DNA电泳相关试剂及缓冲液的配制
- 格式:doc
- 大小:66.50 KB
- 文档页数:7
DNA 电泳相关试剂及缓冲液的配制
1. 0.5M EDTA(pH=8.0):在800ml 蒸馏水中加入186.1g 二水乙二胺四乙酸钠(EDTA-Na 2·2H 2O),充分搅拌,这时溶液为乳白色,加NaOH 调解pH 值至8.0,这时溶液颜色逐渐变为澄清。最后
定容至1L 。高压灭菌。
2. 5 X TBE:Tris 碱54g;硼酸27.5g;20ml0.5M EDTA(pH=8.0),加蒸馏水定容至1L 。高压灭菌。(不过我在实验中没有灭菌,实验结果影响不大)。1 X TBE:5 X TBE 缓冲液与蒸馏水按 1: 4
稀释就OK 。
配置方法方法1:1%的溴酚蓝
将托盘天平上称取1g 溴酚蓝定溶于100ml 无水乙醇中,转移入
滴瓶中,贴标签备用。
方法2:0.05%
的溴酚蓝
配western blot
用的2*SDS 上样缓冲液需要用到0.1%
的溴酚蓝,
2-DE中溴酚蓝一般也是配成0.1%母液。实际上,溴酚蓝在水中的溶解度不高,直接将0.1g溴酚蓝溶于100ml水是有困难的。下面是其较合适的配制方法:
0.05%的溴酚蓝配制方法:取溴酚蓝0.1g,加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.0ml使溶解,再加水稀释至200ml,即得。变色范围pH2.8~4.6(黄→蓝绿)。只是不知道加入NaOH会不会影响2-DE实验。估计影响不大,因为指示剂用量毕竟很少。
方法3:1%溴酚蓝
加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。溴酚蓝其钠盐易溶解在水里。
相关词条
甲醇、乙醇、苯、有机化学、氢氧化钠
Western上样缓冲液配制整理
● 6×SDS 样品缓冲液 4×Tris·Cl/SDS,PH6.8 (0.28mol/L) 7ml
甘油[30%(V/V)]
3.0ml
(3.8g ) 甘油密度为 1.2613g/cm3 (20/4℃)
SDS [1%(m/V )] 1g
溴
酚
蓝[0.0012%(m/V)] 1.2mg
DTT (0.5mol/L)
0.93g
如果需要,加去离子蒸馏水至10ml ;等量分装成0.5ml 并于-70℃贮存
● 8×Tris·Cl/SDS,PH6.8 ●丽春红S 染色液
Tris-base (0.5mol/L ) 6.05g
40ml 水中溶解后以1mol/L 盐酸调至PH6.8,补加至100ml 。 HCl
调至6.8 0.45um 滤膜过滤,再加0.4gSDS
SDS[0.4%(m/V)] 0.4g 4℃可保存1月
1. Prepared using Tris base, pH adjusted with HCl.
2. If 2-ME is used, omit DTT.
3. If DTT is used, omit 2-ME.