常用染色液的配制
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病理制片技术——常用试剂及染液的配制一、Harris氏苏木精染色液的配制1.试剂准备:苏木精10 g,硫酸铝钾80 g,无水乙醇200 ml,蒸馏水2000 rnl,氧化汞3 g,冰乙酸40ml。
2.配制步骤(1)将2000 ml蒸馏水注入一只3000 的大号三角烧瓶内,加入80 g硫酸铝钾后置电炉或电磁炉上加热硫酸铝钾完全溶解。
(2)将200 ml无水乙醇注入一只300 ml的三角烧瓶内,加入10 g苏木精摇动使之完全溶解。
(3)将已完全溶解于无水乙醇的苏木色精液体缓缓注入已完全溶解的2000 ml硫酸铝钾液体中,继续加热至液体沸腾关闭电源。
此时液体应呈透明的玫瑰红色。
(4)将3 g氧化汞溶于20ml蒸馏水中搅匀后缓缓(一定要缓慢)方入未被氧化的苏木精液体中,边加氧化汞边搅拌。
此时苏木精被氧化,液体的颜色会迅速地变成深蓝紫色。
(5)氧化汞加完后用玻棒充分的搅拌液体并继续加热至液体再度沸腾关闭电源。
(6)用湿毛巾保护,将装有停止沸腾的热苏木精的三角烧瓶转移至冷水中迅速降温至室温。
(7)密封瓶口室温避光直射储存备用,临用前每100 ml苏木精液加入2~3 ml冰乙酸混匀。
二、伊红染色液的配制l. 试剂准备;伊红Y 20 g,蒸馏水1500 ml,95%乙醇500 ml,冰乙酸lml。
2.配制步骤(1)先将20 g伊红Y溶于500 m1蒸馏水中,用玻棒搅拌至其完全溶解后再加入1000 ml 蒸馏水并搅匀,液体呈深红色。
(2)加入500 ml 95%乙醇并搅匀,此时液体由深红色转变为荧光绿色。
(3)加入lml冰乙酸并搅匀,密封瓶口室温储存备用。
三、HE染色分化液的配制0.5%盐酸乙醇液:蒸馏水300 ml与95%乙醇700 ml混合后加入浓盐酸5 ml混匀。
四、HE染色返蓝液的配制0.5%氢氧化氨液:在1000毫拜蒸馏水中溶入5毫升浓氢氧化氨混匀。
实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
实验室常用染色液和试剂配方染色液和试剂在实验室中被广泛使用,用于各种科学研究和实验。
它们可以用来染色细胞、分析化合物和反应产物、诊断疾病等。
下面是一些常用的染色液和试剂配方。
1. Hematoxylin-Eosin染色液:Hematoxylin-Eosin(HE)染色液是一种经典的组织染色方法,常用于病理学研究和诊断。
配方如下:- Hematoxylin染色液:将5 g hematoxylin溶解在100 mL乙醇中,加入2 mL盐酸和900 mL蒸馏水,最后调节pH值为5-6-酸性酒红染液:将0.5g酸性酒红溶解在100mL乙醇中。
- Eosin染色液:将0.5 g eosin溶解在100 mL乙醇中。
2. Giemsa染色液:Giemsa染色液用于染色细胞,特别是白细胞,常用于血液学和微生物学研究。
配方如下:- Giemsa染色液:将4 g Giemsa粉末溶解在1 L蒸馏水中。
可以加入2 mL甲醇增强染色效果。
3.厌氧培养试剂:用于厌氧条件下培养微生物的试剂。
配方如下:- Thioglycollate培养基:将11.5 g thioglycollate溶解在1 L蒸馏水中,加热至溶解。
- Dithiothreitol(DTT)溶液:将1 g DTT溶解在100 mL蒸馏水中,用10 mL离心管分装,-20℃保存。
4. Bradford试剂:用于蛋白质的浓度测定,常用于生物化学和分子生物学实验。
配方如下:- Coomassie Brilliant Blue G-250:将100 mg染料溶解在50 mL浓硫酸中,加热至溶解。
再用1 L蒸馏水稀释至30%浓度。
5. Gill's胶片显影试剂:用于胶片的显影,常用于分子生物学实验。
配方如下:-显影溶液A:将1.5g氯化钴和1g柠檬酸溶解在200mL蒸馏水中,用0.1MNaOH调节pH值至6.4-6.8-显影溶液B:将3g溴化钾和1g柠檬酸溶解在200mL蒸馏水中,用0.1MNaOH调节pH值至6.4-6.86.RIPA裂解缓冲液:用于细胞或组织的裂解,提取蛋白质或RNA,常用于生物化学和分子生物学实验。
常用染色液的配制1.染料饱和酒精溶液的配制配制染色液常先将染料配成可长期保存的饱和酒精溶液,用时再予以稀释配制。
配制饱和酒精溶液,应先用少量95%酒精先在研钵中徐徐研磨,使染料充分溶解,再按其溶解度加于95%酒精之中,贮存于棕色瓶中即可。
附表1 几种常用染料在95%酒精中的溶解度(26℃)染料名称美蓝结晶紫龙胆紫碱性复红沙黄溶100mL95%酒精中的重量(g) 1.4813.8710.003.203.412.常用染色液的配制(1)碱性美蓝(亦称骆氏美蓝)染色液:取美蓝饱和酒精溶液30ml,加入0.01%氢氧化钾水溶液l00mL,混合即成。
此染色液在密闭条件下可保存多年。
若将其在瓶中贮至半满,松塞棉塞,每日拔塞摇振数分钟,并不时加水补充失去的水分,约1年后可获得多色性,成为多色美蓝染色液。
(2)草酸铵结晶紫(亦称赫克结晶紫)染色液:取结晶紫饱和酒精溶液2mL,加蒸馏水18mL稀释10倍,再加入1%草酸铵水溶液80mL,混合过滤即成。
(3)革兰氏碘溶液:将碘化钾2g置乳钵中,加蒸馏水约5mL。
再加入碘片1g,予以研磨,并徐徐加水,至完全溶解后,注入瓶中,被加蒸馏水至全量为300mL即成。
此液可保存半年以上,当产生沉淀或褪色后即不能再用。
(4)沙黄水溶液:沙黄也称番红花红。
将沙黄饱和酒精溶液以蒸馏水稀释10倍即成。
此液保存期以不超过4个月为宜。
(5)石炭酸复红染色液:取3%复红酒精溶液10mL,加入5%石炭酸水溶液90mL混和过滤即成。
(6)稀释石炭酸复红染色液:将石炭酸复红染色液以蒸馏水稀释10倍即成。
(7)3%盐酸酒精(亦称含酸酒精):加浓盐酸3mL于95%酒精97mL中即成。
(8)瑞士染色色液:取瑞氏染料0.1g置乳钵中,徐徐加入甲醇,研磨以促其溶解。
将溶液倾入有色中性玻瓶中,并数次以甲醇洗涤乳钵,亦倾入瓶内,最后使全量为60mL即可。
将此瓶置暗处过夜,次日滤过即成。
此染色液须置于暗处,其保存期约为数月。
常用染色液配制The Standardization Office was revised on the afternoon of December 13, 20201.草酸铵结晶紫染色液A液:结晶紫,95%乙醇25mL。
B液:草酸铵,蒸馏水1000mL。
制备时,将结晶紫研细,加入95%乙醇溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合静止48h后,过滤后使用。
2.鲁格尔氏(路戈氏)碘液碘,,蒸馏水300mL。
先用3~5mL蒸馏水溶解KI,再加入碘片,稍加热溶解,加足水过滤后使用。
3.脱色液:95%乙醇;或丙酮乙醇溶液:95%乙醇70mL,丙酮30mL4.沙黄(番红)染色液%沙黄(番红)乙醇溶液:沙黄(番红),95%乙醇100mL。
此母液存放于不透气的棕色瓶中,使用时取20mL母液加80mL蒸馏水使用。
5.%美兰染色液溶解于100mL蒸馏水中。
6.吕氏碱性美蓝色染色液A液:美蓝,95%乙醇30mL。
B液:,蒸馏水100mL,分别配制A液和B液,混合即可。
7.瑞氏染色液瑞氏染料粉未,甘油3mL,甲醇97mL。
将染料放乳钵内研磨,先加甘油,后加甲醇,过夜后过滤即可。
8.5%孔雀绿水溶液(芽孢染色用)孔雀绿,蒸馏水100mL。
先将孔雀绿放乳钵内研磨,加少许95%乙醇溶解,再加蒸馏水。
9.黑色素水溶液(荚膜负染色用)黑色素10g,蒸馏水100mL,40%甲醛(福尔马林)。
将黑色素溶于蒸馏水中,煮沸5min,再加福尔马林作防腐剂,用玻璃棉过滤。
10.硝酸银鞭毛染色液A液:单宁酸,,福尔马林(15%),1%,蒸馏水100mL。
B液:,蒸馏水100mL。
将AgNO3溶解后,取出10mL备用,向其它的90mL硝酸银液中加浓氢氧化铵,则形成很厚的沉淀,再继续滴加氢氧化铵到刚刚溶解沉淀成为澄清溶液为之。
再将备用的硝酸银慢慢滴入,则出现薄雾,但轻轻摇动后,薄雾状的沉淀又消失,再滴入硝酸银,直到摇动后,仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为之。
一、埃利希(EhrIiCh)氏苏木精染液先将苏木精2g溶于IOOm1乙醇中,再加冰醋酸IOm1,混合后加蒸储水IOOm1和IOOm1甘油,然后加硫酸铝钾(约Iog)至饱和,搅拌均匀,倒入瓶中。
将瓶口用1层纱布包着小块棉花塞上,放在暗处通风的地方,并经常摇动促进“成熟”,直到液体颜色变为深红色为止。
成熟时间约2-4周。
若加0.4g碘酸钠可加快成熟。
二、吉姆萨(GiemSa)氏母液将吉姆萨粉末Ig先溶于少量甘油,在研钵内研磨30min以上,至看不见颗粒为止,再将全部(66m1)剩余甘油倒入,于56℃温箱内保温2h。
然后再加入甲醇(66m1),搅匀后保存于棕色瓶中。
母液配制后放入冰箱可长期保存,一般刚配制的母液染色效果欠佳,保存时间越长越好。
临用时用PH6.8的磷酸盐缓冲液稀释10倍。
三、瑞(Wright)氏染液称取瑞氏染料粉末OJg于研钵内研细后,加入少量甲醇再反复研磨,最后将全部甲醇(总共60m1)加入研匀,染料全部溶解后,将染液保存于棕色瓶内备用。
四、醋酸洋红染液将洋红粉末Ig倒入IOOm145%醋酸溶液中,边煮边搅拌,煮沸(沸腾时间不超过30s),冷却后过滤,即可使用。
也可再加入1%~2%铁明矶水溶液5-10滴,至此液变为暗红色而不发生沉淀为止。
如制作永久标本染色时,可加入饱和氢氧化铁或醋酸铁(媒染剂)溶液数滴,至染色液呈浅蓝色为止。
五、硫堇染液(工作液)①干液(硫堇):硫堇Ig或2g溶于Ioom150%乙醇中,溶解后过滤备用;②醋酸钠缓冲液:醋酸钠∙3H2O9.7g,巴比妥钠14.7g,溶于50Om1蒸储水中;③0.1mo1/1盐酸;按①:②:③=40:28:32比例配成混合液,调pH5.7±0.2,即得硫堇工作液。
六、0.02%盾纳斯绿B(JanusGreenB)用0.9%生理盐水溶液配制。
七、甲基绿一派洛宁染液(Unna试剂)派洛宁0.25g,甲基绿0.15g,95%乙醇20m1,甘油20m1。
一、常用染色液的配制⒈碘—碘化钾(I2-KI)溶液能将淀粉染成蓝紫色,蛋白质染成黄色,也是植物组织化学测定的重要试剂.配方:碘化钾2g ;蒸馏水300ml ;碘1g先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,待全溶解后再加碘,振荡溶解后稀释至300mL,保存在棕色玻璃瓶内.用时可将其稀释2—10倍,这样染色不致过深,效果更佳。
⒉苏丹Ⅲ(sudanⅢ或Ⅳ)能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色,是著名的脂肪染色剂。
配方:(1)苏丹III或苏丹Ⅳ干粉;95%酒精10ml ;过滤后再加入10ml甘油(2)先将苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中,再加入70%酒精50ml.(3)苏丹III 70%乙醇的饱和溶液.⒊1%醋酸洋红(aceto carmine)酸性染料,适用于压碎涂抹制片,能使染色体染成深红色,细胞质成浅红色。
配方:洋红1g ;45%醋酸100ml煮沸2h左右,并随时注意补充加入蒸馏水到原含量,然后冷却过滤,加入4%铁明矾溶液1~2滴(不能多加,否则会发生沉淀),放入棕色瓶中备用.⒋改良苯芬品红染色液(Carbol fuchsine) 核染色剂。
配制步骤:先配成三种原液,再配成染色液。
原液A:3g碱性品红溶于100ml 70%酒精中。
原液B:取原液A10ml加入到90ml 5%石炭酸水溶液中。
原液C:取原液B 55ml,加入6ml冰醋酸和6ml福尔马林(38%的甲醛).(原液A和原液C可长期保存,原液B限两周内使用)染色液:取C液10~20ml,加45%冰醋酸80~90ml,再加山梨醇1~,配成10%~20%浓度的石炭酸品红液,放置两周后使用,效果显著(若立即用,则着色能力差)。
适用范围:适用于植物组织压片法和涂片法,染色体着色深,保存性好,使用2~3年不变质。
山梨醇为助渗剂,兼有稳定染色液的作用,假如没有山梨醇也能染色,但效果较差。
⒌中性红(neutral red)溶液用于染细胞中的液泡,可鉴定细胞死活。
实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾 2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red)2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
1.草酸铵结晶紫染色液A液:结晶紫,95%乙醇25mL;B液:草酸铵,蒸馏水1000mL;制备时,将结晶紫研细,加入95%乙醇溶解,配成A液;将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液;两液混合静止48h后,过滤后使用;2.鲁格尔氏路戈氏碘液碘,,蒸馏水300mL;先用3~5mL蒸馏水溶解KI,再加入碘片,稍加热溶解,加足水过滤后使用;3.脱色液:95%乙醇;或丙酮乙醇溶液:95%乙醇70mL,丙酮30mL4.沙黄番红染色液%沙黄番红乙醇溶液:沙黄番红,95%乙醇100mL;此母液存放于不透气的棕色瓶中,使用时取20mL母液加80mL蒸馏水使用;5.%美兰染色液溶解于100mL蒸馏水中;6.吕氏碱性美蓝色染色液A液:美蓝,95%乙醇30mL;B液:,蒸馏水100mL,分别配制A液和B液,混合即可;7.瑞氏染色液瑞氏染料粉未,甘油3mL,甲醇97mL;将染料放乳钵内研磨,先加甘油,后加甲醇,过夜后过滤即可;8.5%孔雀绿水溶液芽孢染色用孔雀绿,蒸馏水100mL;先将孔雀绿放乳钵内研磨,加少许95%乙醇溶解,再加蒸馏水;9.黑色素水溶液荚膜负染色用黑色素10g,蒸馏水100mL,40%甲醛福尔马林;将黑色素溶于蒸馏水中,煮沸5min,再加福尔马林作防腐剂,用玻璃棉过滤;10.硝酸银鞭毛染色液A液:单宁酸,,福尔马林15%,1%,蒸馏水100mL;B液:,蒸馏水100mL;将AgNO3溶解后,取出10mL备用,向其它的90mL硝酸银液中加浓氢氧化铵,则形成很厚的沉淀,再继续滴加氢氧化铵到刚刚溶解沉淀成为澄清溶液为之;再将备用的硝酸银慢慢滴入,则出现薄雾,但轻轻摇动后,薄雾状的沉淀又消失,再滴入硝酸银,直到摇动后,仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为之;如雾重,则银盐沉淀出,不宜使用;11.改良利夫森Leifson’s鞭毛染色液A:20%单宁鞣酸;B:饱和钾明矾液20%;C:5%石炭酸;D:碱性复红酒精95%饱和液;将以上各液于染色前1~3d,按B加到A中,C加到A、B混合液中,D加到A、B、C混合液中的顺序,混合均匀,马上过滤15~20次,2~3d内使用效果较好;12.石炭酸复红染色液A液:碱性复红,95%乙醇10mL;B液:石炭酸苯酚5g,蒸馏水95mL;先将染料溶解于乙醇,将苯酚溶于水,AB两液混合即可;13.乳酸石炭酸棉蓝染色液石炭酸苯酚10g,乳酸比重10mL,甘油20mL,棉蓝苯胺蓝,蒸馏水10mL;将石炭酸加入蒸馏水中,加热溶解,再加入乳酸和甘油,最后加棉蓝;附录Ⅴ:常用缓冲液的配制1.磷酸盐缓冲液PBS20℃pH值~甲液:,蒸馏水1000mL;乙液:,蒸馏水1000mL;甲液二份和乙液三份混合即可;2.l醋酸缓冲液甲液:醋酸,蒸馏水1000mL;乙液:醋酸钠,蒸馏水1000mL;甲液72mL,乙液28mL,,配毕测pH值,以121℃,30min灭菌后备用; 3.明胶磷酸盐缓冲液成分:明胶2g,磷酸氢二钠4g,蒸馏水1000mL,;制法:加热溶解,校正pH,121℃高压灭菌15min;4.包被缓冲液碳酸盐缓冲液的制备,,加蒸馏水至1000mL;也可用的磷酸盐缓冲液代替;5.洗液PBS-T的制备PBS加%V/V吐温-20;6.抗体稀释液的制备加PBS-T至1000mL;封闭液的制备同抗体稀释液;7.底物缓冲液的制备A液L柠檬酸水溶液:柠檬酸C6H8O7·H2O,加蒸馏水至1000mL; B液L磷酸氢二钠水溶液:Na2HPO4·,加蒸馏水至1000mL;。
常用染色液配方范文
染色液是一种常见的化学染料,用于染色纺织品、皮革、木材等材料。
下面是一些常用的染色液配方,供参考:
1.酸性染色液配方:
-甲醛:5%(染色前处理)
-醋酸:2%(酸洗、pH调节)
-染料:1-3%(根据颜色需求)
-辅料:盐酸、硫酸、硫酸铵等(根据具体工艺条件)
2.碱性染色液配方:
-乙醇胺:5-10%(碱性调节)
-染料:1-3%(根据颜色需求)
-辅料:碱性添加剂(根据具体工艺条件)
3.偶氮染料染色液配方:
-偶氮染料:0.5-2%(根据颜色需求)
-萃取剂:1-5%(用于溶解染料)
-辅料:乙醇、盐酸、润湿剂等(根据具体工艺条件)
4.基于金属盐的染色液配方:
-金属盐:如铜盐、铁盐、铅盐等
-酸洗剂:如盐酸、硝酸等
-辅料:酸性调节剂、沉淀剂等(根据具体工艺条件)
5.响应性染料染色液配方:
-响应性染料:根据所使用的响应性染料种类和需求量决定
-辅料:如还原剂、氧化剂等(根据具体工艺条件)
注意事项:
-在配制染色液时,选择合适的溶剂和添加剂,确保染料能够均匀分
散在溶液中,达到较好的染色效果。
-不同类型的染料有不同的适应pH范围,因此在选择配方时需要考虑
染料的酸碱性。
-染色液的具体配方需根据不同的染色物料和工艺要求进行调整。
这些仅是一些常见的染色液配方,实际应用中还需要根据具体的染料、染色物料和工艺要求进行调整和优化。
最佳的染色液配方应该结合实验室
试验和生产实际,以确保染色效果的质量和稳定性。
实验用染色液的配制1.黑色素液水溶性黑素10g,蒸馏水100mL, 甲醛(福尔马林)0.5mL。
可用作荚膜的背景染色。
2.墨汁染色液国产绘图墨汁40mL,甘油2mL,液体石炭酸2mL。
先将墨汁用多层纱布过滤,加甘油混匀后,水浴加热,再加石炭酸搅匀,冷却后备用。
用作荚膜的背景染色。
3.吕氏(Loeffier)美蓝染色液A液:美蓝(methylene blue, 又名甲烯蓝)0.3g, 95%乙醇30mL;B液:0.0l% KOH l00mL。
混合A液和B液即成,用于细菌单染色,可长期保存。
根据需要可配制成稀释美蓝液,按1:10或1:100稀释均可。
4.革兰氏染色液(1)结晶紫(crystal violet)液:结晶紫乙醇饱和液(结晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL,1%草酸铵水溶液80mL 将两液混匀置24h后过滤即成。
此液不易保存,如有沉淀出现,需重新配制。
(2)卢戈(Lugol)氏碘液:碘1g,碘化钾2g,蒸馏水300mL。
先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,然后加入碘使之完全溶解,再加蒸馏水至300mL即成。
配成后贮于棕色瓶内备用,如变为浅黄色即不能使用。
(3)95%乙醇:用于脱色,脱色后可选用以下(4)或(5)的其中一项复染即可。
(4)稀释石炭酸复红溶液:碱性复红乙醇饱和液(碱性复红1g, 95%乙醇l0mL, 5%石炭酸90mL混合溶解即成碱性复红乙醇饱和液),取石炭酸复红饱和液l0mL加蒸馏水90mL即成。
(5)番红溶液:番红O(safranine,又称沙黄O)2.5g, 95%乙醇100mL,溶解后可贮存于密闭的棕色瓶中,用时取20mL与80mL蒸馏水混匀即可。
以上染液配合使用,可区分出革兰氏染色阳性(G+)或阴性(G-)细菌,G-被染成蓝紫色,G+被染成淡红色5. 鞭毛染色液A液:丹宁酸5.0g, FeCl3 1.5g,15%甲醛(福尔马林)2.0mL,l%NaOH 1.0mL,蒸馏水l00mL;B液:AgNO3 2.0g, 蒸馏水100mL。
常用染色液的配制1.吕氏(Loefflev)美蓝染色液A液:2%美蓝(Methylene blue)95%酒精溶液B液:10%KOH溶液取A液30ml、B液0.1ml与100ml蒸馏水混合。
2.石炭酸复红染色液A液:4%碱性复红(basic fuchsin)95%酒精溶液将碱性复红在研钵中研磨后,逐渐加入95%酒精,继续研磨使其溶解、配成A液。
B液:5%石炭酸溶液取A液10ml、B液90ml混合即可。
一般可将此溶液稀释5-10倍使用。
但稀释液易变质失效,一次不宜多配。
3.革兰氏(gram)染色液(1)草酸铵结晶紫染液:A液:1%结晶紫(Crystal violet)95%酒精溶液B液:1%草酸铵(Ammonium oxalate)溶液取A液20mlB液80ml,静置48/小时后使用。
(2)路哥氏(Lugol)碘液:碘片1.0g、碘化钾2.0g、蒸馏水300ml先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液另,待碘全部溶解后,加够水即成。
(3)95%酒精溶液(4)蕃红(沙黄)复染液:2.5%蕃红(Safranlne O)95%酒精溶液。
取此液10ml与90ml蒸馏水混匀即成。
4.芽孢染色液(1)5%孔雀绿(Malachite green)溶液。
(2)0.5%蕃红溶液。
(3)苯酚品红溶液称取11g碱性品红溶于100ml无水酒精中。
再取上述溶液10ml与100ml 5%的苯酚溶液混合,过滤备用。
(4)黑色素(nigrosin)溶液10%黑色素溶液,置沸水浴中30min后,滤纸过滤二次,补加水到100ml, 然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。
5.荚膜染色液(1)黑色素水溶液将黑色素在蒸馏水中煮沸5min,配成5%溶液,然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。
(2)蕃红染色液与革兰氏染色液中的蕃红复染液相同。
6.鞭毛染色液A液:单宁酸5.0g、FeC131.5g、蒸馏水100ml,福尔马林(15%)2.0ml、NaOH(1%)1.0ml。
常用染色液的配方染色液是一种被广泛使用的化学品,用于改变物体表面的颜色,并且根据不同的需要,可以根据用户的要求来制定配方。
下面是常用染色液的配方的一些例子。
1.织物染色液配方:-水:1000毫升-盐:20克-特种染料:根据需要添加适量将水加热至75°C,然后将盐加入水中,搅拌至溶解。
待水温降至60°C时,将特种染料加入溶液中,搅拌均匀。
将织物放入染色液中,注意保持温度和时间,完成染色后,用清水冲洗织物。
2.金属染色液配方:-硫酸铜:50克-硝酸钠:50克-硝酸铜:50克-水:500毫升将硫酸铜、硝酸钠和硝酸铜加入水中,搅拌均匀。
将金属材料浸入染色液中,保持一定的温度和时间,然后将金属材料取出,用清水冲洗,再进行上光处理。
3.木质染色液配方:-水:1000毫升-染料:根据需要添加适量-氨水:5毫升(用于调整pH值)将水加热至50°C,然后将染料加入水中,搅拌均匀。
根据需要添加适量的氨水来调整pH值,以获得所需的染色效果。
将木质材料放入染色液中,保持温度和时间,然后用清水冲洗,再进行涂漆或上蜡处理。
4.皮革染色液配方:-水:300毫升-醋酸铬:10克-硫酸铜:10克-盐酸:5毫升-助剂:根据需要添加适量将水加热至60°C,然后将醋酸铬和硫酸铜加入水中,搅拌均匀。
将盐酸稀释后加入溶液中,调整pH值。
根据需要添加适量的助剂,例如增溶剂或抗皱剂。
将皮革材料浸泡在染色液中,并保持所需的温度和时间,然后用清水冲洗。
需要注意的是,染色液的配方可以根据不同的材料和染色要求进行调整。
这只是一些常用的配方示例,具体的配方应根据实际情况来定制。
在使用染色液时,应注意安全操作,避免接触皮肤和眼睛,并在通风良好的地方使用。
常用染色液的配方染色液是一种用于给纤维或织物上色的溶液,可以通过调整其成分的配比来获得不同颜色的染色效果。
以下是一些常见的染色液配方,涵盖了不同颜色和纤维材料的染色需求。
1.无酶法染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量-草酸:10g-盐:60g-分散剂:适量2.酶法染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量-酶解剂:2g-分散剂:适量3.酸性染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量- 醋酸:20ml-分散剂:适量4.乳液染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量-乳化剂:适量- 硫酸:10ml-盐:60g-分散剂:适量5.染料固定剂染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量-染料固定剂:根据需要调整用量-盐:60g-分散剂:适量6.阴离子染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量-还原剂:适量-分散剂:适量7.阳离子染色液- 水:1000ml-染料:根据需要调整用量-盐:60g-分散剂:适量上述配方仅为一般参考,实际配方可能会因具体染色要求和纤维类型的不同而有所调整。
在进行染色之前,应根据纤维类型、染料选择和染色效果的要求进行配方调整。
此外,注意遵循相关安全操作和环保要求,以确保染色过程的安全和可持续性。
在实际染色过程中,可以根据需要使用其他添加剂来调整染色液的性能,如增稠剂、酸碱调节剂、湿润剂等。
此外,注意控制染色液的pH值、温度和时间等参数,以获得理想的染色效果。
总之,染色液的配方是根据具体需求和材料类型来确定的,在实际应用中需要充分考虑材料特性和染色效果,并注意安全环保要求。
染色液得配制一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液A液:美蓝(methylene blue) 0.6g95%酒精 30mlB液:KOH 0.01g蒸馏水 100ml分别配制A液与B液,配好后混合即可。
二、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(basic fuchsin) 0.3g95%酒精 10mlB液:石炭酸 5.0g蒸馏水 95ml将碱性复红在研钵中研磨后,逐渐加入95%酒精,继续研磨使其溶解,配成A液。
将石炭酸溶解于水中,配成B液。
混合A液及B液即成。
通常可将此混合液稀释5—10倍使用,稀释液易变质失效,一次不宜多配。
三、革兰氏(Gram)染色液1.草酸铵结晶紫染液A液:结晶紫(crystal violet) 2g95%酒精 20mlB液:草酸铵(ammonium oxalate) 0.8g蒸馏水 80ml混合A、B二液,静置48小时后使用。
2.卢戈氏(Lugol)碘液碘片 1.0g碘化钾 2.0g蒸馏水 300ml先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液中,待碘全溶后,加足水分即成。
3.95%得酒精溶液。
4.番红复染液番红(safranine O) 2.5g95%酒精 100ml取上述配好得番红酒精溶液10ml与80ml蒸馏水混匀即成。
四、芽孢染色液1.孔雀绿染液孔雀绿(malachite green) 5g蒸馏水 100ml2.番红水溶液番红 0.5g蒸馏水 100ml3.苯酚品红溶液碱性品红 11g无水酒精 100ml制法取上述溶液10ml与100ml5%得苯酚溶液混合,过滤备用。
4.黑色素(nigrosin)溶液水溶性黑色素 10g蒸馏水 100ml称取10g黑色素溶于100ml蒸馏水中,置沸水浴中30分钟后,滤纸过滤二次,补加水到100ml,加0.5ml甲醛,备用。
五、荚膜染色液1.黑色素水溶液黑色素 5g蒸馏水 100ml福尔马林(40%甲醛) 0.5ml将黑色素在蒸馏水中煮沸5分钟,然后加入福尔马林作防腐剂。
常用染色液的配制一、骆氏美蓝染色液(碱性美蓝染色液)甲液:美蓝0.3克,95%酒精30ML乙液:0.01%氢氧化钾溶液100ML甲、乙混合即可,密闭保存,一年后可获多色性。
二、革兰氏染色液1、草酸铵结晶紫染液甲液:结晶紫2G,95%酒精20ML,或结晶紫饱和酒精溶液2ML加蒸馏水18ML。
乙液:草酸铵0.8克,蒸馏水80ML。
甲、乙混合,静置48小时,过滤后备用,可较久贮存。
2、革兰氏碘溶液碘片1G,碘化钾2G,蒸馏水300ML碘化钾+3-5ML蒸馏水,溶解后+碘片,摇匀后+蒸馏水至足量。
3、95%酒精,用作脱色剂4、碱性复红染色液碱性复红(一品红)0.1G,蒸馏水100ML可用沙黄水溶液或稀释石炭酸复红液代替此液。
沙黄水溶液:沙黄饱和酒精溶液+10倍蒸馏水,保存期小于4个月。
稀释石炭酸复红染色液:石炭酸复红液10ML+蒸馏水90ML三、抗酸染色液1、石炭酸复红染色液3%碱性复红酒精溶液10ML+5%石炭酸水溶液90ML,过滤即可。
2、盐酸酒精液浓盐酸3ML+95%酒精97ML四、克利特氏荚膜染色液1、美蓝溶液:美蓝1G+96%酒精10ML+100ML蒸馏水2、碱性红溶液:碱性复红0.03G+1ML96%酒精+99ML蒸馏水五、瑞特氏染色液1、0.1G瑞特氏染粉研磨,再加中性甘油3ML,充分研磨,后徐徐加入甲醇液60ML,边研边搅,存于棕色瓶中过夜,过滤后贮于棕色瓶中,越久越好。
2、磷酸盐缓冲液甲液:磷酸氢二钠23.86G,1000ML蒸馏水。
乙液:磷酸二氢钾9.07G,1000ML蒸馏水。
4份甲液+1份乙液即可。
常用染色液的配制1.番红水液番红0.1g溶入蒸馏水,定溶至100ml。
2. 番红酒液番红0.5g或1g溶入50%酒精,定溶至100ml3. 固绿染液固绿0.1g溶入95%酒精,定溶至100ml。
4. 碘-碘化钾染液碘化钾溶入100ml蒸馏水,再加入1g碘,溶解后即可使用。
5. 苏丹Ⅲ(或Ⅳ)染液将0.1g苏丹Ⅲ或Ⅳ溶解在50ml丙酮中,再加入70%酒精50ml。
6.改良苯酚品红染液原液A:将3g碱性品红溶入100ml 70%酒精,此液可长期保存。
原液B:将10mlA液加入到90ml 5%苯酚水溶液中。
原液C:将55mlB液加入到6ml的冰醋酸和6ml的38%的甲醛中。
染色液:取C液20ml,加45%冰醋酸80ml,充分混匀,再加入1g山梨醇,放置14天后使用,可保存3年。
7. 间苯三酚染液将5g间苯三酚溶入100ml 95%酒精(若溶液呈黄色,即为失效)。
8. 中性红染液将0.1g中性红溶入100ml蒸馏水,用时稀释10倍。
9. 钌红染液将5~10mg钌红溶入25~50ml蒸馏水,现用现配。
10.龙胆紫染液将0.2g龙胆紫溶入100ml蒸馏水。
现常用结晶紫代替。
必要时可将医用紫药水稀释5倍后代用。
11.铁醋酸洋红染液先将100ml 45%醋酸水溶液置入200ml的锥形瓶中煮沸,移去火苗,然后慢慢地分多次加入1g 洋红粉末(切记不可一次倒入)。
待全部倒入后,再煮沸1~2min,并悬入一生锈的小铁钉于染液中,过1min后取出,使染色剂略含铁质,以增加染色性能。
静置12h后过滤于棕色瓶中备用(置于避光处)。
12.苏木精染液苏木精的配方很多,常用的有如下3种:配方Ⅰ:苏木精水溶液0.5g苏木精溶入100ml煮沸的蒸馏水中,静置24h后可使用。
配方Ⅱ:代氏苏木精(De larfield’s haematoxylin)甲液:苏木精1g + 无水酒精6ml乙液:硫酸铝铵(铵矾)10g + 蒸馏水100ml丙液:甘油25ml + 甲醇25ml分别配制甲、乙两液,将甲液一滴滴地加入乙液中,充分搅拌后,放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口,置于温暖和光线充足处7~10天,再加入丙液,混匀后静置1~2月,至颜色变为深紫色后,过滤备用,可长期保存。
附录二:常用固定液和染色液的配制
1. 番红水液
番红0.1g溶入蒸馏水,定溶至100ml。
2. 番红酒液
番红0.5g或1g溶入50%酒精,定溶至100ml。
3. 固绿染液
固绿0.1g溶入95%酒精,定溶至100ml。
4. 碘-碘化钾染液
碘化钾溶入100ml蒸馏水,再加入1g碘,溶解后即可使用。
5. 苏丹Ⅲ(或Ⅳ)染液
将0.1g苏丹Ⅲ或Ⅳ溶解在50ml丙酮中,再加入70%酒精50ml。
6.改良苯酚品红染液
原液A:将3g碱性品红溶入100ml 70%酒精,此液可长期保存。
原液B:将10mlA液加入到90ml 5%苯酚水溶液中。
原液C:将55mlB液加入到6ml的冰醋酸和6ml的38%的甲醛中。
染色液:取C液20ml,加45%冰醋酸80ml,充分混匀,再加入1g 山梨醇,放置14天后使用,可保存3年。
7. 间苯三酚染液
将5g间苯三酚溶入100ml 95%酒精(若溶液呈黄色,即为失效)。
8. 中性红染液
将0.1g中性红溶入100ml蒸馏水,用时稀释10倍。
9. 钌红染液
将5~10mg钌红溶入25~50ml蒸馏水,现用现配。
10.龙胆紫染液
将0.2g龙胆紫溶入100ml蒸馏水。
现常用结晶紫代替。
必要时可将医用紫药水稀释5倍后代用。
11.铁醋酸洋红染液
先将100ml 45%醋酸水溶液置入200ml的锥形瓶中煮沸,移去火苗,然后慢慢地分多次加入1g洋红粉末(切记不可一次倒入)。
待全部倒入后,再煮沸1~2min,并悬入一生锈的小铁钉于染液中,过1min 后取出,使染色剂略含铁质,以增加染色性能。
静置12h后过滤于棕色瓶中备用(置于避光处)。
12.苏木精染液
苏木精的配方很多,常用的有如下3种:
配方Ⅰ:苏木精水溶液
0.5g苏木精溶入100ml煮沸的蒸馏水中,静置24h后可使用。
配方Ⅱ:代氏苏木精(Delarfield’s haematoxylin)
甲液:苏木精1g + 无水酒精6ml
乙液:硫酸铝铵(铵矾)10g + 蒸馏水100ml
丙液:甘油25ml + 甲醇25ml
分别配制甲、乙两液,将甲液一滴滴地加入乙液中,充分搅拌后,放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口,置于温暖和光线充足处7~10天,再加
入丙液,混匀后静置1~2月,至颜色变为深紫色后,过滤备用,可长期保存。
配方Ⅲ:爱氏苏木精(Ehrlich’s haematoxylin)
苏木精1g + 无水或95%酒精50ml + 蒸馏水50ml + 甘油50ml + 冰醋酸5ml + 硫酸铝钾(钾矾)3~5g。
配制时,先将苏木精溶于酒精中,然后依次加入蒸馏水、甘油和冰醋酸,最后加入研细的钾矾,边加边搅拌,直到瓶底出现钾矾结晶为止。
混合后溶液颜色呈淡红色,放入广口瓶中,用纱布封口,自然氧化1~2月,至颜色变为深红色时即可过滤备用,可长期保存。
13.席夫试剂(Schiff’s regent)
将0.5g碱性品红溶入煮沸的蒸馏水,搅拌使其充分溶解。
冷却至50℃时,过滤于棕色细口瓶中,加入10ml1mol/L盐酸。
冷却至25℃左右,加入1g偏亚硫酸钾或钠(Na2S2O5或K2S2O5),振荡使其溶解,密封瓶口,置于黑暗低温处过夜。
次日检查,若染色液透明无色或呈淡茶色,即可使用。
若染色较深,可加入少量优质活性炭(0.5~2g),振荡1min,置于4℃冰箱中过夜,过滤使用。
此液配好后,应塞紧瓶塞,外包黑纸,贮藏于冰箱中。
14.硫堇染液
将0.25g硫堇粉末,溶于100ml蒸馏水中,即可使用。
使用此液时。
需用微碱性自来水封片或用1%NaHCO3水溶液封片,能产生多色反应。
15.亚甲基蓝染液
0.1g亚甲基蓝溶入100ml蒸馏水即可。
16.詹纳斯绿B(Janus green B)染液
5.18g詹纳斯绿溶入100ml蒸馏水,配成饱和水溶液。
用时需稀释,稀释倍数应视材料而异。
17.苏木精-曙红(HE)染液
曙红(Eosin),酸性染料,为最优良的动物细胞染料,与苏木精配合使用(复染)对动物组织进行对比染色。
苏木精的染液的配方同上。
曙红有以下配制方法:
配方Ⅰ:曙红0.5g + 95%酒精100ml
配方Ⅱ:曙红0.5g + 蒸馏水100ml
配方Ⅲ:曙红0.5g + 95%酒精25ml +蒸馏水75ml
【上页】常用固定液的配制。