第!"卷第!期纺织高校基础科学学报#$%&!"’($&! )**+年,月-./01/102312/45673.859:2;:082630<27/0:0
= ================================================================
2/>?@A B’)**+文章编号C!**D E",F!G)**+H*!E***!E*D
溶菌酶在疏水表面吸附的研究
吴雅妮!’)’耿信鹏!’陈立成!’耿信笃)’邢建伟,
G!&西安工程科技学院环境与化学工程学院’陕西西安I!**F"J)&西北大学现代分离科学研究所’陕西西安I!**D K J ,&西安工程科技学院纺织与材料学院’陕西西安I!**F"H
摘要C采用摇床法’通过改变盐酸胍浓度和溶菌酶浓度测定不同温度下的变性溶菌酶G M N O H在疏水色谱填料P Q R E D**表面的吸附等温线&研究发现’)+S’,+S和F+S吸附达平衡所需时间分别为+B’FB和)B&原因可能是)+S时包覆作用显著’温度升高时’包覆作用消失’吸附容易达到平衡&改变盐酸胍浓度时’吸附量的变化与三种作用力’即去水合作用T亲合力及分子构象作用力的相对大小有关&*&"U$%V MR W X Y%吸附量达最大值’暗示蛋白可能发生了构象突变G至少是微扰H&以吸附计量置换模型G Z[>E\H对溶菌酶的吸附等温线进行拟合的线性关系很好’表明Z[>E\适用于溶菌酶在液E固界面上的吸附&Z[>E\热力学研究表明’变性溶菌酶折叠吸附过程
中总的自由能]^
P 为负值’净吸附自由能]^
\
均比相应条件下的]^
P
的负值更大’而净解吸附自
由能]^
[均为正值&说明上述自发过程是由]^
\
作为驱动力的结果’符合吸附过程的一般规律&
关键词C溶菌酶J疏水填料J吸附J吸附计量置换模型G Z[>E\H J热力学
中图分类号C_D F&,!文献标识码C\
蛋白在适度疏水色谱表面上的吸附及折叠研究是近年来刚刚兴起的蛋白折叠复性及纯化技术的新的研究领域&自)*世纪K*年代起’出现了采用高效疏水相互作用色谱G X P X‘Y H对多种蛋白实现了完全或部分折叠a!’)b&随后’用其它色谱研究蛋白在液E固界面上的折叠也相继报道a,’F b&精密量热法研究蛋白折叠自由能是从能量角度探讨蛋白折叠特性及规律这一前沿课题的极其重要也是最直接的途径&溶菌酶在一种疏水色谱填料上折叠焓变的微量热测定a+b为研究蛋白在液V固界面上折叠自由能迈出了第一步&而溶菌酶在疏水表面吸附等温线的研究’不仅能为测量蛋白折叠焓变和自由能变提供必须的吸附量’而且能为蛋白折叠机理研究提供重要的信息&现有的吸附等温线的研究报道均为色谱法研究a D b’但色谱中流动相是连续的’而量热实验是一系列单元操作&为了解决量热实验中蛋白吸附量的计量’需要用摇床法测定蛋白的吸附等温线’而目前还无采用此法研究蛋白吸附量的报道&
液E固界面吸附中’常见的吸附模型有M?c d U W e@方程’f@g W c h%e A B方程和溶质吸附计量置换模型G Z[>E
\H’但Z[>E\要远远优于M?c d U W e@和f@g W c h%e A B模型a I b&本文通过摇床法测定溶菌酶在不同条件下的吸附等温线’讨论了溶菌酶的吸附平衡时间T吸附量’并依据Z[>E\模型及其热力学’计算了吸附折叠过程中的能量变化’得到了重要的结果&
!计算公式
液E固吸附计量置换模型G Z[>E\H将吸附等温线表示为线性方程a"b C
L收稿日期C)**F E!*E*"
基金项目C陕西省自然科学研究计划项目G)**F i)+H’西安市科技局工业科技攻关项目G R R)**)I*H及西北大学)**F年度重点科研基地开放基地资助项目&
通讯作者C耿信鹏G!K F"E H’男’陕西省山阳县人’西安工程科技学院教授’Q E U?e%C j e c k g c d d g c d l!D,&A$U&万方数据