3第3章免疫原和抗血清的制备多媒体.pptx
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临床免疫学和免疫检验第三章免疫原和抗血清的制备讲义第三章免疫原和抗血清的制备概述:免疫学的研究主要涉及到两个重要的组分:免疫原和抗血清。
免疫原是引发免疫反应的物质,抗血清则是由免疫反应产生的抗体。
制备免疫原和抗血清是研究免疫学的基础,也是开展临床免疫学和免疫检验的前提。
一、免疫原的制备1.病原体免疫原的制备(1)整活病原体的制备:将病原体培养至足够数量,收集后经过消毒杀菌处理,用于动物免疫或制备抗血清。
(2)灭活病原体的制备:将病原体培养至足够数量,用热、化学物质或辐射等方法使其失去活性,避免感染动物或人员,用于动物免疫或制备抗血清。
(3)病原体抗原的提取和纯化:通过培养病原体,收集其代谢产物,经过提取、纯化等步骤得到纯净的抗原物质。
2.细胞免疫原的制备(1)原代细胞制备:从动物或人体中采集组织或器官,通过细胞培养技术将细胞分离并进行传代,得到大量的细胞用于动物免疫或制备抗血清。
(2)细胞株制备:将细胞分离后,在适当的培养环境中进行无限传代,得到大量同源的细胞,用于动物免疫或制备抗血清。
(3)细胞裂解物制备:将细胞离心沉淀后,用适当的缓冲液裂解细胞释放细胞内的免疫原物质,进行纯化处理后得到制备的免疫原。
3.蛋白质免疫原的制备(1)从细胞裂解物中分离:将细胞裂解,经过离心等步骤得到细胞内的蛋白质物质,可以经过分子筛、电泳等技术得到纯净的蛋白质免疫原。
(2)基因工程蛋白质的制备:利用克隆技术将目标蛋白质的基因导入到表达系统中,通过大量表达和纯化,得到目标蛋白质。
二、抗血清的制备抗血清是由免疫原引发的免疫反应产生的抗体。
下面介绍几种常见的抗血清制备方法。
1.动物抗血清的制备选择适宜的动物(如小鼠、兔子、小鸡等),先注射免疫原,然后通过多次免疫,免疫记忆细胞对免疫原做出反应,最后采集动物血液得到抗血清。
2.单克隆抗体的制备将B细胞与病原体或免疫原细胞融合,形成杂交瘤细胞。
杂交瘤细胞能够无限制地分裂,并能够产生单一抗体。