起煮沸,然后降至低火煮沸2个小时。
最后将茜草根滤去,保留液体部分,即可制得茜草红染料。
二、合成染料的配方1.偶氮黄偶氮黄是一种黄色合成染料,其配方为:-对氨基苯磺酸20克-水合硫酸铜10克-硫酸10克-水1升将对氨基苯磺酸、水合硫酸铜和硫酸放入烧杯中搅拌溶解,并逐渐加入水,搅拌均匀。
然后用稀盐酸调整pH值到4-5,最后将溶液经过过滤、浓缩、结晶得到偶氮黄染料。
2.酸性红酸性红是一种红色合成染料,其配方为:-2-硝基氨基苯25克-氯硫酸50克将2-硝基氨基苯和氯硫酸混合,加入足够的水,并搅拌均匀。
然后用二氧化硫气体进行还原反应,最后通过结晶或浓缩得到酸性红染料。
三、直接染料的配方1.亚麻蓝亚麻蓝是一种蓝色直接染料,其配方为:-亚麻蓝素50克-碳酸钠50克-氨5克-水1升将亚麻蓝素和碳酸钠溶解于水中,加入适量的氨调整pH值。
然后用过滤滤去杂质,并将其浓缩至一定浓度,即可得到亚麻蓝染料。
2.尼尔黄尼尔黄是一种黄色直接染料-尼尔黄50克-碳酸钠50克-氨5克-水1升将尼尔黄和碳酸钠溶解于水中,加入适量的氨调整pH值。
然后用过滤滤去杂质,并将其浓缩至一定浓度,即可得到尼尔黄染料。
以上是几种常用染色剂的配方,染色剂的配方根据具体染色剂的特性和用途可能会有所不同。
在使用染色剂的过程中,需要注意采取适当的防护措施,避免对人体和环境造成伤害。
实验室常用染色液配方1. Giemsa染色液配方:- Giemsa染色液用于染色细胞核和染色体,常用于血液细胞计数、病原体观察等实验。
- 配方:Giemsa染色液的配方一般会根据不同的实验需求进行调整,但基本原料一般包括甲基蓝、伊苏琉斯蓝G、亚甲基蓝、酒精、非紫外吸收的甘油、磷酸盐缓冲液等。
2.范式染色液配方:-范式染色液常用于细胞和组织的常规染色,如荧光染色、光学显微镜下的染色观察等。
-配方:范式染色液的主要成分包括染料、溶剂、pH缓冲溶液、增稠剂等。
常用的染料有荧光素、伊红、伊博蓝等;常用的溶剂有酒精、乙醚、显微镜油等;常用的增稠剂有明胶粉、琼脂等。
3.原位杂交染色液配方:-原位杂交染色液主要用于检测细胞和组织中的特定核酸序列,常用于分子生物学研究、基因定位等实验。
- 配方:原位杂交染色液的配方会根据实验的具体目的进行调整,但一般包括核酸探针、碱性缓冲液、蛋白酶K、DNase I等。
4.细胞活力染色液配方:-细胞活力染色液用于评估细胞的活力和生理状态,常用于细胞培养实验、细胞毒性测试等。
- 配方:细胞活力染色液的配方一般包括活细胞染料、死细胞染料、背景抑制剂等。
常用的活细胞染料有乙酰红、卤化丙啶(Propidium Iodide,PI)等;常用的死细胞染料有丙酮溴化物(7-AAD)、EthD-1等;常用的背景抑制剂有苯甲缩醛(Sodium Azide,NaN3)等。
以上是实验室常用染色液的一些基本配方和介绍,实验者在进行实验前需要根据具体实验目的和需求进行配方选择和调整。
同时,注意染色液的稳定性、pH值的控制、操作的规范等因素也是成功进行染色实验的关键。
实验室常用染色液和试剂配方【很全】实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
常用染色液的配方染色液是一种被广泛使用的化学品,用于改变物体表面的颜色,并且根据不同的需要,可以根据用户的要求来制定配方。
下面是常用染色液的配方的一些例子。
1.织物染色液配方:-水:1000毫升-盐:20克-特种染料:根据需要添加适量将水加热至75°C,然后将盐加入水中,搅拌至溶解。
待水温降至60°C时,将特种染料加入溶液中,搅拌均匀。
将织物放入染色液中,注意保持温度和时间,完成染色后,用清水冲洗织物。
2.金属染色液配方:-硫酸铜:50克-硝酸钠:50克-硝酸铜:50克-水:500毫升将硫酸铜、硝酸钠和硝酸铜加入水中,搅拌均匀。
将金属材料浸入染色液中,保持一定的温度和时间,然后将金属材料取出,用清水冲洗,再进行上光处理。
3.木质染色液配方:-水:1000毫升-染料:根据需要添加适量-氨水:5毫升(用于调整pH值)将水加热至50°C,然后将染料加入水中,搅拌均匀。
根据需要添加适量的氨水来调整pH值,以获得所需的染色效果。
将木质材料放入染色液中,保持温度和时间,然后用清水冲洗,再进行涂漆或上蜡处理。
4.皮革染色液配方:-水:300毫升-醋酸铬:10克-硫酸铜:10克-盐酸:5毫升-助剂:根据需要添加适量将水加热至60°C,然后将醋酸铬和硫酸铜加入水中,搅拌均匀。
将盐酸稀释后加入溶液中,调整pH值。
根据需要添加适量的助剂,例如增溶剂或抗皱剂。
将皮革材料浸泡在染色液中,并保持所需的温度和时间,然后用清水冲洗。
需要注意的是,染色液的配方可以根据不同的材料和染色要求进行调整。
这只是一些常用的配方示例,具体的配方应根据实际情况来定制。
在使用染色液时,应注意安全操作,避免接触皮肤和眼睛,并在通风良好的地方使用。
常用染色液的配方染色液是一种用于给纤维或织物上色的溶液,可以通过调整其成分的配比来获得不同颜色的染色效果。
以下是一些常见的染色液配方,涵盖了不同颜色和纤维材料的染色需求。
1.无酶法染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量-草酸:10g-盐:60g-分散剂:适量2.酶法染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量-酶解剂:2g-分散剂:适量3.酸性染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量- 醋酸:20ml-分散剂:适量4.乳液染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量-乳化剂:适量- 硫酸:10ml-盐:60g-分散剂:适量5.染料固定剂染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量-染料固定剂:根据需要调整用量-盐:60g-分散剂:适量6.阴离子染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量-还原剂:适量-分散剂:适量7.阳离子染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量-盐:60g-分散剂:适量上述配方仅为一般参考,实际配方可能会因具体染色要求和纤维类型的不同而有所调整。
在进行染色之前,应根据纤维类型、染料选择和染色效果的要求进行配方调整。
此外,注意遵循相关安全操作和环保要求,以确保染色过程的安全和可持续性。
在实际染色过程中,可以根据需要使用其他添加剂来调整染色液的性能,如增稠剂、酸碱调节剂、湿润剂等。
此外,注意控制染色液的pH值、温度和时间等参数,以获得理想的染色效果。
总之,染色液的配方是根据具体需求和材料类型来确定的,在实际应用中需要充分考虑材料特性和染色效果,并注意安全环保要求。
配方一:染色液:单蒸水670ml,乙醇250ml,考马斯亮蓝R-250 2.5g,搅拌溶解后加冰醋酸80ml,过滤。
配方二:染色液:去离子水500ml,乙醇400ml,醋酸100ml。
0.1%考马斯亮蓝R250。
多加一些也可。
最好在摇床上摇摇,多溶解些,然后滤纸过滤。
染色液:染色液不加考马斯亮蓝。
复旦实验室配方:染色液的制备:甲醇500 ml,冰醋酸100 ml,考马斯亮蓝R-250 2.5 g,添加去离子水定容至1000ml,充分溶解混匀后过滤备用。
脱色液的制备:甲醇500 ml,冰醋酸100 ml,添加去离子水定容至1000ml。
配方三:染色液:1g考兰(R-250),300ml乙醇,100乙酸,纯水定容至1000ml.搅拌过夜,再过滤
脱色液:500ml乙醇,100ml乙酸,纯水定容至1000ml
5×SDS-PAGE电泳缓冲液的配制:Tris 取15.1g,Glysine取94g,SDS取5.0g加入约900ml去离子水充分搅拌至溶解,最后定容至1000ml,室温下保存。
常用染色液的配制一、骆氏美蓝染色液(碱性美蓝染色液)甲液:美蓝0.3克,95%酒精30ML乙液:0.01%氢氧化钾溶液100ML甲、乙混合即可,密闭保存,一年后可获多色性。
二、革兰氏染色液1、草酸铵结晶紫染液甲液:结晶紫2G,95%酒精20ML,或结晶紫饱和酒精溶液2ML加蒸馏水18ML。
乙液:草酸铵0.8克,蒸馏水80ML。
甲、乙混合,静置48小时,过滤后备用,可较久贮存。
2、革兰氏碘溶液碘片1G,碘化钾2G,蒸馏水300ML碘化钾+3-5ML蒸馏水,溶解后+碘片,摇匀后+蒸馏水至足量。
3、95%酒精,用作脱色剂4、碱性复红染色液碱性复红(一品红)0.1G,蒸馏水100ML可用沙黄水溶液或稀释石炭酸复红液代替此液。
沙黄水溶液:沙黄饱和酒精溶液+10倍蒸馏水,保存期小于4个月。
稀释石炭酸复红染色液:石炭酸复红液10ML+蒸馏水90ML三、抗酸染色液1、石炭酸复红染色液3%碱性复红酒精溶液10ML+5%石炭酸水溶液90ML,过滤即可。
2、盐酸酒精液浓盐酸3ML+95%酒精97ML四、克利特氏荚膜染色液1、美蓝溶液:美蓝1G+96%酒精10ML+100ML蒸馏水2、碱性红溶液:碱性复红0.03G+1ML96%酒精+99ML蒸馏水五、瑞特氏染色液1、0.1G瑞特氏染粉研磨,再加中性甘油3ML,充分研磨,后徐徐加入甲醇液60ML,边研边搅,存于棕色瓶中过夜,过滤后贮于棕色瓶中,越久越好。
2、磷酸盐缓冲液甲液:磷酸氢二钠23.86G,1000ML蒸馏水。
乙液:磷酸二氢钾9.07G,1000ML蒸馏水。
4份甲液+1份乙液即可。
常用染色液的配制1.番红水液番红0.1g溶入蒸馏水,定溶至100ml。
2. 番红酒液番红0.5g或1g溶入50%酒精,定溶至100ml3. 固绿染液固绿0.1g溶入95%酒精,定溶至100ml。
4. 碘-碘化钾染液碘化钾溶入100ml蒸馏水,再加入1g碘,溶解后即可使用。
5. 苏丹Ⅲ(或Ⅳ)染液将0.1g苏丹Ⅲ或Ⅳ溶解在50ml丙酮中,再加入70%酒精50ml。
6.改良苯酚品红染液原液A:将3g碱性品红溶入100ml 70%酒精,此液可长期保存。
原液B:将10mlA液加入到90ml 5%苯酚水溶液中。
原液C:将55mlB液加入到6ml的冰醋酸和6ml的38%的甲醛中。
染色液:取C液20ml,加45%冰醋酸80ml,充分混匀,再加入1g山梨醇,放置14天后使用,可保存3年。
7. 间苯三酚染液将5g间苯三酚溶入100ml 95%酒精(若溶液呈黄色,即为失效)。
8. 中性红染液将0.1g中性红溶入100ml蒸馏水,用时稀释10倍。
9. 钌红染液将5~10mg钌红溶入25~50ml蒸馏水,现用现配。
10.龙胆紫染液将0.2g龙胆紫溶入100ml蒸馏水。
现常用结晶紫代替。
必要时可将医用紫药水稀释5倍后代用。
11.铁醋酸洋红染液先将100ml 45%醋酸水溶液置入200ml的锥形瓶中煮沸,移去火苗,然后慢慢地分多次加入1g 洋红粉末(切记不可一次倒入)。
待全部倒入后,再煮沸1~2min,并悬入一生锈的小铁钉于染液中,过1min后取出,使染色剂略含铁质,以增加染色性能。
静置12h后过滤于棕色瓶中备用(置于避光处)。
12.苏木精染液苏木精的配方很多,常用的有如下3种:配方Ⅰ:苏木精水溶液0.5g苏木精溶入100ml煮沸的蒸馏水中,静置24h后可使用。
配方Ⅱ:代氏苏木精(De larfield’s haematoxylin)甲液:苏木精1g + 无水酒精6ml乙液:硫酸铝铵(铵矾)10g + 蒸馏水100ml丙液:甘油25ml + 甲醇25ml分别配制甲、乙两液,将甲液一滴滴地加入乙液中,充分搅拌后,放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口,置于温暖和光线充足处7~10天,再加入丙液,混匀后静置1~2月,至颜色变为深紫色后,过滤备用,可长期保存。
实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
11动物组织石蜡切片染色方法苏木精-伊红(HE)染色:二甲苯Ⅰ, Ⅱ各10 min,依次进入无水乙醇、950 mL/L, 900 mL/L, 800 mL/L及700 mL/L的酒精各5 min,蒸馏水洗;入苏木精染液10 min,盐酸酒精分色4 s,自来水洗10 min;依次入700 mL/L, 800 mL/L及900 mL/L酒精各5 min,入伊红染液染色10 min;入950 mL/L及无水乙醇Ⅰ, Ⅱ各5 min, 以二甲苯透明,中性树脂封片.一、常用染色液的配制⒈碘-碘化钾(I2-KI)溶液能将淀粉染成蓝紫色,蛋白质染成黄色,也是植物组织化学测定的重要试剂。
配方:碘化钾2g ;蒸馏水300ml ;碘1g先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,待全溶解后再加碘,振荡溶解后稀释至300mL,保存在棕色玻璃瓶内。
用时可将其稀释2-10倍,这样染色不致过深,效果更佳。
⒉苏丹Ⅲ(sudanⅢ或Ⅳ)能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色,是著名的脂肪染色剂。
配方:(1)苏丹III或苏丹Ⅳ干粉0.1g ;95%酒精10ml ;过滤后再加入10ml甘油(2)先将0.1g苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中,再加入70%酒精50ml。
(3)苏丹III 70%乙醇的饱和溶液。
⒊1%醋酸洋红(aceto carmine)酸性染料,适用于压碎涂抹制片,能使染色体染成深红色,细胞质成浅红色。
配方:洋红1g ;45%醋酸100ml煮沸2h左右,并随时注意补充加入蒸馏水到原含量,然后冷却过滤,加入4%铁明矾溶液1~2滴(不能多加,否则会发生沉淀),放入棕色瓶中备用。
⒋改良苯芬品红染色液(Carbol fuchsine)核染色剂。
配制步骤:先配成三种原液,再配成染色液。
原液A:3g碱性品红溶于100ml 70%酒精中。
原液B:取原液A10ml加入到90ml 5%石炭酸水溶液中。
原液C:取原液B 55ml,加入6ml冰醋酸和6ml福尔马林(38%的甲醛)。
(原液A和原液C可长期保存,原液B限两周内使用)染色液:取C液10~20ml,加45%冰醋酸80~90ml,再加山梨醇1~1.8g,配成10%~20%浓度的石炭酸品红液,放置两周后使用,效果显著(若立即用,则着色能力差)。
适用范围:适用于植物组织压片法和涂片法,染色体着色深,保存性好,使用2~3年不变质。
山梨醇为助渗剂,兼有稳定染色液的作用,假如没有山梨醇也能染色,但效果较差。
[/sell] ⒌中性红(neutral red)溶液用于染细胞中的液泡,可鉴定细胞死活。
配方:中性红0.1g ;蒸馏水100ml使用时再稀释10倍左右。
⒍曙红Y(伊红,eosin Y)酒精溶液常与苏木精对染,能使细胞质染成浅红色,起衬染作用。
配方:曙红0.25g ;95%酒清100ml也常用于95%酒精脱水时,加入少量曙红溶液,其目的是在包埋、切片、展片、镜检时便于识别材料。
⒎钌红(ruthenium red)染液钌红是细胞胞间层专性染料,其配后不易保存,应现用现配。
配方:钌红5~10mg ;蒸馏水25-50ml⒏龙胆紫(gentian violet)为酸性染料,适用于细菌涂抹制片。
配方:龙胆紫0.2~1 g ;蒸馏水100ml⒐苯胺兰(aniline blue)溶液为酸性染料,对纤维素细胞壁、非染色质的结构、鞭毛等,尤其是染丝状藻类效果好。
还多用于与真曙红作双重染色,对于高等植物多用于与番红作双重染色。
配方:苯胺兰1 g ;35%或95%酒精100ml⒑间苯三酚(phloroglucin)溶液用于测定木质素。
配方:间苯三酚5g ;95%酒精100ml注:此溶液呈黄褐色即失效。
⒒橘红G(orange G)酒精溶液为酸性染料,染细胞质,常作二重或三重染色用。
配方:橘红G 1g ;95%酒精100ml⒓番红(safranin O)为碱性染料,适用于染木化、角化、栓化的细胞壁,对细胞核中染色质、染色体和花粉外壁等都可染成鲜艳的红色。
并能与固绿、苯胺兰等作双重染色,与橘红G、结晶紫作三重染色。
配方:(1)番红水溶液番红0.1或1 g ;蒸馏水100ml(2)番红酒精溶液番红0.5或1 g ;50%(或95%)酒精100ml(3)苯胺番红酒精染色液甲液番红5 g +95%酒精50ml乙液苯胺油20ml +蒸馏水450ml将甲、乙二溶液混合后充分摇均匀,过滤后使用。
⒔固绿(fast green)又称快绿溶液。
为酸性染料,能将细胞质,纤维素细胞壁染成鲜艳绿色,着色很快,故要很好的掌握着色时间。
配方:(1)固绿酒精液固绿0.1 g ;95%酒精100ml(2)苯胺固绿酒精液固绿 1 g ;无水酒精100ml ;苯胺油4ml配后充分摇匀,过滤后使用。
现配现用效果好。
⒕苏木精(hematoxylin)染液苏木精是植物组织制片中应用最广的染料,是苏木科植物苏木的心材提取出来的。
它是很强的细胞核染料,而且可以分化出不同颜色。
配方很多,现举海登汉氏(Heidenhain's)苏木精染色液,又称铁矾苏木精染色液。
配方:甲液(媒染剂):硫酸铁铵(铁明矾)2-4g ;蒸馏水100ml(必须保持新鲜,最好临用之前配制)乙液(染色剂):苏木精0.5-1g ;95%酒精10ml;蒸馏水90ml配制步骤:(1)将苏木精溶于酒精中,瓶口用双层纱布包扎,使其充分氧化(通常在室内放置两个月后方可使用)。
(2)加入蒸馏水,塞紧瓶口,置冰箱中可长期保存。
切片需先经甲液媒染,并充分水洗后才能以乙液染色,染色后经水稍洗再用另一瓶甲液分色至适度。
铁矾苏木精染液为细胞学上染细胞核内染色质最好的染色剂,但要注意甲液与乙液在任何情况下决不能混合。
⒖亚甲基蓝染液常用于细菌、活体细胞等的染色。
取0.1g亚甲基蓝,溶于100ml蒸馏水中即成。
⒗詹纳斯绿B(Janus green B)染液将5.18gJanus 绿溶于100ml蒸馏水,配成饱和水溶液。
用时需稀释。
稀释的倍数应视材料不同而异。
⒘硫堇染液取0.25克硫堇(也称劳氏青莲或劳氏紫)粉末,溶于100ml蒸馏水中,即可使用。
使用此液时,需要用微碱性自来水封片或用1%NaHCO3水溶液封片,能成多色反应。
18.黑色素液水溶性黑素10g,蒸馏水100mL,甲醛(福尔马林)0.5mL。
可用作荚膜的背景染色。
19.墨汁染色液国产绘图墨汁40mL,甘油2mL,液体石炭酸2mL。
先将墨汁用多层纱布过滤,加甘油混匀后,水浴加热,再加石炭酸搅匀,冷却后备用。
用作荚膜的背景染色。
20.吕氏(Loeffier)美蓝染色液A液:美蓝(methylene blue,又名甲烯蓝)0.3g,95%乙醇30mL;B液:0.01%KOH100mL。
混合A液和B液即成,用于细菌单染色,可长期保存。
根据需要可配制成稀释美蓝液,按1∶10或1∶100稀释均可。
21.革兰氏染色液(1)结晶紫(cristal violet)液:结晶紫乙醇饱和液(结晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL,1%草酸铵水溶液80mL。
将两液混匀置24h后过滤即成。
此液不易保存,如有沉淀出现,需重新配制。
(2)芦戈(Lugol)氏碘液:碘1g,KI 2g,蒸馏水300mL。
先将KI溶于少量蒸馏水中,然后加入碘使之完全溶解,再加蒸馏水至300mL,即成。
配成后贮于棕色瓶内备用,如变为浅黄色能使用。
(3)95%乙醇:用于脱色,脱色后可选用以下(4)或(5)的其中一项复染即可。
(4)稀释石炭酸复红溶液:碱性复红乙醇饱液(碱性复红1g,95%乙醇10mL,5%石炭酸90mL)10mL,加蒸馏水90mL。
(5)番红溶液:番红O(safranine O,又称沙黄O)2.5g,95%乙醇100mL,溶解后可贮存于密闭的棕色瓶中,用时取20mL与80mL蒸馏水混匀即可。
以上染色液配合使用,可区分出革兰氏染色阳性(G+ )或阴性(G- )细菌,前者蓝紫色,后者淡红色。
22.齐氏(Ziehl)石炭酸复红液:碱性复红0.3g溶于95%乙醇10mL中为A液;0.01%KOH溶液100mL为B液。
混合A、B液即成。
23.姬姆萨(Giemsa)染液(1)贮存液:称取姬姆萨粉0.5g,甘油33mL,甲醇33mL。
先将姬姆萨粉研细,再逐滴加入甘油,继续研磨,最后加入甲醇,在56℃放置1-24h后即可使用。
(2)应用液(临用时配制):取1mL贮存液加19mLpH7.4磷酸缓冲液即成。
也可以贮存液∶甲醇=1∶4的比例配制成染色液。
24. 1%瑞氏(Wright's)染色液称取瑞氏染色粉6g,放研钵内磨细,不断滴加甲醇(共600mL)并继续研磨使溶解。