同型半胱氨酸的检测及临床应用

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（3）Hcy水平与心血管疾病的危险性 Hcy水平与心血管疾病的危险性 通过血管内超声观察AS斑块情况 通过血管内超声观察 斑块情况 ，观察 到血浆HCY 浓度 浓度<8umol/L时，斑块较小 时 到血浆 （0.17-0.76mm）, > 8umol/L时，斑块明 ） 时 显增大（ 显增大（0.27-1.04，p<0.001）,表明与冠 ， ） 表明与冠 正相关。 状动脉病变程度呈正相关 状动脉病变程度呈正相关。
同型半胱氨酸的检测及 临床应用
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前
言
同型半胱氨酸（ Hcy） 同型半胱氨酸（homocysteine, Hcy）是一 种人体内的含硫氨基酸， 种人体内的含硫氨基酸，为蛋氨酸和半胱氨 酸代谢过程中的重要中间产物。 酸代谢过程中的重要中间产物。 新热点:许多学者认为血液Hcy升高已成为动 Hcy升高已成为 新热点:许多学者认为血液Hcy升高已成为动 脉粥样硬化发生的一个独立危险因子，也成 脉粥样硬化发生的一个独立危险因子， 发生的一个独立危险因子 为基础医学和临床医学研究的新热点。 为基础医学和临床医学研究的新热点。 新理念:伴有血浆Hcy升高( 10umol/L)的原 Hcy升高 新理念:伴有血浆Hcy升高(>10umol/L)的原 发性高血压定义为H型高血压。 发性高血压定义为H型高血压。 2 2011-4-28 2
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四、Hcy的测定方法 Hcy的测定方法
同位素法：该方法灵敏度高，特异性强， 同位素法：该方法灵敏度高，特异性强， 但操作繁琐且有放射污染，未能推广使用。 但操作繁琐且有放射污染，未能推广使用。 色谱法：灵敏度、特异性好，但仪器价格 色谱法：灵敏度、特异性好， 昂贵而不能推广。 昂贵而不能推广。 荧光偏振免疫测定： 荧光偏振免疫测定：此法需要专门的荧光 偏光免疫检测仪。 偏光免疫检测仪。
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P值 <0.02 0.16 <0.05 0.006
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20 30 35 40
50.1± 50.1±2.6 45.1±1.6 55.7±1.6 55.0±1.4
10.6±0.45 15.5±1.83 17.8±2.05 19.5±1.97
有研究表明： 有研究表明： 轻度、中度 轻度、中度Hcy水平升高可使心血管疾 水平升高可使心血管疾 病死亡危险性增加4 倍 血浆总Hcy水平 病死亡危险性增加 ~6倍，血浆总 水平 每升高5 每升高 µmol/L则CHD危险性男性增加 则 危险性男性增加 60%，女性增加80%。 ，女性增加
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METHOD
（反应类型） ： 反应类型）
END 20~27
Point（反应点）： Method Point（反应点）：
Limit（吸光度范围）： ）：Reagent OD Limit（吸光度范围）：-2.0~2.5 Dynamic Range (反应范围) (反应范围)： 反应范围 3~50 1点 umol/L
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Hcy水平的因素 二、影响血液Hcy水平的因素 影响血液Hcy
1、遗传因素： 、遗传因素： ①C667T点突变可引起 点突变可引起Hcy升高。 升高。 点突变可引起 升高 基因多态性。 ②CBS基因多态性。 基因多态性 ③蛋氨酸合成酶基因多态性。 蛋氨酸合成酶基因多态性。
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6、影响体内的转甲基化反应 ： Hcy浓度的升高会影响体内许多物质的甲 Hcy浓度的升高会影响体内许多物质的甲 基化过程，如核酸（DNA和RNA）、蛋白质、 基化过程，如核酸（DNA和RNA）、蛋白质、 ）、蛋白质 髓磷脂、多糖、 髓磷脂、多糖、胆碱和儿茶酚胺类的甲基 化；甲基化能力的降低影响细胞的发育及 分化，这可能是Hcy致病的关键因素。 分化，这可能是Hcy致病的关键因素。 Hcy致病的关键因素
* Arnesen E,Refsum H,Bonaa K H,et al.Serum total homocysteine and coronary heart disease［J］. Int J Epidemiol,1995,24(4):7042011-4-28
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美国专家在Framingham心脏病研究项目 美国专家在Framingham心脏病研究项目 Framingham 中发现，Hcy与心力衰竭的相关性更为密切， 中发现，Hcy与心力衰竭的相关性更为密切， 与心力衰竭的相关性更为密切 对尚未出现心脏病症状者来说，Hcy升高者 对尚未出现心脏病症状者来说，Hcy升高者 患心力衰竭的危险可加倍， 患心力衰竭的危险可加倍，妇女的危险可 增加3 增加3倍。
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3、致血栓作用： 致血栓作用： Hcy可促进血栓调节因子的表达， Hcy可促进血栓调节因子的表达，激活蛋 可促进血栓调节因子的表达 白C和凝血因子Ⅻ、Ⅴ，血小板内前列腺 和凝血因子Ⅻ 素合成增加， 素合成增加，从而促进血小板粘附和聚 集。
来自百度文库
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Hcy通过多种途径损伤血管， Hcy通过多种途径损伤血管，它损伤血管内皮细胞同时刺 通过多种途径损伤血管 激血管平滑肌细胞生长，二者导致的损伤阻塞血流通路； 激血管平滑肌细胞生长，二者导致的损伤阻塞血流通路；Hcy 还破坏正常凝血机制；增加血栓形成引起心脏病发作及中风 。 还破坏正常凝血机制；
E L, Robinson K, Jacobsen D W. et al .Low plasm homocyseine levels predic reduced atheroma burden in patient undergoing coronary intervention:Evideence from intravascular ultrsund.J Am Coll Cardiol,1995,25(special issum):81 A.
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2、性别与年龄： 、性别与年龄： 国内外不少研究发现， 国内外不少研究发现，Hcy随年龄增长而 随年龄增长而 升高，而且男性>女性。女性在绝经前的水 女性。 升高，而且男性 女性 平较低，绝经后显著升高， 平较低，绝经后显著升高，认为其机制可 能与雌激素水平的变化有关。 能与雌激素水平的变化有关。
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有学者在动物实验中观察到注射Hcy后引起 有学者在动物实验中观察到注射Hcy后引起 Hcy 高Hcy血症，2—3个月后发生动脉粥样硬 Hcy血症， 血症 化 。认为高Hcy血症是发生动脉粥样硬化 认为高Hcy Hcy血症是发生动脉粥样硬化 的独立危险因素。 的独立危险因素。
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三、同型半胱氨酸致病机理
1、内皮毒性作用： 内皮毒性作用： Hcy可引起内皮细胞损伤， Hcy可引起内皮细胞损伤，尤其合并高 可引起内皮细胞损伤 血压时更易受损， 血压时更易受损，并且破坏血管壁弹力 层和胶原纤维。 层和胶原纤维。 2、刺激血管平滑肌细胞增生： 刺激血管平滑肌细胞增生： Hcy可直接诱导血管平滑肌细胞增殖。 Hcy可直接诱导血管平滑肌细胞增殖。 可直接诱导血管平滑肌细胞增殖
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Hcy循环酶法实验参数的设计 Hcy循环酶法实验参数的设计 实验参数根据分析仪的不同有所差异， 实验参数根据分析仪的不同有所差异，可要 求试剂供应商提供相应的实验参数。 求试剂供应商提供相应的实验参数。 下面列举OLYMPUS系列的实验参数 OLYMPUS系列的实验参数： 下面列举OLYMPUS系列的实验参数： Volume（样品体积）： Sample Volume（样品体积）： 9ul 试剂1体积）： ）：167ul R1 Volume （试剂1体积）：167ul 试剂2体积）： R2 Volume （试剂2体积）： 45ul Wave1（主波长） Measure Wave1（主波长） ：340nm Wave2（副波长） Measure Wave2（副波长） ：700nm
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4、脂肪、糖、蛋白代谢紊乱： 脂肪、 蛋白代谢紊乱： Hcy可促进脂质沉积于动脉壁， Hcy可促进脂质沉积于动脉壁，泡沫细胞增 可促进脂质沉积于动脉壁 加，还可改变动脉壁糖蛋白分子纤维化结 构，促进斑块钙化。 促进斑块钙化。
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5、干扰谷胱甘肽的合成 ： 谷胱甘肽是一种重要的高氧化剂， 谷胱甘肽是一种重要的高氧化剂，它能防 止很多细胞成分的氧化互相作用，对血管 止很多细胞成分的氧化互相作用， 产生保护作用。Hcy干扰谷胱甘肽的合成， 产生保护作用。Hcy干扰谷胱甘肽的合成， 干扰谷胱甘肽的合成 从而对机体造成危害 。
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定标数）： Calibration Type （定标数）： Unit
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（单位）： 单位）：
五、同型半胱氨酸的临床应用
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1、心血管病防治
升高与动脉粥样硬化(AS)的关系： 的关系： （1）HCY升高与动脉粥样硬化 ） 升高与动脉粥样硬化 的关系 1969年就曾有人从尸检中发现 例血浆 年就曾有人从尸检中发现2例血浆 年就曾有人从尸检中发现 Hcy浓度超过正常人几十倍的病儿存在广泛 浓度超过正常人几十倍的病儿存在广泛 的动脉粥样硬化和动脉血栓。 的动脉粥样硬化和动脉血栓。临床上发现高 胱氨酸尿症病人早年多因全身动脉粥样硬化 和血栓形成死于脑梗塞和心肌梗塞， 和血栓形成死于脑梗塞和心肌梗塞，这与血 升高有关。 中Hcy升高有关。 升高有关
同型半胱氨酸（Hcy） 同型半胱氨酸（Hcy）能够让四分之三的高 血压患者脑卒中死亡风险增加12 12倍 血压患者脑卒中死亡风险增加12倍。
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一、Hcy的存在形式 Hcy的
有研究发现在正常人和高Hcy血症患者血浆 有研究发现在正常人和高Hcy血症患者血浆 Hcy 中，Hcy大部分（70％）是与蛋白质结合， Hcy大部分（70％）是与蛋白质结合， 大部分 ％）是与蛋白质结合 血浆中与Hcy结合的是白蛋白。 血浆中与Hcy结合的是白蛋白。 Hcy结合的是白蛋白 Hcy在血液中的存在方式: Hcy在血液中的存在方式: 部分以同型半胱 在血液中的存在方式 氨酸-半胱氨酸二硫化物存在， 氨酸-半胱氨酸二硫化物存在，微量以还原 型同型半胱氨酸存在， 型同型半胱氨酸存在，大部分通过二硫键与 白蛋白结合而存在。 白蛋白结合而存在。
* Mayer
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惠汝太教授等的研究结果显示： 惠汝太教授等的研究结果显示： 冠状动脉病变支数随着血浆Hcy浓度增高而增加。 冠状动脉病变支数随着血浆Hcy浓度增高而增加。 Hcy浓度增高而增加
冠动脉病变与血浆HCY浓度的关系 冠动脉病变与血浆HCY浓度的关系 HCY 冠动脉造影 血浆Hcy 例数 年龄 血浆Hcy 正常 单支病变 双支病变 3支病变
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ELISA：对仪器要求不高，易普及， ELISA：对仪器要求不高，易普及，但结果 准确性相对较差。 准确性相对较差。 放射免疫法：结果准确，但有放射性污染， 放射免疫法：结果准确，但有放射性污染， 很少使用。 很少使用。 循环酶法：快速、简便、灵敏度高。 循环酶法：快速、简便、灵敏度高。可上 全自动生化分析仪，适用大批标本， 全自动生化分析仪，适用大批标本，临床 应用广泛。 应用广泛。
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3、营养因素： 、营养因素： 代谢辅酶， ①VitB6、VitB12、叶酸是 、 、叶酸是Hcy代谢辅酶， 代谢辅酶 它们的水平与Hcy水平呈负相关，摄入不足 水平呈负相关， 它们的水平与 水平呈负相关 上述三个酶活性下降， 升高。 时，上述三个酶活性下降，则Hcy升高。 升高 ②饮酒：长期饮酒可引起肝细胞蛋氨酸合成 饮酒： 酶活性下降，从而造成Hcy血症。 血症。 酶活性下降，从而造成 血症 ③饮食中蛋氨酸含量过高：有报道认为高动 饮食中蛋氨酸含量过高： 物蛋白、低植物蛋白饮食可能是Hcy血症的 物蛋白、低植物蛋白饮食可能是 血症的 危险因素之一。 危险因素之一。